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瑞香素调节STING/TBK1/IRF3信号通路对脓毒症大鼠免疫炎症反应的影响
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作者 温亚 李燕 +3 位作者 白思怡 陈凯林 成丽英 李亚冬 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期822-827,共6页
目的探究瑞香素调节STING/TBK1/IRF3信号通路对脓毒症大鼠免疫炎症反应的影响。方法选用80只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,将大鼠随机分为4组,假手术组20只;其余60只按照盲肠结扎穿刺法(CLP)构建脓毒症小鼠模型,腹腔注射不同剂量瑞香素,... 目的探究瑞香素调节STING/TBK1/IRF3信号通路对脓毒症大鼠免疫炎症反应的影响。方法选用80只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,将大鼠随机分为4组,假手术组20只;其余60只按照盲肠结扎穿刺法(CLP)构建脓毒症小鼠模型,腹腔注射不同剂量瑞香素,分为无瑞香素模型组(0 mg/kg)、低剂量组(2.5 mg/kg)、高剂量组(5 mg/kg),每组20只;模型组及假手术组腹腔注射等量0.1%DMSO。观察CLP建模后的各组大鼠存活率。收集肺、肾、肝和脾组织进行病理组织学分析。ELISA检测大鼠血清炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β),流式细胞术检测外周血中的T淋巴细胞亚群,Western blotting检测STING/TBK1/IRF3信号通路蛋白表达变化。结果与假手术组相比,模型组大鼠生存率降低(P<0.05),各个脏器组织损伤明显,血清炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平上升(P<0.05),外周血CD4^(+)比例、CD4^(+)/CD8^(+)比值均降低(P<0.05),CD8^(+)比例、Th1/Th2比值均升高(P<0.05),STING、p-TBK1/TBK1、p-IRF3/IRF3蛋白表达均下调(P<0.05)。与模型组相比,瑞香素高剂量组提高了大鼠生存率(P<0.05),各脏器组织损伤明显减轻,血清炎症因子水平降低(P<0.05),外周血CD4^(+)比例、CD4^(+)/CD8^(+)比值升高(P<0.05),CD8^(+)比例、Th1/Th2比值降低(P<0.05),STING、p-TBK1/TBK1、p-IRF3/IRF3蛋白表达升高(P<0.05)。结论瑞香素可通过调节STING/TBK1/IRF3信号通路,改善脓毒症大鼠免疫炎症反应。 展开更多
关键词 瑞香素 脓毒症 盲肠结扎穿刺(CLP) STING/TBK1/irf3信号通路 免疫调节 炎症
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斑石鲷irf3基因鉴定及其在虹彩病毒感染下的表达模式
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作者 李开敏 王磊 +5 位作者 巩志宏 王清滨 李华 杨桂文 黄友华 陈松林 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期346-357,共12页
干扰素调节因子(irf3)是干扰素调节因子(IRF)家族的一员,是I型干扰素依赖性免疫反应的主要转录调节因子,在针对DNA和RNA病毒的先天免疫反应中发挥重要作用。本研究中,斑石鲷irf3基因(Oplegnathus punctatus interferon regulatory facto... 干扰素调节因子(irf3)是干扰素调节因子(IRF)家族的一员,是I型干扰素依赖性免疫反应的主要转录调节因子,在针对DNA和RNA病毒的先天免疫反应中发挥重要作用。本研究中,斑石鲷irf3基因(Oplegnathus punctatus interferon regulatory factors 3,Opirf3)来自实验室斑石鲷基因组数据库,经分析鉴定Opirf3的CDS序列全长1362 bp,可编码453个氨基酸,预测其蛋白分子量为50.0 ku,理论等电点为4.97,有一个IRF结构域和一个IRF-3结构域。荧光定量分析结果显示,Opirf3在斑石鲷肝脏、鳃、心脏、皮肤、脾脏、肠、脑、肾脏、胃和头肾组织均有表达;虹彩病毒感染7 d时,免疫组织肝脏、脾脏和肾脏中Opirf3的表达水平显著上调。斑石鲷肾细胞系体外刺激实验显示,不同浓度poly I:C刺激后,Opirf3的表达量较对照组均显著升高,poly I:C浓度为100μg/mL时,肾脏细胞中Opirf3的相对表达水平升高,为对照组的86.8倍。siRNA干扰后,斑石鲷肾细胞系中Opirf3表达水平显著下调30%,下游基因IFN-α、CD40、CD80和IL-1β显著下调,IL-6显著上调。以上结果可能表明Opirf3基因参与了I型IFN在斑石鲷抗虹彩病毒过程中的先天免疫反应。本研究可为斑石鲷抗病分子育种提供理论依据。 展开更多
关键词 斑石鲷 irf3 基因表达 SIRNA
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IRF3在乳腺癌中的研究进展
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作者 许中满 吴思铭 +2 位作者 王晓玲 钟田雨 张文娟 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 CAS 2024年第5期315-320,共6页
乳腺癌作为全球女性健康的重大挑战,其研究的重要性和紧迫性日益凸显。干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)属于人类干扰素调节因子(interferon regulatory factors,IRFs)家族的一员,是一个关键的转录因子。IRF3在天... 乳腺癌作为全球女性健康的重大挑战,其研究的重要性和紧迫性日益凸显。干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)属于人类干扰素调节因子(interferon regulatory factors,IRFs)家族的一员,是一个关键的转录因子。IRF3在天然免疫应答的信号传递过程中起着重要的调节作用。近年来研究揭示了IRF3在肿瘤免疫学领域的关键作用,特别是在乳腺癌中。IRF3不仅调节乳腺癌细胞的生长和凋亡,而且通过诱导Ⅰ型干扰素(type Ⅰ interferons,IFN-Ⅰ)及其他重要细胞因子的产生,对肿瘤细胞的行为产生影响。然而,在乳腺癌中,IRF3的激活受到多种机制的抑制,这包括阻断IRF3依赖的细胞凋亡途径和通过调节微RNA表达来抑制干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon genes,STING)等。在特定情况下,IRF3还可能促进乳腺癌发生及复发。本综述全面探讨了IRF3的基本特征、参与的信号通路、在乳腺癌发展中的作用及当前研究的最新进展,并总结了基于IRF3作用机制的潜在治疗方法。 展开更多
关键词 干扰素调节因子3 乳腺癌 Ⅰ型干扰素 免疫治疗
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太平洋鳕IRF3基因的克隆及绝对定量表达分析 被引量:2
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作者 孙航 姜志强 +5 位作者 蒋洁兰 温施慧 李幸 暴宁 苏鹏 毛明光 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期887-895,共9页
本研究通过克隆首次得到太平洋鳕(Gadus macrocephalus)干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)的部分序列。该序列长1878 bp,包含长1377 bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),编码459个氨基酸,其编码的蛋白质... 本研究通过克隆首次得到太平洋鳕(Gadus macrocephalus)干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)的部分序列。该序列长1878 bp,包含长1377 bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),编码459个氨基酸,其编码的蛋白质分子量约为51 k D。经氨基酸序列比对发现,太平洋鳕IRF3的氨基酸序列包括1个含有5个保守色氨酸残基的DNA结合域(DNA binding domain,DBD)和1个保守的C端IRF关联域(IRF association domain,IAD);系统进化树分析表明,太平洋鳕IRF3与其他物种的IRF3亲缘关系较近。应用绝对荧光定量PCR方法对IRF3在不同组织和不同日龄(days post-hatching,dph)仔鱼的表达水平进行检测,并对干扰素在仔鱼期的免疫作用进行分析。组织表达绝对定量结果显示,性腺,肝和胸腺表达量高于其他组织。不同日龄仔鱼IRF3表达量结果显示,IRF3在受精卵就已经表达,在25 dph表达量大幅提高。本研究的结果为进一步研究太平洋鳕干扰素作用机制以及其在早期发育中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 太平洋鳕 irf3 干扰素 绝对定量PCR
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TLR3和IRF3在华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠中表达的初步分析 被引量:4
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作者 刘瀛 颜超 +3 位作者 华慧 李向阳 汤仁仙 郑葵阳 《徐州医学院学报》 CAS 2013年第9期602-605,共4页
目的 建立华支睾吸虫感染小鼠模型,初步分析TLR3、IRF3基因在小鼠肝脏中的表达情况.方法 随机选用健康雌性C3H/HeN小鼠感染华支睾吸虫建立感染模型,分别在感染第0、1、7、14、28、56、84天颈椎脱臼处死小鼠,取肝脏组织进行病理学观察,... 目的 建立华支睾吸虫感染小鼠模型,初步分析TLR3、IRF3基因在小鼠肝脏中的表达情况.方法 随机选用健康雌性C3H/HeN小鼠感染华支睾吸虫建立感染模型,分别在感染第0、1、7、14、28、56、84天颈椎脱臼处死小鼠,取肝脏组织进行病理学观察,收集粪便检查华支睾吸虫虫卵.同时,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝脏中Toll样受体(TLRs)中的TLR3和IRF3的mRNA的表达情况.结果 自感染后第20~30天检查出华支睾吸虫虫卵;肝脏病理学结果显示,与正常组小鼠相比,随着时间的增加,感染组小鼠肝脏汇管区由少量炎症细胞浸润、胆管上皮反应性增生发展到在该区域出现大量纤维组织增生伴有炎症细胞浸润,表明华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠模型成功建立.与正常组相比,感染组自感染后第1天起TLR3和IRF3的mRNA表达均升高(P〈0.01),均在第84天开始下降.结论 华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠后可激活TLR3-TRIF途径,提示TLR3-TRIF途径可能在华支睾吸虫致病过程中起了一定的作用. 展开更多
关键词 华支睾吸虫 C3H HeN小鼠 TLR3 irf3
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利多卡因对胰腺癌细胞PANC-1增殖、凋亡和STING/IRF3/IFN-β通路的影响 被引量:2
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作者 刘炯 汪向飞 江斌 《中南医学科学杂志》 CAS 2022年第4期499-503,共5页
目的探讨利多卡因对胰腺癌细胞PANC-1增殖、凋亡和干扰素基因刺激因子(STING)/干扰素调节因子3(IRF3)/干扰素-β(IFN-β)通路的影响。方法体外培养PANC-1细胞,阴性对照组不干预,利多卡因低、中、高剂量组分别用20、40、80 mg/L利多卡因... 目的探讨利多卡因对胰腺癌细胞PANC-1增殖、凋亡和干扰素基因刺激因子(STING)/干扰素调节因子3(IRF3)/干扰素-β(IFN-β)通路的影响。方法体外培养PANC-1细胞,阴性对照组不干预,利多卡因低、中、高剂量组分别用20、40、80 mg/L利多卡因干预,阳性对照组用10 mg/L吉西他滨干预。采用CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖率和凋亡率,酶标仪检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IFN-β水平,荧光定量聚合酶链反应和蛋白印迹法检测细胞STING、IRF3、Akt和Caspase-3 mRNA及蛋白水平。结果与阴性对照组比较,利多卡因低、中、高剂量组及阳性对照组细胞增殖率、TNF-α水平、Akt mRNA和蛋白水平降低,细胞凋亡率、IFN-β水平及STING、IRF3、Caspase-3 mRNA和蛋白水平增加;利多卡因组随利多卡因剂量增加呈剂量效应关系,但利多卡因组效应未及阳性对照组(P<0.05)。结论利多卡因抑制PANC-1细胞增殖,促进PANC-1细胞凋亡,其机制可能与STING/IRF3/IFN-β通路的激活有关。 展开更多
关键词 利多卡因 STING/irf3/IFN-β通路 胰腺癌 细胞增殖 细胞凋亡
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固本化湿降脂汤调控STING-IRF3通路对脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠炎症细胞因子的影响 被引量:1
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作者 张琦 朱绚绚 +5 位作者 孙勇兵 王美君 谢情江 熊佳丽 周丽 陈浩 《广东药科大学学报》 CAS 2023年第2期86-93,共8页
目的 探讨固本化湿降脂汤通过STING-IRF3信号通路对脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠炎症细胞因子的影响。方法 建立脾虚湿阻型单纯性肥胖模型后,将大鼠随机分成模型组、奥利司他阳性对照组(37.5 mg/kg)、固本化湿降脂汤高剂量组(34.4 g/kg)、... 目的 探讨固本化湿降脂汤通过STING-IRF3信号通路对脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠炎症细胞因子的影响。方法 建立脾虚湿阻型单纯性肥胖模型后,将大鼠随机分成模型组、奥利司他阳性对照组(37.5 mg/kg)、固本化湿降脂汤高剂量组(34.4 g/kg)、中剂量组(17.2 g/kg)、低剂量组(8.6 g/kg)及正常组,每组8只,灌胃给药1次/d,连续4周。比较各组大鼠体质量、Lee’s系数、远红外热成像及脑部核磁共振成像(MRI),观察固本化湿降脂汤的减肥效果;比较各组大鼠炎症细胞因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、C反应蛋白(CRP)表达变化;采用免疫组织化学法检测脂肪中STING的表达;采用RT-PCR法检测肝脏STING的mRNA表达,使用蛋白印迹法在蛋白水平测量IRF3的变化,观察其对大鼠STING-IRF3信号通路的影响。结果 固本化湿降脂汤干预脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠后体质量下降明显(P<0.05),脑部、腹部异常区域恢复,可有效降低大鼠TNF-α、IL-6、IL-1β、CRP等相关炎症细胞因子的表达(P <0.01),用药前后STING-IRF3通路变化差异明显(P <0.01)。结论 固本化湿降脂汤通过调控STING-IRF3通路,降低脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠体质量并调节相关炎症细胞因子的表达。 展开更多
关键词 固本化湿降脂汤 脾虚湿阻型单纯性肥胖 炎症细胞因子 STING-irf3通路
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EWS抑制TRIF和IKKε激活的IRF3的转录活性
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作者 魏传宇 王晨辉 +9 位作者 李文龙 陈亮 陈媛 穆蕊 方迪峰 李爱玲 靳宝峰 李慧艳 巩伟丽 周涛 《科学技术与工程》 2010年第15期3688-3691,共4页
为了研究EWS蛋白质对IRF3转录活性的影响,以及EWS蛋白对IRF3信号通路的调节,在真核细胞293T中表达Flag-EWS蛋白质,通过双荧光报告系统研究EWS对TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性的影响。结果显示Flag-EWS蛋白质能够在真核细胞293T中正确表... 为了研究EWS蛋白质对IRF3转录活性的影响,以及EWS蛋白对IRF3信号通路的调节,在真核细胞293T中表达Flag-EWS蛋白质,通过双荧光报告系统研究EWS对TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性的影响。结果显示Flag-EWS蛋白质能够在真核细胞293T中正确表达,过表达EWS,能够抑制TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性,而且能够直接抑制IRF3的转录活性。 展开更多
关键词 EWS irf3 转录活性
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14-3-3η抑制TRIF和IKKε激活的IRF3的转录活性
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作者 魏传宇 王晨辉 +9 位作者 李文龙 陈亮 陈媛 穆蕊 方迪峰 李爱玲 靳宝峰 李慧艳 巩伟丽 周涛 《科学技术与工程》 2010年第15期3692-3694,3703,共4页
为了研究14-3-3蛋白是否参与了IRF3信号通路,以及14-3-3蛋白质对IRF3转录活性的影响,在真核细胞293T中表达14-3-3蛋白质的三种亚型,并且通过双荧光报告系统研究14-3-3蛋白对TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性的影响。结果显示14-3-3蛋白质... 为了研究14-3-3蛋白是否参与了IRF3信号通路,以及14-3-3蛋白质对IRF3转录活性的影响,在真核细胞293T中表达14-3-3蛋白质的三种亚型,并且通过双荧光报告系统研究14-3-3蛋白对TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性的影响。结果显示14-3-3蛋白质能够在真核细胞293T中正确表达,过表达14-3-3η能够抑制TRIF和IKKε激活的IRF3转录活性,而且能够直接抑制IRF3转录活性。 展开更多
关键词 14-3-3η蛋白 irf3 转录活性
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长链非编码RNA MALAT1在肿瘤细胞中调控IRF3的表达 被引量:1
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作者 张道奇 曹倩 +3 位作者 唐羽 王会丹 李胜 周国平 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期435-438,共4页
目的:验证长链非编码RNA(long non-codingRNA,lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)与干扰素调节因子3(interferon regulation factor 3,IRF3)的靶向调控关系。方法:将人IRF3... 目的:验证长链非编码RNA(long non-codingRNA,lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)与干扰素调节因子3(interferon regulation factor 3,IRF3)的靶向调控关系。方法:将人IRF3启动子荧光素酶报告基因重组质粒p GL3-56与敲降MALAT1的siRNA(si MALAT1-1、si MALAT1-2)或阴性对照物(si NC)瞬时共转染A549细胞,检测相对荧光素酶活性。同样使用si NC或si MALAT1-1、si MALAT1-2瞬时共转染A549细胞,反转录-实时荧光定量PCR检测IRF3 mRNA表达水平,Western blot检测IRF3蛋白表达水平。结果:与si NC组比较,si MALAT1-1组和siMALAT1-2组荧光素酶活性均有下降,差异均有统计学意义(P<0.05);与si NC组比较,si MALAT1-1组和si MALAT1-2组MALAT1 mRNA和IRF3 mRNA相对表达量均有下降,差异有统计学意义(P<0.05);与si NC组比较,si MALAT1-1组和siMALAT1-2组的IRF3蛋白表达水平均有下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IRF3是MALAT1的靶基因,MALAT1通过调控IRF3启动子区来影响IRF3的转录与表达。 展开更多
关键词 长链非编码RNA MALAT1 irf3 启动子 转录因子
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香菇多糖联合活化型IRF3对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 张晶 苏畅 +2 位作者 孔凡铭 李小江 苏剑飞 《临床和实验医学杂志》 2022年第14期1465-1469,共5页
目的探讨香菇多糖联合组成型活化IRF3对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法构建表达组成型活化IRF3的腺病毒载体(AdIRF3)及对照空载体(AdGFP)。增强绿色荧光蛋白(EGFP)作为示踪标记及外源抗原,分别采用感染复数(MOI)5及MOI 20感染小鼠过... 目的探讨香菇多糖联合组成型活化IRF3对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法构建表达组成型活化IRF3的腺病毒载体(AdIRF3)及对照空载体(AdGFP)。增强绿色荧光蛋白(EGFP)作为示踪标记及外源抗原,分别采用感染复数(MOI)5及MOI 20感染小鼠过度表达HER2/neu蛋白克隆乳腺癌细胞系(TUBO)细胞;流式细胞荧光分选技术(FACS)检测感染效率;蛋白质印迹检测IRF3的过表达,实时荧光PCR方法检测下游目的基因干扰素β(IFNβ)、趋化因子配体(CCL)包括CCL2、CCL5、CXCL1、CXCL3、CXCL10等表达;香菇多糖联合AdIRF3处理TUBO细胞后,实时荧光PCR方法检测下游目的基因IFNβ的表达;CCK-8法检测香菇多糖对乳腺癌细胞增殖的影响;Annexin V法检测香菇多糖对乳腺癌细胞凋亡的影响。结果IRF3可在体外过表达;IRF3可有效活化下游IFNβ、CCL2、CCL5、CXCL1、CXCL3、CXCL10等目的基因表达;采用AdIRF3 MOI20及香菇多糖100μg/mL处理TUBO细胞后,香菇多糖联合AdIRF3可促进IFNβ下游分子表达,且香菇多糖联合AdIRF3可有效抑制TUBO细胞的体外增殖和诱导TUBO细胞发生凋亡。结论组成型活化IRF3可有效活化下游信号传导通路,香菇多糖联合AdIRF3可有效抑制TUBO乳腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,这些可能是其抑制肿瘤的原因之一。 展开更多
关键词 乳腺癌 香菇多糖 组成型活化irf3 免疫治疗 细胞增殖 细胞凋亡
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IRF3在抗病毒固有免疫应答中的作用及调控机制 被引量:9
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作者 季晓丽 张毓川 陈玮 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期2289-2295,共7页
干扰素调控因子3(IRF3)是促进Ⅰ型干扰素合成的关键转录因子,在抗病毒固有免疫应答中发挥着重要的作用。IRF3可通过TLR3/TLR4-TRIF,RIG-Ⅰ-MAVS和cGAS-STING三条抗病毒信号通路活化,继而发生二聚化并入核,启动Ⅰ型干扰素和细胞因子的表... 干扰素调控因子3(IRF3)是促进Ⅰ型干扰素合成的关键转录因子,在抗病毒固有免疫应答中发挥着重要的作用。IRF3可通过TLR3/TLR4-TRIF,RIG-Ⅰ-MAVS和cGAS-STING三条抗病毒信号通路活化,继而发生二聚化并入核,启动Ⅰ型干扰素和细胞因子的表达。作为机体抗病毒免疫应答的关键性转录因子,IRF3的活化受到一系列复杂而精密的调控,其磷酸化、泛素化、甲基化等修饰都能影响IRF3的活性。此外,IRF3还与适应性免疫应答、肿瘤、炎症性疾病等过程相关。本文就IRF3在抗病毒免疫反应中的作用及其调控机制进行综述。 展开更多
关键词 干扰素调控因子(irf3) 固有免疫应答 Ⅰ型干扰素 病毒感染
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棕榈酸通过cGAS-STING-IRF3通路降低心肌细胞的自噬功能 被引量:1
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作者 余蕙麟 刘谦 +2 位作者 郭永正 夏勇 罗素新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期36-44,共9页
目的探究棕榈酸(PA)对心肌细胞自噬功能的影响及潜在机制。方法提取大鼠乳鼠心肌细胞(NRCMs)并体外培养24 h,分别加入10%BSA以及不同浓度的PA(0、0.1、0.3、0.5、0.7 mmol/L)共培养24 h。Western blotting检测NRCMs中自噬指标(PINK1、Pa... 目的探究棕榈酸(PA)对心肌细胞自噬功能的影响及潜在机制。方法提取大鼠乳鼠心肌细胞(NRCMs)并体外培养24 h,分别加入10%BSA以及不同浓度的PA(0、0.1、0.3、0.5、0.7 mmol/L)共培养24 h。Western blotting检测NRCMs中自噬指标(PINK1、Parkin、p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)以及cGAS、STING、p-IRF3/IRF3的蛋白表达水平。CCK8法检测细胞活性,筛选0.7 mmol/L PA用于后续实验。进一步将cGAS siRNA转染入NRCMs中以敲降cGAS的表达,将NRCMs细胞分为:空白对照组(Control组,无特殊处理)、阴性对照组(NC组,转染NC序列)、cGAS siRNA组(转染cGAS-siRNA敲降cGAS)、PA组(0.7 mmol/L PA处理24 h)、cGAS siRNA+PA组(转染cGAS-siRNA后予以0.7 mmol/L PA处理24 h)。Western blot检测NRCMs自噬相关蛋白指标表达变化,CCK8法检测细胞活性,免疫荧光检测p62和LC3阳性着色情况。结果经不同浓度PA作用24 h后,NRCMs中PINK1、Parkin,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ+Ⅱ蛋白表达量明显降低(P<0.05),p62蛋白表达量明显增高(P<0.05),且心肌细胞活性明显下降(P<0.05)。将cGAS敲降后,可明显逆转PA诱导的NRCMs自噬功能降低,并改善心肌细胞活性(P<0.05)。结论PA通过介导cGAS-STING-IRF3通路激活,抑制心肌细胞的自噬功能,导致细胞活性降低。 展开更多
关键词 棕榈酸 cGAS-STING-irf3 心肌细胞 自噬
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Irf3基因缺失导致角膜组织对HSV-1病毒易感性增强 被引量:2
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作者 张曦 张洁琼 +5 位作者 罗琳林 邹杨成 刘佩 张硕基 林森 叶剑 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期112-118,共7页
目的研究IRF3缺失对单纯疱疹性角膜炎的发病进程影响以及病理学依据。方法用HSV-l感染对照组和实验组小鼠角膜,同时用培养基(不含病毒)处理Irf3^(-/-)小鼠角膜作为溶剂对照组。分别用裂隙灯显微镜、HD-OCT、角膜共聚焦技术观察各组角膜... 目的研究IRF3缺失对单纯疱疹性角膜炎的发病进程影响以及病理学依据。方法用HSV-l感染对照组和实验组小鼠角膜,同时用培养基(不含病毒)处理Irf3^(-/-)小鼠角膜作为溶剂对照组。分别用裂隙灯显微镜、HD-OCT、角膜共聚焦技术观察各组角膜的临床变化;采用组织学技术检查角膜病理学改变;用QRT-PCR检测角膜中HSV-1的表达水平;用蛋白免疫印迹法检测炎性指标在各组角膜组织中的表达水平。用流式细胞术、全身症状记录观察小鼠全身感染情况。结果实验组角膜接种HSV-1后第7天开始出现角膜上皮缺损等角膜基质炎早期症状,并且逐渐加重,发病率持续增高。对照组发病率显著较低,且症状比实验组明显减轻。Irf3^(-/-)溶剂对照组无明显角膜感染变化。QRT-PCR和蛋白免疫印迹法结果显示,实验组HSV-1、IL-9、IL-10、IL-18、TNF-α表达水平均比对照组、Irf3^(-/-)溶剂对照组显著较高。脾脏流式细胞术、全身症状记录结果显示实验组比对照组、Irf3^(-/-)溶剂对照组全身炎性反应明显较重,提示有全身感染。结论 IRF3是角膜HSV-1感染的重要感受信号分子,它的缺失使小鼠发生单纯疱疹病毒性角膜炎的易感性明显增高。 展开更多
关键词 irf3 角膜 Ⅰ型单纯疱疹病毒 单纯疱疹性角膜基质炎
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IRF3抑制LPS诱导肝星状细胞LX-2的炎症因子的分泌 被引量:1
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作者 刘云洁 程玮 +2 位作者 李丽 顾萌 徐涛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第2期178-182,共5页
目的研究干扰素调节因子3(IRF3)对LPS诱导的肝星状细胞中LX-2中炎症因子IL-6及TNF-α分泌的影响。方法利用脂质体将质粒pc DNA3-IRF3瞬时转染到人肝星状细胞LX-2中过量表达IRF3,qRT-PCR和Western blot法检测转染效率,并检测炎症因子IL-6... 目的研究干扰素调节因子3(IRF3)对LPS诱导的肝星状细胞中LX-2中炎症因子IL-6及TNF-α分泌的影响。方法利用脂质体将质粒pc DNA3-IRF3瞬时转染到人肝星状细胞LX-2中过量表达IRF3,qRT-PCR和Western blot法检测转染效率,并检测炎症因子IL-6及TNF-α的表达。结果qRT-PCR和Western blot结果显示用2μg/ml的LPS刺激LX-2细胞12 h后,与正常组比较,IRF3的表达量明显降低,而诱导产生的炎症因子TNF-α及IL-6的表达量则明显上升。而pc DNA3转入LX-2细胞12 h后,与pc DNA3空载体对照组比较,pc DNA3转染组中炎症因子IL-6及TNF-α表达量在LX-2细胞中被显著抑制。结论在肝星状细胞中,IRF3能够抑制LPS诱导的肝星状细胞LX-2中炎症因子IL-6及TNF-α的表达。 展开更多
关键词 irf3 TNF-Α 肝星状细胞 LX-2细胞 炎症因子
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UⅡ/UT系统对LPS刺激枯否细胞固有免疫炎症信号通路TLR4-IRF3的影响 被引量:5
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作者 涂文娟 汪小庭 +4 位作者 刘亮明 朱彤 梁冬雨 杨志文 高得勇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1313-1319,共7页
目的:探讨UrotensinⅡ(UⅡ)/UT系统对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激枯否细胞(Kupffer cell,KC)固有免疫炎症信号通路Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)-干扰素调节因子3(Interferon regulatory factor 3,IRF3)的影响。方法... 目的:探讨UrotensinⅡ(UⅡ)/UT系统对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激枯否细胞(Kupffer cell,KC)固有免疫炎症信号通路Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)-干扰素调节因子3(Interferon regulatory factor 3,IRF3)的影响。方法:体外分离培养大鼠肝KCs,KCs培养上清液促炎性细胞因子IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平采用ELISA分析检测,细胞表面TLR4的表达采用流式细胞技术分析,IRF3基因和蛋白表达情况分别采用real-time PCR和Western blot分析方法检测。结果:LPS刺激后,KCs培养上清液IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平、细胞表面TLR4表达阳性细胞率及细胞内IRF3 mRNA表达水平均显著升高,UT拮抗剂urantide预处理抑制了LPS刺激诱导KCs对上述分子的上调表达;LPS的应用也造成了KCs胞核内IRF3蛋白表达水平升高,而使胞浆内IRF3蛋白表达水平降低,urantide预处理后,抑制了LPS诱导KCs核内IRF3蛋白上调和胞浆水平下调。结论:UⅡ/UT系统通过对TLR4-IRF3通路的正性调控作用,介导了或至少部分介导了LPS刺激KCs的免疫性炎症分泌效应。 展开更多
关键词 枯否细胞 炎症 脂多糖 UrotensinⅡ URANTIDE Toll样受体4 干扰素调节因子3
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TLR4、TBK/IRF3信号通路介导肾小管上皮细胞与单核细胞相互作用 被引量:4
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作者 李青 郑敏 +2 位作者 张露 刘利华 孙伟 《中国中西医结合肾病杂志》 2015年第11期994-996,I0005,共4页
目的:探讨单核细胞与肾小管上皮细胞相互作用的分子机制。方法:体外建立单核细胞(U937)与肾小管上皮细胞(HK-2)共培养系统,观察HK-2细胞对U937细胞Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)及TANK结合蛋白激酶(TBK)/干扰素调节因子3(IR... 目的:探讨单核细胞与肾小管上皮细胞相互作用的分子机制。方法:体外建立单核细胞(U937)与肾小管上皮细胞(HK-2)共培养系统,观察HK-2细胞对U937细胞Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)及TANK结合蛋白激酶(TBK)/干扰素调节因子3(IRF3)信号通路的影响;观察阻断TBK/IRF3信号通路对单核细胞分化的影响。结果:HK-2细胞促进U937细胞TLR4及TBK/IRF3信号通路蛋白及mRNA的表达(P<0.05);阻断TBK/IRF3信号通路抑制HK-2细胞诱导U937细胞发生M1型转化(P<0.05)。结论:TLR4分子介导HK-2细胞与U937细胞相互作用,激活TBK/IRF3信号通路,导致U937细胞发生M1型转化,进一步诱导炎症因子产生,促进肾脏纤维化。 展开更多
关键词 单核/巨噬细胞 肾小管上皮细胞 TLR4 TBK/irf3
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Negative feedback regulation of cellular antiviral signaling by RBCKl-mediated degradation of IRF3 被引量:13
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作者 Min Zhang Yang Tian +6 位作者 Rui-Peng Wang Dong Gao Yan Zhang Fei-Ci Diao Dan-Ying Chen Zhong-HeZhai Hong-Bing Shu 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2008年第11期1096-1104,共9页
Viral infection causes host cells to produce type I interferons (IFNs), which are critically involved in viral clearance. Previous studies have demonstrated that activation of the transcription factor interferon reg... Viral infection causes host cells to produce type I interferons (IFNs), which are critically involved in viral clearance. Previous studies have demonstrated that activation of the transcription factor interferon regulatory factor (IRF)3 is essential for virus-triggered induction of type I IFNs. Here we show that the E3 ubiquitin ligase RBCC protein interacting with PKC1 (RBCK1) catalyzes the ubiquitination and degradation of IRF3. Overexpression of RBCK1 negatively regulates Sendai virus-triggered induction of type I IFNs, while knockdown of RBCK1 has the opposite effect. Plaque assays consistently demonstrate that RBCKI negatively regulates the cellular antiviral response. Furthermore, viral infection leads to induction of RBCK1 and subsequent degradation of IRF3. These findings suggest that the cellular antiviral response is controlled by a negative feedback regulatory mechanism involving RBCKl-mediated ubiquitination and degradation of IRF3. 展开更多
关键词 RBCK1 irf3 antiviral response type I IFNs feedback regulation E3 ligase
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IRF3调控瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和细胞外基质表达的研究 被引量:2
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作者 张谊 洪炜龙 +4 位作者 徐云升 李智铭 张璃 林孝华 张启瑜 《浙江医学》 CAS 2018年第5期433-438,共6页
目的通过观察干扰素调节因子3(IRF3)对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和细胞外基质表达的作用,探讨IRF3在皮肤纤维化中的调控机制。方法取行瘢痕疙瘩切除手术的10例患者的术中切除的瘢痕疙瘩组织为研究材料,另择8例外科手术患者的正常皮肤组织... 目的通过观察干扰素调节因子3(IRF3)对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和细胞外基质表达的作用,探讨IRF3在皮肤纤维化中的调控机制。方法取行瘢痕疙瘩切除手术的10例患者的术中切除的瘢痕疙瘩组织为研究材料,另择8例外科手术患者的正常皮肤组织为对照,培养两者的成纤维细胞。采用real-time RT-PCR、Western blot检测成纤维细胞IRF3 mRNA、蛋白表达水平,转染siRNAs-IRF3后IRF3蛋白水平;检测TGF-β1诱导后瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖情况,细胞外基质Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)、a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)I型胶原与TGF-β受体Ⅰ、Ⅱ,及TGF-β1信号通路调节蛋白p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3表达水平。结果 IRF3在瘢痕疙瘩组织中表达显著上调。下调IRF3的表达,显著抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,并抑制collagenⅠ、a-SMA的表达,同时抑制TGF-β1诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞的TGF-β受体Ⅰ、Ⅱ的表达。下调IRF3的表达亦抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3表达水平。结论 IRF3表达下调通过抑制TGF-β1/Smad信号通路,抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和细胞外基质的表达。IRF3或为治疗瘢痕疙瘩新的靶点。 展开更多
关键词 干扰素调节因子3 瘢痕疙瘩成纤维细胞 细胞外基质 TGF-Β1/SMAD 通路
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清热利湿活血方对HBV转基因小鼠的抗病毒作用及对TKB1-IRF3表达的影响 被引量:2
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作者 张传涛 廖婷婷 +5 位作者 黄群 张技 辜海英 杨鸿 黄晓群 王芳瑜 《广州中医药大学学报》 CAS 2018年第3期490-495,共6页
【目的】观察清热利湿活血方对乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠的抗病毒作用及对肝组织TANK结合激酶1(TKB1)、干扰素调控因子3(IRF3)表达的影响,以阐明其作用机制。【方法】首先建立清热利湿活血方的HPLC指纹图谱。再将HBV转基因小鼠随机分... 【目的】观察清热利湿活血方对乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠的抗病毒作用及对肝组织TANK结合激酶1(TKB1)、干扰素调控因子3(IRF3)表达的影响,以阐明其作用机制。【方法】首先建立清热利湿活血方的HPLC指纹图谱。再将HBV转基因小鼠随机分为4组,即模型组,苦参素组,清热利湿活血方高、低剂量组,每组8只。苦参素组小鼠给予灌胃剂量为0.15 g·kg^(-1)·d^(-1)的苦参素混悬液,清热利湿活血方高、低剂量组小鼠分别给予灌胃剂量为7、2 g·kg^(-1)·d^(-1)的清热利湿活血方混悬液,给药共5周。治疗结束后,采用酶链免疫吸附法(ELISA)检测血清及肝组织乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg),采用常规苏木素—伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,采用定量聚合酶链反应(qPCR)法检测血清中HBV DNA及肝组织中HBV DNA、TKB1 mRNA、IRF3 mRNA表达,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肝组织TKB1、IRF3的蛋白表达。【结果】标定14个特征峰构成清热利湿活血方的指纹图谱,其中1号峰为没食子酸,8号峰为柯里拉京,9号峰为虎杖苷,10号峰为鞣花酸,13号峰为甘草酸,14号峰为齐墩果酸。高剂量清热利湿活血方可减轻肝细胞轻度脂肪变性、肝细胞轻度水肿及Kuffer细胞增生等病理改变,显著降低HBV转基因小鼠肝脏和血清中的HBsAg、HBV DNA水平(P<0.05或P<0.01),显著增强小鼠TKB1、IRF3的mRNA及蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)。【结论】清热利湿活血方有抗HBV作用,其抗病毒机制可能与增强TKB1、IRF7 mRNA及蛋白表达,进而影响干扰素分泌有关。 展开更多
关键词 清热利湿活血方 乙型肝炎病毒 TANK结合激酶1 干扰素调控因子3 转基因小鼠
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