lncRNA PVT1对急性髓系白血病HL-60细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨长链非编码RNA PVT1基因(lncRNA PVT1)对人急性髓系白血病(AML)HL-60细胞增殖、凋亡的影响。方法 选取106例AML患者为试验组,同期健康体检志愿者100例为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测外周血lncRNA PVT1表达。以干扰lncRNA PVT1的质粒转染HL-60细胞株(si-lncRNA PVT1组),同时将转染空载体的HL-60细胞设为对照组(si-Control组),另设正常组。RT-qPCR技术检测细胞中lncRNA PVT1的表达;CCK-8检测细胞的增殖率;流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化;Western blot和RT-qPCR技术检测细胞中细胞周期相关蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸蛋白水解酶3 (Caspase 3)表达。结果 试验组患者lncRNA PVT1表达水平高于对照组(P<0.05)。干扰lncRNA表达后HL-60细胞中,si-lncRNA PVT1组lncRNA PVT1水平显著低于si-Control组(P<0.05)。si-lncRNA PVT1组细胞增殖率显著低于si-Control组(P<0.05)。敲低lncRNA PVT1后细胞被显著阻滞于G1期,且明显诱导细胞的凋亡(P<0.05)。si-lncRNA PVT1组与si-Control组比较,Cyclin D1、Bcl-2表达降低,P21、Bax、Caspase 3表达升高(P<0.05)。结论 敲低lncRNA PVT1可抑制HL-60细胞的增殖并诱导其凋亡,提示lncRNA PVT1可能作为AML防治的一个分子靶点。

LncRNA PVT1在胃癌中的研究进展

长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位体1(Long Non-Coding Ribonucleic Acid Plasmacytoma Variant Translocation 1,LncRNA PVT1)是一种在多种肿瘤中异常表达的LncRNA,与肿瘤的发生、侵袭、患者预后等密切相关。近年来,越来越多的研究表明LncRNA PVT1在胃癌中发挥重要作用。本文将聚焦于LncRNA PVT1在胃癌发生发展及治疗过程中的最新研究进展,探讨并展望其在胃癌的发展及治疗中的价值与可能性。

子宫内膜异位症患者血清lncRNA PVT1和HIF⁃1α水平及临床意义

目的探究浆细胞瘤可变易位基因1(LncRNA PVT1)、缺氧诱导因子⁃1α(HIF⁃1α)在子宫内膜异位症(EMs)中的表达及临床意义。方法选取2021年10月至2023年7月于成都锦欣爱囝医院就诊的92例EMs患者为研究对象(EMs组),选择同期在本院因子宫肌瘤进行子宫切除手术患者92例为对照组。比较两组、不同R⁃AFS分期EMs患者血清lncRNA PVT1、HIF⁃1α水平;分析lncRNA PVT1与HIF⁃1α之间、R⁃AFS分期与lncRNA PVT1、HIF⁃1α水平之间的关系。采用受试者工作特征曲线(ROC)评估lncRNA PVT1、HIF⁃1α诊断EMs的价值。结果与对照组相比,EMs患者血清lncRNA PVT1、HIF⁃1α表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);随着R⁃AFS分期进展,EMs患者血清lncRNA PVT1、HIF⁃1α表达水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,lncRNA PVT1与HIF⁃1α之间存在显著正相关(r=0.419,P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,血清lncRNA PVT1、HIF⁃1α水平与EMs患者R⁃AFS分期呈显著正相关(r=0.467,0.699,P<0.05);ROC曲线结果显示,lncRNA PVT1、HIF⁃1α单独诊断EMs的AUC分别为0.915、0.873,敏感度分别为87.0%、73.9%,特异性分别为70.7%、73.9%,二者联合诊断EMs的AUC为0.962,敏感度为87.0%,特异性为78.3%;lncRNA PVT1、HIF⁃1α高表达EMs患者临床分期III~IV期、深层生长、囊肿大小≥3 cm、有痛经比例显著高于lncRNA PVT1、HIF⁃1α低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EMs患者血清lncRNA PVT1、HIF⁃1α表达水平升高,且lncRNA PVT1、HIF⁃1α高表达与R⁃AFS分期相关,两者联合检测有利于临床早期诊疗。

脓毒症患者血lncRNA PVT1、lncRNA TUG1、HMGB1的表达及临床意义

目的 探讨脓毒症患者外周血长链非编码RNA(lncRNA)PVT1、lncRNA TUG1、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达及临床意义。方法 选取脓毒症患者87例为脓毒症组,按是否休克将其分为非休克组(54例)和休克组(33例);随机选取同期健康人群50例为对照组。比较各组血清HMGB1、lncRNA PVT1、lncRNA TUG1表达情况,并分析其相关性。结果 与对照组比较,脓毒症组血lncRNA PVT1、HMGB1升高,lncRNA TUG1降低;且休克组较非休克组更为显著(P<0.05)。脓毒症患者HMGB1与lncRNA PVT1呈正相关,与lncRNA TUG1呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析表明,lncRNA PVT1、lncRNA TUG1和HMGB1联合检测对脓毒症的诊断效能最高。结论 lncRNA PVT1、lncRNA TUG1和HMGB1与脓毒症病情严重程度密切相关,三者联合检测对脓毒症患者的诊断有一定预测价值。

LncRNA PVT1调控巨噬细胞极化抑制胰腺癌细胞侵袭

目的探讨lncRNA PVT1调控巨噬细胞向M1型极化对胰腺癌细胞侵袭的影响及机制。方法培养单核细胞株THP-1,通过感染NC shRNA慢病毒、PVT1 shRNA慢病毒、miR-NC慢病毒、miR-409-5p慢病毒、miR-409-5p抑制物慢病毒及嘌呤霉素筛选的方法得到稳定转染的THP-1细胞,检测lncRNA PVT1、miR-409-5p、音猬因子(SHH)的表达水平;进行M1型极化诱导后检测TNF-α、IL-1β、IL-6、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平。稳定转染的THP-1细胞进行M1型极化诱导后与胰腺癌细胞株PANC-1细胞共培养,检测PANC-1细胞的侵袭数目。结果稳定转染PVT1 shRNA后,THP-1细胞中lncRNA PVT1、SHH表达明显降低(NC shRNA组、PVT1 shRNA组lncRNA PVT1分别为1.00±0.12、0.43±0.05;SHH分别为1.00±0.13、0.47±0.05)(均P<0.05),miR-409-5p、TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS表达明显增加(NC shRNA组、PVT1shRNA组的miR-409-5p分别为1.00±0.08、1.83±0.19;TNF-α分别为1.00±0.11、1.93±0.25,IL-1β分别为1.00±0.08、1.77±0.21,IL-6分别为1.00±0.09、2.31±0.20;iNOS分别为1.00±0.13、2.09±0.17)(均P<0.05),共培养体系中PANC-1细胞的侵袭数目明显减少(P<0.05);稳定转染miR-409-5p后,THP-1细胞中SHH表达明显降低(P<0.05),miR-409-5p、TNF-α、IL-1β、IL-6、i NOS表达明显增加(P<0.05),共培养体系中PANC-1细胞的侵袭数目明显减少(P<0.05);稳定转染PVT1 shRNA与miR-409-5p抑制物后,THP-1细胞中SHH表达明显增加,miR-409-5p、TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS表达明显降低(均P<0.05),共培养体系中PANC-1细胞的侵袭数目明显增加(P<0.05)。结论敲低lncRNA PVT1能够促进巨噬细胞M1型极化并抑制胰腺癌细胞侵袭,这一调控作用可能与靶向miR-409-5p/SHH轴有关。

lncRNA PVT1通过靶向miR-761对缺氧复氧诱导的心肌细胞损伤的影响

目的探讨lncRNA PVT1对缺氧复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡、氧化应激的影响及其对miR-761的调控作用。方法采用H/R诱导大鼠心肌细胞H9c2建立细胞损伤模型,分别将si-NC、si-PVT1、miR-mimics-NC、miR-761 mimics、si-PVT1与miR-inhibitor-NC、si-PVT1与miR-761 inhibitor转染至H/R诱导的心肌细胞;采用qRT-PCR法检测PVT1、miR-761的表达量;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的含量;双荧光素酶报告实验检测PVT1与miR-761的靶向关系;Western blot法检测B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤2相关蛋白(Bax)的蛋白表达量。结果与对照组比较,H/R组PVT1的表达水平升高(P<0.05),miR-761的表达水平降低(P<0.05)。与H/R+si-NC组比较,H/R+si-PVT1组凋亡率及Bax蛋白水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平及SOD、CAT的活性升高(P<0.05),MDA的含量降低(P<0.05)。与H/R+miR-mimics-NC组比较,H/R+miR-761 mimics组凋亡率及Bax蛋白水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平及SOD、CAT的活性升高(P<0.05),MDA的含量降低(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实PVT1可靶向结合miR-761;干扰miR-761可明显逆转沉默PVT1对H/R诱导的心肌细胞氧化应激及凋亡的作用。结论沉默PVT1可通过上调miR-761而抑制细胞凋亡及氧化应激从而减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。

lncRNA PVT1通过miR-1207-5p靶向调控Wnt6/β-catenin2信号通路对高级别浆液性卵巢癌的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)PTV1对高级别浆液性卵巢癌增殖和迁移能力的影响。方法收集61例高级别浆液性卵巢癌患者的癌组织及相应癌旁正常组织,qRT-PCR检测miR-1207-5p、lncRNA PVT1在高级别浆液性卵巢癌组织、癌旁正常组织及不同细胞系中的表达情况。构建lncRNA PVT1沉默细胞系,分为Ovcar3-siPVT1组、Ovcar3-siNC组、NC组。采用MTT和平板克隆实验、Transwell和划痕实验检测细胞增殖、侵袭和迁移;双荧光素酶报告基因检测验证miR-1207-5p与lncRNA PVT1、Wnt6的靶向关系,StarBase和TargetScan网站预测相应miRNA可靶向结合的基因;Western blotting检测Wnt6/β-catenin2信号通路相关蛋白的表达。构建siPVT1+过表达miR-1207-5p、siPVT1+过表达Wnt6细胞系,以siPVT1+siNC为对照,验证lncRNA PVT1的调控作用。结果qRT-PCR结果显示,高级别浆液性卵巢癌组织中lncRNA PVT1的表达水平显著高于正常癌旁组织(P<0.05)。与NC组和Ovcar3-siNC组相比,Ovcar3-siPVT1组中lncRNA PVT1的表达显著下调,细胞克隆数、侵袭数减少,细胞迁移率降低,Wnt6、β-catenin2蛋白表达水平明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果证明miR-1207-5p与lncRNA PVT1、Wnt6具有靶向关系。经StartBase和TargetScan网站预测分析,miR-1207-5p分别与lncRNA PVT1、Wnt6存在靶向结合位点。与siPVT1+NC组相比,siPVT1+过表达miR-1207-5p组和siPVT1+过表达Wnt6组细胞克隆数和迁移数明显增加(P<0.05)。结论lncRNA PVT1在高级别浆液性卵巢癌中高表达。高表达lncRNA PVT1可能通过上调miR-1207-5p表达增强Wnt6/β-catenin2信号通路的活性,从而促进高级别浆液性卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

LncRNA PVT1通过竞争miR-149-5p上调CHI3L1并影响变应性鼻炎进展的研究

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)PVT1对变应性鼻炎(AR)进展的影响及其相关作用机制。方法24只BALB/c小鼠,其中6只作为对照组,余18只采用卵白蛋白和氢氧化铝建立AR模型并采用随机数字表法均分为模型组、AR+NC组(尾静脉注射空载体慢病毒)、AR+shPVT1组(尾静脉注射LncRNA PVT1干扰载体慢病毒),每组6只。采用行为学评分评估各组小鼠过敏症状;HE染色观察各组小鼠鼻黏膜组织病理学改变;实时荧光定量PCR检测各组小鼠鼻黏膜组织中LncRNA PVT1、miR-149-5p和几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1)mRNA的表达;Western blot检测CHI3L1蛋白表达;ELISA分析各组小鼠血清IgE、白细胞介素(IL)-5、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。构建LncRNA PVT1和CHI3L1的野生型(WT)和突变型(MT)荧光素酶报告质粒,单独或同时与miR-149-5p mimic共转染293T细胞,采用双荧光素酶实验分析并计算各组细胞荧光素酶相对活性。结果与模型组相比,AR+shPVT1组小鼠行为学评分降低;血清中IgE、IL-5和TNF-α水平降低;鼻黏膜组织中LncRNA PVT1 mRNA表达水平降低,miR-149-5p mRNA表达水平升高,CHI3L1 mRNA及蛋白水平均降低,鼻黏膜组织炎症反应减轻。双荧光素酶实验证实LncRNA PVT1通过竞争性结合miR-149-5p,上调miR-149-5p靶基因CHI3L1的表达。结论在AR模型小鼠中异常高表达的LncRNA PVT1通过发挥竞争性内源RNA作用抑制miR-149-5p表达而上调CHI3L1的表达,引发小鼠鼻黏膜组织的炎性症状并促进过敏反应。

LncRNA PVT1/miR-124轴靶向Jagged-1/Notch通路抑制晶状体纤维化的分子机制研究

目的 探究环状LncRNA PVT1调节人晶状体上皮细胞(LECs)纤维化的作用及可能的分子机制。方法 收集新鲜晶状体前囊膜标本,包括前囊下白内障(ASC)手术眼和健康死后眼各9例。体外培养SRA01/04细胞,并分为空白组、TGFβ2组、si-control组、si-PVT1组、si-PVT1+miR-NC组、si-PVT1+miR-124-inhibitor组。除空白组外,其余各组在转染相应序列后,用5 ng·m LTGFβ2作用48 h。提取组织或细胞RNA并进行微阵列分析。应用实时荧光定量PCR法检测组织样本或细胞中LncRNA PVT1、miR-124表达。采用双荧光素酶报告系统和RNA结合蛋白免疫共沉淀(RIP)法分析LncRNA PVT1、miR-124、Jagged-1之间的靶向关系。Western blot法检测各组细胞Jagged-1、Notch-1、Notch-2、Notch-3、Snail、Slug、纤维蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)、肌动蛋白α (α-SMA)等蛋白表达。结果 LncRNA PVT1在ASC眼的前囊膜组织或TGFβ组SRA01/04细胞中表达上调,同时miR-124表达水平降低(P<0.05),且LncRNA PVT1与miR-124表达水平均呈负相关性(P<0.05)。与空白组相比,TGFβ2组和si-control组FN、α-SMA、ColⅣ、Snail、Slug蛋白表达上调;与TGFβ2组和si-control组比较,si-PVT1组和si-PVT1+miR-NC组上述蛋白表达下调,但si-PVT1+miR-124-inhibitor组可逆转si-PVT1对上述蛋白表达的下调作用(P<0.05)。双荧光素酶报告系统和RIP法分析结果显示,LncRNA PVT1通过“海绵吸附”miR-124,负性调节miR-124的表达。与空白组相比,TGFβ2组Jagged-1、Notch-1、Notch-2、Notch-3蛋白表达显著上调;与TGFβ2组和si-control组比较,si-PVT1组Jagged-1、Notch-1、Notch-2、Notch-3蛋白表达下调,同时si-PVT1+miR-124-inhibitor组可逆转si-PVT1对上述蛋白表达的下调作用(P<0.05)。结论 TGFβ2通过一种LncRNA PVT1依赖机制诱导LECs发生上皮—间充质转化,其机制可能是LncRNA PVT1通过“海绵吸附”miR-124负性调节其表达,进而诱导下游Jagged-1/Notch信号通路激活。

乳腺癌组织中lncRNA PVT1的表达与患者临床特征及总体生存率的关系

目的探讨乳腺癌组织中lncRNA PVT1的表达与患者临床特征及总体生存率的关系。方法采用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌组织及其相应癌旁正常组织中lncRNA PVT1的相对表达量;分析lncRNA PVT1表达水平与乳腺癌患者临床特征与总体生存率间的关系。结果lncRNA PVT1在乳腺癌组织中的相对表达量显著高于癌旁正常组织(0.0075 vs 0.003),其差异具有统计学意义(P=0.0186)。lncRNA PVT1表达水平与乳腺癌患者的年龄(χ^2=5.948,P=0.015)、临床分期(χ^2=12.349,P=0.006)、淋巴结转移(χ^2=20.942,P<0.001)、远端转移(χ^2=5.330,P=0.021)和Her2(χ^2=5.221,P=0.022)显著相关。lncRNA PVT1高表达组患者的总体生存率(overall survival,OS)显著低于lncRNA PVT1低表达组,差异具有统计学意义(P=0.036)。结论lncRNA PVT1是一种可预测乳腺癌患者预后的有潜力的生物学指标。

干扰LncRNA PVT1对LPS所致人支气管上皮细胞16HBE损伤的影响

目的探讨干扰LncRNA PVT1对脂多糖(LPS)所致人支气管上皮细胞16HBE炎症、氧化应激、凋亡的影响及其可能作用机制。方法采用LPS诱导16HBE细胞建立细胞损伤模型,将16HBE细胞分为对照组Control组、LPS组、LPS+si-NC组、LPS+si-PVT1组、LPS+si-PVT1+anti-miR-NC组、LPS+si-PVT1+anti-miR-1301-3p组;采用qRT-PCR检测PVT1、miR-1301-3p的表达量;采用ELISA法检测白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素13(IL-13)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;采用试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测PVT1与miR-1301-3p的靶向关系。结果与Control组比较,LPS组PVT1的表达水平升高(P<0.05),miR-1301-3p的表达水平降低(P<0.05),IL-6、IL-13、TNF-α的水平与MDA、LDH的含量及凋亡率升高(P<0.05),SOD的含量降低(P<0.05);转染siPVT1后可明显降低IL-6、IL-13、TNF-α的水平与MDA、LDH的含量及凋亡率(P<0.05),提高SOD的含量(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实PVT1可靶向调控miR-1301-3p;共转染si-PVT1与anti-miR-1301-3p可明显逆转si-PVT1对LPS所致16HBE细胞炎症、氧化应激及凋亡的作用。结论干扰PVT1可通过上调miR-1301-3p而抑制炎症反应、氧化应激及细胞凋亡从而减轻LPS所致支气管上皮细胞损伤。

LncRNA PVT1通过调节miR-214/STAT6轴减轻哮喘模型小鼠气道炎性反应

目的探究抑制lncRNA PVT1表达对支气管哮喘小鼠气道炎性反应的作用,以及对miR-214/STAT6轴的影响。方法将小鼠随机分成对照组、模型组[用卵清蛋白(OVA)诱导哮喘]、lncRNA PVT1抑制组和lncRNA PVT1 NC组(尾静脉注射lncRNA PVT1抑制物或其阴性对照),每组12只。血细胞计数仪计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞总数、巨噬细胞数、中性粒细胞数和淋巴细胞数;ELISA试剂盒检测BALF上清液中白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)、白介素-13(IL-13)浓度;试剂盒检测血清中IgE水平;HE染色观察肺组织炎性细胞浸润情况并进行评分;RT-qPCR检测肺组织中miR-214和STAT6 mRNA水平;Western blot检测肺组织中STAT6和p-STAT6蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测分析lncRNA PVT1与miR-214靶向关系。结果与对照组相比,模型组小鼠BALF中炎性细胞总数、巨噬细胞数、中性粒细胞数和淋巴细胞数、IL-4、IL-5、IL-13水平、血清中IgE水平及肺组织中炎性细胞浸润程度评分、STAT6 mRNA和蛋白磷酸化水平均显著升高(P<0.05),而肺组织中miR-214水平显著降低(P<0.05)。与模型组和lncRNA PVT1 NC组相比,lncRNA PVT1抑制组BALF中炎性细胞总数、巨噬细胞数、中性粒细胞数和淋巴细胞数、IL-4、IL-5、IL-13水平、血清中IgE水平及肺组织中炎性细胞浸润程度评分、STAT6 mRNA和蛋白磷酸化水平均显著降低(P<0.05),而肺组织中miR-214水平显著升高(P<0.05)。miR-214与lncRNA PVT1具有明显的靶向关系(P<0.05)。结论抑制lncRNA PVT1可能通过靶向提高miR-214表达水平,抑制STAT6磷酸化途径,减轻哮喘小鼠的气道炎性反应。

滋金补水膏对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的治疗作用及对lncRNAPVT1、miR-30b-5p表达的影响

【目的】探讨滋金补水膏对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠的治疗作用及机制。【方法】将96只大鼠随机分为正常组,模型组,滋金补水膏低、中、高剂量组,盐酸氨溴索组、滋金补水膏高剂量+pcDNA组,滋金补水膏高剂量+pcDNA-人浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)组,每组12只。除正常组外,其他各组大鼠采用气道滴注脂多糖(LPS)联合烟雾暴露法构建COPD模型。建模成功后,进行给药干预。给药结束后,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;流式细胞术检测大鼠外周血中辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理变化,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测血清和肺组织中长链非编码RNA(lncRNA)PVT1、miR-30b-5p表达,Western Blot法检测肺组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA PVT1与miR-30b-5p的关系。【结果】与正常组比较,模型组肺泡间隔变大,支气管周围有大量炎症细胞浸润,Treg细胞比例、miR-30b-5p表达水平、Foxp3蛋白表达水平降低,IL-6、TNF-α水平,Th17细胞比例、Th17/Treg比值,lncRNA PVT1表达水平,RORγt蛋白表达水平升高(均P<0.05);与模型组比较,滋金补水膏低、中、高剂量组及盐酸氨溴索组大鼠肺组织病理损伤减轻、Treg细胞比例、miR-30b-5p表达水平、Foxp3蛋白表达水平升高,IL-6、TNF-α水平,Th17细胞比例,Th17/Treg比值,lncRNA PVT1表达水平,RORγt蛋白表达水平降低(均P<0.05)。lncRNA PVT1靶向调控miR-30b-5p表达。【结论】滋金补水膏可能通过调节lncRNA PVT1/miR-30b-5p轴促进Th17/Treg细胞平衡来抑制COPD大鼠炎症反应。

支气管哮喘患者血清lncRNA PVT1表达与气道炎症、重塑的相关性

目的探究支气管哮喘患者血清长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(lncRNA PVT1)表达与气道炎症、重塑的相关性。方法选取2019年5月至2020年5月安康市人民医院呼吸科收治的80例支气管哮喘患者作为研究对象,将入组患者分为急性发作期组43例和慢性持续期组37例。另选取同期在本院体检显示健康者78例作为对照组。采用实时荧光定量(qRT-PCR)法检测所有入组者血清LncRNA PVT1表达水平,常规检测入组者气道炎症、气道重塑和肺功能指标水平,采用Pearson法进行相关性分析。结果急性发作期组患者哮喘控制测试(ACT)评分明显低于慢性持续期组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。血清lncRNA PVT1、气道炎症指标白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)、免疫球蛋白E(IgE)、外周血嗜酸性粒细胞计数(EOS)及气道重塑指标支气管厚度(T/D)、管壁面积占支气道总横截面积百分比(WA%)由高至低依次为急性发作期组、慢性持续期组、对照组;肺功能指标第一秒用力呼气量(FEV1)、一秒率预计值(FEV1%)、最高呼吸气流(PEF)水平由高至低依次为对照组、慢性持续期组、急性发作期组,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。急性发作期组和慢性持续期组患者的血清lncRNA PVT1水平均与IL-6、TGF-β、T/D、WA%水平呈正相关(P<0.05),与FEV1、FEV1%水平呈负相关(P<0.05)。结论支气管哮喘患者血清lncRNA PVT1表达水平显著升高,与气道炎症、气道重塑和肺功能指标变化有关,可作为生物标志物用于临床支气管哮喘患者病情评估和治疗方案确定。

LncRNA PVT1在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的:探讨LncRNA PVT1在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法:RT-qPCR法检测130例CRC患者癌组织和癌旁正常组织中LncRNA PVT1的表达,并揭示其表达的临床意义。结果:与癌旁正常组织相比较癌组织中的LncRNA PVT1呈高表达,其高表达与淋巴结转移和远处转移密切相关,而与T分级关系不大。LncRNA PVT1低表达和高表达患者的中位DFS分别为44个月和26个月(P=0.021);COX分析表明LncRNA PVT1表达水平和TNM分期均是预测DFS的独立影响因子。在Ⅰ期CRC中LncRNA PVT1高表达患者所占的比例显著高于血浆CEA升高患者的比例(P<0.0001)。结论:LncRNA PVT1在CRC的高表达与淋巴结转移和远处转移相关,是预测DFS的独立影响因子,另外其异常表达具有早期诊断CRC的潜在价值。

lncRNA PVT1和微小RNA-106a-5p对骨肉瘤MG-63细胞的影响及机制研究

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)PVT1和miR-106a-5p对骨肉瘤细胞恶性行为的影响及分子机制。方法将骨肉瘤MG-63细胞分为NC组、PVT1-siRNA组、miRNA抑制剂组以及共转染组。以CCK-8实验检测细胞增殖能力,以流式细胞仪检测细胞凋亡情况,以DCFH-DA法检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,以实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测基因表达,以蛋白印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4),铁蛋白(ferritin heavy chain,FTH)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO1)和MDM4(murine double minute 4,MDM4)的表达水平。结果CCK-8实验结果显示敲低lncRNA PVT1后MG-63细胞12 h、24 h、48 h、72 h增殖能力降低(P<0.05),流式细胞仪检测结果显示敲低lncRNA PVT1后MG-63细胞凋亡水平以及ROS水平显著升高(P<0.05),lncRNA PVT1敲低联合miR-106a-5p抑制剂相对于lncRNA PVT1敲低组结果逆转(P<0.05)。RT-qPCR实验结果显示敲低lncRNA PVT1后miR-106a-5p基因表达水平升高并抑制MDM4基因表达(P<0.05),Western blot结果显示敲低lncRNA PVT1后抑制MDM4、HO1、GPX4和FTH蛋白水平(P<0.05)。结论在人骨肉瘤MG-63中,抑制lncRNA PVT1表达可促进miR-106a-5p表达,促进铁死亡和凋亡并抑制增殖。

lncRNA PVT1在心血管疾病中的研究进展

心血管疾病是全球范围内导致死亡和健康负担的主要原因之一,严重影响患者的生活质量,寻求早期识别、诊断和有效治疗方法至关重要。当前已有研究表明,长链非编码RNA(lncRNA)通过内源竞争RNA(ceRNA)参与肿瘤、心脑血管疾病、免疫性疾病的调控。其中lncRNA浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)通过促进纤维化增殖、炎症、细胞凋亡、线粒体代谢等途径加重心脏损伤,可能成为重要的检测及治疗靶点。由于目前研究较为零散,部分研究结论也存在差异,该文就lncRNA PVT1在心血管疾病中最新研究进展进行了综述,以期为心血管疾病的基础研究和临床实践提供更为全面的理论依据。

LncRNA PVT1靶向miR-146a对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞TLR4通路免疫效应的影响

目的探讨长链非编码核糖核酸浆细胞瘤可变异位基因(LncRNA PVT)1靶向微小核糖核酸(miR)-146a对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞Toll样受体(TLR)4通路免疫效应的影响。方法采用结核分枝杆菌株H37Rv感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,分别向感染细胞转染LncRNA PVT1干扰阴性对照(si-NC)、si-LncRNA PVT1、miR-146a模拟物(miR-146a mimics)、miR-146a mimics阴性对照(miR-NC)、si-LncRNA PVT1+miR-146a抑制剂阴性对照(NC inhibitor)、si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor,记为si-NC组、si-LncRNA PVT1组、miR-146a mimcs组、miR-NC组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组、si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组,另取未转染的感染细胞为对照组。转染48 h后,倒置荧光显微镜观测转染效率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平;实时荧光定量-聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞LncRNA PVT1和miR-146a、TLR4、髓样分化因子(MyD88)、核转录因子(NF)-κB p65 mRNA表达;Western印迹检测细胞TLR4、MyD88、NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因及RT-qPCR法检测LncRNA PVT1与miR-146a、miR-146a与TLR4的靶向作用。结果si-NC组、si-LncRNA PVT1组、miR-146a mimcs组、miR-NC组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组、si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组转染效率(81.21±4.15)%、(85.68±3.49)%、(86.55±5.03)%、(84.63±4.29)%、(83.41±4.73)%、(80.67±3.95)%;与对照组、si-NC组、miR-NC组比较,miR-146a mimics组、si-LncRNA PVT1组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组和si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组TNF-α和IL-6水平显著下降,miR-146a表达显著上升,TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达和p-NF-κB p65蛋白表达显著下降(P<0.01);与si-LncRNA PVT1组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组比较,si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组TNF-α和IL-6水平上升,TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达和p-NF-κB p65蛋白表达上升,差异有统计学意义(P<0.01);LncRNA PVT1直接靶向调控miR-146a;miR-146a直接靶向调控TLR4。结论抑制LncRNA PVT1可促进结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞的免疫效应,可能与靶向miR-146a抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路、下调TNF-α和IL-6水平相关。

卵巢癌组织长链非编码RNA PVT1表达及其靶基因生物信息学预测研究

目的检测长链非编码RNA浆细胞瘤多样异位基因1(lncRNA PVT1)在卵巢癌组织中的表达并预测其靶基因,进而对靶基因进行生物信息学分析。方法收集2019年6月至2019年12月于我院行手术治疗的125例卵巢癌患者的癌组织及其切缘正常组织。RT-PCR检测癌组织及其切缘正常组织lncRNA PVT1的表达;比较不同临床病理特征患者卵巢癌组织lncRNA PVT1表达;应用在线工具Annolnc2数据库、GEPIA2数据库、UALCAN数据库分别筛选出lncRNA PVT1靶基因取交集;采用DAVID数据库对筛选出的lncRNA PVT1靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果与切缘正常组织相比,癌组织中lncRNA PVT1相对表达水平升高(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低/未分化程度的卵巢癌患者癌组织中lncRNA PVT1的相对表达水平分别高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、中/高分化程度的卵巢癌患者(P<0.05);lncRNA PVT1的靶基因有44个,GO功能分析发现靶基因功能主要富集于细胞周期调控、RNA聚合酶Ⅱ启动子的转录调控、转录因子活性、赖氨酰氧化酶活性、细胞外基质、细胞质等;KEGG通路分析显示其参与的通路主要富集于癌症相关信号通路、转化生长因子-β(TGF-β)信号通路、细胞外基质受体的相互作用、环磷酸鸟苷酸(cGMP)-蛋白激酶G(PKG)信号通路、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)信号通路等。结论lncRNA PVT1在卵巢癌组织中表达上调,其靶基因富集于细胞组分、分子功能和生物调节等多个生物学过程及TGF-β、cGMP-PKG等肿瘤相关信号通路上,lncRNA PVT1通过调控靶基因的表达在卵巢癌中发挥作用。

清胰汤通过lncRNA-PVT1竞争性结合miR-146a靶向TRAF6参与重症胰腺炎发生发展的机制研究

目的探讨清胰汤通过lncRNA-PVT1竞争性结合miR-146a靶向肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)参与重症胰腺炎发生发展的机制。方法购置SD大鼠50只,随机取10只设为空白对照组;剩余40只大鼠经肠壁穿刺逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠注射制备重症胰腺炎动物模型,建模成功后随机取10只为模型对照组;剩余30只大鼠利用慢病毒转染干扰lncRNA-PVT1序列(LV-shPVT1)及空载(LV-control),分为清胰汤组、清胰汤+空载组和清胰汤+PVT1沉默组,每日用药1次,比较各组HE染色、炎症因子及TRAF6及细胞凋亡相关基因表达。结果HE染色结果表明,清胰汤组病理学改善显著,胰腺组织内炎症细胞浸润减轻明显;清胰汤+空载组和模型组可见微血栓形成,且随着时间延长加重,炎症细胞浸润明显,伴有上皮细胞浸润。清胰汤组TNF-α、IL-1β、TRAF6表达水平均低于清胰汤+空载组和清胰汤+PVT1沉默组(均P<0.05);清胰汤组miR-146a表达水平高于清胰汤+空载组和清胰汤+PVT1沉默组(P<0.05);清胰汤组细胞凋亡相关基因β-actin、ki-67、Bax、caspase、Caspase-9表达水平低于清胰汤+空载组和清胰汤+PVT1沉默组(均P<0.05)。结论在重症胰腺炎中,清胰汤能通显著下调lncRNA-PVT1表达,促进miR-146a表达,抑制TRAF6的表达,作用于炎症信号通路,降低炎症因子水平,抑制细胞凋亡,抑制重症胰腺炎的病理进展。