m6A甲基化修饰非编码RNA调控病理性心脏重塑的作用

背景:m6A甲基化修饰非编码RNA是病理性心脏重塑形成机制的研究热点,在心血管疾病的发生发展中起着重要作用。目的:总结m6A甲基化修饰非编码RNA对调控病理性心肌肥大、心肌细胞死亡、心肌纤维化与血管重塑等病理性心脏重塑主要过程的可能作用机制。方法:以“m6A甲基化修饰,非编码RNA,病理性心肌肥大,心肌细胞凋亡,心肌细胞焦亡,心肌细胞铁死亡,心肌纤维化,血管重塑”为中文主题词,以“m6A、non-coding RNA,pathological cardiac hypertrophy,cardiomyocyte apoptosis,cardiomyocyte pyroptosis,cardiomyocyte ferroptosis,myocardial fibrosis,vascular remodeling”为英文主题词,检索中国知网、PubMed、Web of Science数据库1974年1月至2023年4月发表的相关文献,对符合筛选标准的86篇文献进行综述。结果与结论:①m6A甲基化修饰是一种动态可逆的表观遗传修饰方式;②病理性心脏重塑主要包括病理性心肌肥大、心肌细胞死亡、心肌纤维化、血管重塑,m6A相关酶可调控病理性心脏重塑相关进程;③m6A甲基化修饰相关酶可通过多种非编码RNA与不同信号通路参与调控病理性心脏重塑过程,可作为心血管疾病新的潜在干预方式;④在病理性心脏重塑中,m6A甲基化修饰与非编码RNA之间的调控关系仍处于起步阶段,随着表观遗传学的发展,m6A甲基化修饰非编码RNA来调控病理性心脏重塑有望有新的发展。

m6A甲基化调控骨代谢防治骨质疏松症的作用机制

背景:骨质疏松症发病机制复杂,其本质是各种原因导致的骨形成减弱和骨吸收增强,引起骨代谢失衡。近年来研究发现N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化可以通过调控骨代谢,达到防治骨质疏松的目的。目的:以m6A甲基化调控骨代谢作为切入点,对m6A甲基化在骨质疏松症中的相关研究进展进行系统性的整理和归纳,为寻找骨质疏松症新的治疗靶点提供一定的理论参考依据。方法:查阅国内外数据库,从各数据库建立至2023年发表的相关文献,设置中文检索词为“骨质疏松症,m6A甲基化,骨代谢,骨髓间充质干细胞,成骨细胞,破骨细胞”等,英文检索词为“Osteoporosis,m6A methylation,Bone metabolism,bone marrow mesenchymal stem cells,osteoblasts,osteoclasts”等,检索中国知网、万方、维普、PubMed、MEDLINE、Nature及Cochrane数据库,排除重复及陈旧无参考意义的文献,通过纳入和排除标准共纳入73篇标准文献进行探讨。结果与结论:①m6A甲基化可以通过多种途径影响骨髓间充质干细胞、成骨细胞、破骨细胞的活性及分化过程,调节骨代谢防治骨质疏松症;②m6A甲基化的调节过程极为复杂,其相关蛋白在不同的细胞中发挥不同的作用,甚至在同种细胞内,同类型的蛋白也会发生截然不同的作用,调控着不同的生理及病理过程。

m6A甲基化相关单核苷酸变异与膜性肾病的发病相关

目的:膜性肾病(membranous nephropathy, MN)是一种具有遗传易感性的肾小球靶向性自身免疫性疾病,其发病机制仍未完全阐明,本文旨在探索m6A甲基化相关单核苷酸变异(m6A-SNPs)是否参与了其发病环节。方法:本研究利用全基因组关联分析(GWAS)和RMvar数据库中的SNPs数据初步确定了与MN相关的m6A-SNPs,通过查询在线网站选取位于基因本体区、显示顺势表达数量性状位点(cis-eQTL)信号以及在东亚人群中次等位基因频率(minor allele frequency, MAF)值大于0.1的SNPs,并对剩余SNPs进行功能注释。最后,利用GEO数据库中GSE108113数据集进行差异基因表达分析。结果:共确定了61个与MN相关的m6A-SNPs以及MICA、NOTCH4、EXTL3、PCDHB14等8个差异表达基因。结论:m6A-SNPs可能通过调控以上基因的表达参与了MN的发生发展。

RNA m6A甲基化在卒中后认知障碍中的研究进展

卒中后认知障碍(PSCI)主要表现为学习、记忆等方面的障碍。哺乳动物大脑中高度富集的RNA m6A甲基化修饰,参与神经胶质细胞介导的神经炎症。鉴于神经炎症是PSCI神经损伤以及空间和记忆能力下降的主要机制,推测RNA m6A甲基化修饰可调节脑卒中后神经胶质细胞炎症反应,进而改善PSCI。该文就RNA m6A甲基化修饰在PSCI发展中的作用及其调控神经胶质细胞介导的炎症的详细机制进行总结分析,为该领域的研究者提供参考。

甲基转移酶METTL3介导m6A甲基化调控犬JBMMSCs成骨分化

目的:探究甲基转移酶METTL3对颌骨骨髓间充质干细胞(Jaw bone marrow mesenchymal stem cells, JBMMSCs)增殖、迁移及成骨分化的影响。方法:体外培养JBMMSCs,慢病毒转染构建沉默METTL3基因细胞模型,转染后siMETTL3组JBMMSCs mRNA水平(P<0.001)及蛋白水平(P<0.01)下降。检测两组细胞的增殖、迁移、碱性磷酸酶活性、钙沉积以及成骨相关因子骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA及蛋白水平。结果:与沉默对照(siNC)组相比,siMETTL3组培养24、48、72、96 h的增殖活性降低(P<0.001),24 h后细胞迁移能力下降(P<0.05)。成骨诱导7 d后siMETTL3组碱性磷酸酶活性下降,21 d后矿化沉积较siNC组少。qRT-PCR及Western Blot显示,OCN的mRNA(P<0.001)和蛋白(P<0.05)表达水平降低。结论:沉默METTL3可抑制JBMMSCs的增殖、迁移及成骨分化。

m6A甲基化修饰在急性肾损伤中的研究进展

急性肾损伤因高发病率、高病死率、高治疗费用已然成为全球性重要公共健康问题,其发病机制复杂、治疗策略有限,深入探索其病理生理机制、寻找临床治疗的潜在靶点具有重要意义。N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化是真核生物中最为普遍和高度保守的表观遗传修饰,是由m6A甲基转移酶、去甲基化酶和阅读蛋白共同调控RNA的剪接、出核、翻译、稳定性和高级结构的动态可逆过程。研究表明m6A甲基化修饰在急性肾损伤的发生发展中发挥重要调节作用,有望成为治疗急性肾损伤的有效靶点。本文就m6A在急性肾损伤中的调控作用及未来可能的研究方向进行综述。

METTL14介导ACSL4的m6A甲基化在髓核细胞铁死亡和细胞衰老中的作用

目的探究METTL14介导ACSL4的m6A甲基化在髓核细胞铁死亡和细胞衰老中的作用。方法采用市售人髓核细胞,利用叔丁基氢过氧化物复制细胞模型,分别复制METTL14过表达和敲除的稳转细胞株。通过分光光度法检测细胞内亚铁离子、MDA、GSH、GPX4水平,流式细胞术检测ROS和细胞线粒体膜电位,采用β-半乳糖苷酶染色评估细胞衰老情况。同时进行了甲基化RNA免疫共沉淀结合实时荧光定量聚合酶链反应(MeRIP-qRT-PCR)和RNA稳定性实验,探究METTL14对ACSL4表达的调控作用。结果METTL14过表达在髓核细胞中导致显著的铁过载(P<0.05)、ROS相对表达量升高(P<0.05)、MDA水平增加(P<0.05),以及GSH与GPX4水平下降(P<0.05),同时降低线粒体膜电位(P<0.05),从而促进了细胞衰老。通过MeRIP-qRT-PCR和RNA稳定性实验发现METTL14调控ACSL4的表达,并影响其mRNA的稳定性。挽救实验进一步证实METTL14通过调控ACSL4促进髓核细胞衰老的机制。结论METTL14通过介导ACSL4的m6A甲基化过程促进髓核细胞的铁死亡和衰老,为深入理解髓核细胞相关疾病的发病机制提供新的视角和治疗靶点。

METTL7A通过m6A甲基化调控牙髓干细胞的衰老和成骨/成牙分化

目的:探索甲基转移酶样7A(METTL7A)通过N6-甲基腺苷(m6A)甲基化对牙髓干细胞(DPSCs)衰老和成骨/成牙分化的影响。方法:利用慢病毒转染DPSCs获得METTL7A稳定敲低的DPSCs,利用逆转录病毒转染DPSCs获得METTL7A稳定过表达的DPSCs,实时荧光定量PCR和Western blot实验检测敲低及过表达效率。在此基础上,利用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色及定量检测METTL7A是否调控DPSCs的衰老,斑点杂交实验检测METTL7A是否调控DPSCs的m6A甲基化水平。METTL7A过表达组加入m6A甲基化抑制剂环亮氨酸(Cyc)后,利用SA-β-gal染色及定量检测和碱性磷酸酶(ALP)活性实验检测METTL7A通过m6A甲基化调控DPSCs的衰老和成骨/成牙分化。结果:利用慢病毒转染DPSCs,与对照组(Consh)相比,METTL7A基因和蛋白在METTL7A敲低组(METTL7Ash)的表达显著降低(P<0.01),METTL7Ash组的SA-β-gal染色及定量检测发现阳性细胞数量增加(P<0.05);利用逆转录病毒转染DPSCs,与对照组(Vector)相比,METTL7A在METTL7A过表达(HA-METTL7A)组的表达显著增加(P<0.01),HA-METTL7A组的SA-β-gal染色及定量检测显示阳性细胞数量减少(P<0.01)。此外,相比于Consh组,METTL7Ash组DPSCs的m6A甲基化修饰水平显著降低,而过表达METTL7A组DPSCs的m6A甲基化修饰水平明显升高。在此基础上,在METTL7A过表达组加入Cyc,SA-β-gal染色及其定量检测显著增加因METTL7A过表达而减少的阳性细胞数量(P<0.01),同时也显著抑制因METTL7A过表达促进的ALP活性(P<0.05)。结论:METTL7A可能通过调控m6A甲基化水平抑制DPSCs的衰老并促进其成骨/成牙分化。

m6A甲基化甲基转移酶RBM15在宫颈癌中的表达及临床意义

目的探究m6A甲基化甲基转移酶RNA结合蛋白15(RNA-binding Motif Protein 15,RBM15)与宫颈癌的相关性及临床意义。方法选取2011年1月1日至2018年1月1日期间于皖南医学院第一附属医院进行诊治的宫颈癌病例132例,另选20例正常宫颈组织病例作为对照,共152例,通过免疫组化法检测RBM15在宫颈癌中和正常宫颈中的表达水平,分析其相关性,并研究其表达量与临床分期及临床病理特征之间的关系。结果RBM15在宫颈癌中的阳性表达率56%显著高于正常宫颈0%(P=0.001),且宫颈癌的期别越高,RBM15表达越强(P=0.002)。复发宫颈癌中RBM15的表达也呈现为随期别逐渐上升的趋势(P=0.156)。RBM15的阳性表达与宫颈癌的肿瘤最大径、淋巴结转移、神经侵犯、脉管癌栓有关(P<0.05),而与肿瘤分级、病理类型、发病年龄、鳞状上皮细胞癌抗原(Squamous cell carcinoma antigen,SCCA)无关(P>0.05)。结论RBM15在宫颈癌中呈高表达,且与宫颈癌分期及临床病理特征具有一定的相关性,RBM15表达升高也会造成宫颈癌患者预后不良,这一发现日后有望成为宫颈癌诊治的新靶点。

METTL3介导m6A甲基化对骨代谢及骨质疏松的调控作用

随着社会老龄化和人们生活方式的改变,导致骨质疏松患病率升高,因此对公众健康危害极大。骨质疏松的发病机制及临床治疗方法仍不明确,目前有研究发现N6-甲基腺苷(N6 methyladenosine,m6A)在不改变碱基序列的前提下,成为调控基因转录水平的重要机制。其中,甲基转移酶样3(methyltransferase-like 3,METTL3)作为一种关键的甲基转移酶,专门催化m6A甲基化修饰。经过对现有文献报道分析发现METTL3在干细胞、成骨细胞以及破骨细胞的增殖、分化及凋亡等多个生物学过程中扮演着重要角色,从而有效地调节和维持了骨代谢的平衡状态。因此,该文通过详细介绍METTL3在骨代谢中的研究现状,为进一步探究骨质疏松的治疗提供新思路。

m6A甲基化修饰在前列腺癌中的研究进展

N6甲基腺苷修饰(m6A)甲基化修饰是一种常见的表观遗传学修饰,可改变RNA的结构和功能,影响RNA的翻译与结构的稳定性,在基因的表达调控、恶性肿瘤的发生及发展中起重要作用,已成为肿瘤领域的研究热点。该文从m6A甲基化修饰的分子调节机制及生物效应出发,重点叙述了甲基转移酶复合体、去甲基化酶、甲基化阅读器这3类m6A调节因子在前列腺癌中的研究进展。越来越多的m6A调节因子被发现其异常表达与前列腺癌的发生、发展密切相关,有助于临床从分子层面进一步了解前列腺癌的发生、发展机制。但如何将这些m6A调节因子应用于前列腺癌的诊疗还有待做进一步的研究和探索。

m6A甲基化修饰在胰腺癌中的研究进展

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)作为真核生物RNA中最丰富的表观转录组修饰,通过转移、去除和识别m6A甲基化位点来调节RNA加工、剪接、成核、翻译和稳定性,而这些位点对于肿瘤的发生、进展、代谢和转移至关重要。胰腺癌是一种恶性程度较高的肿瘤,具有诊断晚、转移早、预后差、易耐药、缺乏有效治疗手段等特点,已成为临床治疗的一个巨大挑战。最近有研究发现,m6A修饰异常与胰腺癌的致病机制和恶性进展有关,因此,本文就m6A甲基化及其相关调节因子的异常表达在胰腺癌发生发展及治疗中的调控机制作一简要综述,旨在为胰腺癌的改进治疗和开创新疗法提供新思路。

核糖核酸的m6A甲基化水平及主要甲基化调控酶在糖尿病肾病足细胞损伤中的表达和作用

目的明确糖尿病肾病(DN)足细胞损伤中RNA m6A甲基化修饰的改变,探索可能起主要调控作用的甲基化修饰酶。方法2型DN db/db小鼠(DN组)和非DN db/m小鼠(对照组),每组各6只饲养至32周后提取肾小球。采用比色法检测各组小鼠肾小球RNA m6A甲基化水平,RT-PCR检测小鼠肾小球中主要甲基化调控酶(METTL3、METTL14、WTAP、FTO和ALKBH5)的表达,采用免疫组织化学(简称免疫组化)法观察甲基转移酶METTL14在各组小鼠肾组织的表达。选取微小病变(MCD)和DN患者肾穿刺和肾癌患者癌旁健康肾组织标本,采用免疫组化法检测METTL14和WT1在各组组织中的表达。采用免疫印迹RT-PCR和免疫印迹检测体外梯度浓度高糖(25、35 mmol/L)或AGE(25、50、100μmol/L)刺激的人足细胞内METTL14的mRNA和蛋白质相对表达量。采用免疫荧光明确METTL14在50μmol/L的AGE处理下的人足细胞中的表达和定位。体外应用METTL14小干扰RNA处理人足细胞并予AGE刺激24 h。采用免疫印迹检测法检测各组足细胞内METTL14和凋亡蛋白表达,RT-PCR检测各组足细胞趋化因子和炎症因子的mRNA水平。结果与对照组比较,DN组小鼠肾小球中RNA的m6A甲基化水平显著增加;DN组小鼠肾小球中甲基转移酶METTL3、METTL14及去甲基化酶FTO的mRNA和蛋白质相对表达量升高,其中METTL14增高最为显著(P值均<0.05)。与健康对照者比较,DN患者肾穿刺样本中足细胞标志物WT1显著减少,METTL14的阳性数目显著增多并定位于细胞核(P值均<0.001)。体外35 mmol/L高糖和50μmol/L AGE刺激显著促进人足细胞内METTL14 mRNA和蛋白质相对表达量(P值均<0.01)。体外转染METTL14小干扰RNA显著抑制了AGE刺激后的人足细胞内METTL14蛋白表达的上调和足细胞凋亡,减轻AGE诱导的人足细胞内趋化因子MCP-1、炎症因子IL-6、TNF-αmRNA水平的增加。结论METTL14可能是介导DN肾小球中RNA的m6A甲基化修饰的关键调控酶。敲除足细胞METTL14可通过减轻足细胞的凋亡和炎症发挥对DN损伤足细胞的保护作用。

m6A甲基化修饰在甲状腺癌中的研究进展

甲状腺癌在内分泌系统恶性肿瘤中发病率最高,2018年占女性癌症的5.1%,但其预后良好、病死率低,10年生存率可达到90%~95%[1]。虽然内分泌治疗、手术、放疗等各种治疗技术不断进步,仍有10%的甲状腺癌患者复发、转移[2-3]。6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是RNA中含氮碱基腺苷酸(A)第6位N原子上发生的甲基化修饰,是高等真核生物信使RNA(mRNA)最丰富的修饰之一,属于表观遗传学修饰中的转录组学范畴。许多癌症与m6A修饰的异常调节有关,包括结直肠癌、乳腺癌、神经胶质瘤、肺癌、肾透明细胞癌和肝细胞癌等[4]。本文对目前甲状腺癌m6A甲基化修饰的研究进展进行简要概述。

m6A甲基化修饰与宫颈癌

2018年全球癌症统计,宫颈癌被公认为第二大最常见的恶性肿瘤,其死亡率在女性中位居第二[1]。宫颈癌在中低收入国家的发病率和死亡率较高[2],其中印度(病例:97000,死亡:60000)和中国(病例:106000,死亡:48000)加起来占全球宫颈癌的三分之一以上[3]。尽管人乳头瘤病毒的疫苗和筛查广泛应用于临床,但临床中宫颈癌的诊断和治疗仍备受关注。

嗜热链球菌m6A甲基化差异研究

嗜热链球菌是乳制品工业生产中最为重要的发酵剂之一,具有良好的发酵特性。DNA甲基化是DNA化学修饰的一种形式,可在不改变DNA序列的前提下影响基因表达。本文选取2株产酸表型具有较大差异的嗜热链球菌为研究对象,通过甲基化组学探究m6A甲基化与遗传表型的关系。利用PacBio SMRT测序平台对嗜热链球菌IMAU80278与嗜热链球菌IMAU20416进行基因组测序及m6A甲基化测定,比较2株嗜热链球菌功能基因及m6A甲基化差异。结果表明,嗜热链球菌IMAU80278与嗜热链球菌IMAU20416基因组相似,且功能基因均以碳水化合物代谢及氨基酸代谢为主。嗜热链球菌IMAU80278与嗜热链球菌IMAU20416限制修饰系统,m6A甲基化位点和m6A基序均存在显著差异,特别是在碳水化合物代谢及氨基酸代谢相关功能基因的m6A甲基化存在明显差异。推测m6A甲基化的差异可能导致嗜热链球菌IMAU80278与嗜热链球菌IMAU20416产酸表型的不同。此外,从表观遗传学角度探究嗜热链球菌DNA甲基化对发酵特性的影响,为优良发酵剂的筛选及利用奠定理论基础。

m6A甲基化与肿瘤细胞程序性死亡的研究进展

N6-甲基腺苷(N6-methyladenine,m6A)是真核细胞中最常见的内部RNA修饰方式,近年来受到越来越多的关注。m6A在生物体内发挥着多样性作用,其作用机制可能与m6A基因序列的位置发生改变有关。m6A修饰从多个方面影响转录后修饰,在细胞的各种病理生理过程中发挥着重要调节作用。肿瘤细胞的程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)包括细胞凋亡、细胞焦亡、铁死亡、坏死性凋亡以及细胞自噬。本文将从m6A甲基化与肿瘤细胞程序性死亡的研究进展作一综述,介绍m6A甲基化在体内的作用、m6A甲基化与PCD的相关性、m6A通过PCD途径与肿瘤及以m6A通过PCD途径为靶点在肿瘤诊疗方面的意义。

m6A甲基化对邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯诱导小鼠睾丸间质细胞自噬的作用

目的 探讨邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]致小鼠睾丸间质(TM-3)细胞自噬中m6A甲基化的作用。方法 将对数生长期的TM-3细胞暴露于浓度梯度(0、5、10、20、40、80μmol·L^(-1))的m6A甲基化抑制剂3-脱氮腺苷(3-Deazaadenosine,DAA)24 h,CCK-8法检测细胞活力,确定3-脱氮腺苷的染毒剂量后,梯度稀释为对照组(0μmol·L^(-1))、MEHP低剂量组(200μmol·L^(-1))、MEHP中剂量组(400μmol·L^(-1))、MEHP高剂量组(800μmol·L^(-1)),将TM-3细胞分别暴露于0、200、400、800μmol·L^(-1)MEHP,40μmol·L^(-1)DAA+400μmol·L^(-1)MEHP和40μmol·L^(-1)DAA染毒组24 h,光镜下观察TM-3细胞形态。CCK-8法检测细胞存活率;m6A RNA甲基化定量检测试剂盒检测m6A修饰水平;丹酰尸胺(MDC)荧光染色检测自噬形成情况;Western blot检测LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的蛋白表达水平。结果 与对照组相比,DAA浓度为5、10、20、40μmol·L^(-1)时,细胞活力均无明显变化(P均>0.05);DAA浓度为80μmol·L^(-1)时,细胞活力下降(P<0.01);各MEHP染毒组TM-3细胞活力和m6A甲基化水平均降低(P均<0.01),细胞空隙变大,圆形细胞增多,贴壁细胞的数量明显减少;DAA组m6A甲基化水平较对照组降低(P<0.01);与MEHP中剂量组相比,DAA+MEHP组细胞活力和m6A甲基化水平均下降(P均<0.01),细胞发生皱缩,细胞间隔稍有增大。与对照组相比,各MEHP染毒组、DAA+MEHP组和DAA处理组LC3-Ⅱ的蛋白表达水平均升高(P均<0.05),MEHP低剂量组MDC荧光信号强度、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的蛋白表达量均无明显变化(P均>0.05);MEHP中、高剂量组和DAA+MEHP组荧光强度、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的表达量均升高(P均<0.01);DAA组荧光强度和Beclin-1的表达水平均升高(P均<0.01),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ无明显变化(P均>0.05)。DAA+MEHP组荧光强度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ较MEHP中剂量组呈上升趋势(P<0.05)。结论 MEHP可能通过降低RNA甲基化m6A修饰的水平来诱导TM-3细胞发生自噬。

高脂饮食诱导的小鼠NAFLD模型肝组织中m6A甲基化修饰表达谱分析

目的·利用微阵列芯片技术检测高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型中肝组织mRNA的m6A甲基化修饰和基因表达的变化。方法·以6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠为实验动物,高脂饲料喂养16周诱导建立NAFLD模型(高脂组,n=10);另设基础组(n=10)为对照,给予含10%脂肪的基础饲料喂养。苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H-E)染色评估小鼠肝组织病理改变,判断NAFLD模型是否构建成功。运用甲基化RNA免疫共沉淀技术(methylated RNA immunoprecipitation,MeRIP)和微阵列测序技术(microarray表达谱分析)检测2组小鼠肝组织中mRNA的m6A甲基化和表达水平变化。结果·基础组小鼠肝脏呈鲜红色,少见脂肪沉积;高脂组小鼠肝脏边界黄润,H-E染色可见肝细胞中脂滴弥漫浸润且相互融合,提示高脂饲料诱导的NAFLD模型构建成功。MeRIP-微阵列芯片检测结果显示,与基础组相比,高脂组小鼠肝脏中共有320个基因m6A甲基化修饰水平变化显著(P<0.05且变化倍数>1.5),其中有108个上调基因和212个下调基因。将组间m6A甲基化水平差异显著的基因与mRNA差异表达基因取交集,发现有163个基因m6A甲基化水平和mRNA表达水平均差异显著。结论·高脂饮食诱导的小鼠NAFLD模型中肝组织mRNA的m6A修饰变化显著,且该变化与mRNA的基因表达有关。

链脲佐菌素对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响

目的探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响。方法20只8周龄雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组和模型组,腹腔注射STZ诱导糖尿病动物模型。注射后第2、4、6、8周检测血糖及体重;第8周采用精子计数法检测小鼠精子数量,HE染色检测精子存活率及睾丸形态,称量睾丸、附睾的重量;Real-time PCR和Western blotting检测各组小鼠睾丸中m6A甲基化酶mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,模型组小鼠空腹血糖显著增高,体重降低(P<0.01);睾丸及附睾重量显著下降(P<0.01)、精子数量显著下降(P<0.05);睾丸形态结构破坏,生精小管萎缩,管腔直径变小,各级生精细胞排列紊乱,管腔内精子数量减少;睾丸m6A甲基化酶METTL3、FTO、YTHDF3 mRNA表达降低(P<0.05);METTL3、FTO蛋白质表达显著降低(P<0.05)。结论STZ诱导的糖尿病小鼠出现生精障碍,其生精障碍可能与睾丸内m6A甲基化酶METTL3以及FTO的表达异常有关。