脊蛇祛湿胶囊调节mPGES-1干预类风湿关节炎的作用机制研究

目的:探究脊蛇祛湿胶囊(JiShe QuShi Capsules,JSQSC)对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)大鼠模型微粒体前列腺素E 2合酶-1(mPGES-1)靶点的影响。方法:雌性SD大鼠24只,随机分为正常组、模型组、JSQSC组和甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)组,每组6只。适应性喂养一周后构建CIA大鼠模型,二次免疫后第3天开始给药。JSQSC组每天灌胃脊蛇祛湿胶囊药液,MTX组每天灌胃1 mg/kg甲氨蝶呤药液,正常组和模型组每天灌胃等体积的生理盐水,每7天检测大鼠体重、足肿胀等指标,于实验第28天取材。结果:相比于模型组,JSQSC组与MTX组的大鼠体质量增加,足肿胀减轻,滑膜组织mPGES-1表达水平降低(P<0.05)。结论:脊蛇祛湿胶囊药液可通过抑制mPGES-1的表达从而减轻CIA大鼠炎性症状的产生。

黑骨藤追风活络胶囊调节NF-κB/STAT3/mPGES-1信号通路改善胶原诱导性关节炎的作用研究

目的:研究黑骨藤追风活络胶囊(Heiguteng Zhuifenghuoluo cupsule,HZC)调节NF-κB/STAT3/mPGES-1信号通路改善胶原诱导性关节炎(Collagen induced arthritis,CIA)大鼠的作用机制。方法:取24只SD大鼠,随机分组为正常组、模型组、HZC组和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)组。除正常组外,其余三组采用牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂混合乳化剂构建类风湿性关节(rheumatoid arthritis,RA)大鼠模型。按照实验分组分别给予生理盐水、MTX(1 mg/kg)和HZC(243 mg/kg)灌胃,共给药21天。每周测量大鼠足肿胀程度、观察并进行足肿胀评分、检测大鼠血清中前列腺素E 2(Prostaglandin E2,PGE 2),检测大鼠滑膜组织中微粒体前列腺素E2合酶-1(microsomal prostaglandin E synthase 1,mPGES-1)以及p-p65、p-STAT3蛋白表达情况。结果:模型组大鼠足肿胀程度、肿胀程度评分、大鼠血清PGE 2明显增加,HZC和MTX组大鼠足肿胀程度、肿胀程度评分和大鼠血清PGE 2明显降低。进一步机制研究发现模型组大鼠关节滑膜组织中mPGES-1、p-p65、p-STAT3蛋白的表达增加,HZC和MTX组大鼠关节滑膜组织中mPGES-1、p-p65、p-STAT3蛋白的表达明显降低。结论:HZC通过抑制NF-κB/STAT3/mPGES-1信号通路,发挥其对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用。

利用组织芯片研究COX-2和mPGES-1在肝细胞癌中的表达及意义

目的:检测COX-2和mPGES-1在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达,探讨其在HCC发生、发展中的意义。方法:构建含HCC、癌旁肝硬化、癌旁慢性肝炎及正常肝组织的组织芯片,应用免疫组化和图像分析技术检测COX-2和mPGES-1蛋白的相对表达量,进行半定量分析。结果:COX-2和mPGES-1在HCC中表达均高于正常肝组织(P<0.01),随着病理学分级的升高,COX-2相对表达量明显下降(P<0.01),但mPGES-1表达量逐渐增高,包膜侵犯组中mPGES-1表达量高于包膜无侵犯组(P<0.01),转移组高于无转移组(P<0.01)。在HCC组织中,COX-2与mPGES-1的表达无明显相关(r=-0.13,P>0.05)。结论:COX-2和mPGES-1与HCC的发生密切相关,mPGES-1可能在HCC进展期发挥重要作用,选择性抑制mPGES-1有可能成为治疗HCC新的靶点。

辣椒素通过下调COX-2和mPGES-1抑制IL-1β诱导的NCI-H460细胞PGE_2含量的实验研究

目的观察辣椒素对IL-1β诱导的人肺腺癌NCI-H460细胞PGE_2含量的影响,并且进一步观察其对COX-2和mPGES-1的影响,探讨其抗非小细胞肺癌(NSCLC)的可能机制。方法体外培养NCI-H460细胞,采用MTT比色分析法,观察辣椒素对NCI-H460细胞增殖抑制作用,计算IC50;采用IL-1β刺激的方法构建炎症模型,ELISA法检测辣椒素对NCI-H460细胞PGE_2含量和COX-2活性的影响;Western blot法检测辣椒素对NCI-H460细胞COX-2、mPGES-1蛋白表达的影响;Real-time PCR法检测辣椒素对NCI-H460细胞COX-2mRNA和mPGES-1mRNA表达的影响。结果 MTT比色分析结果表明,辣椒素对NCI-H460细胞增殖具有明显抑制作用,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。辣椒素明显降低NCI-H460细胞COX-2活性和PGE_2浓度,而且明显降低NCIH460细胞COX-2、mPGES-1蛋白及其mRNA的表达,且呈剂量依赖性,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论辣椒素通过降低NCI-H460细胞COX-2和mPGES-1 mRNA表达从而抑制PGE_2释放,可能是其抗NSCLC的机制之一。

mPGES-1抑制剂MK886对白血病HL-60/A细胞凋亡及耐药性的影响

为了探讨膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGES-1)抑制剂MK886对耐药白血病HL-60/A细胞诱导凋亡的作用及对其耐药性的影响,采用QT-PCR及Western blot法检测HL-60/A细胞mPGES-1的表达,CCK-8法观察药物对HL-60/A细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA法检测PGE2的合成,Western blot法检测Akt、P-Akt表达,并观察低浓度(10μmol/L)MK886对HL-60/A细胞耐药性及多药耐药基因表达的影响。结果表明,HL-60/A细胞高表达mPGES-1,MK886可时间、浓度依赖性地抑制HL-60/A细胞增殖,诱导其凋亡(r=-0.83,P<0.05),同时,mPGES-1表达及PGE2合成减少,P-Akt表达明显下降。低浓度MK886可下调多药耐药基因mdr-1及蛋白P170表达,增强对化疗的敏感性。结论:MK886可抑制耐药白血病HL-60/A细胞增殖,诱导其凋亡,增强其化疗敏感性,其机制与下调mPGES-1/PGE2合成、抑制P-Akt蛋白及多药耐药基因表达有关。

mPGES-1抑制剂MK886对白血病HL-60细胞周期的影响

本研究探讨膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGES-1)抑制剂MK886对人急性髓系白血病HL-60细胞周期的作用。采用流式细胞仪分析技术、Western blot、ELISA等方法检测不同浓度MK886(10、25、50μmol/L)对HL-60细胞周期的作用及对细胞周期调控因子周期蛋白D1、mPGES-1、PGE2、Akt、P-Akt、C-MYC蛋白的影响。结果表明:与正常人外周血单个核细胞比较,G0/G1期HL-60细胞比例减少,S期比例增多。MK886作用24 h后,被阻滞于G0/G1期的细胞增多,同时细胞mPGES-1表达下调,合成PGE2减少,P-Akt、C-MYC、周期蛋白D1蛋白表达下降。结论:MK886对白血病HL-60细胞有细胞周期阻滞作用,其机制可能与抑制mPGES-1表达,减少PGE2的合成,抑制Akt磷酸化及C-MYC表达,下调周期蛋白D1表达有关。

AH6809干预的单纯性脑震荡大鼠海马mPGES-1的表达变化

目的：观察单纯性脑震荡（pure cerebral concussion,PCC）致伤后大鼠海马膜结合型前列腺素E2-合酶1（membrane-associated prostaglandin E synthase-1,mPGES-1）在EP2受体抑制剂（AH6809）干预后的表达变化,探讨AH6809对mPGES-1的干预调控作用。方法：采用金属单摆闭合式脑损伤打击装置制备PCC模型,分别于致伤后即刻和12 h腹腔注射AH6809,然后随机分为1、2、3 d和7 d组（n=5）,另设相应生理盐水对照组（n=5）。采用免疫组织化学染色和Western Blot方法,观察PCC＋AH6809组和生理盐水对照组大鼠海马（CA1~4和上、下齿状回）内m PGES-1的表达情况。结果：免疫组化实验结果显示：在AH6809干预前后均可观察到mPGES-1阳性产物表达于海马CA1~4和上、下齿状回的神经元胞体,呈圆形或卵圆形,胞核不着色,胞浆为棕黄色。与生理盐水对照组相比,AH6809干预后2 d组均出现mPGES-1阳性表达相对减弱,染色渐浅且细胞轮廓不清,3 d组下调最为明显,其中3 d组和7 d组的差异具有显著性（P〈0.05）。Western Blot实验结果显示：mPGES-1蛋白出现相似的规律性变化,下降的低峰出现在7 d组,其中2、3、7 d组与对照组相比差异具有显著性（P〈0.05）。结论：AH6809对PCC大鼠海马mPGES-1的表达具有一定的干预抑制作用。

mPGES-1抑制剂MK886对白血病HL-60细胞的增殖抑制作用

目的:观察膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGES-1)抑制剂MK886对急性髓细胞白血病细胞株HL-60的增殖抑制作用。方法:不同浓度的MK886作用于HL-60细胞不同时间后,CCK-8测定其对HL-60细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测HL-60细胞的凋亡情况,Western blot法检测mPGES-1、Bax、Bcl-2蛋白的表达,ELISA法检测PGE2。结果:HL-60细胞株高表达mPGES-1。MK886可时间、剂量依赖性地抑制HL-60细胞mPGES-1表达和PGE2合成,同时细胞增殖受到抑制,凋亡增加,Bax蛋白表达上调,Bcl-2表达下降。结论:MK886可抑制HL-60细胞增殖,诱导凋亡,其机制与下调mPGES-1表达、抑制PGE2合成和调控Bcl-2/Bax等有关。

肺癌中mPGES-1的表达及生物学意义

目的探讨前列腺素E合成酶(mPGEs-1)在肺癌中的表达及生物学意义,为肺癌发生和发展的分子机制提供理论依据。方法采用RT-PCR检测肺癌及癌旁组织中mPGEs-1mRNA的表达,同时采用免疫组织化学S-P法检测相应标本中mPGEs-1蛋白的表达。结果肺癌组织中mPGEs-1 mRNA的表达量明显高于癌旁组织(P<0.05)。mPGEs-1蛋白阳性表达率肺癌组织中为66.7%(40/60),在相应癌旁组织中为10%(6/60),肺癌明显高于癌旁(χ2=20.38,P<0.01)。肺癌mPGES-1蛋白的阳性表达率与肿瘤大小、组织类型无关(P>0.05);而与分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关,随着组织分化程度的降低、淋巴结的转移和临床分期的增加,肺癌mPGEs-1蛋白的阳性表达率逐渐增高,差异有显著性(P<0.05)。结论 mPGEs-1的高表达可能在肺癌的发生发展中起着重要作用,它们可能为肺癌的早期诊断和为开发肺癌的靶向治疗提供一定的临床依据。

单纯性脑震荡大鼠海马mPGES-1的表达

目的:观察单纯性脑震荡(pure cerebral concussion,PCC)大鼠脑内海马区膜结合型前列素E合酶1(membrane-associated prostaglandin E synthase-1,mPGES-1)的表达变化,探讨mPGES-1是否通过前列腺素代谢途径参与PCC的病理变化及其变化规律。方法:采用清醒状态下自制金属单摆闭合式脑损伤打击装置制备PCC模型,致伤后随机分为3 h、12 h、1 d、2 d、3 d、7 d组(n=5),另设正常对照组(n=5)。采用mPGES-1多克隆抗体进行免疫组织化学法和Western blot技术,检测PCC组和正常组大鼠海马CA1-4区mPGES-1的定位及定量情况。结果:正常状态下,海马CA1-4区mPGES-1阳性细胞极少,轮廓不清,致伤后3 h海马各区的mPGES-1表达水平开始增高,至3 d达高峰,与正常组比较有显著性差异(P<0.05),3 d后逐渐下降,至7 d接近正常水平。mPGES-1蛋白的变化规律和免疫组化结果相似。结论:PCC损伤早期海马区出现mPGES-1表达增强,提示mPGES-1通过前列腺素代谢途径参与PCC致伤后的病理变化。

RNA干扰mPGES-1基因对K562/A细胞增殖及凋亡的影响

[目的]探讨RNA干扰膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGES-1)对阿霉素耐药的人红白血病细胞株K562/A细胞增殖、凋亡及耐药性的影响及其可能的机制.[方法]通过RNA干扰技术抑制K562/A细胞中mPGES-1表达.分组:①未处理组(K562/A),②干扰后的阴性对照组(K562/A-NC),③干扰组(K562/A-KD),④干扰后加入外源性PGE2组(K562/A-KD+PGE2);CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测PGE2浓度;Western blot检测蛋白水平.[结果]RNA干扰可明显下调K562/A细胞mPGES-1表达,抑制PGE2合成(P<0.0001).RNA干扰后,K562/A细胞增殖受抑,凋亡增加,对各化疗药物敏感性均有不同程度的增强(P<0.05),同时β-catenin、MDR1的表达量减少(P<0.01).外源性PGE2可逆转RNA干扰对K562/A增殖、凋亡水平、药物敏感性的影响(P<0.05),同时β-catenin、MDR1的表达上调(P<0.01);β-catenin抑制剂XAV939可浓度依赖性抑制β-catenin、MDR1蛋白的表达(P<0.05).[结论]RNA干扰mPGES-1基因可抑制K562/A细胞增殖、诱导细胞凋亡、增强细胞对化疗的敏感性,其机制与减少PGE2的合成进而下调β-catenin、MDR1的表达有关.Wnt/β-catenin通路可能参与了mPGES-1/PGE2对MDR1的调控.

mPGES-1相关结直肠癌变机制的研究进展

膜结合型前列腺素E合成酶1（mPGES-1）是前列腺素H2（PGH2）转化为前列腺素E2（PGE2）过程中的重要终端限速酶，是一种诱导型酶，参与机体的多种生理及病理过程。多项研究结果显示，mPGES-1在结肠癌、肺癌、头颈部肿瘤、乳腺癌和胃癌中过度表达，且与肿瘤的发生、发展密切相关。结直肠癌（colorectal carcinoma，CRC）是最常见的肿瘤并在肿瘤相关致死疾病中位列第2名。

shRNA干扰mPGES-1基因对K562细胞在裸鼠体内成瘤的影响

目的:探讨抑制前列腺素E2合酶1(mPGES-1)表达对人急性白血病K562细胞在裸鼠体内成瘤的影响及其可能的机制。方法:通过shRNA干扰技术下调K562细胞中mPGES-1表达,实验设立了如下研究小组:①干扰组(KD),②阴性细胞(NC)非特异序列shRNA干扰组;③未处理组(CON组);应用Western blot法检测β-catenin和cyclin D1在3组细胞中的表达;构建K562细胞人-裸鼠移植瘤模型,观察移植瘤的生长情况;应用HE染色观察各组肿瘤组织的结构;应用免疫组织化学法检测β-catenin和cyclin D1的表达水平。结果:与CON组和NC组比较,细胞体外实验结果显示KD组β-catenin和cyclin D1表达量减少(P<0.05);动物体内实验结果显示,KD组瘤体生长明显减慢,移植瘤体积明显缩小,重量明显减轻(P<0.01);HE染色显示,KD组细胞排列相对松散,间质较多,肿瘤细胞核小,细胞质较少;免疫组织化学检测显示,KD组β-catenin和cyclin D1表达量明显下降(P<0.05)。结论:下调mPGES-1表达能显著抑制人急性白血病K562细胞在裸鼠体内成瘤,其机制可能与抑制β-catenin和cyclinD1表达相关。

mPGES-1来源的PGE2抑制血管钙化

目的COX-2特异性抑制剂可以增加心血管疾病的发生率，血管钙化是心血管疾病的重要并发症之一。COX一2下游代谢产物PGE2在动脉粥样硬化等疾病中具有重要作用。在本文中，我们观察了COX-2特异性抑制剂对血管钙化的影响。方法和结果COX．2特异性抑制剂NS398和SC236可以显著抑制高磷介导的血管平滑肌细胞钙化，而COX-1特异性抑制剂SC560和COX-1／2抑制剂吲哚美辛没有明显作用。血管平滑肌细胞敲低COX-2可以显著增加高磷诱导的血管钙化水平。超高压液相色谱质谱联用（UPLC—MS／MS）结果显示高磷刺激血管平滑肌细胞可以显著上调PGE2、PGD2和6-keto—PGFlα表达，使用NS398可以抑制这一变化，而使用SC560可以抑制PGD2和6-keto—PGFlOt表达而对PGE2没有影响。

The Expression and Significance of CyclinD2,MPGES-1,Bcl2 in Diffuse Large B-cell Lymphoma

Objective:To study the expression and significance of cell cycle proteins CyclinD2,mPGES-1,Bcl2 in diffuse large B-cell lymphoma.Methods:Choose lymphoma and sexually hyper-plastic lymphoid tissues as control.Immunohistoc-hemical methods were used to detect the expression of CyclinD2,mPGES-1,and Bcl2,and to compare the positive expression rates of CyclinD2,MPGES-1 and Bcl2 in diffuse large B-cell lymphoma and reactive proliferative lymphoid tissues to compare their diffusion formation.B-cell lymphoma was analyzed for its clinicopathological features.Results:The positive expression rate of CyclinD2,mPGES-1 and Bcl2 in diffuse large B-cell lymphoma is higher than that in reactive proliferative lymphoid tissue,and the difference between the two is statistically significant.There was no statistical difference in CyclinD2,mPGES-1 and Bcl2 in diffuse large B-cell lymphoma between patients according to the age,sex,location,tissue type and degree of differentiation.Conclusion:CyclinD2,mPGES-1 and Bcl2 are highly expressed in patients with diffuse large B-cell lymphoma,and can be used as reference indicators for evaluating the malignant degree and efficacy of dysplasia.

黑骨藤追风活络胶囊调节mPGES-1改善胶原诱导性关节炎的作用研究

目的研究黑骨藤追风活络胶囊(HZC)调节mPGES-1干预类风湿关节炎的作用机制。方法随机选取24只SD大鼠并分为正常组、模型组、HZC组、甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)组,造模成功后对大鼠进行灌胃给药,除正常组外,其余三组采用牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂混合乳化剂构建胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,大鼠分别给予生理盐水、MTX和HZC灌胃,共给药21 d。比较各组足肿胀、脾指数、微粒体前列腺素E2合酶-1(microsomal prostaglandin E synthase 1,mPGES-1)的表达情况。结果与正常组大鼠比较,模型组大鼠足肿胀程度明显且伴随着关节变形肿大,HZC组和MTX组大鼠未见明显足肿胀和关节变形。模型组给药第14、21天足肿胀厚度高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05),而HZC组和MTX组给药后第14、21天足肿胀厚度低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组脾指数高于正常组、HZC组、MTX组,差异有统计学意义(P<0.05);与正常组比较,模型组大鼠关节滑膜组织m PGES-1蛋白表达上升(P<0.05),而与模型组比较,HZC组和MTX组mPGES-1蛋白表达下调(P<0.05)。结论HZC能通过干预m PGES-1的表达情况而改善CIA大鼠的炎症反应,起到治疗作用。

靶向微粒体前列腺素E_(2)合酶-1的抗炎药物研究进展

微粒体前列腺素E_(2)合酶-1(mPGES-1)是介导前列腺素E_2(PGE_2)产生的主要终末合成酶,在炎症性疾病中起着至关重要的作用。与非甾体抗炎药相比,mPGES-1抑制剂在阻断PGE_(2)的产生方面具有更好的特异性和更高的安全性,因此被认为是更具前景的抗炎药物。本文总结了mPGES-1分子在炎症和心血管疾病中的研究现状,系统梳理了mPGES-1抑制剂的研究进展,详细阐述了其在不同炎症性动物模型和炎性疾病中的治疗作用,并探讨了可能存在的挑战,以期为后续抗炎药物的研发提供指引和参考。

HMGB1、mPGES-1和TLR4在卵巢子宫内膜异位症中的表达及临床相关性研究

目的通过检测卵巢巧克力囊肿患者异位、在位及正常内膜中Toll样受体4(TLR4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和膜结合型前列腺素E合酶1(m PGES-1)的表达,探讨TLR4、HMGB1和m PGES-1在子宫内膜异位症发病机制中的作用。方法采用免疫组织化学(SP)法对35例子宫内膜异位症患者的异位、在位内膜以及26例对照组的正常内膜进行TLR4、HMGB1和m PGES-1表达水平的检测。结果卵巢巧克力囊肿患者异位内膜、在位内膜中TLR4、HMGB1和m PGES-1的表达均明显高于对照组(P<0.05);子宫内膜异位症患者异位内膜组的表达高于在位内膜组(P<0.05)。子宫内膜异位症患者在位内膜组中TLR4和m PGES-1的表达分泌期高于增生期(P<0.05);而HMGB1在在位内膜组的增生期和分泌期的表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HMGB1和m PGES-1在子宫内膜异位症患者异位内膜组和在位内膜组Ⅲ、Ⅳ期中的表达高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);而TLR4在子宫内膜异位症患者Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期中的表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TLR4、HMGB1和m PGES-1在卵巢子宫内膜异位症中表达上调,且表达呈正相关,表明三者与子宫内膜异位症的发生、发展可能相关,并有可能成为监测子宫内膜异位症病情严重程度的标记物。

膜结合型前列腺素合酶-1在鼻息肉中的检测

目的探讨前列腺素E2生成的终末酶——膜结合型前列腺素合酶(mPGEs-1)在鼻息肉组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法对34例鼻息肉和10例正常下鼻甲黏膜中mPGEs-1的蛋白表达进行检测。结果mPGEs-1在正常下鼻甲黏膜组织中无或少量表达,在鼻息肉组织中显示高表达;Ⅲ型鼻息肉组织中mPGEs-1的阳性表达面积和密度均高于Ⅱ型鼻息肉组(P<0.05)。结论mPGEs-1在鼻息肉组织中高表达,而且与鼻息肉的分型有关;mPGEs-1的高表达可能是鼻息肉发生、发展的重要因素。

TLR4介导大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中PGE2分泌研究

为了探讨TLR4与大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中前列腺素E2(PGE2)蓄积的相关性,试验分别用1×10-5 mol/L和1×10-6 mol/L的TLR4抑制剂处理体外培养的大肠杆菌DH5α感受态细胞和大肠杆菌突变株JE5505(脂蛋白缺失菌)感染的奶牛子宫内膜组织,用实时荧光定量PCR方法检测组织中COX-2和mPGES-1 mRNA的表达,用ELISA法检测组织上清液中PGE2的分泌情况。结果表明:大肠杆菌DH5α感受态细胞和大肠杆菌突变株JE5505感染的奶牛子宫内膜组织中COX-2和mPGES-1 mRNA的表达量及组织上清液中PGE2的分泌量明显升高,而TLR4抑制剂能明显降低大肠杆菌DH5α感受态细胞和大肠杆菌突变株JE5505感染的奶牛子宫内膜组织中COX-2和mPGES-1 mRNA的表达量及组织上清液中PGE2的分泌量。说明TLR4可调控大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中炎症介质PGE2的分泌。