miR-21-3p靶向STAT3促进银屑病角质形成细胞增殖的研究

目的探讨miR-21-3p及其靶蛋白信号转导子和转录激活子3蛋白(STAT3)在寻常型银屑病发生过程中角质形成细胞的作用意义。方法对皮肤组织中STAT3蛋白表达情况的检测选择免疫组织化学法,对健康人群皮肤组织及银屑病患者皮损组织miR-21-3p表达量的检测选择实时荧光定量PCR法,靶基因STAT3和miR-21-3p关系的检测选择双荧光素酶报告基因。化学合成miR-21-3p模拟物、抑制剂,瞬时转染HaCaT细胞,对不同分组细胞进行CCK8、流式细胞凋亡实验,探究分析miR-21-3p调控细胞表型主要作用。对于转染细胞中STAT3蛋白表达情况,选择Western Blot检测。结果寻常型银屑病患者皮肤组织中miR-21-3p呈高表达(P<0.05)。STAT3免疫组化阳性表达定位于细胞浆,在银屑病组患者皮损组织阳性表达率为82.22%(37/45)高于正常皮肤组织(P<0.01)。双荧光素酶报告基因显示miR-21-3p与STAT3存在结合,呈靶向关系。miR-21-3p mimics促进HaCaT细胞增殖活性,抑制细胞凋亡;miR-21-3p inhibitor抑制HaCaT细胞的增殖能力,促使细胞趋向凋亡。miR-21-3p转染HaCaT过表达可对STAT3蛋白表达量产生促进,相反则降低(F=48.632,P<0.01)。结论miR-21-3p呈现正调控关系,能够靶向调控STAT3;两者共同作用参与并加重银屑病的病程,并抑制患者细胞凋亡,调节角质形成细胞增殖活性。

miR-21-3p通过下调CCT4抑制食管鳞癌细胞的迁移及侵袭

目的:探讨miR-21-3p对食管鳞癌细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:通过数据库检索miR-21-3p的下游靶基因,GEPIA2数据库预测CCT4在食管鳞癌中的表达和对食管鳞癌患者预后的影响,培养食管鳞癌细胞TE-1、KYSE150,将miR-21-3p inhibitor、SiCCT4、Plenti-CMV-CCT4-GFP/Puro转染至TE-1和KYSE150细胞中,分为miR-21-3p inhibitor组和inhibitor NC组、SiCCT4组和SiNC组、Plenti-CMV-CCT4组和inhibitor+Plenti-CMV-CCT4组,采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-21-3p和CCT4 mRNA的表达水平,Transwell迁移侵袭实验检测各组细胞的迁移及侵袭能力,Western blot检测转染后各组细胞CCT4蛋白的表达水平。结果:数据库预测结果显示CCT4在食管鳞癌中过表达,与食管鳞癌患者总体生存期相关,与miR-21-3p呈正相关。qRT-PCR显示miR-21-3p和CCT4在食管癌细胞相较于正常上皮细胞表达显著升高,且在抑制miR-21-3p后CCT4表达水平显著降低(P<0.05)。Transwell实验显示,inhibitor组迁移率及侵袭率显著低于inhibitor NC组(P<0.05);SiCCT4组迁移率及侵袭率显著低于SiNC组(P<0.05);inhibitor+Plenti-CMV-CCT4组迁移率及侵袭率显著高于inhibitor组(P<0.05);Western blot检测CCT4蛋白发现,inhibitor组蛋白低于inhibitor NC组(P<0.05),inhibitor+Plenti-CMV-CCT4组蛋白显著高于inhibitor组(P<0.05)。结论:miR-21-3p和CCT4在食管癌中呈现过表达,miR-21-3p通过下调CCT4表达抑制食管癌细胞迁移和侵袭能力。

血清miR-21-3p、IL-18水平检测对重症急性胰腺炎患者急性肾损伤预测评估的临床价值

目的探讨血清中微RNA(miR)-21-3p和白细胞介素(IL)-18水平对重症急性胰腺炎患者急性肾损伤(AKI)预测评估的临床价值。方法前瞻性选取2020年9月至2023年青岛市中医医院收治的146例急性重症胰腺炎患者,根据有无AKI分为AKI组(n=51)和非AKI组(n=95)。比较两组的临床资料[性别、年龄(≤50岁、>50岁)、病因类型(酒精性、胆源性、高血脂性、其他)、体重指数(≤28 kg/m 2、>28 kg/m 2)],比较两组血清中miR-21-3p(相对表达量、高表达比例、低表达比例)、IL-18水平(平均表达量、≤140 pg/mL比例、>140 pg/mL比例);采用Logistic回归模型分析影响重症急性胰腺炎患者住院期间AKI发生的因素;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析miR-21-3p、IL-18对重症急性胰腺炎患者并发AKI的预测价值。结果AKI组患者的性别、年龄、病因类型、体重指数与非AKI组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。AKI组的miR-21-3p相对表达量、IL-18水平、Ranson评分分别为2.24±0.52、(178.21±49.32)pg/mL、(6.14±1.24)分,均明显高于非AKI组[1.58±0.35、(82.35±38.43)pg/mL、(4.53±1.12)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,miR-21-3p和IL-18增高均是SAP患者发生AKI的危险因素(OR=1.490,95%CI:1.035~1.832;OR=1.421,95%CI:1.042~1.734;P<0.05)。miR-21-3p和IL-18联合检测对重症急性胰腺炎伴AKI的诊断具有更高的敏感性和特异性,AUC为0.873,敏感度为90.42%,特异度为91.24%。结论在重症急性胰腺炎合并AKI患者中,血清中miR-21-3p和IL-18水平显著升高。检测血清miR-21-3p和IL-18水平有助于预测重症急性胰腺炎合并AKI,尤其在联合检测时,有更高的准确性。

血清miR-21-3p检测联合淋巴结粗针穿刺活检对甲状腺癌颈淋巴结转移的诊断价值

目的:探讨血清miR-21-3p检测联合超声引导下淋巴结粗针穿刺活检(LCNB)对甲状腺癌颈淋巴结转移的诊断价值。方法:选取甲状腺癌伴颈淋巴结肿大(均行血清miR-21-3p检测及LCNB)病人80例,以手术病理为标准,比较血清miR-21-3p检测、超声引导下LCNB及两者联合检查对甲状腺癌伴颈淋巴结转移的诊断价值。结果:80例病人经手术病理检查,有淋巴结转移者49例,无转移者31例。血清miR-21-3p检测联合超声引导下LCNB诊断甲状腺癌伴颈淋巴结转移准确度为91.8%、灵敏度为87.6%,均高于两者独立检查准确度76.2%、84.7%和灵敏度82.3%、85.7%(P<0.05),联合检查受试者工作曲线下面积为0.9071,大于两者单独检测的0.7765、0.8292(P<0.05)。结论:相较于单独检测,血清miR-21-3p联合超声引导下LCNB诊断甲状腺癌淋巴结转移的准确度、灵敏度更好,诊断效能更高。

丙泊酚调控miR-21-3p对缺氧/复氧所诱导心肌细胞损伤的影响

目的探讨丙泊酚对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法以H/R诱导的大鼠心肌细胞H9C2建立心肌缺血再灌注损伤模型,不同剂量的丙泊酚处理H9C2细胞;采用CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;采用qRT-PCR法检测miR-21-3p的表达量;ELISA法检测白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的水平;anti-miR-NC、anti-miR-21-3p分别转染至H9C2细胞后进行H/R处理,miR-NC、miR-21-3p mimics分别转染至H9C2细胞后用50μmol/L丙泊酚处理24 h,然后进行H/R处理,采用上述方法分别检测细胞增殖、凋亡及炎性细胞因子表达水平;Western blot测定B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白表达量。结果丙泊酚处理后,H/R诱导的H9C2细胞增殖抑制率、TNF-α、细胞凋亡率、IL-1β、Bax蛋白水平、IL-6、miR-21-3p表达量下降(P<0.05),Bcl-2蛋白水平上升(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染anti-miR-21-3p可降低细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、Bax蛋白水平、IL-6、TNF-α、IL-1β水平(P<0.05),Bcl-2蛋白水平升高(P<0.05);转染miR-21-3p mimics可减弱丙泊酚对H/R诱导的H9C2细胞增殖、凋亡及炎性因子表达水平的作用。结论丙泊酚可通过抑制miR-21-3p表达而促进细胞增殖及抑制细胞凋亡、炎性反应从而减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。

miR-195及miR-21-3p在老年重症急性胰腺炎中的表达及相关性

选取新疆医科大学第一附属医院2020年2月—2022年3月收治的老年重症急性胰腺炎患者102例作为研究对象,按照不同疾病严重程度分为轻度组(n=45)及重度组(n=57),同时选择健康受试者50例作为对照组,全部人员均接受了荧光定量法检测,对3组人员的miR-195及miR-21-3p表达水平进行测量;对比轻度组与重度组急性生理与慢性健康评估(APACHEⅡ)评分、RANSON系统评分;采用Spearman相关性探讨APACHEⅡ及RANSON分别与微小RNA-195(miR-195)及微小RNA-21-3p(miR-21-3p)表达水平相关性;将老年重症急性胰腺炎患者按照不同预后分为死亡组(n=21)及生存组(n=36),采用ROC曲线分析miR-195及miR-21-3p对老年重症急性胰腺炎的预测价值。结果显示,轻度组与重度组的miR-195及miR-21-3p表达水平均明显高于对照组,重度组的miR-195及miR-21-3表达水平均明显高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度组与轻度组相比,APACHEⅡ评分及RANSON评分均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。采用Spearman相关性分析,APACHEⅡ及RANSON评分分别与miR-195及miR-21-3p表达水平均呈现出了明显的正相关性(P<0.05)。死亡组与生存组相比miR-195及miR-21-3p表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析可见,miR-195及miR-21-3p分别用于预测重度急性胰腺炎患者曲线下面积分别为0.932、0.901。miR-195及miR-21-3p在老年重症急性胰腺炎患者中呈现出了异常升高的表达水平,与疾病严重程度呈现出了正相关性;miR-195及miR-21-3p在预测老年重症急性胰腺炎不良预后上具有一定的应用价值。

MiR-21-3p在心肌梗死后心肌纤维化中的作用与机制研究

目的 研究miR-21-3p在心肌梗死后心肌纤维化重塑中的作用与机制。方法 选取40只C57雄性小鼠,随机分为正常组、假手术组、心肌梗死+病毒对照组、心肌梗死+miR-21-3p抑制组各10只。利用miR-21-3p mimics转染心肌成纤维细胞,转染48 h以后,利用实时定量PCR及免疫荧光的方法检测mi R-21-3p对心肌成纤维细胞分化以及胶原合成的影响;手术完成4周后行小动物心脏超声、Masson染色以及定量PCR检测各组实验小鼠心功能状态及心肌纤维化程度。利用双荧光素酶实验以及蛋白电泳实验,明确miR-21-3p与磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)的调控关系。结果 miR-21-3p在心梗组织中显著上调,miR-21-3p表达上调可以显著促进心肌成纤维细胞的增殖、迁移以及分化功能;相较于心肌梗死+病毒对照组,心肌梗死+miR-21-3p抑制组小鼠的左心室射血分数显著改善[(36.12±6.54)%比(18.72±4.23)%,P<0.05],左心室舒张末容积内径显著减少[(3.54±2.13)mm比(5.67±1.42)mm,P<0.05],同时伴有心肌纤维化面积的显著减轻[(23.42±2.69)mm^(2)比(42.12±7.15)mm^(2),P<0.05]。MiR-21-3p可以靶向结合PTEN的3’非编码区(3’UTR),并抑制PTEN的蛋白表达。结论 MiR-21-3P通过抑制PTEN的表达,介导心肌梗死后心肌纤维化的发生以及心功能的恶化。

miR-21-3p/p53信号通路对缺血/再灌注损伤小鼠的肾脏保护作用及其机制

目的观察miR-21-3p对肾缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤小鼠的影响,并探讨其肾脏保护作用是否与通过miR-21-3p/p53信号通路而调控凋亡水平有关。方法体内实验随机分为Sham、I/R、I/R+agomir、I/R+agomir+PIF、I/R+PIF共5组。建立小鼠肾缺血/再灌注(I/R)损伤模型;构建过表达miR-21-3p(agomiR-21-3p)小鼠,同时给予p53抑制剂Pifithrin-α(PIF)处理;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-21-3p与p53的互作;检测小鼠血清中肾功能指标小鼠胱抑素C(Cys C)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的含量,以及炎症指标肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)含量水平;此外,TUNEL染色观察肾细胞凋亡情况,并检测肾组织(细胞)匀浆中细胞凋亡相关基因p53、Bax、Bcl2、Caspase-3的表达水平。结果与Sham组比较,I/R组小鼠肾细胞miR-21-3p表达明显降低;而与I/R组相比,I/R+agomir组、I/R+PIF组和I/R+agomir+PIF组miR-21-3p表达均明显升高(P<0.05),而p53表达趋势相反;双荧光素酶报告基因实验证实miR-21-3p与p53存在互作关系;与Sham组比较,其他肾组织细胞凋亡率均升高;但是与I/R组相比,I/R+agomir组、I/R+PIF组和I/R+agomir+PIF组凋亡率降低,I/R+agomir+PIF组损伤最低(P<0.05)。结论miR-21-3p可以通过靶向下调p53表达来抑制凋亡的发生,从而减轻肾I/R小鼠的肾损伤,发挥肾脏保护作用。

miR-21-3p靶向RNF-11基因对脊索瘤细胞生物学行为的影响

目的 观察miR-21-3p对脊索瘤细胞生物学行为的影响,并初步探究其作用机制。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-21-3p在脊索瘤组织及配对癌旁组织中的表达,在脊索瘤细胞U-CH1中转染特异性miR-21-3p inhibitors(anti-miR-21-3p组)或阴性对照inhibitors(anti-NC组),同时设置空白对照(Blank组),分别采用噻唑蓝(MTT)、克隆形成、流式细胞术、Transwell和划痕实验探究下调miR-21-3p对U-CH1细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响,采用qRT-PCR和Western印迹分析细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达,生物信息学软件TargetScan预测miR-21-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miR-21-3p和RNF-11基因的靶向关系。结果 脊索瘤组织中miR-21-3p的表达量明显高于癌旁组织(P<0.05),与Blank组相比,anti-miR-21-3p组U-CH1细胞中miR-21-3p的表达量、N-cadherin和Vimentin的mRNA和蛋白表达水平降低,细胞增殖、侵袭和迁移能力均受到抑制,凋亡率、E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平升高,差异均有显著意义(P<0.05)。生物信息学分析发现miR-21-3p的可能靶基因是RNF-11,双荧光素酶报告基因实验证实了RNF-11是miR-21-3p的靶基因。结论 miR-21-3p靶向RNF-11调控脊索瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等生物学行为。

重症急性胰腺炎患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p与并发肺损伤的相关性

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p与并发肺损伤(ALI)的相关性。方法选择2017年7月~2020年2月本院收治的124例SAP患者作为研究对象,按照是否合并ALI分为单纯SAP组(78例)、SAP合并ALI组(46例);另选择同期体检的50例健康志愿者作为对照组。采集患者外周静脉血,采用实时荧光反转录定量聚合酶链式反应检测miR-21-3p、miR-22-3p表达,收集SAP患者临床资料。结果单纯SAP组、SAP合并ALI组患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p显著高于对照组(P<0.05);SAP合并ALI组高于单纯SAP组(P<0.05)。不同CT分级、伴有胸水与否、急性生理学与慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p水平比较差异具统计学意义(P<0.05);CT分级为E级、合并胸水、APACHEⅡ评分≥15分患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p水平高于CT分级为D级、无胸水、APACHEⅡ评分<15分的患者(P<0.05)。Logistic回归分析显示,CT分级、胸水、外周血miR-21-3p、miR-22-3p表达水平与SAP患者并发ALI相关(P<0.05)。外周血miR-21-3p、miR-22-3p诊断ALI曲线下面积(AUC)为0.770、0.812,当截点值为2.668、1.815时,约登指数最大;两者联合诊断AUC为0.869。结论SAP患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p与ALI并发密切相关,临床可检测其水平明确SAP程度及是否发生ALI,对指导临床治疗具有重要价值。

Hsa-miR-21-3p对食管癌细胞运动与侵袭能力的影响

目的:研究hsa-miR-21-3p对人食管癌细胞Eca9706侵袭和迁移能力的影响。方法:采用终浓度为30 nmol/L的寡核苷酸hsa-miR-21-3p mimics和阴性对照转染Eca9706细胞48 h后,用实时荧光定量PCR检测转染后hsa-miR-21-3p的表达水平,通过Transwell体外侵袭试验和划痕愈合试验分别观察hsa-miR-21-3p对Eca9706细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:与阴性对照组相比4较,hsa-miR-21-3p mimics转染组细胞中hsa-miR-21-3p表达明显升高(P<0.01),是阴性对照的1.1×10倍;Transwell体外侵袭试验结果显示镜下每个视野穿膜细胞数试验组(76.67±6.11)较阴性对照组(42.33±2.52)增加了81.1%(P<0.01),表明hsa-miR-21-3p的过表达显著增强食管癌细胞的侵袭能力;划痕愈合试验结果显示,hsa-miR-21-3p试验组的划痕宽度较对照组窄,在相同的时间点,试验组的划痕愈合能力均大于对照组(P<0.01),说明转染了hsa-miR-21-3p mimics的试验组细胞的迁移能力大于对照组。结论:Hsa-miR-21-3p的高表达可以使人食管癌细胞Eca9706的侵袭和迁移能力增强,提示其可能参与了食管癌进程中的浸润和转移。

寻常型银屑病患者miR-21-3p及STAT3基因的表达研究

观察寻常型银屑病发生、发展这一动态过程,病人体内miR-21-3p、STAT3两种基因的表达状况,并分析其实际意义。方法:纳入15例寻常型银屑病患者作为研究组,同时选择15例正常皮肤人员组织作为参照组,病例选取于2015年至2019年间,其中各组人员中miR-21-3p、STAT3的表达量采用实时荧光定量PCR法检测,差别倍数用2-ΔΔCt值表示。结果:miR-21-3p在研究组患者皮损组织中的表达水平更高(t=5.511,P<0.01);且研究组患者皮损组织中STAT3的表达水平亦更高,差异有统计学意义(t=6.368,P<0.01)。结论:miR-21-3p及STAT3基因在寻常型银屑病患者皮肤组织中的表达异常,且均呈现高表达,其可能参与寻常型银屑病的发病过程,且呈现正相关的关系。

血清miR-21-3p对脓毒症患儿并发急性肾损伤的预测价值

目的探讨血清miR-21-3p及其联合血肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C)及肾损伤分子-1(KIM-1)对脓毒症患儿并发急性肾损伤(AKI)的预测价值.方法2016年1月至2019年3月诊断为脓毒症的患儿142例,根据是否并发AKI分为AKI组(n=49)和非AKI组(n=93).检测两组血清miR-21-3p、Scr、Cys-C及KIM-1水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-21-3p、Scr、Cys-C及KIM-1水平预测AKI的价值,Pearson相关分析血清miR-21-3p表达水平与Scr、Cys-C及KIM-1表达水平的相关性.结果AKI组血清miR-21-3p、Scr、Cys-C及KIM-1水平明显高于非AKI组(P<0.05).ROC曲线分析结果显示血清miR-21-3p、Scr、Cys-C及KIM-1水平四项联合预测脓毒症患儿并发AKI的曲线下面积(0.962,95%CI:0.906~0.998)均分别大于上述各单项指标预测的曲线下面积(P<0.05),且敏感度(97.0%)和特异度(91.4%)最高.相关分析显示,AKI组血清miR-21-3p表达水平与Scr、Cys-C及KIM-1表达水平均呈正相关(r=0.704、0.812、0.863,P<0.01).结论血清miR-21-3p表达水平在脓毒症并发AKI患儿中明显升高,联合Scr、Cys-C及KIM-1指标对预测脓毒症并发AKI具有较高的价值.

循环血miR-21-3p作为脓毒症心肌病的标记物

已有研究发现微小RNA(micro RNAs,mi RNAs)可由细胞分泌并释放进入循环系统,在血清、血浆、尿液和其他体液中稳定存在,并可作为非损伤性生物标记物对多种疾病进行早期诊断、鉴别分期、预后判断和疗效监测等.与健康对照者相比,mi R-21-3p在22例脓毒症心衰患者血浆中显著升高.通过绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,并分析其与临床参数的相关性发现,mi R-21-3p在鉴别脓毒症心衰和健康人群时,曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.949.相关性分析结果显示,血浆mi R-21-3p水平与B型脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)(r=0.968,P<0.001)、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,c TNT)(r=0.257,P=0.002)水平呈正相关.因此,外周血中的mi R-21-3p有作为脓毒症心肌病的生物标记物的潜力.

小檗碱对大鼠压力超负荷肥厚心肌组织miR-21-3p表达的影响及其干预心肌肥厚的作用机制

目的探讨小檗碱对大鼠压力超负荷肥厚心肌组织miR-21-3p表达的影响及其干预心肌肥厚的作用机制。方法2019年6月—2020年9月于武汉科技大学实验动物中心进行实验。取SPF级雄性SD大鼠36只随机数字表法分为假手术组、模型组及小檗碱组,每组12只。模型组采用腹主动脉缩窄法构建心肌肥厚模型,小檗碱组在模型组基础上予以小檗碱灌胃处理,假手术组只暴露腹主动脉后关腹不做任何处理。40天后测量大鼠心脏超声指标,心、体质量及心体质量比,检测心肌组织中ANP、BNP及miR-21-3p表达,AKT、GSK3β及其磷酸化水平的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠左心室舒张末期后壁厚度(LVPWT)、心脏质量、心体质量比增加,左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)减少(P<0.05);与模型组比较,小檗碱组大鼠LVPWT、心脏质量、心体质量比减少,LVEDD、LVEF增加,差异均有统计学意义(t/P=2.864/0.021、3.929/0.004、3.866/0.005、4.518/0.002、2.841/0.022)。与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织ANP、BNP、miR-21-3p、p-AKT及p-GSK3β表达上调(P<0.05);与模型组比较,小檗碱组上述心肌指标表达均下调,差异均有统计学意义(t/P=8.845/0.000、9.514/0.000、15.376/0.000、20.090/0.000、27.945/0.000)。结论在压力超负荷诱导的心肌肥厚大鼠模型中,小檗碱通过抑制miR-21-3p表达及AKT/GSK3β信号通路活性进而抑制心肌肥厚。

miR-21-3p与肿瘤研究进展

微RNA(miRNA)是一类参与基因转录后调控的小分子非编码RNA,其在肿瘤中的表达水平、肿瘤发生中的调控作用及在肿瘤早期检测、治疗、预后等方面的研究一直是肿瘤研究的热点问题。而miRNAs*的作用却被忽视,近年来发现miRNA*可以作为功能链在肿瘤细胞迁移、侵袭、分化、增殖和凋亡等多种生物学过程中发挥重要作用。研究发现,许多肿瘤中存在异常表达的miR-21-3p,其功能广泛,包括调节肿瘤细胞增殖、迁移、凋亡和分化等过程。随着研究的深入,miR-21-3p可能成为新的肿瘤标志物,并为肿瘤的基因治疗提供新靶点。

血清miR-21-3p表达对脓毒症心肌损伤的早期诊断价值

目的探讨血清miR-21-3p表达对脓毒症心肌病的早期诊断价值。方法96例脓毒症患者按有无心肌损伤分为脓毒症组(59例)和心肌损伤组(37例)。比较两组肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Myo)、N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)和miR-21-3p水平。超声心动图测定并比较两组左心室收缩期末内径(LVESD)、左心室舒张期末内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)、二尖瓣口舒张早期最大流速(E)与心房收缩期最大流速(A)比值(E/A)、二尖瓣舒张早期血流峰速度(E)与二尖瓣环舒张早期运动峰速度(e')比值(E/e')等指标。受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-21-3p早期诊断价值。结果入院即刻心肌损伤组miR-21-3p明显高于脓毒症组(P<0.05)。入院3 h,心肌损伤组cTnI、Myo、miR-21-3p明显高于脓毒症组(P<0.05);心肌损伤组miR-21-3p与cTnI呈明显正相关。入院3 h,miR-21-3p诊断脓毒症心肌损伤的ROC曲线下面积0.904,灵敏度86.1%,特异度84.7%。入院6 h和12 h,心肌损伤组cTnI、CK-MB、Myo、NT-proBNP和miR-21-3p均明显高于脓毒症组(P<0.05)。入院12 h,心肌损伤组LVESD、LVEDD、E/e'明显高于脓毒症组(P<0.05),LVEF、E/A明显低于脓毒症组(P<0.05),miR-21-3p与LVEF呈明显负相关。结论血清miR-21-3p表达有助于早期诊断脓毒症心肌病。

妊娠期糖尿病孕妇血清miR-21-3p和miR-155-5p表达水平及临床意义

目的检测miR-21-3p、miR-155-5p在妊娠期糖尿病(GDM)孕妇血清中的水平并分析其临床意义。方法将2015年5月至2017年4月在重庆市红十字会医院妇产科就诊的67例GDM孕妇纳入研究,作为GDM组。另外,将同期糖耐量正常的孕妇60例纳入研究,作为对照组。采用实时荧光PCR(qPCR)技术检测纳入研究孕妇的血清miR-21-3p、miR-155-5p水平,采用全自动生化分析仪检测血清中生化指标TC、TG等的水平,分析血清miR-21-3p、miR-155-5p对GDM诊断效能,采用logistic多因素回归分析影响GDM孕妇发病的危险因素。结果GDM组孕妇的体质量指数(BMI)、TC、TG、LDL-C、FPG、HbA1c和HOMA-IR水平和血清miR-21-3p、miR-155-5p水平均高于对照组(P<0.05),HDL-C水平低于对照组(P<0.05)。GDM孕妇血清miR-21-3p、miR-155-5p水平与TC、TG、LDL-C、FPG、HbA1c、HOMA-IR水平均呈正相关(P<0.05),与HDL-C水平呈负相关(P<0.05)。miR-21-3p、miR-155-5p对GDM孕妇诊断的AUC分别为0.774、0.717。logistics分析表明,血清miR-21-3p水平、miR-155-5p水平是影响GDM疾病发生的独立危险因素。结论GDM孕妇血清中有较高水平的miR-21-3p、miR-155-5p,miR-21-3p、miR-155-5p可用于对GDM的初步筛查,是影响GDM疾病发生的独立危险因素。

敲低miR-21-3p抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移及侵袭

目的探索敲低miR-21-3p后对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的增殖、迁移及侵袭的影响,并分析其作用机制,为控制NSCLC进展提供参考依据。方法收集2018年5月至2019年12月湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)收治的未进行过放化疗并接受肿瘤切除术的16例T2期NSCLC患者的肿瘤组织和癌旁组织。用含10%胎牛血清的培养基常规培养正常人肺上皮细胞株(BEAS-2B)、NSCLC细胞株(A549和H1975)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测NSCLC组织及癌旁组织、BEAS-2B和NSCLC细胞株(A549、H1975)中miR-21-3p的表达情况。将miR-21-3p inhibitor或miR-21-3p inhibitor与sh-CTDSPL转入A549细胞后,用噻唑蓝(MTT)和5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EDU)法检测细胞活性和增殖情况;用Transwell法检测细胞迁移和侵袭;生物信息学和荧光素酶报告基因法确定miR-21-3p与CTDSPL的靶向关系;Western blot检测CTD小磷酸酶样蛋白(CTDSPL)的表达。结果与癌旁组织比较,miR-21-3p在NSCLC组织中表达显著升高;与BEAS-2B细胞比较,miR-21-3p在A549和H1975细胞中表达均显著升高;抑制miR-21-3p表达可降低A549细胞增殖、迁移和侵袭并上调CTDSPL表达;CTDSPL是miR-21-3p的靶基因;转染sh-CTDSPL能部分逆转抑制miR-21-3p表达对A549细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论抑制miR-21-3p通过靶向CTDSPL来抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭。

miR-21-3p靶向PTEN对深静脉血栓内皮祖细胞的增殖和凋亡的影响

目的探讨miR-21-3p对深静脉血栓(deep vein thrombosis,DVT)中内皮祖细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用RT-PCR检测DVT患者和健康受试者外周血中miR-21-3p和PTEN的表达水平;在DVT内皮祖细胞中转染miR-21-3p mimics和miR-21-3p inhibitors后,采用CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,RTPCR和western blot检测PTEN mRNA和蛋白表达水平。双荧光素酶报告检测miR-21-3p和PTEN的结合情况。结果 miR-21-3p在DVT患者外周血中的表达水平明显低于健康受试者(P<0.05),同时miR-21-3p和PTEN在DVT患者外周血中的表达水平呈明显负相关(P<0.05)。在DVT内皮祖细胞中转染miR-21-3p mimics后,细胞增殖能力较miR-NC组明显升高(P<0.05),细胞凋亡率较miR-NC组明显降低(P<0.05)。在DVT内皮祖细胞中转染miR-21-3p inhibitors后,细胞增殖能力较miR-NC组明显降低(P<0.05),细胞凋亡率较miR-NC组明显升高(P<0.05)。双荧光素酶结果显示miR-21-3p能够靶向结合PTEN。在DVT内皮祖细胞中共转染miR-21-3p mimics和LV-PTEN后能够反转单独转染miR-21-3p mimics对细胞增殖和凋亡的影响(P均>0.05)。结论 miR-21-3p在DVT中明显低表达,过表达miR-21-3p能够通过靶向调控PTEN促进内皮祖细胞增殖和抑制细胞凋亡。miR-21-3p可能成为DVT治疗的一个潜在作用靶点。