miRNA-223、miRNA-21及miRNA-27a与冠心病冠脉病变的关系

目的 探讨miRNA-223、miRNA-21及miRNA-27a与冠心病冠脉病变的关系。方法 选取2021年1月至2022年12月商丘市第一人民医院收治的CHD患者86例为观察组,选取70名同期院内健康体检者作为对照组。对比两组血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平;分析影响CHD冠脉病变的单因素,采用Logistic回归分析影响CHD冠脉病变的单因素、多因素;对比不同CHD冠脉病变类型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平;对比不同CHD冠脉病变支数的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平。结果 观察组miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic多因素分析显示,患有高血压、糖尿病以及miRNA-223>1.5、miRNA-21>6.0、miRNA-27a>5.5均是影响CHD冠脉病变的独立危险因素(P<0.05);miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平:急性心肌梗死>不稳定型心绞痛>稳定型心绞痛,差异有统计学意义(P<0.05);miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平:三支>双支>单支,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 不同冠脉病变CHD患者miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平不同,提示以上指标对判断CHD患者冠脉病变类型具有一定的临床价值。

肾衰饮对肾间质纤维化大鼠miRNA-21/PTEN/AKT/自噬途径的作用及影响

目的以miRNA-21/PTEN/AKT/自噬途径为切入点,探讨肾衰饮改善肾间质纤维化大鼠的作用及机制。方法将60只雄性SD大鼠适应性喂养3 d后,按体重随机分为两组,即假手术组10只,模型组50只,采用左侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化大鼠模型。造模成功后,将大鼠再随机分为组:模型组,肾衰饮低剂量组,肾衰饮中剂量组,肾衰饮高剂量组及尿毒清组。分别按人与大鼠1∶1/2,1∶1,1∶2和1∶1灌胃各给药组大鼠,假手术组与模型组给予生理盐水0.15ml/10g灌胃,M组:9.56 g/kg/d。实验期间进行一般情况观察,灌胃治疗14d后结束实验,各组大鼠禁食、不禁水12h,第二日早8:00称重,进行取材。收集24小时尿,全自动生化分析仪一次性检测尿肌酐(UCr)、微球蛋白(β2-MG)及尿微量白蛋白(mAlb)含量,髂总动脉分支处穿刺采血测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理学改变及胶原沉积情况;免疫组织化学法检测肾脏组织相关蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肾脏组织miRNA21及相关mRNA的表达水平;免疫印迹法(Western Blot)检测肾脏组织相关蛋白表达水平。结果与假手术组大鼠比较,模型组大鼠精神倦怠,明显消瘦,排便、排尿异常。Scr、BUN、Ucr、β2-MG、mAlb显著升高(P<0.01)。模型组HE染色肾组织结构紊乱,肾小管官腔明显扩张,排列稀疏,肾小管间质明显增宽,间质内有炎性细胞浸润;Masson模型组肾间质区及系膜区增宽伴大量胶原纤维沉积;肾脏组织miR-21、p62、FN、CollagenⅢmRNA的表达显著增高(P<0.01或P<0.05),PTEN、Atg13、LC3、Beclin-1mRNA的表达显著降低(P<0.01或P<0.05);肾脏组织FN、CollagenⅢ、p62、AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR蛋白水平显著增高(P<0.01);PTEN、Atg13、LC3、Beclin-1蛋白水平显著降低(P<0.01或P<0.05)。经给药治疗后,各给药组大鼠上述指标均明显好转(P<0.01或P<0.05),其中以肾衰饮高剂量组最为显著,明显优于尿毒清组(P<0.01或P<0.05)。结论肾衰饮可能通过下调miR-21及其介导的PTEN/AKT/m TOR通路,从而促进自噬的发生而有效延缓肾间质纤维化的发生发展。

血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行根治性前列腺切除术老年前列腺癌患者预后的评估价值

目的分析血清微小RNA(miRNA)-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行腹腔镜根治性前列腺切除术(LRP)的老年前列腺癌患者预后的评估价值。方法选取2014年1月至2018年9月该院收治的行LRP治疗的213例老年前列腺癌患者作为研究对象,根据5年随访结局将患者分为预后优良组(87例)和预后不良组(126例)。收集患者术前临床基线资料及血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平。采用Logistic回归分析筛选影响患者预后的因素,并以独立危险因素构建预后预测模型,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析其预测价值。结果多因素Logistic回归分析结果显示,患者血清前列腺特异性抗原(PSA)水平、切缘阳性、血清miRNA-21-5p与miRNA-5189-5p表达水平均为行LRP的老年前列腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05),以独立危险因素构建联合预测模型,各因素单独预测行LRP的老年前列腺癌患者预后的曲线下面积均小于4项联合(P<0.05)。结论血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行LRP的老年前列腺癌患者预后的预测具有较高价值。

miRNA-21、白细胞介素-17、缺氧诱导因子-1α在多发性骨髓瘤患者中的表达水平及临床意义

目的探讨微小RNA-21(miRNA-21)、白细胞介素-17(IL-17)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在多发性骨髓瘤患者中的表达及临床意义。方法选取78例多发性骨髓瘤患者和64例健康体检者,分别作为研究组和对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测两组受试者miRNA-21水平,酶联免疫吸附试验检测两组受试者血清IL-17、HIF-1α水平。比较两组受试者、不同预后情况多发性骨髓瘤患者miRNA-21、IL-17、HIF-1α水平。采用Pearson相关分析法分析多发性骨髓瘤患者miRNA-21与IL-17、HIF-1α水平的相关性。采用Cox风险比例回归模型分析多发性骨髓瘤患者预后的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA-21、IL-17、HIF-1α单独及联合检测对多发性骨髓瘤的诊断价值及对预后的预测价值。比较不同miRNA-21、IL-17、HIF-1α表达情况多发性骨髓瘤患者的生存情况。结果研究组患者miRNA-21、IL-17、HIF-1α水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。预后不良多发性骨髓瘤患者miRNA-21、IL-17、HIF-1α水平均明显高于预后良好患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多发性骨髓瘤患者miRNA-21与IL-17、HIF-1α水平均呈正相关(r=0.447、0.462,P﹤0.05)。miRNA-21、IL-17、HIF-1α均是多发性骨髓瘤患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。ROC曲线显示,miRNA-21、IL-17、HIF-1α联合检测诊断多发性骨髓瘤的曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于三者单独检测;miRNA-21、IL-17、HIF-1α联合检测预测多发性骨髓瘤患者预后的AUC、灵敏度、阴性预测值均高于三者单独检测。miRNA-21、IL-17、HIF-1α高表达组多发性骨髓瘤患者的2年累积生存率分别低于miRNA-21、IL-17、HIF-1α低表达组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论多发性骨髓瘤患者中miRNA-21、IL-17、HIF-1α均高表达,且miRNA-21与IL-17、HIF-1α水平均呈正相关,三者联合检测可较好地诊断多发性骨髓瘤及预测预后,有助于临床及早采取有效的防治措施,改善多发性骨髓瘤患者的预后情况。

肺部超声评分及血浆miRNA-21-5p对脓毒症患者肺损伤程度及预后预判价值

目的分析外周血miRNA-21-5p水平与肺部超声评分(LUS)对脓毒症患者并发急性肺损伤(ALI)的病情及预后的预测价值。方法选择我院就诊的90例ALI患者作为研究对象,根据ALI患者病情严重程度分为3组:低危组(38例,APACHEⅡ评分≤10分)、中危组(32例,APACHEⅡ评分10-20分)及重危组(20例,APACHEⅡ评分≥20分)。检测比较3组血浆miRNA-21-5p、B型脑钠肽(BNP)、D二聚体(D-dimer)、氧合指数(OI)、血管外肺水指数(EVLWI)以及LUS评分。采用Pearson直线分析评估血浆miRNA-21-5p水平及LUS评分和APACHEⅡ评分相关程度。依据患者预后结局分为存活组(71例)和死亡组(19例),比较上述临床指标的差异。应用多元Logistic回归分析上述指标与患者预后结局的危险程度。应用受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆miRNA-21-5p水平与LUS评分对ALI患者预后的诊断价值。结果中危组血浆miRNA-21-5p、BNP、EVLWI及LUS评分均低于重危组(P<0.05),但均高于轻危组(P<0.05);而中危组OI高于重危组(P<0.05),但低于轻危组(P<0.05)。三组D-dimer均无统计学差异(P>0.05)。血浆miRNA-21-5p水平及LUS评分和APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.857,P=0.026;r=0.795,P=0.036)。死亡组的血浆miRNA-21-5p、BNP、EVLWI及LUS评分显著高于存活组(P<0.05),但OI则显著低于存活组(P<0.05)。血浆miRNA-21-5p水平与LUS评分是ALI患者预后结局的危险因素(OR=3.656,P=0.013;OR=2.913,P=0.029)。血浆miRNA-21-5p切点3.25与LUS评分切点17.50对预测ALI患者短期预后的曲线下面积为0.856,灵敏度为84.2%和特异度为81.7%(P=0.018)。结论血浆miRNA-21-5p与LUS评分能有效评估ALI患者病情严重程度,对短期预后结局预测有较好价值。

血清外泌体miRNA-21、miRNA-214联合检测在骨质疏松症诊断中的价值

目的探讨骨质疏松症(OP)患者血清外泌体中微小RNA(miRNA)-21和miRNA-214的相对表达水平及其对OP的诊断价值。方法选取重庆市人民医院2022年1月至2023年12月收治的77例OP患者作为OP组,另选取同期该院81例健康体检者为健康对照组。分离并鉴定血清外泌体,提取外泌体miRNA。采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组血清外泌体中miRNA-21和miRNA-214的相对表达水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清外泌体中miRNA-21和miRNA-214对OP的诊断价值。结果分离的血清外泌体中CD63标志蛋白呈高表达。OP组血清外泌体miRNA-21和miRNA-214相对表达水平分别为5.302(2.407,9.765)和1.875(1.605,2.450),明显高于对照组的1.338(0.801,2.088)和1.163(0.860,1.391),差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清外泌体miRNA-21、miRNA-214相对表达水平升高是导致OP的危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清外泌体miRNA-21、miRNA-214诊断OP的AUC分别为0.853、0.811,灵敏度分别为80.5%、89.6%,特异度分别为79.0%、82.7%,二者联合诊断OP的AUC为0.919,灵敏度为90.9%,特异度为84.0%。结论血清外泌体miRNA-21和miRNA-214单独检测对诊断OP具有一定的价值,二者联合检测可提高诊断的准确性,有临床应用价值。

血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21对冠心病经皮冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄的预测价值

目的探讨血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)、分泌型卷曲蛋白5(Sfrp5)、微小RNA-21(miRNA-21)对冠心病(CHD)经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)后支架内再狭窄(ISR)的预测价值。方法选择商水县人民医院2021年1月至2022年9月间行PCI手术治疗的CHD患者218例为CHD组,同期非心血管疾病的住院患者97例为对照组,比较两组FGF21、Sfrp5及miRNA-21;CHD组术后随访6个月,以是否发生ISR分为ISR组(n=56)及无ISR组(n=162);分析CHD患者行PCI手术后发生ISR的影响因素,分析FGF21、Sfrp5及miRNA-21对ISR的预测价值。结果CHD组FGF21、miRNA-21均高于对照组,Sfrp5水平低于对照组,差异有统计学意义(t=11.196、15.030、13.685,P<0.05);ISR组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、FGF21、miRNA-21均高于无ISR组,Sfrp5水平低于无ISR组,差异有统计学意义(t=7.093、7.216、6.388,P<0.05),ISR组吸烟、合并糖尿病比率高于无ISR组,差异有统计学意义(χ^(2)=6.015、11.295,P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,LDL-C、合并糖尿病、FGF21、Sfrp5、miRNA-21是CHD患者行PCI术后发生ISR的影响因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,FGF21、Sfrp5、miRNA-21三者单独及联合检测预测PCI术后发生ISR的AUC分别为0.772、0.758、0.763、0.905(P<0.05)。结论血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21在行PCI手术后发生ISR的CHD患者中表达异常,联合检测三者水平对于预测CHD患者PCI术后发生ISR具有较好的应用价值。

恒温扩增检测miRNA-21-5p系统的构建和初步评价

目的建立一种基于滚环扩增和CRISPR-Cas9系统的荧光检测miRNA-21-5p方法,并对检测性能进行初步评价。方法设计一种特异性的锁式探针识别靶标miRNA-21-5p,在大肠杆菌DNA连接酶和Phi29 DNA聚合酶的作用下,进行滚环扩增,扩增形成一条长重复单链。在Cas9酶的辅助下进行特异性识别,并形成双链DNA,然后通过加SYBR GreenⅠ荧光染料与形成双链DNA产物结合,产生荧光信号的荧光强度与双链DNA产物浓度成正比,并对该系统进行特异性和灵敏度进行分析。用构建的方法对胃癌患者血清和健康人血清进行miRNA检测,是否成功检测miRNA,同时检测两组血清中胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅠ/Ⅱ)水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,根据曲线下面积(AUC)分析miRNA-21-5p、胃蛋白酶原对胃癌的诊断价值。结果构建的扩增系统能检测到血清中miRNA,胃癌血清中miRNA-21-5p荧光强度高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线结果显示,miRNA-21-5p、PGⅠ/Ⅱ单独诊断胃癌的AUC分别为0.72、0.80,两者联合检测诊断的AUC为0.85,高于任意单个指标诊断。结论用该方法直接检测miR-21-5p操作方便快捷,不需要复杂热循环仪器,适用范围广。

miRNA-21在糖尿病肾病诊断中的临床分析

目的分析miRNA-21在糖尿病肾病诊断中的应用价值。方法回顾性选取2023年1月—2024年1月莆田市第一医院收治的93例糖尿病患者的临床资料,均进行miRNA-21检测,以肾活检结果为金标准,分析miRNA-21诊断糖尿病肾病的灵敏度、特异度、准确度、约登指数、阳性预测值、阴性预测值及kappa值。结果miRNA-21诊断糖尿病肾病的灵敏度为89.29%(25/28),特异度为86.15%(56/65),准确度为87.10%(81/93),约登指数为0.75,阳性预测值73.53%(25/34),阴性预测值94.92%(56/59)。kappa=0.711。结论miRNA-21诊断糖尿病肾病的灵敏度较高,可作为糖尿病肾病诊断的新型标志物。

miRNA-21、miRNA-122联合PD1、PD-L1评估HBV相关肝细胞癌免疫治疗预后作用的研究

分析miRNA-21、miRNA-122联合PD1、PD-L1评估HBV相关肝细胞癌免疫治疗预后的作用。方法 采用回顾性分析,将本院在2019年1月至2021年1月期间接收的行免疫治疗的142例HBV相关肝细胞癌患者的临床资料进行收集,包括性别,年龄、肿瘤位置、个数等指标。采集所有研究对象的血液标本,应用荧光定量聚合链反应和流式细胞术分别检测其miRNA-21、miRNA-122、PD1、PD-L1水平。结合单因素分析、多因素logistic回归分析,并绘制受试者工作特征曲线(ROC)对HBV相关肝细胞癌免疫治疗患者的预后分析。结果 经调查,在142例HBV相关肝细胞癌患者中,治疗1年后的生存率为66.90%(95/142);单因素分析显示,年龄≥50岁、肿瘤分布左右两叶、肿瘤最大径>3cm、肿瘤数量>3个、TNMⅣ期、miRNA-21水平高、miRNA-122水平低、PD1和PD-L1水平高均为HBV相关肝细胞癌免疫治疗预后不良的影响因素;肿瘤数量>3个、TNMⅣ期、miRNA-21水平过高、miRNA-122水平过低、PD1水平高、PD-L1水平高均为HBV相关肝细胞癌免疫治疗预后不良的独立危险因素;miRNA-21、miRNA-122、PD1、PD-L1 联合预测 HBV相关肝细胞癌免疫治疗预后不良的ROC曲线下面积(AUC)均高于各项指标单一值。结论 在HBV相关肝细胞癌免疫治疗预后情况的评估中,miRNA-21、miRNA-122联合PD1、PD-L1的预测价值较高,可作为临床中的一项重要参考指标。

急性心肌梗死血清miRNA-21变化及其与细胞凋亡因子的相关性

目的 分析急性心肌梗死(AMI)患者血清微小RNA-21(miRNA-21)变化及其与细胞凋亡因子[半胱氨酸天冬酶-3(Caspase-3)、可溶性肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体(sTRAIL)、可溶性凋亡相关因子(sFas)]的相关性。方法 选取北京市大兴区人民医院2020年4月至2022年4月112例AMI患者作为研究组,根据冠脉病变程度分为单支组(n=30)、双支组(n=48)及三支组(n=34),选取同期健康体检者70名作为对照组。采用实时荧光定量聚合链式反应技术检测血清miRNA-21水平,酶联免疫吸附法检测血清Caspase-3、sTRAIL及sFas水平。比较所有受试者血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas水平,采用Pearson系数分析miRNA-21与Caspase-3、sTRAIL及sFas的相关性,采用ROC曲线分析血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas对AMI的诊断价值,采用Spearman系数分析miRNA-21、Caspase-3、s TRAIL及s Fas与冠脉病变程度的相关性。结果 研究组血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,AMI患者血清miRNA-21均与Caspase-3、sTRAIL、sFas呈正相关(P<0.05);由ROC曲线可知,血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及s Fas联合诊断AMI的AUC为0.940,高于四者单独诊断的0.788、0.749、0.775、0.756(P<0.05);三组血清miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas水平相比:三支组>双支组>单支组,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析显示,miRNA-21、Caspase-3、sTRAIL及sFas均与冠脉病变程度呈正相关(P<0.05)。结论 miRNA-21与细胞凋亡因子在AMI患者血清中呈高表达,且均与冠脉病变程度相关,有望成为诊断AMI的参考指标。

三阴性乳腺癌患者血清中miRNA-21、miRNA-210表达及其临床意义

目的分析三阴性乳腺癌患者血清中miRNA-21、miRNA-210表达情况及其临床意义。方法收集2015年5月至2017年7月河南中医药大学第三附属医院收治的64例三阴性乳腺癌患者作为病例组,选择同期来医院体检的40例正常健康人作为对照组,所有对象均留取血清样本,提取RNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-PCR)测定血清miRNA-21、miRNA-210表达,并收集所有三阴性乳腺癌患者的临床资料,分析miRNA-21、miRNA-210表达与三阴性乳腺癌临床病理参数的关系。结果病例组血清miRNA-21、miRNA-210相对表达量均高于对照组(P<0.05);临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、组织分化程度为低分化、合并淋巴结转移的三阴性乳腺癌患者血清miRNA-21、miRNA-210相对表达量高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、组织分化程度为中高分化及未合并淋巴结转移者(P<0.05);多元逐步回归分析显示,miRNA-21、miRNA-210均为三阴性乳腺癌患者临床分期、组织分化程度、淋巴结转移的影响因素(P<0.05)。结论三阴性乳腺癌患者血清中miRNA-21、miRNA-210表达水平较高,且其表达水平的变化与三阴性乳腺癌临床分期、组织分化程度及淋巴结转移情况密切相关。

黄芪总黄酮对特发性肺纤维化miRNA-21、let-7 d及TGF-β/smad信号干预作用

目的：研究黄芪总黄酮对BLM诱导的肺纤维化模型miRNA-21、let-7 d表达水平和TGF-β1/smad信号干预作用。方法：C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪总黄酮组。模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注博莱霉素（10 mg/kg）,假手术组予等量生理盐水,造模后治疗组予黄芪总黄酮（43 mg/kg）灌胃,假手术组和模型组与等量生理盐水灌胃。第28天取材,进行HE、Masson染色分析肺组织形态及胶原蛋白表达水平,羟脯氨酸含量测定胶原蛋白含量,realtime-PCR分析miRNA-21、let-7 d表达变化,Western-Bloting检测TGF-β/smad信号及EMT相关蛋白表达。结果：BLM诱导肺纤维化miRNA-21明显上调,而let-7 d下调,在此过程中信号蛋白smad7表达增强mad3磷酸化水平减弱,EMT标记蛋白α-SMA表达增高而E-cadherin减少,黄芪总黄酮对上述改变具有逆转作用,但对let-7 d表达无影响。结论：黄芪总黄酮可通过抑制miRNA-21,增加smad7表达,使TGF-β1/smad激活能力下降,抑制肺纤维化EMT作用。

脓毒症患者血清miRNA-21和PCT动态表达及其临床意义

目的:观察血清miRNA-21和炎症因子PCT在脓毒症病程中的动态表达,并探讨与脓毒症病情以及预后的关系。方法:收集脓毒症患者58例、健康对照24例,其中一般脓毒症32例,脓毒性休克26例,按28 d病死率分为生存组48例和死亡组10例。检测研究对象在入组第1、3、5天血清miRNA-21表达量以及炎症因子PCT水平,并记录患者的临床信息。结果:(1)与健康对照组比较,脓毒症患者入组第1天血清miRNA-21表达量明显升高(Z=-7.061,P=0.000),做ROC曲线分析得出血清miRNA-21诊断脓毒症的曲线下面积为0.997(95%CI=0.991~1.000,P=0.000),且以miRNA-21≥0.875为截断点,其诊断脓毒症的特异度和灵敏度分别为91.7%、100%。(2)在脓毒症5 d病程中,不同时间点的miRNA-21表达差异具有统计学意义(F=67.778,P=0.000),且不同时间点两两比较均有统计学差异(P=0.000,P=0.000,P=0.000),入组第1天血清miRNA-21表达量(1.974±0.886)ng/μL高于第3天miRNA-21表达量(1.015±0.709)ng/μL,第3天血清miRNA-21表达量高于第5天miR NA-21表达量(0.531±0.312)ng/μL。(3)在脓毒症5 d病程中,不同时间点的PCT表达差异具有统计学意义(F=34.304,P=0.000),且不同时间点两两比较均有统计学差异(P=0.000,P=0.000,P=0.000),入组第1天PCT表达量(14.164±13.939)μg/L高于第3天PCT表达量(4.224±4.039)μg/L,第3天PCT表达量高于第5天PCT表达量(1.614±3.438)μg/L。(4)脓毒性休克组入组第1天,血清miRNA-21表达量、PCT水平及APACHEⅡ评分均高于一般脓毒症组(Z=-6.510,P=0.000;Z=-4.457,P=0.000;Z=-6.517,P=0.000),且miRNA-21表达量与APACHEⅡ评分成正相关(r=0.993,P=0.000)。(5)血清miRNA-21在死亡组中高表达,且在各个观测时间点两组表达量均具有统计学差异(Z=-2.823,P=0.005;Z=-3.664,P=0.000;Z=-4.942,P=0.000)。结论:血清miRNA-21在脓毒症中表达明显升高,可能为脓毒症潜在的早期诊断标记物。血清miRNA-21在脓毒症病程中的动态表达可能与机体炎症反应紧密相关,并在预警脓毒症严重程度以及评估预后方面具有积极的临床意义。

miRNA-21和miRNA-134在乳腺癌患者血清中表达情况及其临床意义

【目的】研究乳腺癌相关miRNA在正常人群及乳腺癌患者血清中的表达情况,统计分析其在乳腺癌诊断中的临床价值。【方法】收集47例乳腺癌及50例正常体检人群血清,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组miR-630、miR-21、miR-195、miR-134、miR-200a、miR-381、miR-1228的表达情况。分析单个血清miRNA在乳腺癌诊断中的价值,进一步用统计学方法分析多个miRNA联合检测的诊断价值。【结果】相比正常体检人群,乳腺癌患者血清中miR134和miR-21表达增加,P<0.01;miR-134的表达在早期和晚期患者之间没有明显区别,P=0.143;miR-21在晚期患者中表达增加,P=0.004;miR-195、miR-630、miR-200a、miR-381、miR-1228的表达量在两组之间差异没有统计学意义。ROC曲线分析结果显示,miR-21在乳腺癌诊断中的AUC为0.82(95%CI,0.71-0.88),P<0.001;miR-134在乳腺癌诊断中的AUC为0.88(95%CI,0.80-0.94),P<0.001。miR-21联合miR-134在乳腺癌诊断中AUC值为0.95(95%CI,0.89-0.99),P<0.001;两者联合优于单一检测miR-21或者miR-134,P<0.05。【结论】miR-21和miR-134在乳腺癌患者血清中升高,血清中miR-21和miR-134的表达情况,可以作为乳腺癌诊断的理想标志物。

血浆miRNA-21和miRNA-29c水平对非小细胞肺癌的诊断意义

目的:探讨血浆miRNA-21、miRNA-29c水平对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断意义。方法:采用实时荧光定量PCR法检测56例NSCLC患者和47例良性肺病患者血浆miRNA-21和miRNA-29c的相对表达水平。建立受试者工作特征(ROC)曲线,根据ROC曲线下面积判断它们诊断NSCLC的效能。依据ROC曲线分析设定的临界值计算血浆miRNA-21和miRNA-29c诊断NSCLC的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性。并将这些结果与NSCLC患者血清癌胚抗原检测结果进行比较。结果:NSCLC患者血浆miRNA-21水平显著高于良性肺病患者(P<0.001),而血浆miRNA-29c水平明显低于良性肺病患者(P<0.001)。NSCLC患者血浆miRNA-21和miRNA-29c水平与肿瘤的临床(TNM)分期显著相关(P=0.008和P=0.011),血浆miRNA-21水平与肿瘤的分化程度也明显相关(P=0.001)。根据ROC曲线分析取miRNA-21和miRNA-29c诊断NSCLC的临界值分别为4.026和0.985,血浆miRNA-21诊断NSCLC的敏感性和特异性分别为76.8%和76.6%,血浆miRNA-29c诊断NSCLC的敏感性和特异性分别为78.6%和72.3%。血清癌胚抗原诊断NSCLC的敏感性明显低于miRNA-21和miRNA-29c,特异性相似。结论:血浆miRNA-21和miRNA-29c诊断肺癌的效能优于血清癌胚抗原,有可能成为诊断NSCLC的血液标志物。

靶向抑制miRNA-21提高白血病K562细胞对阿糖胞苷的敏感性

为研究以miRNA-21为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对阿糖胞苷(Ara-C)的敏感性及可能的作用机制,在LipofectamineTM2000介导下,将化学合成的AMO-miR-21转染K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测单独使用AMO-miR-21、Ara-C以及两者联合使用对细胞增殖抑制作用,并计算抑制率和IC50;流式细胞仪检测细胞凋亡;实时定量PCR(Real-time PCR)检测miRNA-21及其候选靶基因Pdcd4 mRNA的表达水平;免疫印迹(Western blot)检测Pdcd4蛋白的表达水平.结果显示Ara-C与AMO-miR-21联合使用后,IC50从1.95μmol/L降低到0.84μmol/L,敏感性提高到单用Ara-C的2.3倍.AMO-miR-21联合Ara-C组细胞凋亡明显增加(P<0.05).AMO-miR-21显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.05),同时Pdcd4的表达明显增加(P<0.05).提示AMO-miR-21可以提高K562细胞对Ara-C的敏感性,其作用机制与靶向抑制miRNA-21,进而诱导细胞凋亡有关.

加味补阳还五汤对心肌梗死后患者心室重构及miRNA-21、GDF-15表达的影响

目的:探讨加味补阳还五汤对心肌梗死后患者心室重构及miRNA-21、GDF-15表达的影响。方法:将100例心肌梗死患者作为研究对象,随机分为研究组、对照组各50例;对照组单纯采用传统的西医方法治疗,研究组在西医方法治疗的基础上给予加味补阳还五汤治疗。观察对照组、研究组中医证候积分变化、超声心动图、miRNA-21及GDF-15的表达水平、NT-Pro BN含量。结果:在进行治疗的4个月后,研究组总有效率89%,明显高于对照组总有效率78%(P<0.05);研究组中医证候积分改善也明显优于对照组(P<0.05);研究组经过加味补阳还五汤治疗后LVESV、LVEDV、NT-pro BNP、GDF-15水平下降明显,均显著低于对照组患者,研究组SV、LVEF水平升高明显,均显著高于对照组患者,差异均有统计学意义(均P<0.05);两组治疗后miRNA-21较治疗前表达水平升高,研究组升高更为明显。结论:使用加味补阳还五汤治疗心肌梗死后患者能取得显著的效果,补阳还五汤可调控miRNA-21高表达、GDF-15低表达,改善心脏功能,抑制心室重构,改善心肌梗死患者预后,值得临床进一步推广使用。

当归补血汤干预miRNA-21调控自噬保护早期糖尿病肾病大鼠肾功能的研究

目的基于miRNA-21干预Akt/mTOR信号通路调控自噬探讨当归补血汤防治早期糖尿病肾病的作用机制。方法制备当归补血汤的醇提取物,在早期糖尿病肾病造模成功后,将SD大鼠随机分为A组:空白组;B组:模型组;C组:当归补血汤高剂量组[7g/(kg·d)];D组:当归补血汤低剂量组[1.75g/(kg·d)];E组:格列奇特组[2mg/(kg·d)]。每组10只,连续灌胃4周后取材。检测血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿白蛋白排泄率(uAE),并观察一般情况、肾脏组织病理(PAS染色),电镜观察肾足细胞的自噬体情况;Western Blotting法分析Akt(protein kinaseB)、总mTOR(mammalian target of rapamycin)的表达,RT-PCR法检测miR-21以及Akt、mTOR的mRNA表达。结果对比模型组,当归补血汤组均能明显改善糖尿病肾病的大鼠的肾功能指标(P<0.05),病理表现上减轻了肾系膜增生,上调了足细胞nephrin蛋白(P<0.05),增加了肾足细胞自噬体形成,延缓了肾纤维化。同时当归补血汤组抑制了miR-21表达(P<0.05),下调了Akt、总mTOR及其mRNA表达(P<0.05),从而增强了肾足细胞的自噬活性,起到延缓肾衰竭的作用。结论当归补血汤能抑制miR-21表达调控肾足细胞自噬活性防治早期糖尿病肾病。

低能激光照射对大鼠心肌梗死后miRNA-21表达的影响

目的:观察低能激光照射(LLLI)对大鼠心肌梗死区及其边缘组织中miRNA(简称miR)-21表达的影响。方法:将110只SD大鼠分为假手术组(30只)、对照组(40只)和治疗组(40只)。对照组和治疗组通过结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死模型,假手术组同部位只穿线不结扎,3周后治疗组采用LLLI处理梗死区域,对照组和假手术组照射同一区域但治疗仪不接通电源,各组分别于照射后1 h、24 h、48 h、72 h、7 d取梗死及边缘组织,采用RT-PCR法检测miR-21的表达。结果:梗死中心和边缘区比较,不同组别之间miR-21表达量比较差异有统计学意义(P<0.001),处理后不同时间miR-21表达量比较差异有统计学意义(P<0.001);治疗组梗死区miR-21的表达在LLLI处理后各时间点的表达量均高于对照组(P<0.05);治疗组梗死边缘miR-21的表达量在48 h达到峰值,且不同时间点的表达量均高于对照组和假手术组(P<0.05)。结论:LLLI处理梗死心肌能有效上调梗死及边缘区域miR-21的表达,有较好的心肌保护作用。