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Engineering subcellular-patterned biointerfaces to regulate the surface wetting of multicellular spheroids 被引量:1
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作者 Luying Wang Pingqiang Cai +9 位作者 Jing Luo Feilong Zhang Jian Liu Yupeng Chen Zhongpeng Zhu Yongyang Song Bingquan Yang Xi Liu Xiaodong Chen Shutao Wang 《Nano Research》 SCIE EI CAS CSCD 2018年第10期5704-5715,共12页
Studying the wetting behaviors of multicellular spheroids is crucial in the fields of embryo implantation, cancer propagation, and tissue repair. Existing strategies for controlling the wetting of multicellular sphero... Studying the wetting behaviors of multicellular spheroids is crucial in the fields of embryo implantation, cancer propagation, and tissue repair. Existing strategies for controlling the wetting of multicellular spheroids mainly focus on surface chemistry and substrate rigidity. Although topography is another important feature in the biological micro-environment, its effect on multicellular spheroid wetting has seldom been explored. In this study, the influence of topography on the surface wetting of multicellular spheroids was investigated using subcellular- patterned opal films with controllable colloidal particle diameters (from 200 to 1,500 nm). The wetting of hepatoma carcinoma cellular (Hep G2) spheroids was impaired on opal films compared with that on flat substrates, and the wetting rate decreased as colloidal particle diameter increased. The decrement reached 48.5% when the colloidal particle diameter was 1,500 nm. The subcellular-patterned topography in opal films drastically reduced the cellular mobility in precursor films, especially the frontier cells in the leading edge. The frontier cells failed to form mature focal adhesions and stress fibers on micro-patterned opal films. This was due to gaps between colloidal particles leaving adhesion vacancies, causing weak cell-substrate adhesion and consequent retarded migration of Hep G2 spheroids. Our study manifests the inhibiting effects of subcellular-patterned topography on the wetting behaviors of multicellular spheroids, providing new insight into tissue wetting-associated treatments and biomaterial design. 展开更多
关键词 TOPOGRAPHY WETTING multicellular spheroids cell adhesion collective migration biointerfaces
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Agar coating in multicellular spheroids culture of rat hepatocytes
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作者 Shaolin Li Jilun Pan +1 位作者 Tao Xu Yaoting Yu 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1999年第24期2246-2249,共4页
Aggregation of freshly isolated adult rat hepatocytes in vitro is important for the construction of artificial liver support system. In the experiment, agar has been used as an extracellular matrix substrate and resul... Aggregation of freshly isolated adult rat hepatocytes in vitro is important for the construction of artificial liver support system. In the experiment, agar has been used as an extracellular matrix substrate and results demonstrate that hepatocytes in serum-free culture 展开更多
关键词 AGAR HEPATOCYTE multicellular spheroids.
原文传递
3D (Three-Dimensional) Caco-2 Spheroids: Optimized in vitro Protocols to Favor Their Differentiation Process and to Analyze Their Cell Growth Behavior
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作者 Gabriella Rainaldi Alessandra Boe Sandra Gessani 《Journal of Pharmacy and Pharmacology》 2016年第7期341-350,共10页
3D (Three-dimensional) Caco-2 spheroids closely recapitulating in vivo physiological organization of intestinal epithelial cells, provide an excellent in vitro model system to study their pathophysiology and their r... 3D (Three-dimensional) Caco-2 spheroids closely recapitulating in vivo physiological organization of intestinal epithelial cells, provide an excellent in vitro model system to study their pathophysiology and their response to stressful stimuli. The objective of this technical note is to provide optimized in vitro experimental protocols for culturing 3D Caco-2 spheroids and for analyzing their cell growth features. An optimized 3D Caco-2 spheroid culturing technique based on a new configuration of the culture medium is provided A methodological approach to determine the distribution of the cell cycle phases in disaggregated Caco-2 spheroids by using cytofluorimetric analysis is also described. The optimized culturing protocol favors 3D Caco-2 spheroid differentiation process, as evaluated by the number of well-differentiated spheroids with a single hollow lumen. The cytofluorimetric analysis allows rapid collection of cell cycle phase data from high numbers of spheroid samples, thus, permitting to estimate their growth dynamics in a relatively short time. The optimized technical approaches described here can be applied in systematic manner to a variety of research activities utilizing 3D Caco-2 spheroids. Ease of use, time and economic saving advantages deriving from these protocols further highlight their potential. 展开更多
关键词 3D multicellular spheroids 3D intestinal epithelial spheroids 3D Caco-2 spheroid culture systems optimizedexperimental protocols.
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脂质质谱成像揭示三氯生促进三维肝癌肿瘤细胞球增长的相关机理
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作者 陈静 谢佩斯 蔡宗苇 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第2期213-222,共10页
三氯生(triclosan,TCS)作为一种广谱抗菌剂被广泛应用于多种日常消费品中。当前研究表明,TCS暴露可以促进肝癌肿瘤增长,但涉及的相关脂质代谢机理尚不完全清楚。基于此,本研究建立了TCS暴露的肝癌肿瘤细胞球模型,利用质谱成像技术分析... 三氯生(triclosan,TCS)作为一种广谱抗菌剂被广泛应用于多种日常消费品中。当前研究表明,TCS暴露可以促进肝癌肿瘤增长,但涉及的相关脂质代谢机理尚不完全清楚。基于此,本研究建立了TCS暴露的肝癌肿瘤细胞球模型,利用质谱成像技术分析对照组和暴露组间脂质小分子在肿瘤细胞球内丰度和分布的差异。结果表明,6μmol/L TCS暴露可以显著促进肝癌肿瘤细胞球的增长,并引起脂质代谢的变化。27种脂质代谢小分子(含19种甘油磷脂、3种甘油酯和5种鞘脂)的丰度在对照组和暴露组的肿瘤细胞球内发生了显著性的变化。在暴露组的19种甘油磷脂中,16种在肿瘤细胞球外围增殖区发生了显著性上调;在3种甘油酯中,1种在外围增殖区发生了显著性上调,2种在内部凋亡区发生了显著性下调;5种鞘脂在肿瘤细胞球内部凋亡区均发生了显著性下调。可见,TCS可能是通过促进肿瘤细胞球外围细胞的增殖以及抑制内层细胞的凋亡来促进三维肿瘤细胞球的增长。该结果可为进一步探讨环境污染物对肿瘤发展影响的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 质谱成像(MSI) 肿瘤细胞球 三氯生(TCS) 脂质代谢 细胞增殖
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阻断PD-L1和MEK对非小细胞肺癌多细胞球体模型的治疗作用
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作者 林吉兴 云天洋 +3 位作者 申磊磊 陈瑞骥 王柏霖 王钰琦 《临床肺科杂志》 2023年第7期1046-1051,共6页
目的观察阻断细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)和丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)对非小细胞肺癌(NSCLC)多细胞球体(MTS)模型的治疗作用。方法收集2019年1月~2020年1月的NSCLC患者样本,培养MTS模型,使用流式细胞技术观察MEK抑制剂与抗P... 目的观察阻断细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)和丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)对非小细胞肺癌(NSCLC)多细胞球体(MTS)模型的治疗作用。方法收集2019年1月~2020年1月的NSCLC患者样本,培养MTS模型,使用流式细胞技术观察MEK抑制剂与抗PD-L1抗体对NSCLC的MTS模型生长抑制、细胞因子产生和免疫检查点基因表达的影响。结果共成功建立7个MTS模型,成功率63.6%。7个MTS模型MEK、MAPK和PD-L1均呈高表达水平。将7种MTS模型分为空白组、阿特珠单抗组、司美替尼组和阿特珠单抗+司美替尼联合应用组,阿特珠单抗组和司美替尼组产生中度抗增殖作用,细胞死亡中位数为30%和25%,联合应用组表现出高度抗增殖效果,细胞死亡中位数为45%。RT-PCR处理后,联合组IFN-γ、IL-12和IL-6的表达显著增加(P<0.05),PD-L1和CTLA-4表达显著减少(P<0.05),司美替尼和阿特珠单抗组PD-L1表达显著减少(P<0.05)。结论在NSCLC的MTS模型中,双重阻断PD-L1和MEK具有优于单一抑制的疗效。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 细胞程序性死亡-配体1 丝裂原活化的细胞外信号调节激酶 多细胞球体模型 肿瘤免疫治疗
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卵巢癌多细胞球体对紫杉醇耐药及其机制的探讨 被引量:5
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作者 邢辉 高庆蕾 +5 位作者 杨晓葵 李静 高纯 吴剑宏 卢运萍 马丁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第8期826-830,共5页
背景和目的:多细胞球体(multicellularspheroids,MCS)对传统细胞毒化疗药物的敏感性明显低于单层细胞。本实验旨在探讨卵巢癌MCS耐药的分子机制。方法:以单层细胞为对照,以三维培养方法获得的人卵巢癌A2780MSC和CAOV3MCS为模型,采用台... 背景和目的:多细胞球体(multicellularspheroids,MCS)对传统细胞毒化疗药物的敏感性明显低于单层细胞。本实验旨在探讨卵巢癌MCS耐药的分子机制。方法:以单层细胞为对照,以三维培养方法获得的人卵巢癌A2780MSC和CAOV3MCS为模型,采用台盼蓝拒染法比较紫杉醇对单层细胞和MCS生长的抑制作用,流式细胞仪比较单层细胞和MCS细胞周期的分布和细胞凋亡率;采用流式细胞仪、蛋白质免疫印迹法、激光共聚焦显微镜检测单层细胞及MCS的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达及亚细胞分布;采用RT-PCR法检测mdr1mRNA表达水平。结果:(1)不同浓度的紫杉醇(0.2、2.0、10.0、20.0μmol/L)作用后,MCS细胞生长抑制率明显低于单层细胞(PA2780=0.003,PCAOV3=0.015);经20.0μmol/L的紫杉醇作用后,单层细胞的细胞凋亡率明显高于MCS,差异有统计学意义(PA2780=0.034,PCAOV3=0.032)。(2)流式细胞仪、蛋白质免疫印迹法、激光共聚焦显微镜检测提示P-gp在单层细胞中不表达,在MCS中表达明显升高(P均<0.05);RT-PCR证实MCS中有mdr1mRNA表达,而单层细胞中未检出其表达。(3)流式细胞仪检测提示将单层细胞培养成MCS时,G0/G1期细胞比率增加,S期和G2/M期细胞比率降低(P均<0.05)。结论:卵巢癌MCS对紫杉醇化疗耐药性增加,其高表达P-gp。 展开更多
关键词 卵巢癌 多细胞球体 紫杉醇 耐药机制
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上调p38表达提高卵巢癌多细胞球体顺铂敏感性 被引量:3
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作者 项涛 夏曦 +2 位作者 王世宣 卢运萍 马丁 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期157-160,共4页
目的研究p38在卵巢癌多细胞球体化疗耐药中的作用。方法构建p38正义真核表达载体,稳定转染卵巢癌细胞并三维培养形成多细胞球体,RT-PCR及Western blot分析p38表达;CCK-8细胞毒性试验和流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果(1)多细胞球体p38... 目的研究p38在卵巢癌多细胞球体化疗耐药中的作用。方法构建p38正义真核表达载体,稳定转染卵巢癌细胞并三维培养形成多细胞球体,RT-PCR及Western blot分析p38表达;CCK-8细胞毒性试验和流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果(1)多细胞球体p38表达低于单层细胞。(2)FACS检测转染p38真核表达载体的多细胞球体经顺铂作用后,细胞凋亡率高于转染空载体和未转染的多细胞球体;(3)CCK-8细胞毒性试验示转染p38真核表达载体的多细胞球体相对于转染空载体和未转染的细胞球体对顺铂敏感性更高。结论p38介导顺铂对卵巢癌化疗耐药,上调p38表达,可提高卵巢癌多细胞球体对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 卵巢癌 P38 顺铂 化疗耐药 多细胞球体
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酪氨酸激酶受体B在OVCAR-3卵巢癌细胞中的表达及意义 被引量:2
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作者 于晓辉 蔡斌 +2 位作者 杨懿霞 严沁 万小平 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第6期405-409,共5页
背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor,TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高侵袭能力。TrkB过度表达与神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤的化疗耐药和不良预后有关。本研... 背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor,TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高侵袭能力。TrkB过度表达与神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤的化疗耐药和不良预后有关。本研究旨在探讨TrkB及其配体脑源性神经营养因子(brain- derived neurotrophic factor,BDNF)在卵巢上皮性癌细胞系OVCAR-3中的表达及其意义。方法:检测卵巢癌细胞系OVCAR-3细胞贴壁培养(AC)、细胞立体培养(AIC)以及细胞立体培养得到的多细胞团簇(CS)经胰酶消化成单细胞后再次贴壁培养(RAC)细胞中TrkB及BDN F的表达差异。结果:经RT-PCR检测,与贴壁培养细胞(adhesive cells)比较,TrkB mRNA高表达于OVCAR-3多细胞团簇中(multicellular-spheroids),两组数值分别(23.5±0.5)%,(35.3±0.7)%,差异有显著性(P<0.001);BDNF mRNA的表达则正相反,两组数值分别(41.4±0.6)%,(32.2±0.7)%,差异有显著性(P<0.001)。经Western blot检测,TrkB的前体蛋白(未发生糖基化的受体形式)广泛地高表达于上述3种不同培养方式的OVCAR-3细胞中;与贴壁培养细胞比较,OVCAR-3细胞立体培养全长TrkB(发生糖基化的完整受体形式,分子量145 000)明显高表达(P<0.001)。结论:卵巢癌细胞中存在TrkB及BDNF的自分泌环路,TrkB可能是介导卵巢癌失巢凋亡抑制的因子。 展开更多
关键词 酪氨酸激酶受体B 脑原性神经营养因子 卵巢癌 失巢凋亡 多细胞团簇
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酪氨酸激酶受体B在卵巢上皮性癌中的表达及其意义 被引量:2
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作者 于晓辉 蔡斌 +2 位作者 杨懿霞 严沁 万小平 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第7期501-506,共6页
背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor, TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。TrkB在良性肿瘤中及正常卵巢上皮中不表达,在癌组织中不但表达,并且与交界性肿瘤比较表达明显... 背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor, TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。TrkB在良性肿瘤中及正常卵巢上皮中不表达,在癌组织中不但表达,并且与交界性肿瘤比较表达明显增高;转移灶和低分化癌组织中明显增高,如在神经母细胞瘤和其它多种人类高侵袭性恶性肿瘤组织中过度表达,本研究旨在探讨其过度表达与肿瘤组织分化及病人预后的关系。方法:选取卵巢癌石蜡标本73例(包括与原发灶相对应的8例腹水中的癌细胞团簇),其中低分化腺癌34例,28例卵巢交界性上皮性肿瘤;16例卵巢良性上皮性肿瘤及13例正常卵巢组织作为对照,行免疫组化ABC法检测TrkB的表达;随机选取上述病例中30例(包括4例与原发灶相对应的大网膜转移灶和腹水中的癌细胞团簇)、交界性上皮性肿瘤7例;卵巢良性上皮性肿瘤4例及正常卵巢组织(包括卵巢皮质和髓质)2例作为对照,行RT-PCR检测TrkB的表达。结果:RT-PCR结果表明,TrkB mRNA在卵巢癌与卵巢交界性肿瘤中的相对转录水平分别为(16.7±3.1)%和(4.6±0.4)%,在卵巢癌组织中表达明显增加(P<0.001);TrkB mRNA在大网膜转移灶和腹水中的癌细胞团簇中的TrkB mRNA相对表达量分别为(31.4±1.4)%和(28.2±0.7)%,与相应的原发灶(18.1±1.1)%比较,差异有显著性(P<0.001)。免疫组化结果表明,卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢上皮不表达TrkB;TrkB在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率分别为67.12%(49/73)和14.29%(4/28),两者比较差异有显著性(P<0.001),TrkB前体蛋白(表达于胞质)广泛地高表达于卵巢上皮性癌组织中67.12%(49/73),全长TrkB蛋白(表达于胞膜)在腹水中的癌细胞团簇100%(8/8)和低分化卵巢癌组织中100%(34/34)表达增强,与原发灶49.32%(36/73)和高分化癌7.69%(3/39)比较,差异有显著性(P<0.01)。TrkB阳性表达与卵巢癌患者不良预后有关(P<0.002)。结论:卵巢上皮性癌中存在TrkB的过度表达;全长TrkB高表达于低分化卵巢癌和腹水中的癌细胞团簇中,TrkB可能是介导卵巢癌失巢凋亡抑制的因子;TrkB的过度表达预示卵巢癌的不良预后。 展开更多
关键词 酪氨酸激酶受体B 卵巢癌 失巢凋亡 多细胞团簇
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整合素αⅤ对鼻咽癌CNE-2Z细胞放疗敏感性的影响 被引量:2
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作者 黄海辉 栾巍 +1 位作者 李建军 梁后杰 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2008年第7期640-643,共4页
目的:探讨粘附分子整合素αV通过细胞间相互作用,是否对鼻咽癌CNE-2Z细胞的放疗敏感性产生影响,进而初步探讨其可能机制。方法:采用liquid overlay技术进行CNE-2Z细胞三维立体(多细胞球)培养;血球计数器计数法比较在阻断整合素αV作用前... 目的:探讨粘附分子整合素αV通过细胞间相互作用,是否对鼻咽癌CNE-2Z细胞的放疗敏感性产生影响,进而初步探讨其可能机制。方法:采用liquid overlay技术进行CNE-2Z细胞三维立体(多细胞球)培养;血球计数器计数法比较在阻断整合素αV作用前后CNE-2Z细胞的放射敏感性;AnnexinV/PI双标流式细胞术检测细胞凋亡。结果:(1)成功建立CNE-2Z多细胞球培养模型;(2)CNE-2Z多细胞球在接受X射线照射后,并在一定的照射剂量下,其表达的整合素αV量,随着照射剂量的增加而增加;(3)阻断整合素αV作用后CNE-2Z多细胞球放疗敏感性增强、细胞凋亡率上调。结论:以多细胞球培养模型模拟体内实体瘤情况,证实粘附分子整合素αV的表达情况可以影响鼻咽癌CNE-2Z细胞的放疗敏感性,抑制细胞凋亡是其可能的作用机制。 展开更多
关键词 人鼻咽癌细胞系CNE-2Z 多细胞球 整合素ΑV 放疗 敏感性 凋亡
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肿瘤多细胞球:一种近似实体瘤的体外肿瘤模型 被引量:3
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作者 蒋乔 薛雪 +2 位作者 马会利 邹国漳 梁兴杰 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期552-556,共5页
本文介绍了一种简便易行的方法,用以在体外建立近似体内实体瘤的肿瘤模型———肿瘤多细胞球模型(multicellular tumor spheroids,MCTSs)。采用液滴重叠法(liquid overlay method)来构建HeLa肿瘤多细胞球模型,并在光镜下对肿瘤多细胞球... 本文介绍了一种简便易行的方法,用以在体外建立近似体内实体瘤的肿瘤模型———肿瘤多细胞球模型(multicellular tumor spheroids,MCTSs)。采用液滴重叠法(liquid overlay method)来构建HeLa肿瘤多细胞球模型,并在光镜下对肿瘤多细胞球的生长状况进行观察描述,再应用场发射扫描电镜和透射电镜观察MCTSs对肿瘤多细胞球的外部和内部超微结构及双光子激光共聚焦荧光显微镜对活细胞球进行激光层切,建MCTSs的三维立体形貌。还利用该模型对于表面不同电荷的量子点进行筛选。结果表明,该模型的建立相对简便易行,并具有明确形态学表征,可广泛应用于对抗肿瘤药物和纳米材料进入肿瘤方式和作用机制等研究。 展开更多
关键词 肿瘤多细胞球 三维细胞培养 量子点
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FAK靶向RNAi重组体的构建及其抗多细胞球体形成效应 被引量:1
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作者 陈玉英 向浏欣 +4 位作者 杨黎 潘凤 蒋金妍 陈克力 梁后杰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期1633-1636,共4页
目的构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制黏着斑激酶(FAK)表达,并探讨其对结肠癌多细胞球体(MCSs)形成的影响。方法针对FAK cDNA序列设计并合成1对特异性的含有短发卡的寡核苷酸序列及其对照序列,经退火后插入pGenesil-1中构建重组体。经双酶... 目的构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制黏着斑激酶(FAK)表达,并探讨其对结肠癌多细胞球体(MCSs)形成的影响。方法针对FAK cDNA序列设计并合成1对特异性的含有短发卡的寡核苷酸序列及其对照序列,经退火后插入pGenesil-1中构建重组体。经双酶切鉴定和DNA测序后,用脂质体2000将其转染结肠癌HT29细胞,并用G418稳定筛选,采用Real-time PCR和Western blot检测干扰前后FAK在HT29内的表达变化,并作细胞悬浮培养观测靶向干扰FAK对MCSs形成的影响。结果双酶切和测序鉴定证实插入序列完全正确;靶向干扰FAK后,其mRNA和蛋白表达分别显著下调(79.20±2.97)%和(78.47±4.39)%,且细胞不易聚集形成MCSs。结论成功构建FAK靶向RNAi重组载体,显著地抑制FAK表达,并能有效地抑制MCSs的形成。 展开更多
关键词 黏着斑激酶 RNA干扰 构建 多细胞球
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A549肺腺癌多细胞球体的生长特性 被引量:1
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作者 史德刚 黄钢 +3 位作者 苗积生 林祥通 贺晓东 苏斌 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第3期250-253,共4页
背景与目的 放射生物学试验时单层细胞或移植瘤均存在不同程度的局限性,而多细胞球体(multieellularspheroid,MTS)作为实体瘤的模型应用较多。本研究旨在了解A549肺腺癌MTS的生长特性,有助于选择最佳MTS用于实验研究。方法1.75... 背景与目的 放射生物学试验时单层细胞或移植瘤均存在不同程度的局限性,而多细胞球体(multieellularspheroid,MTS)作为实体瘤的模型应用较多。本研究旨在了解A549肺腺癌MTS的生长特性,有助于选择最佳MTS用于实验研究。方法1.75×10^7的A549细胞株35mL转移人2%琼脂糖封底的100mm培养皿中旋转培养,60r/min,40h时分离MTS到2%琼脂糖封底的96孔板中,每孔一个MTS,静止培养。结果 旋转培养阶段A549MTS形态较圆,大小均一,细胞间连接不紧密。经过约10天的静止培养,直径在429~570μm时MTS的细胞间连接紧密,静止培养26.5天时直径达1358.5μm,已经不能用于试验。电镜观察MTS的细胞生长良好,很少有凋亡和坏死。MTS的细胞周期以G0~G1期占优势。结论 旋转结合静止培养方法简单,所得MTS的生长特性与实体瘤相似,直径在500μm左右时最适合用于实验研究。 展开更多
关键词 肺腺癌 多细胞球体 生物学
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多细胞球样体的制备及其在肿瘤治疗研究中的应用 被引量:2
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作者 徐强 廖泉 赵玉沛 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2010年第3期320-324,共5页
多细胞球样体(MCS)模型具有与体内细胞相似的生理或病理特性,能够更好地模拟细胞在体内的生物学行为,被广泛应用于治疗效能检测中,包括放疗、化疗、免疫治疗、联合治疗等;基于MCS建立的共培养系统为研究同种或异种细胞间的关系提供了良... 多细胞球样体(MCS)模型具有与体内细胞相似的生理或病理特性,能够更好地模拟细胞在体内的生物学行为,被广泛应用于治疗效能检测中,包括放疗、化疗、免疫治疗、联合治疗等;基于MCS建立的共培养系统为研究同种或异种细胞间的关系提供了良好的平台。本文将对多细胞球样体的制备及应用尤其是近年的新进展做一简要综述。 展开更多
关键词 多细胞球样体 三维培养 抗肿瘤治疗 共培养
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CD147单克隆抗体对HCE1多细胞球体紫杉醇耐药的影响(英文) 被引量:2
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作者 胡芸 吴宜林 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期192-202,共11页
目的:研究CD147单克隆抗体在人宫颈鳞癌细胞株HCE1多细胞球体模型中对紫杉醇天然耐药的影响,探讨CD147单克隆抗体是否可以逆转HCE1多细胞球体天然耐药及其对P-糖蛋白(P-gp)的影响。方法:运用液体重叠法和旋转法建立HCE1多细胞球体模型... 目的:研究CD147单克隆抗体在人宫颈鳞癌细胞株HCE1多细胞球体模型中对紫杉醇天然耐药的影响,探讨CD147单克隆抗体是否可以逆转HCE1多细胞球体天然耐药及其对P-糖蛋白(P-gp)的影响。方法:运用液体重叠法和旋转法建立HCE1多细胞球体模型。以单层细胞作为对照,观察CD147单克隆抗体干预前后HCE1多细胞球体形态学变化。WST-1法检测不同浓度的CD147单克隆抗体干预前后,紫杉醇对HCE1多细胞球体的抑制率,计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)和多细胞耐药指数(index of multicellular resistance,MCRI),并绘制浓度抑制率曲线。用对照组,CD147单抗,紫杉醇及紫杉醇+CD147单抗分别干预单层细胞及多细胞球体,流式细胞学检测细胞周期及凋亡率。用免疫组织化学法分别检测药物干预前后单层细胞及多细胞球体中CD147和P-gp的表达。结果:成功建立了HCE1多细胞球体紫杉醇天然耐药模型。CD147单克隆抗体能使HCE1多细胞球体解聚。CD147单克隆抗体能增强HCE1多细胞球体对紫杉醇的敏感性。5,10,20μg/mL CD147单克隆抗体组IC50分别为(40.31±3.73),(32.43±1.56),(30.69±1.01)μg/mL,5和10μg/mL CD147单抗组呈剂量依赖性(P<0.05)而10和20μg/mL CD147单抗组无明显剂量依赖性(P>0.05),其凋亡率接近单层细胞(P>0.05)。CD147单克隆抗体引起多细胞球体G1/G0期阻滞,和紫杉醇联用,分别在G1/G0和G2/M 2个调控点共同阻滞HCE1细胞生长。HCE1多细胞球体各组中CD147和p-gp表达呈一致性。结论:成功建立宫颈鳞癌HCE1多细胞球体紫杉醇天然耐药模型;CD147的表达与宫颈鳞癌HCE1多细胞球体对紫杉醇的耐药呈正相关,阻断CD147可部分逆转HCE1多细胞球体对紫杉醇的天然耐药;CD147介导的HCE1多细胞球体的紫杉醇天然耐药可能与P-gp有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 多细胞球体 CD147 P-糖蛋白 紫杉醇
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酪氨酸激酶受体B与人卵巢癌OVCAR-3细胞侵袭能力的关系 被引量:1
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作者 于晓辉 蔡斌 +4 位作者 杨懿霞 严沁 万小平 任海军 刘天卿 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第10期728-733,共6页
背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。TrkB在神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤组织中过度表达,TrkB在卵巢癌细胞中的表... 背景与目的:失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力。TrkB在神经母细胞瘤和其他多种人类高侵袭性恶性肿瘤组织中过度表达,TrkB在卵巢癌细胞中的表达及其与卵巢癌细胞的高侵袭能力的关系的研究鲜有报道。本研究探讨失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)与人卵巢癌OVCAR-3细胞侵袭能力的关系。方法:RT-PCR和Western印迹法检测卵巢癌细胞系OVCAR-3细胞贴壁培养、细胞立体培养以及细胞立体培养得到的多细胞团簇经胰酶消化成单细胞后再次贴壁培养细胞TrkB的表达差异;体内、体外细胞侵袭实验检测通过RNAi技术沉默TrkB后OVCAR-3细胞侵袭及转移能力的改变。结果:RT-PCR结果表明,OVCAR-3多细胞团簇中TrkBmRNA的表达高于贴壁细胞(P<0.001);Western印迹结果显示,与OVCAR-3贴壁细胞比较,立体培养细胞中全长TrkB表达升高[(17.47±0.58)%vs(8.93±0.19)%,(P<0.001)]。体内、体外细胞侵袭实验表明,OVCAR-3细胞团簇的侵袭转移能力较普通贴壁细胞明显增强(P<0.01);TrkB沉默后OVCAR-3的侵袭及转移能力受到抑制(P<0.01)。结论:TrkB通过失巢凋亡抑制机制介导了卵巢上皮性癌细胞的侵袭和转移。 展开更多
关键词 酪氨酸激酶受体B 卵巢癌 失巢凋亡 ANOIKIS 多细胞团簇
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乳腺癌细胞三维培养模型构建及其药物敏感性研究 被引量:4
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作者 姜昊声 曹燕 +4 位作者 吴绍秋 刘冰妍 贾一平 王振磊 尚鸣异 《实用癌症杂志》 2016年第6期871-874,共4页
目的观察乳腺癌MCF-7细胞在3D与2D培养模式下对阿霉素的敏感性。方法应用模板印制凝胶微孔支架技术建立体外3D细胞培养模型,通过倒置显微镜等方法观察3D细胞球的生长特性;采用Alamar Blue法获得不同培养模式下药物阿霉素作用的细胞抑制... 目的观察乳腺癌MCF-7细胞在3D与2D培养模式下对阿霉素的敏感性。方法应用模板印制凝胶微孔支架技术建立体外3D细胞培养模型,通过倒置显微镜等方法观察3D细胞球的生长特性;采用Alamar Blue法获得不同培养模式下药物阿霉素作用的细胞抑制率;采用流式细胞术比较2D培养和3D培养细胞周期、细胞凋亡的差异。结果3D与2D培养相比,G-1/G-0期胞增多,S期、G2/M期细胞减少,细胞周期受阻滞,具有统计学差异(P〈0.05);活细胞减少,早期凋亡、晚期凋亡、坏死细胞比例增大(P〈0.05)。阿霉素作用3 d后,3D培养细胞的IC50值为23.77μg/ml[95%CI 15.80-35.77],2D培养细胞的IC-(50)值为0.46μg/ml(95%CI 0.28-0.75),MCRI为51.7。结论 3D培养MCF-7细胞在细胞周期、细胞凋亡等方面与2D培养细胞存在明显差异,可能是导致乳腺癌多细胞耐药的重要原因。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤多细胞球 3D培养 阿霉素 抗药性
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肺腺癌细胞微环境及转移与黏附分子表达的关系 被引量:2
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作者 高峰 王吾如 林岩 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期213-215,共3页
目的 研究肺腺癌细胞生长环境及转移性与黏附分子CD4 4v6和CD2 9的表达关系。方法 将起源相同、转移性不同的两个肺腺癌细胞系AGZY和Anip分别用简便肿瘤多细胞球体 (MTS)培养法培养 ,并设常规单层贴壁细胞培养对照。通过倒置显微镜、... 目的 研究肺腺癌细胞生长环境及转移性与黏附分子CD4 4v6和CD2 9的表达关系。方法 将起源相同、转移性不同的两个肺腺癌细胞系AGZY和Anip分别用简便肿瘤多细胞球体 (MTS)培养法培养 ,并设常规单层贴壁细胞培养对照。通过倒置显微镜、扫描及透射电镜观察MTS形成情况 ,并用免疫组化法分别对MTS及贴壁细胞上CD4 4v6和CD2 9表达进行检测。结果 MTS培养成功 ,贴壁细胞与MTS在细胞结构及细胞连接结构上相似 ,两种MTS在形态及结构上差异无显著性。免疫组化结果显示 ,CD2 9在高转移性的Anip细胞及其MTS上呈阳性表达 ;在低转移性的AGZY细胞及其MTS上阴性表达。CD4 4v6在Anip和AGZY细胞及MTS上均呈阳性表达 ,差异无显著性。贴壁细胞与MTS上两种黏附分子表达均无差异。结论 成功建立了一种简易制备MTS的方法。细胞生长方式 (单层贴壁与MTS)可能不影响CD4 4v6和CD2 9的表达。CD2 9表达可能与肺腺癌转移性相关 ;CD4 展开更多
关键词 肺腺癌 细胞微环境 肿瘤转移 黏附分子 肿瘤多细胞球体
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莪棱舌草Ⅰ号对人肝癌细胞抑制作用的研究 被引量:1
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作者 谢文杰 刘欣 +3 位作者 王喆 王娜 付桂芳 张瑾峰 《首都医科大学学报》 CAS 2003年第2期100-103,共4页
运用MTT比色实验测定细胞增生能力,通过球体细胞培养、细胞生长曲线的测定以及细胞形态结构的观察,研究抗癌药莪棱舌草Ⅰ号对人肝癌细胞(7721细胞)的抑制作用。结果:莪棱舌草Ⅰ号使7721细胞的增生能力明显下降(抑制率高达70%以上),细... 运用MTT比色实验测定细胞增生能力,通过球体细胞培养、细胞生长曲线的测定以及细胞形态结构的观察,研究抗癌药莪棱舌草Ⅰ号对人肝癌细胞(7721细胞)的抑制作用。结果:莪棱舌草Ⅰ号使7721细胞的增生能力明显下降(抑制率高达70%以上),细胞球体明显减小甚至解体,细胞形态明显改变。这种抑制作用可能是莪棱舌草Ⅰ号对肝癌细胞产生杀伤作用的机制之一。 展开更多
关键词 莪棱舌草I号 人肝癌细胞 抑制作用 多细胞肿瘤球体 肝癌 MTT 生长曲线
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Role of soluble factors and three-dimensional culture in in vitro differentiation of intestinal macrophages 被引量:3
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作者 Tanja Spoettl Martin Hausmann +5 位作者 Katrin Menzel Heidi Piberger Hans Herfarth Juergen Schoelmerich Frauke Bataille Gerhard Rogler 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2007年第7期1032-1041,共10页
AIM: To examine the factor(s) involved in differentiation of intestinal macrophages (IMACs) using a recently established in vitro model. METHODS: To test whether soluble or membrane bound factors induce IMAC-different... AIM: To examine the factor(s) involved in differentiation of intestinal macrophages (IMACs) using a recently established in vitro model. METHODS: To test whether soluble or membrane bound factors induce IMAC-differentiation, freshly elutriated monocytes (MO) were incubated with conditioned media or cell membranes of intestinal epithelial cells (IEC) or cultured with IEC in transwell systems. To determine the importance of an active migration of MO, three- dimensional aggregates from a 1:1-mixture of MO and IEC were examined by immunohistochemistry and flow cytometry. Apoptosis was examined by caspase-3 Western blots. Extracellular matrix production in differentiation models was compared by immunohistochemistry. RESULTS: IMAC differentiation was observed in a complex three-dimensional co-culture model (multicellular spheroid, MCS) with IEC after migration of MO into the spheroids. By co-culture of MO with conditioned media or membrane preparations of IEC no IMAC differentiation was induced. Co-culture of MO with IEC in transwell- cultures, with the two cell populations separated by a membrane also did not result in intestinal-like differentiation of MO. In contrast to IEC-spheroids with immigrating MO in mixed MCS of IEC and MO only a small subpopulation of MO was able to survive the seven day culture period. CONCLUSION: Intestinal-like differentiation of MO in vitro is only induced in the complex three-dimensional MCS model after immigration of MO indicating a roleof cell-matrix and/or cell-cell interactions during the differentiation of IMACs. 展开更多
关键词 Intestinal macrophages Intestinal epithelialcells multicellular spheroids Inflammatory boweldisease Tolerance differentiation
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