以课程建设为平台提高医学研究生创新能力的探索

课程建设是提高医学研究生创新能力的重要手段。本文分析了目前医学研究生课程建设存在的问题，在此基础上阐述了我校以课程建设为平台促进医学研究生创新能力培养的具体措施.

蜈蚣提取物对小鼠宫颈肿瘤生长的影响及其作用机制的实验研究

目的:研究蜈蚣提取物在体内对宫颈肿瘤生长的影响及其作用机制。方法:观察不同浓度、不同蜈蚣提取物对荷瘤小鼠的生存期、抑瘤率、免疫功能等方面的影响以研究其体内抗肿瘤效应,并探索其作用机制。结果:两种蜈蚣提取物(CE、CA)处理荷瘤鼠,实验中无一死亡,抑瘤率分别可达52.85%、33.65%;光镜观察实体瘤组织发现盐水对照组瘤组织浸润横纹肌组织中生长旺盛,而药物处理组则普遍可见大量坏死和凋亡;电子透射显微镜观察超微结构发现实验组大量核固缩、边聚的凋亡肿瘤细胞;免疫组化结果显示CE和CA使Bax表达量明显增高,Bc l-2和Survivin表达量降低,但Sm ac的表达无显著差异;CE和CA对VEGF的含量影响不大;胸腺指数和脾脏指数无显著改变;CE组小鼠CD3+的T细胞总数无明显改变,CD4+/CD8+比值、CD19+的B细胞数下降;CA组CD3+以及CD4+细胞下降显著;肝、肾组织切片发现CE、CA在本文实验浓度范围内无明显毒副作用。结论:两种蜈蚣提取物(CE、CA)均可在小鼠体内抑制宫颈肿瘤的生长,通过Bax和Caspase-3介导的线粒体信号转导途径诱导肿瘤组织凋亡机制可能参与了其体内抗肿瘤效应。

中药蜈蚣的研究进展

蜈蚣是一种具有多种生物活性的动物药材。文章综述了蜈蚣的种类、化学成分、药理作用和临床应用的研究简况。

蜈蚣提取物对宫颈癌Caski细胞增殖的抑制效应

目的:观察蜈蚣对宫颈癌Caski细胞生长的抑制作用。方法:实验于2006-06/09在三峡大学医学院免疫学重点学科实验室完成。运用体外细胞培养技术,以不同浓度(8,16,32g/L)的乙醚、乙醇蜈蚣提取物作用于培养的Caski细胞48h,采用MTT法测定细胞代谢率,以流式细胞术观察DNA含量和凋亡的变化情况。结果:①细胞形态由梭形逐渐变圆,胞浆皱缩,体积缩小,细胞数量明显少于阴性对照组。②MTT以浓度依赖方式降低吸光度值,与对照组相比抑制率增高显著。③细胞周期各时相DNA含量改变明显,G0～G1期细胞显著降低(由最初64.0%降至最低37.2%),而S,G2～M期细胞明显上升;凋亡率显著增高,阳性对照药物顺铂组也有上述类似改变。结论:中药蜈蚣乙醚、乙醇提取物在体外对宫颈癌Caski细胞的生长有明显地抑制作用,机制与影响癌细胞的DNA合成,阻止瘤细胞的分裂增殖,并促进其凋亡有关。呈现一定的量效和时效相关性。

NF-κB与肿瘤关系的研究进展

NF-κB是一种具有多功能的核转录因子。文章综述了NF-κB的结构和作用发挥机制及其与机体相关功能和肿瘤发生发展、诊断治疗等相关方面的研究简况。

P2X7受体激活乳腺癌JNK/SAPK信号通路的研究进展

P2X7受体是ATP门控的离子通道,对二价阳离子有较强的选择性,属于嘌呤受体P2X家族。P2X7受体参与细胞信号转导、细胞因子的分泌等多种生理功能。近年研究发现P2X7受体通过增加氧化磷酸化及细胞内ATP的储备,介导细胞的存活与生长。在乳腺癌中P2X7受体表达异常,并能激活JNK/SAPK途径,诱导乳腺癌细胞凋亡。本文综述了P2X7受体与乳腺癌发生发展分子机制的相关研究。

HPVl8 E7联合SLC基因疫苗的构建及在真核细胞中的表达

目的：构建人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）18型E7联合小鼠次级淋巴组织趋化因子（Secondary lymphoid tissue chemokine，SLC）真核共表达基因，以获得高效性治疗HPVl8感染及相关肿瘤的DNA疫苗。方法：分别以HPVl8型的中国野毒株、pDsRed2-N1-SLC为模板，利用PCR克隆技术制备HPVl8E7和SLC基因，分别双酶切后胶回收获得HPVl8E7、SLC基因片段，分别插入到真核表达载体pIRES的多克隆位点B（MCSB）和多克隆位点A（MCSA）中，构建pIRES-E7-SLC真核共表达质粒。酶切及核酸序列分析鉴定质粒。脂质体转染人脐静脉内皮细胞（ECV）细胞，以Western bolt方法鉴定真核表达质粒E7的表达，用ELISA的方法鉴定真核表达质粒SLC的表达。结果：酶切及核酸序列测定表明真核表达质粒pIRES-E7-SIC的成功构建。RT-PCR和Western-Blotting方法证实E7及SLC蛋白在真核细胞的正确表达。结论：成功地构建真核表达质粒plRES-E7-SLC，用它转染ECV细胞后，能表达E7和SLC蛋白，为下一步研究HPVl8感染及相关肿瘤疫苗奠定了基础。

P2X7受体在Caski细胞膜上的表达及功能检测

目的:用重组质粒pcDNA6/His-V5-P2X7建立细胞膜稳定表达P2X7受体的人宫颈癌Caski细胞株。方法:采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA6/His-V5-P2X7转染入Caski细胞后,应用RT-PCR、Western blotting及细胞免疫荧光法筛选高表达P2X7的Caski细胞株;MTT法检测细胞增殖;P2X7的天然配体ATP处理高表达细胞后,MTT检测细胞生存率,FCM检测细胞凋亡率。结果:成功获得高表达P2X7受体的Caski细胞株;与对照细胞相比,高表达P2X7受体可抑制Caski细胞生长;不同浓度ATP作用细胞株后可抑制细胞增殖,并导致细胞凋亡率增加。结论:高表达P2X7可抑制Caski细胞生长,并且在其配体ATP作用下诱导细胞凋亡。

炎症反应中P2X7受体影响NALP3炎症体形成的主要机制

NOD样受体属于胞浆内受体,与Toll样受体一样广泛参与对病原体的识别,产生相应的免疫应答反应,炎症体作为NOD样受体家族重要成分,在宿主防御中是一个重要的传感器,与感染性疾病密切相关。机体免疫细胞膜表面的P2X7受体能被感染或损伤组织所释放的危险信号ATP作用而激活,细胞膜表面活化的P2X7受体能通过多种途径促进炎症体的产生,从而加重机体的炎症反应。本文将介绍炎症体的结构、P2X7受体在炎症反应中对其作用的主要机制及相应反应。

蜈蚣提取物诱导SiHa细胞凋亡及其作用机制的研究

目的：研究蜈蚣提取物对宫颈癌SiHa细胞生长的抑制及其作用机制。方法：观察不同浓度的不同蜈蚣提取物对宫颈癌SiHa细胞的生长抑制情况：运用体外细胞培养技术,以不同浓度的蜈蚣提取物和阳性对照药顺铂作用于培养的SiHa细胞48h,采用MTT法测定药物对细胞生长的影响,以流式细胞术观察DNA含量和凋亡的变化情况,DNA片断化分析凋亡特有DNA梯形格局和Western Blot测定bax、Caspase3蛋白水平的表达。结果：SiHa细胞用8、16、32mg/ml的乙醚、乙醇蜈蚣提取物处理48h后,细胞生长显著受抑;DNA周期改变明显,亚G1峰与对照组有显著性差异;DNA-Ladder显著;Western Blot提示相关凋亡蛋白bax、Caspase3表达并显示活性,凋亡率增高明显。结论：中药蜈蚣乙醚、乙醇提取物在体外对宫颈癌SiHa细胞的生长有明显地抑制作用,其机制与改变细胞DNA周期,促进凋亡有关。