抗高血压病中药的研究进展

血管内皮功能的紊乱、肾素-血管紧张素-醛固酮系统的激活及钾离子、钙离子代谢的失调引起的血管收缩是导致高血压病的重要原因,传统的中医中药在高血压病的防治中具有一定的疗效。文章综合近年来有关中药治疗高血压病的实验及临床研究,从上述机理方面探讨中药的降压作用。

中药复方对细胞色素P450酶的调控研究进展

通过参阅大量近年来国内外有关中药对药物代谢酶细胞色素P450酶影响的文献,并结合笔者实验室的相关研究,对中药对细胞色素P450酶的研究文献进行整理和分析。发现各国学者目前主要从中药有效成分、单味中药或提取物、中药复方三个层面研究了中药对细胞色素P450酶的影响,其中作为中药主导使用形式的中药复方对细胞色素P450酶影响的研究明显偏少,研究的深度也不如前两者,研究中发现一些中药复方对细胞色素P450酶确实存在不同程度的抑制或诱导作用。因此深入研究中药复方对细胞色素P450酶活性的影响,既有利于中医药基础理论的深入和发展,又有助于指导中药在临床上的合理使用,避免因药物相互作用导致的不良反应,还可为个体化用药和发现新药提供参考。

桑枝总黄酮体外抗炎活性及机制研究

目的研究桑枝总黄酮的体外抗炎活性及其作用机制。方法 IFN-γ和LPS协同造成小鼠RAW264.7细胞炎症模型;Griess反应测定细胞上清液中NO产量;FRAP测定细胞总抗氧化能力;RT-PCR检测iNOS、COX-2、HO-1、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达;Western blot检测iNOS、p-ERK蛋白表达水平。结果桑枝总黄酮呈剂量依赖性抑制细胞上清液中NO含量并且无细胞毒性,提高细胞总抗氧化能力,下调iNOS、COX-2、IL-1β、IL-6 mRNA和iNOS、p-ERK蛋白的表达,上调HO-1 mRNA表达,但对TNF-α mRNA表达影响不大。结论桑枝总黄酮部分通过MAPK中的ERK信号转导通路抑制iNOS基因和蛋白的表达从而抑制NO的产量,提高细胞总抗氧化能力,同时下调COX-2、IL-1β、IL-6等炎症介质和上调抗炎介质HO-1的表达而发挥抗炎效果。

衰老相关分泌表型的研究进展

细胞衰老的同时常伴随着衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype,SASP)的产生。SASP由促炎细胞因子、生长因子、趋化因子和基质重塑酶等一系列细胞因子组成,它们可以导致机体慢性低度炎症和疾病,并可以反作用于衰老细胞及其邻近细胞加速它们的衰老进程,并可作为新的细胞衰老效应机制。该文通过对SASP生物学功效、分泌调节、机制、以及与相关疾病关联的探讨,提高我们对SASP的认知,引发我们对SASP相关疾病疗法的思考。

内皮型一氧化氮合酶脱偶联的研究进展

血管内皮功能障碍(endothelial dysfunction)是多种心脑血管疾病的共同病理机制,其突出表现为内皮依赖性血管舒张功能障碍,主要由NO减少及氧自由基增加所致。最新研究发现,内皮型一氧化氮合酶脱偶联(eNOS uncoup ling)是导致NO水平下降和氧自由基水平升高的重要机制,是高血压、糖尿病、动脉粥样硬化等疾病中内皮功能障碍的重要原因。通过纠正eNOS脱偶联可有效改善内皮功能,有望为保护血管内皮功能提供有效途径。

蒺藜皂苷抗抑郁作用及机制研究

目的探讨蒺藜皂苷的抗抑郁作用及机制。方法采用孤立大鼠加慢性轻度不可预见性应激方法造抑郁大鼠模型,进行开放旷场,悬尾行为学测试,用LC-MS/MS液质联用法检测大鼠血液中5-羟色胺(5-HT)、γ氨基丁酸(GABA)、去甲肾上腺素(NE)、谷氨酸(Glu)含量变化。实时定量PCR检测海马吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、核转录因子-κB(NF-κB)、炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)基因表达。Western blot检测海马中吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、细胞因子NF-κB(p65)蛋白水平表达。结果与空白组比较,模型组小鼠旷场运动距离、站立次数和悬尾不动时间明显增加(P<0.05),血液中5-羟色胺明显下降(P<0.05),海马中IDO、NF-κB、IL-1β基因表达上调,IDO、NF-κB蛋白水平明显上调(P<0.05)。与模型组比较,蒺藜皂苷给药组能明显减少慢性应激导致大鼠旷场运动距离、站立次数和悬尾不动时间(P<0.05)。蒺藜皂苷给药组能明显提高大鼠血液中5-羟色胺含量(P<0.05),上调海马中抗炎因子IL-10基因表达,明显下调IDO、IL-1β基因表达(P<0.05),明显下调IDO蛋白表达水平(P<0.05)。结论蒺藜皂苷能明显改善动物行为学,具有抗抑郁作用,其作用可能与提高血液中5-羟色胺水平,下调色氨酸前体代谢酶吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、IL-1β基因表达和降低吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)蛋白表达水平有关。

地黄药理药化及配伍研究

地黄是我国常用的大宗中药。近年来研究人员对其不同炮制方法的生地黄、鲜地黄、熟地黄的化学成分、药理作用及其在临床配伍研究应用有较多研究。

桑枝总黄酮的抗氧化活性研究

目的研究桑枝总黄酮于无细胞系统中的直接抗氧化活性和干预细胞后的体外抗氧化活性。方法桑枝总黄酮经提取和D101大孔树脂纯化后获得,并用紫外分光光度法测定。采用DPPH法、ABTS法和FRAP法分析桑枝总黄酮的直接抗氧化活性且用trolox做阳性对照;采用ABTS法、FRAP法和Griess法分别测定桑枝总黄酮干预AngII诱导内皮细胞模型和LPS协同IFN-γ诱导巨噬细胞模型中的抗氧化活性。结果桑枝总黄酮于100μg/mL剂量对ABTS自由基清除能力>对DPPH自由基清除能力>对铁离子的还原能力;在AngII诱导内皮细胞ECV304模型中显示清除ABTS自由基的能力,且强于对铁离子的还原能力;同时能显著降低LPS协同IFN-γ诱导巨噬细胞中亚硝酸盐的量。结论桑枝总黄酮于体外直接测定或干预细胞后均显示具有抗氧化活性。

蛋白质特殊氧化与疾病关系的研究进展

由于蛋白质氨基酸组成及氧化因素的多样性,导致蛋白质多样性氧化产物的生成,如酪氨酸氧化成3硝-基酪氨酸或3氯-酪氨酸,蛋氨酸氧化生成亚砜等。蛋白质特殊氧化产物的生成及水平的增高,在一定程度上反映并影响着疾病的发生与发展状态。深入研究蛋白质特殊氧化与疾病的关系,有望为相关疾病的预防和治疗提供有效的科研依据。

黑种草子不同组分抑制亚硝酸盐积累、血小板聚集和血管收缩的体外实验研究

目的研究黑种草子不同组分对巨噬细胞活化后含亚硝酸盐量、血小板诱导后聚集、离体血管经苯肾上腺素引起收缩的影响。方法黑种草子醇提物经萃取分别得到乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物,后经大孔树脂纯化分别得到组分Ⅰ(总黄酮类成分)、Ⅱ(总皂苷类成分)和Ⅲ(总多糖类成分);组分Ⅳ(总生物碱成分)为黑种草子经酸水提取后乙醇洗脱乙酸乙酯萃取。以脂多糖和干扰素γ诱导小鼠巨噬细胞活化引起细胞上清液中亚硝酸盐累积;以二磷酸腺苷、花生四烯酸、胶原诱导大鼠体外血小板聚集;以苯肾上腺素引起大鼠离体血管收缩,而后考查黑种草子不同组分对上述指标的影响。结果组分Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ抑制亚硝酸盐形成,组分Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ具有抗血小板聚集作用,组分Ⅳ具有部分内皮依赖性血管舒张活性。结论黑种草子Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ组分可干预血管系统中炎症的多个环节,且各有偏重,这是其活血通经药效的物质基础。

刘寄奴抗炎组分筛选及其机制研究

目的考察刘寄奴活性组分及其对干扰素-γ(IFN-γ)和脂多糖(LPS)协同诱导RAW264.7细胞的抗炎机制。方法应用溶剂萃取和D101大孔树脂分别制备刘寄奴各提取物和总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮的含量;IFN-γ和LPS协同诱导细胞炎症模型;Greissreaction法测定各提取物及总黄酮对细胞上清液中亚硝酸盐含量的影响;RT-PCR法考察总黄酮对细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、诱导型环氧合酶(COX-2)mRNA的影响;Westernblot法考察总黄酮对细胞iNOS、COX-2、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达的影响。结果刘寄奴乙酸乙酯部位与其他提取物相比,在相同剂量时对亚硝酸盐含量的抑制率最高,由此富集获得的总黄酮含量达53%。刘寄奴总黄酮呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐的含量,并对刺激后的细胞活力有保护作用;刘寄奴总黄酮呈抑制iNOS、COX-2mRNA表达,抑制iNOS、COX-2、p-ERK的蛋白表达。结论活性导向的分离提示乙酸乙酯部位是刘寄奴抗炎活性组分之一,由此富集的总黄酮呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐含量,部分通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)中的细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路抑制iNOS和COX-2基因和蛋白的表达而达到抗炎效果。

野菊花提取物舒张血管及抗炎机制研究

目的研究野菊花舒张血管及抗炎机制,同时探索其活性物质基础。方法通过离体血管环张力实验观察野菊花提取物及其主要单体对大鼠胸主动脉环经苯肾上腺素引起血管环收缩的影响。以Griess反应检测野菊花提取物及其单体对LPS(1μg/ml)/IFN-γ(10U/ml)刺激巨噬细胞RAW264.7释放NO的抑制作用;噻唑兰(MTT)比色法检测二者对细胞活力的影响;western blot检测二者对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及环氧合酶-2(COX-2)的抑制作用。结果野菊花提取物、木犀草素对血管的舒张效应为部分内皮依赖性、部分非内皮依赖性;二者对均能剂量依赖性地抑制炎症巨噬细胞生成NO、抑制iNOS表达,同时无细胞毒性,对COX-2表达无影响。结论野菊花提取物的血管舒张效应,抑制炎症细胞内NO及其诱导型合酶iNOS表达可能是其药理作用机制。

芫花总黄酮的抗炎机制研究

目的研究芫花总黄酮(TFDG)对脂多糖(LPS)协同干扰素γ(IFN-γ)诱导鼠RAW264.7巨噬细胞炎症模型中亚硝酸盐含量、诱导型合酶和细胞因子表达的影响,并从ERK/MAPK通路探讨其抗炎机制。方法细胞随机分为芫花总黄酮处理组,阳性药物组(I-NIL50μM)、炎症模型组和正常对照组;Griess反应测定TFDG25、50、100mg/L3个剂量和预刺激、同时加入、预处理3个处理时间及I-NIL对激活细胞上清液中亚硝酸盐的影响,并测定TFDG3个剂量及I-NIL对静息细胞上清液中亚硝酸盐产量的影响;MTT法测定TFDG3个剂量和I-NIL分别对激活细胞和静息细胞的细胞活力的影响;RT-PCR检测TFDG50、100mg/L预处理1h对激活细胞中诱导型合酶iNOS、COX-2、细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α基因表达的影响;Western blot检测TFDG50、100mg/L预处理1h对激活细胞中诱导型合酶iNOS、COX-2和p-ERK蛋白表达的影响。结果模型组中一氧化氮(NO)产物亚硝酸盐含量、诱导型合酶iNOS和COX-2基因和蛋白表达,细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α基因表达,ERK蛋白磷酸化水平均明显高于正常对照组(P<0.01,P<0.05),细胞活力显著下降(P<0.01);TFDG呈剂量和时间依赖性抑制激活细胞上清液中亚硝酸盐含量(P<0.01),提高炎症损伤的细胞活力(P<0.01);TFDG对静息细胞上清液中亚硝酸盐含量无影响,无细胞毒性且于100mg/L剂量促进细胞增殖(P<0.05)。阳性药物I-NIL于50μM剂量的抑制率为35.20%(P<0.01),提高炎症损伤后的细胞活力(P<0.01),但对静息细胞呈细胞毒性(P<0.05)。与模型组比较,芫花总黄酮下调iNOS基因和蛋白表达(P<0.01,P<0.05),抑制COX-2基因表达(P<0.01),对COX-2蛋白表达仅在高剂量100mg/L具抑制效果(P<0.01);下调细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的基因表达(P<0.01),同时能抑制ERK蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。结论芫花总黄酮抑制激活细胞中iNOS基因和蛋白的表达从而降低NO稳定产物亚硝酸盐的产量,抑制COX-2基因和蛋白的表达,同时抑制细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的基因表达,部分机制为抑制ERK/MAPK信号通路中ERK蛋白磷酸化而达到多靶点抗炎效果。

脾酪氨酸激酶——动脉粥样硬化新靶点及其药物研究

脾酪氨酸激酶(Spleen tyrosine kinase,Syk)是一种非受体型酪氨酸激酶,在多种细胞中表达,主要与炎症过程有关。Syk在氧化脂质沉积、C-反应蛋白、NF-κB的激活、血小板活化及炎症小体的激活等动脉粥样硬化的炎症过程中发挥重要调节作用。抑制Syk可降低动脉粥样硬化的炎症过程,并降低斑块的发展,因此,Syk抑制将作为一个新的抗动脉粥样硬化的治疗策略。针对Syk的靶向药物的研发也将是治疗动脉粥样硬化药物发展的新方向之一。

麝香保心丸对自发性高血压大鼠心脏保护作用的研究

目的探讨麝香保心丸(HMP)对自发性高血压大鼠(SHR)心脏保护作用及其可能的机制。方法将6周龄SHR分为HMP治疗组、高血压模型组,将WKY大鼠作为正常血压组,每组分3批在3个时间点(给药6周、给药14周、停药9周)处死大鼠,尾套法测定血压;FRAP法进行心脏组织总抗氧化能力测定;采用RT-PCR考察炎症相关因子ICAM-1、VCAM-1、IL-1β和TNFαmRNA表达;Western Blot与ELISA法分别考察炎症相关因子ICAM-1、VCAM-1及IL-1β、TNFα蛋白表达。结果HMP对SHR无明显降压作用,但能提高SHR心脏组织总抗氧化能力。PCR、Western Blot与ELISA显示给予HMP 6周和14周后,均能显著抑制SHR心脏炎性相关因子ICAM-1、VCAM-1 m RNA表达及ICAM-1蛋白表达;给药14周后,能显著抑制炎性相关因子IL-1β、TNFαmRNA表达及蛋白表达;停药9周后,仍能抑制炎性相关因子ICAM-1、TNFαmRNA表达及ICAM-1蛋白表达。结论HMP具有独立降压以外的对SHR心脏保护作用,其机制可能与抑制心脏组织炎症反应及降低组织氧化应激有关。

玄参提取物舒张血管作用及机制研究

目的观察玄参提取物(extract from scrophulariae,radix,ES)血管舒张作用及其机制。方法采用大鼠离体血管环功能实验装置,记录张力变化,每组血管来自6只同批大鼠,分别保留或去除内皮,各阻断剂预处理25 min后做ES舒张曲线;ES预处理10 min后做钙离子收缩曲线。结果玄参提取物(ES)(0.05 mg/L^2 000 mg/L)剂量依赖性地舒张苯肾上腺素(PE)预收缩的内皮完好或内皮去除大鼠胸主动脉环,在去除内皮前后最大舒张效应(E max)无显著性差异,分别为(78.29%±1.20%)和(76.89%±3.20%);亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)、吲哚美辛、普萘洛尔、鸟甘酸环化酶抑制剂(ODQ)预处理不能抑制ES的血管舒张效应;ES(500 mg/L)对血管紧张素Ⅱ、前列环素F2α、多巴胺、血管加压素收缩血管显示出抑制效应(P<0.05),而对5-羟色胺、内皮素-1(ET-1)的收缩作用无影响;ES(1 000 mg/L)预处理可显著抑制无钙高钾液中由Ca2+内流引起的血管收缩(P<0.05),ES(500 mg/L)预处理可抑制无钙液中PE血管收缩强度(P<0.01);钾通道阻断剂四乙胺(TEA)3 mmol/L、BaCl20.1 mmol/L预处理可阻断ES血管舒张作用(P<0.01),半数效应浓度EC50分别为TEA组(1 900 mg/L)、BaCl2组(1 400 mg/L)。结论 ES具有非内皮依赖性血管舒张作用,其机制与影响血管平滑肌上钾通道有关;部分与阻断钙通道,调节细胞内钙离子浓度相关。

蛋白质羰基化与疾病关系的研究进展

多种疾病的病理过程伴随着蛋白质的氧化,同时,蛋白质的氧化产物在一定程度也反映并影响着疾病的发生与发展状态。蛋白质的羰基化水平是评价蛋白总的氧化程度的常用方法,深入研究蛋白质羰基化与疾病的关系,有望为相关疾病的预防和治疗提供有效的科研依据。