北细辛内生真菌的分离鉴定及代谢产物的生物活性

采用表面消毒法分别从3种北细辛中分离获得10株形态特征不同的优势内生真菌,经形态学和18S rDNA ITS分子分类学分析鉴定为小丛壳属(Glomerella sp.)、叶点霉属(Phyllosticta sp.)、柄孢壳菌属(Po-dospora sp.)、刺盘孢属(Colletotrichum sp.)和镰孢属(Fusarium sp.)。对北细辛优势内生真菌的发酵产物进行体外抗肿瘤和抗菌活性检测,结果表明:除菌株E3、E4和E10外,其余菌株均有不同程度的抗肿瘤和抗菌活性;镰孢属(Fusarium sp.)菌株E9对A549、MDA-MB-231和PANC-1肿瘤细胞抑制率达75%以上;小丛壳属(Glomerella sp.)菌株E1和叶点霉属(Phyllosticta sp.)菌株E2靶向FabI的抗菌活性较强,抑制率达59%。

抗真菌药物echinocandins和pneumocandins类的研究进展

新型抗真菌药物 echinocandins与 pneumocandins类的作用机制是能够非竞争性的抑制真菌细胞壁中 β- 1,3-葡聚糖合成酶的活性 ,进而引起真菌细胞壁的裂解以及细胞内外渗透压的改变从而将真菌细胞彻底杀死。本文综述了这两类药物的研究进展 ,主要包括它们的结构、分类、发现过程以及其中的三种上市或即将上市的药物 caspofungin、micafungin和

植物内生菌生物活性物质研究新进展(英文)

以往 ,抗生素的主要来源是土壤微生物 ;而今 ,植物内生菌这一多样性十分丰富却尚未开发的微生物类群看来是一巨大资源。植物内生菌是生活于植物组织间隙的微生物 (主要是真菌和细菌 )。其中一些内生菌可能会产生在微生物 -宿主关系中发挥作用的生理活性物质 (如 :抗细菌 ,抗真菌 ,抗病毒物质等 )。鉴于这些次级代谢产物在自然界中所起的重要作用 ,对于它们在医药 ,农业 ,工业领域的应用越来越受到人们的关注。全球范围分离植物内生菌及其天然产物的工作正在展开。本文主要概述了植物内生菌及其生理活性物质研究的最新进展 ,希望以此使人们更好的认识到它们对于人类的重要性及价值。

微生物来源的抗真菌抗生素的研究进展

近年来,随着真菌感染性问题的日趋严重,研究开发安全、新型和有效的抗真菌药物显得尤为重要。抗真菌药物根据其作用靶位分为抑制真菌细胞膜、细胞壁、蛋白质和核酸合成及抑制电子传递等5种类型。现从这5个方面对微生物来源的抗真菌抗生素研究进展作一概述。

参与抗生素生物合成的FADH_2依赖型卤化酶研究进展

从发现第一个天然卤化物到现在已有100多年了。在已发现的约4500个天然卤化物中有很多在医药等领域应用广泛,其中包括许多重要的抗生素。直到19世纪90年代中期,人们一直认为生物卤化反应主要由卤过氧化物酶负责催化。近期在许多关于抗生素生物合成基因簇的研究中发现FADH2依赖型卤化酶催化的卤化反应才是许多微生物及其它生物中的主要卤化机制。本文综述了参与抗生素生物合成的FADH2依赖型卤化酶的发现,催化机制及各种来源的该类卤化酶研究进展,并介绍了该类酶在组合生物合成及寻找天然卤化物等方面的应用。

麦角菌HCB-01712生物合成香草酸甲酯

从麦角菌(Claviceps sp.)HCB-01712的发酵液中分离纯化得到化合物HCB-01712-2,经理化分析、紫外吸收、质谱及核磁共振谱分析,确定该化合物为香草酸甲酯。微生物发酵产生香草酸甲酯未见报道。本研究首次从麦角菌发酵代谢产物中发现香草酸酯,有望替代昂贵的植物来源而成为安全的天然绿色产品。

微生物转化植物甾醇产物20-羟基-23,24-二降胆-4-烯-3-酮的鉴定

目的 :鉴定微生物转化植物甾醇过程中一未知产物的结构。方法 :将待鉴定产物用柱色谱、制备HPLC分离纯化后送质谱、1H NMR、13 C NMR、Dept、Cosy和Noesy分析。结果 :待鉴定产物为 2 0 羟基 2 3,2 4 二降胆 4 烯 3 酮。结论

竹红菌素及其衍生物抗肿瘤活性的研究进展

竹红菌素是竹红菌、竹黄菌等几种竹寄生菌的代谢产物,研究表明竹红菌素在可见光区具有优良的光敏活性,是一种潜在的光疗药物,因而受到研究人员的广泛关注。现综述近年竹红菌素及其衍生物抗肿瘤活性的研究进展。

微生物来源的肿瘤血管生成抑制剂

肿瘤组织新血管的生成是使肿瘤得以不断增殖,并向其他器官转移的根本原因之一,因此抑制肿瘤血管的生成成了抗肿瘤治疗的又一个重要靶标。现综述微生物来源的肿瘤血管生成抑制剂的最新进展,包括烟曲霉素及其衍生物、偏端霉素及其衍生物、四环素衍生物COL-3,eponemycin,链球菌多糖外毒素、克拉霉素、罗红霉素、力达霉素等的作用机制、来源、不良反应及临床研究状况等。

微生物来源的Hsp90抑制剂研究进展

热休克蛋白90(Hsp90)是一种分子伴侣,它的效应蛋白多为细胞内信号转导通路的关键蛋白,参与肿瘤的发生与发展。抑制Hsp90,可在多个通路中产生抗肿瘤效应。因此寻找和开发Hsp90抑制剂已成为肿瘤治疗药物的研究热点。本文综述微生物来源的Hsp90抑制剂及其衍生物的研究进展。

Avermectin生物合成及调控的生物化学和分子生物学基础

Avermectin是一族由Streptomycesavermitilis产生的主要用于抗动物、农业植物寄生虫及人类感染的寄生虫的抗生素,是聚酮体衍生而来的十六元五环内酯与甲基化L-齐墩果糖链接而成的化合物。生物合成阻断突变株的研究分析avermectin基因簇的确认使得搞清生物合成途径成为可能,近年S.avermitilis的基因组序列测定,对于我们阐明生物合成精确的先后次序及复杂的生物合成调控机理有很大的帮助。利用S.avermitilis基因组的信息,结合近年来组合生物合成的发展,阐明生物合成途径,使我们能够设计更有效的avermectin类似物以及构建S.avermitilis更有效的重要组分表达宿主。

XC302的微生物转化及其产物研究

筛选可转化抗肿瘤新药XC302的微生物菌种,并对转化产物和活性进行研究。利用保藏的植物内生真茵进行转化筛选,获得了一株具有转化XC302能力的真茵HCCB07927,经过分子生物学鉴定,该茵属于丝核茵属(Rhizoctonm),该菌株可转化XC302生成两个转化产物LYBXYl、LYBXY2。经MS-MS分析初步确定了两个化舍物的结构。抗肿瘤活性测定表明,两个产物均对PANC-1细胞具有较高的抑制作用,其抑制率高于对照品XC302。通过微生物转化技术,成功获得两个转化产物,其均对PANC-1细胞具有较高抑制活性。

希瓦氏菌(Shewanella marinintestina MCCC 1A01703)二十碳五烯酸生物合成基因簇的钓取及鉴定

希瓦氏菌(Shewanella marinintestina MCCC 1A01703)是从海洋动物肠道分离得到的1株产二十碳五烯酸(Ecicosapentaenoic acid,EPA)的海洋细菌。利用PCR方法、Overlap PCR及Gibson Assemble技术克隆该菌中包含pfaA、pfaB、pfaC和pfaD的EPA生物合成基因簇,全长18.4 kb。序列分析表明所钓取的合成基因簇与来自希瓦氏菌SCRC-2738的EPA合成基因簇有88%的相似度,均编码聚酮合酶。以构建的低拷贝表达载体pACYC-Trc为骨架,通过Gibson Assemble技术构建EPA基因簇表达质粒pLYSCY03。钓取大肠埃希菌(Escherichia coli DH5α)细胞中的entD基因,克隆至表达载体pTrc99a中,构建成为重组质粒pLYSCY01。将两个表达质粒同时导入大肠埃希菌(Escherichia coli DH5α)中,获得产EPA的工程菌株。结果表明,希瓦氏菌中含有EPA聚酮生物合成基因簇,大肠埃希菌(Escherichia coli DH5α)中的entD基因可以替代pfaE基因与钓取的EPA合成基因协同合成EPA。

雄甾烯二酮转化菌的诱变育种

分别采用紫外光、YAG倍频脉冲激光、紫外光与倍频激光复合处理等方法 ,以不同剂量对雄甾烯二酮 (1)转化菌进行诱变照射 ,同时对激光的修复作用、诱变效果进行探讨。结果表明 ,被照菌株产 1能力有不同程度的提高。当菌株经紫外光照射后再以不同剂量 YAG倍频激光照射 ,获得一株高产优质突变株 L- 3- 195 ,产 1能力提高了116 % ,且不再产生结构类似副产物雄甾二烯二酮 ,经 4次传代 ,突变株遗传性状稳定。

依尼奥小单孢菌抗性基因sisR的克隆研究

从产西索米星的依尼奥小单孢菌中克隆高抗性新基因sisR ,借助计算机设计PCR引物 ,从西索米星的产生菌依尼奥小单孢菌的染色体DNA中 ,经PCR扩增获得DNA序列长度不等的DNA片段。将这些DNA片段克隆至pUC19载体质粒并导入大肠杆菌 ,从中筛选到 5个抗西索米星的转化子 (其中一个命名为sisR)显示对西索米星的高抗性 (超过 10 0 0 μg mL)。经DNA测序并通过互联网Blast比对 ,确认对该抗性负责的DNA片段是一个未见报道的新基因。

氯离子对东方拟无枝酸菌发酵产物的影响

本文研究了氯离子对东方拟无枝酸菌发酵产物的影响。在常规培养条件下,改变发酵培养基中氯离子存在形式或是添加抑氯剂和溴化钠,都发现了新组分无氯万古霉素(didechlorovancomycin,DDCV)的产生。通过对培养基中添加抑氯剂的量的改变,发现加入0.005%2-巯基苯骈噻唑和0.1%溴化钠时万古霉素产量降至对照的6%,而DDCV的相对含量达到62%。

黑麦麦角菌产生麦角甾醇的研究

从黑麦麦角菌(Claviceps purpurea)HCBO-1711发酵培养后的菌丝体液中分离纯化得到化合物HCBO-1711-1,经过理化分析、紫外吸收、质谱及核磁共振谱分析,证明该化合物为麦角甾醇。

万古霉素发酵废渣固态发酵生产单细胞蛋白的研究

以万古霉素发酵废渣为唯一培养基,对固态发酵生产单细胞蛋白(SCP)进行了研究。经过筛选得到了一株白地霉HCCB2267,它能以万古霉素发酵废渣为唯一底物生长。通过菌株驯化和培养条件优化,固态发酵产生的SCP可达9.42×108个/g干重,其粗蛋白含量达47.24%,氨基酸总量从30.60%提高到46.28%。其优化的培养条件是:培养基起始含水量60%,起始pH5.0～6.0,接种量15%,培养温度28～30℃,培养时间72h等。此外,筛选到的菌株对废渣中残存的菌丝体有降解作用。

达托霉素在不同酸碱条件下产生的杂质及其结构研究

达托霉素是一种正在临床使用的新型抗耐药菌抗生素。由于结构特点,其在不同的pH值下会产生不同的杂质。本文研究了不同pH值下达托霉素杂质的产生情况。利用分析和制备型HPLC,获得了5个主要的相关杂质。通过质谱对各杂质碎片的检测和分析,进行了结构认定。除了4个已知杂质之外,获得了一个未报道的杂质,为达托霉素氨基酸内酰胺断裂后的开环产物。

东方拟无枝酸菌中vcm14基因的敲除对万古霉素合成的影响

PCR-targeting是一种用于敲除或阻断放线菌染色体上某一基因的快速高效的方法。本研究利用该方法在大肠埃希菌中构建破坏粘粒cLYLH17(Δvcm14::apr),通过结合转移首次敲除东方拟无枝酸菌HCCB10007中万古霉素生物合成基因簇中推测的haloperoxidase基因——vcm14,得到一株双交换阻断突变株A.orientalis dvcm14(Δvcm14::apr)。该菌不产生万古霉素及其类似物,证实vcm14基因的编码蛋白不是haloperoxidase,且该蛋白不参与万古霉素的卤化反应,可能是万古霉素生物合成途径中的一个关键酶。本研究为阐明万古霉素生物合成途径中的卤化过程提供了有益线索。