土壤木霉菌实时荧光定量PCR检测体系的建立及应用

基于木霉菌属真菌内转录间隔区(ITS)序列,设计特异性引物DG和DT应用于土壤木霉菌属基因组DNA的实时荧光定量检测,并建立相应的实时荧光定量PCR体系。应用该反应体系对黑土区长期无施肥(NF)、长期施用N、P化肥(NP)以及长期配施N、P化肥和有机肥(NPM)3种方式下大豆田土壤木霉菌基因组DNA进行绝对定量检测。结果表明,引物DG和DT对木霉菌属真菌有较好的特异性;实时荧光定量PCR反应标准曲线相关系数R2=0.993,斜率为-0.2829,而熔点曲线无杂峰;在大豆生育时期的苗期,NF、NP及NPM措施下每克干土中木霉菌基因组DNA含量分别为0.4ng、0.8ng和1.2ng,且NPM措施含量显著高于NF及NP措施(P<0.05)。图4,参17。

微酸性电解水的研究与应用展望

微酸性电解水pH值在5.0～6.5之间,呈微酸性,对绝大多数细菌以及病毒都有显著杀菌效果,且对人体无害。该文结合笔者实验研究综述了微酸性电解水在食品加工及保鲜、医疗以及农业领域等方面的研究现状与应用前景。

用有限酶切法分析蛋白质的氨基酸序列

报道了一个通过有限酶切蛋白质产生多肽片段的方法 .蛋白质经单向SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)分离和用考马斯亮蓝短暂染色后 ,切下所需的蛋白质带 ,将其放入另一个SDS PAGE凝胶的样品槽内 ,在电泳过程中该蛋白质被蛋白酶如蛋白酶V8降解 ,所产生的多肽片段随之被分离 .电泳结束后 ,将多肽片段电印迹至聚偏二氟乙烯 ( polyvinylidenedifluoride,PVDF)膜上 .这些多肽片段从PVDF膜上切下后可以直接被用于分析氨基酸序列 .

枯草芽孢杆菌中一个受二硫键还原剂诱导并与伸长因子Tu同源的蛋白质

分析了β-巯基乙醇（β-ME）和二硫苏糖醇（DTT）对枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis细胞蛋白质组分的影响。在LB培养基中，β-ME和DTT处理能诱导一个50kD蛋白质（P50）的合成。在正常生长条件下P50是一个组成性（constitutive）成的细胞质蛋白质。热激也能诱寻P50，但是孢子形成（sporulation）不能诱导P50。在Schaeffer孢子形成培养基中，β-ME和DTT都不能诱导P5O，表明二硫键还原剂诱导P50的能力依赖于特定的生理条件。用VS蛋白酶有限降解P50，得到4个主要的多肽片段，测定了其中两个片段的N-端氨基酸序列。同源性检索发现P50高度同源于蛋白质合成的伸长因子Tu。