华蟾素对子宫内膜癌Ishikawa细胞株裸鼠皮下移植瘤生长及RRM2基因表达的影响

目的研究华蟾素对子宫内膜癌Ishikawa细胞株裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及对肿瘤组织中核糖核苷酸还原酶亚单位M2(ribonucleotide reductase subunit M2,RRM2)基因表达的影响。方法应用人子宫内膜癌Ishikawa细胞株建立子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机将11只裸鼠分为2组,分别应用华蟾素和生理盐水瘤体内注射治疗1周。观察治疗前后移植瘤体积的变化;计算肿瘤增殖抑制率;RT-PCR方法检测肿瘤组织中RRM2 mRNA表达;Western blot方法检测RRM2蛋白表达。结果华蟾素治疗组移植瘤体积为(0.1314±0.0304)cm3,对照组为(0.3600±0.1145)cm3,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组肿瘤增殖抑制率为43.46%。治疗组肿瘤组织中RRM2 mRNA及蛋白质光密度比值与对照组比较差异均有统计学意义(P=0.019,P=0.001)。结论华蟾素具有抑制子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用,这可能与其抑制肿瘤组织中RRM2表达有关。

磁性纳米Fe_3O_4颗粒协同化疗药物及5溴汉防己甲素在荷瘤鼠体内逆转耐药的研究(英文)

本研究探讨5溴汉防己甲素(5-BrTet)、磁性纳米Fe3O4(Fe3O4-MNP)协同化疗药在动物模型体内逆转耐药的作用及其作用机理。建立恶性血液病荷瘤鼠模型,将其随机分为5组。A组:生理盐水;B组:单用DNR;C组:5-BrTet复合DNR;D组:Fe3O4-MNPs复合DNR;E组:Fe3O4-MNPs复合DNR及5-BrTet。观察各组肿瘤生长特征,肿瘤重量、体积。取各组肿瘤以及心、肝、肾等脏器行组织病理观察。Western blot检测耐药肿瘤BCL-2,BAX,以及caspase-3表达。结果表明:对于K562移植瘤,B、C、D、E4个组之间肿瘤抑制率没有明显的差别。对于K562/A02移植瘤,Fe3O4-MNP复合DNR及5-BrTet可明显抑制移植瘤的增殖,促进肿瘤细胞凋亡;肿瘤组织病理观察显示肿瘤坏死明显。5-BrTet联合Fe3O4-MNP抑制K562/A02移植瘤的BCL-2蛋白的表达,下调BAX和caspas-3的表达。结论:在耐药肿瘤动物模型体内,FeO-MNPs协同DNR和5-BrTet具有很强的肿瘤抑制作用。

磁性纳米Fe_3O_4对卵巢癌细胞耐药性的逆转作用及其与凋亡相关基因的关系

背景与目的:目前认为多药耐药(multi-drug resistance,MDR)是卵巢癌化疗失败和复发的主要原因。本研究探讨磁性纳米Fe3O4颗粒对卵巢癌细胞(SKOV3/DDP)耐药性的逆转作用及其与凋亡相关基因的关系。方法:将卵巢癌细胞的耐药株SKOV3/DDP分为对照组、顺铂组(DDP组)、磁性纳米Fe3O4颗粒组(Fe3O4-MNPs组)、DDP+磁性纳米Fe3O4颗粒组(DDP+Fe3O4-MNPs组)4个组,用MTT比色法检测对细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定细胞凋亡,电感耦合等离子体原子发射光谱法测细胞内顺铂的含量,RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl-2和Survivin mRNA在SKOV3/DDP中的表达。结果:Fe3O4-MNPs组细胞耐药性的逆转倍数为2.259。DDP+Fe3O4-MNPs组细胞凋亡率[(42.1±5.6)%vs.(26.9±4.1)%]及细胞内铂含量[(0.074±0.006)μmol/Lvs.(0.057±0.003)μmol/L]均高于DDP组(P<0.05),其差异有统计学意义(P<0.05)。DDP+Fe3O4-MNPs组细胞bcl-2、survivin mRNA表达均低于DDP组,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:磁性纳米Fe3O4颗粒可逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐受性,作用机制可能与其降低抗凋亡基因bcl-2和survivin mRNA表达有关。

联合应用磁性纳米Fe_3O_4颗粒和5溴汉防己甲素对柔红霉素诱导的K562/A02细胞凋亡效应的影响(英文)

本研究探讨磁性纳米Fe3O4颗粒[MNP(Fe3O4)]和5溴汉防己甲素(5-BrTet)联合治疗慢性髓系白血病的潜在可能性。采用流式细胞术、Wright染色和光学显微镜检测细胞凋亡情况;采用Western blot法检测细胞BCL-2和BAX表达水平。结果表明:MNP(Fe3O4)或5-BrTet与柔红霉素(DNR)联用对K562/A02细胞有细胞毒作用,而联合应用MNP(Fe3O4)和5-BrTet可协同促进DNR诱导K562/A02细胞凋亡,且细胞出现典型的凋亡形态改变,同时可见BCL-2表达下调,BAX表达上调。结论:MNP(Fe3O4)或5-BrTet联合DNR均能有效促进K562/A02细胞凋亡,两者联合应用作用增强,其机制可能与BCL-2表达下调及BAX表达上调有关。

磁性纳米Fe_3O_4颗粒对藤黄酸诱导的U937细胞凋亡效应的影响(英文)

本研究探讨联合应用藤黄酸(GA)和磁性纳米Fe3O4颗粒(MNP-Fe3O4)治疗白血病的潜在可能性。采用MTT法检测GA对U937的细胞毒作用及GA联合MNP-Fe3O4对U937细胞生长抑制的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;应用Wright及DAPI染色观察凋亡细胞的形态学变化;采用实时定量RT-PCR及Western blot法分别检测细胞的caspase-3、bcl-2、bax、NF-κB和survivin基因及相应蛋白的表达。结果表明:GA对U937细胞的生长抑制作用呈现时间及剂量依赖性;MNP-Fe3O4本身无细胞毒作用,但能使GA对U937细胞的生长抑制作用增强;联合应用GA和MNP-Fe3O4诱导的细胞凋亡率较单用GA明显增加,细胞呈现典型的凋亡形态改变,同时可见caspase-3及bax表达上调,而凋亡抑制基因如bcl-2、NF-κB和survivin表达下调。结论:MNP-Fe3O4能增强GA对U937细胞的凋亡诱导作用,两者联合应用可能是一种新型而安全有效的白血病治疗方法。

L-精氨酸对蛛网膜下腔出血大鼠脑组织水电解质含量的影响

目的 探讨L 精氨酸对蛛网膜下腔出血 (SAH)脑组织水电解质含量的影响。方法 非开颅法建立大鼠SAH模型 ,将动物分为SAH组和SAH +L 精氨酸组 ,L 精氨酸于术前 30min按 0 5g/kg腹腔注射 ,每隔 6h以同样的剂量追加 1次。干湿重比较法测定检测不同时间脑组织水含量 ,用原子吸收分光光度计测定脑组织Na+ 、K+ 、Ca2 + 含量。结果 颅脑解剖证实动物模型成功。SAH组于诱导SAH 6h后脑组织水含量和Na+ 含量显著高于术前值 ,脑组织K+ 含量减低 ,SAH后 1h开始脑组织Ca2 + 含量即逐渐增加 ,上述变化在 2 4h最明显。SAH +L 精氨酸组大鼠上述异常改变均明显减轻。结论 :L

载有柔红霉素的磁性纳米Fe_3O_4提高裸鼠异种移植模型中多药耐药K562白血病细胞对化疗效果(英文)

肿瘤的多药耐药是肿瘤化疗失败的主要原因,由于载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在体外显示了良好的耐药逆转效果,本实验研究了载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在体内对白血病多药耐药逆转效果。将裸鼠高成瘤性白血病细胞株K562-n及其相应的多药耐药株K562-n/VCR分别接种于裸鼠的两侧腹股沟皮下,以建立人类白血病移植瘤模型;将双侧成瘤裸鼠随机分为5组,A组给予生理盐水,B组给予磁性纳米Fe3O4颗粒,C组给予柔红霉素,D组给予载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒,E组给予载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒同时在肿瘤表面建立固定磁场。在实验开始后的第1,5,9,13,17,21天分别测量肿瘤体积。实验结束后,分离瘤组织并用RT-PCR,Westernblot检测mdr-1的转录和表达。结果表明:D组、E组的K562-n/VCR肿瘤体积显著小于A、B、C3个组(D或E组相对于A,B或C组p<0.05)。病理检查显示:A组、B组肿瘤细胞生长良好,未见明显细胞坏死;C组肿瘤细胞有散在细胞坏死,部分细胞出现核固缩、核碎裂等;D、E组肿瘤组织内可见细胞明显破碎、坏死、组织的纤维化。D和E组的mdr-1的转录水平明显低于A、B、C3个组,但是P-gp的表达在5个组中无差异。C组、D组、E组3个组K562-n肿瘤平均肿瘤体积显著小于的A、B两组的平均肿瘤体积(C、D或E组相对于A或B组p<0.05)。A组、B组肿瘤细胞生长良好,未见明显细胞坏死;在C、D、E组肿瘤组织内可见细胞明显破碎、坏死、组织的纤维化。结论:载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在体内具有明显的逆转多药耐药的作用,但是相对于单用柔红霉素,载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在敏感的K562-n的肿瘤中并不能进一步提高疗效;本实验中外加磁场并未增加疗效。

中枢组胺在心理应激致大鼠哮喘发病中的作用机制

目的探讨中枢组胺在心理应激致大鼠哮喘发病中的中枢免疫调节作用及其机制。方法 SD大鼠随机分为5组(每组n=10):对照组、哮喘组、应激组、应激哮喘组及侧脑室注射扑尔敏组,测定肺通气功能,放免法测定血清皮质酮(CORT)含量,ELISA测定IL-4及IFN-γ水平,并计算Th1/Th2比值;HE染色观察肺组织形态;高效液相法测定下丘脑内组胺含量;侧脑室注射H1受体拮抗剂扑尔敏观察应激哮喘组肺通气功能、Th1/Th2比值的变化。结果与哮喘组相比:应激哮喘组肺通气功能下降(P<0.05);血清Th1/Th2比值下降(P<0.05),肺组织炎性浸润加重;下丘脑内组胺从231±32 nmol/g升高至287±44 nmol/g(P<0.05)。侧脑室注射H1受体拮抗剂扑尔敏后可减轻上述变化。结论心理应激可致哮喘大鼠中枢组胺含量升高,后者作用于H1受体,加重哮喘气道高反应性及气道炎性反应。

靶向ANG-2的shRNA重组载体抑制人子宫内膜癌Ishikawa生长和侵袭的研究

目的探讨采用RNA干扰（RNA interference，RNAi）抑制血管生成素-2（angiopoietin-2，ANG2）基因的表达对人子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞的影响。方法采用脂质体Lipofectamine^TM2000介导的方法将针对ANG-2基因的短发卡状RNA（short hairpin RNA，shRNA）表达载体转染到人子宫内膜癌Ishikawa细胞中，逆转录聚合酶链反应及Western印迹法检测ANG-2rnRNA及蛋白的表达；噻唑蓝比色法检测Ishikawa细胞的增殖；荧光显微镜观察细胞形态；流式细胞仪检测细胞周期及凋亡；侵袭实验检测其对侵袭能力的影响。结果人子宫内膜癌Ishikawa细胞ANG-2mRNA及其蛋白质表达水平均显著降低；增殖被抑制，抑制率63．11％；细胞凋亡增加，细胞凋亡率与空白对照组和阴性对照组相比明显增高；细胞生长减慢，阻滞于G1期的增多，S期细胞减少；侵袭能力明显下降。结论靶向ANG-2的shRNA能成功下调ANG-2基因的表达，抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长和侵袭。