目的:本实验探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)对体外培养的胃癌细胞株BGC-823凋亡的影响和机制.方法:将BGC-823细胞分为对照组、感染复数(MOI=20)病毒Ad-GFP的Ad-GFP组,重组腺病毒Ad-VEGF165转染的Ad-VEGF165组.应用流式细胞仪检测细...目的:本实验探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)对体外培养的胃癌细胞株BGC-823凋亡的影响和机制.方法:将BGC-823细胞分为对照组、感染复数(MOI=20)病毒Ad-GFP的Ad-GFP组,重组腺病毒Ad-VEGF165转染的Ad-VEGF165组.应用流式细胞仪检测细胞凋亡的百分率,RT-PCR方法检测凋亡抑制基因Bcl-2mRNA的表达,免疫细胞化学方法检测Bcl-2蛋白的表达情况.结果:流式细胞仪测定显示Ad-VEGF165组的细胞凋亡率明显低于Ad-GFP组和对照组(4.6%±0.31% vs 8.37%±1.06%.7.73%±0.86%,P<0.01);RT-PCR和细胞免疫化学结果显示VEGF165转染BGC-823细胞后促进了细胞Bcl-2mRNA和蛋白的表达.Ad-VEGF165组Bcl-2mRNA和蛋白均高于对照组和Ad-GFP组(Bcl-2mRNA:0.761±0.05 vs 0.363±0.12.0.356±0.08;Bcl-2蛋白:1.010±0.08 vs 0.865±0.07,0.901±0.05;P<0.01).结论:VEGF165通过上调凋亡抑制基因Bcl-2及其蛋白的表达,来抑制血浆饥饿诱导的胃癌细胞的凋亡.展开更多
目的探讨蚯蚓纤溶酶(earthworm fibrinolytic enzyme,EFE)对裸鼠人肝癌细胞移植瘤生长及CD44v6表达的影响。方法建立肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为生理盐水组、EFE组、5-Fu组及联合用药组,计算抑瘤率及两药相互作用系数(coe...目的探讨蚯蚓纤溶酶(earthworm fibrinolytic enzyme,EFE)对裸鼠人肝癌细胞移植瘤生长及CD44v6表达的影响。方法建立肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为生理盐水组、EFE组、5-Fu组及联合用药组,计算抑瘤率及两药相互作用系数(coefficient of drug in interaction,CDI),并行血常规检测评价EFE的副反应。同时采用免疫组化SP染色法、RT-PCR及Western blot方法观察EFE组及生理盐水组瘤组织中CD44v6的表达情况。结果与生理盐水组相比,EFE组和5-Fu组抑瘤率分别为20.53%和23.07%;联合用药组抑瘤率为54.20%,且CDI<1。血常规检测提示EFE对造血系统无明显副反应。免疫组化和Western blot结果显示,EFE组CD44v6蛋白的表达水平较生理盐水组分别下调47.16%、28.37%(P<0.05)。RT-PCR结果表明,EFE组CD44v6 mRNA的表达水平亦较生理盐水组低,下调16.44%(P<0.05)。结论蚯蚓纤溶酶对裸鼠人肝癌移植瘤的生长具有一定的抑制作用,与5-Fu存在一定的协同效应,并可以抑制黏附分子CD44v6的表达。展开更多
文摘目的:本实验探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)对体外培养的胃癌细胞株BGC-823凋亡的影响和机制.方法:将BGC-823细胞分为对照组、感染复数(MOI=20)病毒Ad-GFP的Ad-GFP组,重组腺病毒Ad-VEGF165转染的Ad-VEGF165组.应用流式细胞仪检测细胞凋亡的百分率,RT-PCR方法检测凋亡抑制基因Bcl-2mRNA的表达,免疫细胞化学方法检测Bcl-2蛋白的表达情况.结果:流式细胞仪测定显示Ad-VEGF165组的细胞凋亡率明显低于Ad-GFP组和对照组(4.6%±0.31% vs 8.37%±1.06%.7.73%±0.86%,P<0.01);RT-PCR和细胞免疫化学结果显示VEGF165转染BGC-823细胞后促进了细胞Bcl-2mRNA和蛋白的表达.Ad-VEGF165组Bcl-2mRNA和蛋白均高于对照组和Ad-GFP组(Bcl-2mRNA:0.761±0.05 vs 0.363±0.12.0.356±0.08;Bcl-2蛋白:1.010±0.08 vs 0.865±0.07,0.901±0.05;P<0.01).结论:VEGF165通过上调凋亡抑制基因Bcl-2及其蛋白的表达,来抑制血浆饥饿诱导的胃癌细胞的凋亡.
文摘目的探讨蚯蚓纤溶酶(earthworm fibrinolytic enzyme,EFE)对裸鼠人肝癌细胞移植瘤生长及CD44v6表达的影响。方法建立肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为生理盐水组、EFE组、5-Fu组及联合用药组,计算抑瘤率及两药相互作用系数(coefficient of drug in interaction,CDI),并行血常规检测评价EFE的副反应。同时采用免疫组化SP染色法、RT-PCR及Western blot方法观察EFE组及生理盐水组瘤组织中CD44v6的表达情况。结果与生理盐水组相比,EFE组和5-Fu组抑瘤率分别为20.53%和23.07%;联合用药组抑瘤率为54.20%,且CDI<1。血常规检测提示EFE对造血系统无明显副反应。免疫组化和Western blot结果显示,EFE组CD44v6蛋白的表达水平较生理盐水组分别下调47.16%、28.37%(P<0.05)。RT-PCR结果表明,EFE组CD44v6 mRNA的表达水平亦较生理盐水组低,下调16.44%(P<0.05)。结论蚯蚓纤溶酶对裸鼠人肝癌移植瘤的生长具有一定的抑制作用,与5-Fu存在一定的协同效应,并可以抑制黏附分子CD44v6的表达。