2019年东莞市厚街医院细菌耐药性监测分析

目的了解2019年该院临床分离细菌对抗菌药物的耐药性。方法收集2019年该院临床分离的1220株非重复菌株,采用纸片扩散法或自动化仪器法进行药敏试验,按相关标准判读药敏结果,采用WHONET5.6软件进行数据分析。结果1220株细菌中,革兰阴性菌占72.1%,革兰阳性菌占27.9%。较常见的5种细菌分别为大肠埃希菌(34.1%)、肺炎克雷伯菌(10.7%)、金黄色葡萄球菌(10.2%)、铜绿假单胞菌(7.0%)和凝固酶阴性葡萄球菌(6.2%)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为15.2%和65.8%。MRSA和MRCNS对各类抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)。未发现对万古霉素耐药的葡萄球菌。链球菌属细菌对红霉素、克林霉素耐药率高,未发现对万古霉素、青霉素耐药的菌株。产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌检出率分别为27.9%和26.9%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物最敏感,未发现耐药菌株。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为8.4%和12.2%,对头孢吡肟的耐药率最低(0.0%)。结论细菌耐药性具有地域特点,定期进行细菌耐药性监测有助于了解该院细菌耐药性的变迁,为临床经验用药和合理用药提供依据。

冠心病患者中采用不同血液检验指标的价值分析

选取2013年6月-2014年6月本院收治的100例冠心病患者为研究组，研究A组50例为心绞痛患者，研究B组50例为急性心肌梗死患者，同时选取同期健康体检者50例为对照组，均行血常规检测，并对检测结果进行分析。结果研究A组、研究B组RDW水平、hs-cTnT、CK-MB值水平均高于对照组（P〈0．05）。血液检测指标中RDW水平上升对冠心病患者预后具有一定负性影响，且心肌标志物中hs-cTnT可作为患者心肌损伤程度诊断的理想指标。

基于液相芯片技术建立快速检测6种临床常见血流感染厌氧菌的方法及评价

目的基于液相芯片技术建立一种可同时快速检测6种临床常见血流感染厌氧菌的方法。方法通过GenBank寻找脆弱拟杆菌、厌氧消化链球菌、具核梭杆菌、中间普雷沃菌、产气荚膜梭菌和痤疮丙酸杆菌的16S rDNA基因序列,经序列比对分析,选择菌内保守菌间特异的区域作靶序列,使用Primer 5.0软件设计特异性引物及探针,建立不对称多重PCR扩增体系,将PCR产物与偶联核酸探针的荧光微球混合物进行杂交,建立一种多重检测方法,并对该方法的特异度、灵敏度和重复性进行评价。收集2020年6月~2022年5月东莞市厚街医院阳性血厌氧培养瓶84例及阴性培养瓶16例,应用建立的方法进行检测,结果与传统培养法进行比较。结果6种厌氧菌靶基因序列经PCR扩增后,电泳成像清晰可见6条目标条带;经反应体系优化,生物素标记与非标记引物浓度比为4∶1时,选择退火温度56℃进行多重扩增,加入5μl PCR产物,52℃温育20 min检测效果最佳;各目标序列荧光强度中位值(median fluorescence intensity,MFI)>1000,无非特异性信号;最低检测限可达103cfu/ml~10^(4)cfu/ml;当菌液浓度为105cfu/ml时,批内及批间的变异系数分别在7.38%和11.10%以下;100例临床样本中6种厌氧菌的检测结果与培养法一致。结论成功建立一种快速、简便、高效的液相芯片方法,可同时检测6种常见血流感染厌氧菌。

外泌体在颅脑损伤中的研究进展

颅脑损伤(TBI)的致死率、致残率均较高,预后差,给患者及家庭乃至社会都带来极大的经济负担。由于计算机断层扫描、磁共振及格拉斯哥昏迷指数等都存在各自的缺陷,如何准确评估TBI的严重程度一直以来都困扰着临床。外泌体作为细胞间通信工具,广泛参与了调控多种神经系统疾病。由于其免疫原性低、循环半衰期长、能穿过脑血屏障,故有望成为诊断TBI的生物标志物及治疗TBI的特异性靶点。

早期2型糖尿病肾病与醛糖还原酶基因甲基化水平的临床研究

目的 探讨醛糖还原酶(AKR1B1)基因甲基化水平和早期2型糖尿病(T2DM)肾病蛋白尿之间的联系。方法 选取2020年5月至2022年4月期间东莞市厚街医院收治的40例T2DM合并蛋白尿阳性患者作为糖尿病肾病(DN)组,选择同时期39例诊断T2DM且尿蛋白阴性志愿者作为糖尿病(DM)组,进行前瞻性研究。比较两组患者的临床资料,亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)与AKR1B1基因甲基化水平,并分析AKR1B1基因甲基化水平与临床资料中差异有统计学意义的指标的相关性。结果 DN组患者糖化血红蛋白(HbA_(1c))、空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及尿微量白蛋白与肌酐比值(UACR)水平均高于DM组,肾小球滤过率(e GFR)低于DM组(均P<0.05);DN组AKR1B1甲基化水平低于DM组(P<0.05),两组MTHFR甲基化水平比较,差异无统计学差异(P>0.05);Pearson相关分析结果表明,AKR1B1甲基化水平与FBG、2 h PG、HbA_(1c)、Scr、BUN、UACR呈负相关,而与e GFR水平呈正相关(均P<0.05)。结论 AKR1B1基因DNA甲基化可能参与了DN的发生、发展过程,且AKR1B1甲基化水平与FBG、2 h PG、HbA_(1c)、Scr、BUN、UACR呈负相关,与eGFR水平呈正相关,可预估患者T2DM患者病情。

颅脑损伤外泌体microRNA差异表达分析

目的通过高通量测序技术检测颅脑损伤(TBI)患者外泌体microRNA(miRNA)的表达变化及探讨其临床意义。方法收集2020年1月至2022年12月期间东莞市厚街医院急诊科的颅脑损伤患者15例为颅脑损伤组,选择13例同期妇科、五官科和骨科的志愿者为对照组,提取外泌体,用透射电镜鉴定外泌体的形态、纳米流式检测仪分析外泌体粒径及Western blot检测标志蛋白鉴定外泌体。每组选择3例进行miRNA测序,筛选差异表达的基因,对靶基因进行GO分析和KIGG分析。在脑脊液和血清样本中用实时荧光定量PCR方法进行验证。结果成功从脑脊液中提取外泌体,透射电镜下观察到呈椭圆形双层膜结构的小囊泡;对照组和TBI组的平均直径分别为73.12 nm和75.38 nm,浓度分别为4.64×109paritcles/ml和1.49×1011paritcles/mL;Western blot检测出脑脊液中外泌体标记蛋白TGS101和CD9。测序结果显示共8个差异表达的miRNA,其中2个表达上调,6个表达下调。验证结果表明颅脑损伤患者脑脊液外泌体miR-29a-3P表达上调2.33倍,差异有统计学意义(t=3.603,P<0.05),miR-31-5P表达上调2.05倍,差异有统计学意义(t=2.273,P<0.05),miR-199a-5P表达下调0.32倍,差异无统计学意义(t=0.09,P>0.05);血清外泌体中miR-29a-3P表达上调1.95倍,差异有统计学意义(t=2.11,P<0.05),miR-31-5P表达上调2.01倍,差异有统计学意义(t=2.309,P<0.05),miR-199a-5P表达下调0.34倍,差异有统计学意义(t=2.825,P<0.05)。结论外泌体中miR-29a-3P和miR-31-5P有潜力作为辅助诊断TBI的生物标志物。

Lp-PLA2、S-100B蛋白水平联合检测在糖尿病周围神经病变中的诊断价值

目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、S-100B蛋白水平联合检测在糖尿病周围神经病变(DPN)中的诊断价值。方法回顾性分析2021年10月至2022年9月在东莞市水乡中心医院接受治疗的50例DPN患者的临床资料,并将其作为神经病变组,按照1∶1配对原则选择50例单纯糖尿病患者作为糖尿病组。另选取同期该院体检健康者50例作为对照组。收集3组的临床资料,采用免疫定量法检测血清Lp-PLA2、S-100B蛋白水平,Logistic回归分析DPN发生的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线评估血清Lp-PLA2、S-100B表达水平对DPN的诊断效能。结果各组收缩压、糖尿病病程、糖化血红蛋白、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖、运动神经传导速度(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。神经病变组的血清Lp-PLA2、S-100B水平显著高于糖尿病组和对照组(P<0.05),糖尿病组的血清Lp-PLA2、S-100B水平显著高于对照组(P<0.05)。MNCV、SNCV是影响DPN发生的独立保护因素,而Lp-PLA2、S-100B是影响DPN发生的独立危险因素(P<0.05)。血清Lp-PLA2、S-100B单独及联合诊断DPN的曲线下面积分别为0.847、0.780和0.906,灵敏度分别为72.92%、68.75%和83.33%,特异度分别为88.37%、79.07%和87.02%,二者联合检测优于Lp-PLA2、S-100B各自单独预测(P<0.05)。结论血清Lp-PLA2、S-100B在DPN患者中表达异常,二者联合可提高DPN的诊断效能。

支原体、衣原体及抗精子抗体检测在男性不育症中的应用价值

目的探讨支原体、衣原体和抗精子抗体的检测对男性不育症的应用价值。方法采用培养法、免疫层析法、ELISA法,对102例不育男性和42例已育男性进行支原体、衣原体和抗精子抗体的检测及精液常规的分析。根据结果分为单纯支原体或(和)衣原体阳性组71例,单纯抗精子抗体阳性组21例,支原体或(和)衣原体和抗精子抗体阳性组8例,支原体、衣原体和抗精子抗体阴性组44例,对4组的精液常规主要指标进行比较。结果不育男性支原体、衣原体、抗精子抗体阳性率明显高于已育男性(P<0.05);单纯支原体或(和)衣原体阳性组,单纯抗精子抗体阳性组及支原体或(和)衣原体和抗精子抗体阳性组的精子密度、活动率、活力明显低于阴性组,精子的畸形率、液化时间、白细胞数明显高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论支原体、衣原体的感染及抗精子抗体的产生对精液多项指标有明显影响,精液质量下降,从而引起男性不育症的发生。

非高密度脂蛋白胆固醇与传统血脂指标的相关性分析

目的：探讨非高密度脂蛋白胆固醇（non-HDL-C）与性别、年龄的关系，及其与TG（甘油三酯）、TC（总胆固醇）、HDL-C（高密度脂蛋白胆固醇）、LDL-C（低密度脂蛋白胆固醇）、ApoB的相关性。方法：回顾分析门诊体检1636例血脂结果，对其中1556例TG水平小于4．52mmol／L标本血脂结果进行回归分析，比较non-HDL-C、LDL-C与TC、TG、ApoB的相关性，探讨non-HDL-C与LDL-C在不同TG水平时临床意义的差别。结果：non-HDL-C水平在男、女中随年龄的变化一致，即64岁前随着年龄的增加，non-HDL-C浓度升高，随后出现下降；non-HDL-C与ApoB、TG的相关性大于LDL-C。在TG≤2．26mmol／L时，non—HDL-C与LDL-C高度相关，该相关性在TG〉2．26mmol／L时降低。结论：non—HDL-C在男、女中浓度存在差异，但在男、女中随年龄的变化一致，在TG≤2．26mmol／L时，non-HDL-C与LDL-C具有类似的临床意义，而在TG〉2．26mmol／L时，non-HDL-C更能反映致动脉粥样硬化的血脂因素。

自建与配套检测系统生化结果一致性探讨

目的探讨实现国产科美试剂在贝克曼LX20生化分析仪上与原装试剂测定结果一致性的方法。方法以贝克曼原装试剂测定混合血清作为量值传递载体,用其校准科美试剂后对RANDOX校准品赋值,并以赋值后的RANDOX校准品、科美试剂组成自建系统,与原装试剂系统进行检测结果的比对分析。结果在总蛋白(TP)、白蛋白(A lb)、血糖(G lu)、尿素(Urea)、胆固醇(Chol)、三酰甘油(TG)、尿酸(UA)7个项目中,除UA在低水平处与原装试剂差异较大外,其余各项目在其可报告范围内与原装试剂具有较好的一致性。结论通过量值传递后,在贝克曼生化分析仪上国产科美试剂具有与原装试剂临床意义一致的测定结果。

应用ROC曲线分析确定化学发光微粒子法检测TP-Ab灰区

目的确定化学发光微粒子法(CMIA)测定反应性梅毒血清的灰区范围。方法以梅毒螺旋体蛋白免疫印迹试验(TPWB)作为参考方法,对649份CMIA测定值S/CO在1~60的标本,应用ROC曲线确定S/CO的最佳临界点。结果CMIA测定梅毒抗体的灰区范围为1.000~6.815,S/CO为6.815时,敏感度为0.800,特异度为0.865。结论CMIA测定梅毒抗体值为1.000~6.815时,与确证试验TPWB结果不一致时,建议加做TPWB进行复查,以减少假阳性。

慢性前列腺炎并不育患者血清抗精子抗体定量测定分析

目的:探讨慢性前列腺炎并不育患者血清抗精子抗体与不育的关系,为临床治疗提供依据。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测80例慢性前列腺炎并不育患者(A组)血清抗精子抗体(AsAb),同时选择正常生育的慢性前列腺炎患者50例(B组)作对照。结果:A组80例,检出AsAb阳性37例,阳性率46.3%,抗精子总抗体(T-Ig)(126.25±45.47)U/ml,B组AsAb阳性6例,阳性率12.0%,T-Ig(41.25±14.20)U/ml,两组阳性率及抗精子总抗体比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:慢性前列腺炎并不育患者存在免疫性因素,ELISA方法敏感度高,操作简便,对临床合并前列腺炎的不育患者探求病因提供指导。

2型糖尿病患者尿液组织因子及其促凝血活性检测的意义

目的探讨尿液组织因子(TF)含量及其促凝血活性(PCA)在不同尿微白蛋白水平的2型糖尿病(DM)患者中的变化及其意义。方法 86名2型DM患者按照尿白蛋白/肌酐(UACR)比共分为3组,即UACR<30mg/g的正常蛋白尿组42例,30mg/g≤UACR<300mg/g的微量白蛋白尿组26例,UACR≥300mg/g的大量白蛋白尿组18例,21名健康体检者为对照组。ELISA法测定各组尿液TF含量和一步凝固法检测TF-PCA活性。常规检测空腹血糖、糖化血红蛋白、超敏CRP(Hs-CRP)、肾功能。结果 DM组TF含量和PCA活性随尿蛋白水平升高而升高,在不同糖尿病组别间存在差异;尿液TF活性与尿素、肌酐、胱抑素C、hs-CRP、UACR、空腹血糖呈正相关(P<0.05),与其他测定指标无相关性,而尿液TF含量仅与hs-CRP、UACR呈正相关。结论 2型DM尤其是早期糖尿病肾病患者尿液TF呈高表达,可能与糖尿病肾病的发病机制、病程进展相关。

应用ROC曲线分析确定ELISA检测抗-HBe灰区

目的应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析方法确定酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎e抗体(抗-HBe)的灰区,为临床判读提供合理的指导。方法 ELISA检测血清抗-HBe,留取S/CO介于0.5～1.7的标本,用美国雅培Axsym化学发光仪对其复检,结合临床症状及乙型肝炎病毒标志物定量结果,筛选结果可靠的标本,进行ROC曲线分析,根据ROC曲线分别确定其灰区的上、下限。结果根据ROC曲线分析法计算得出检测灰区为0.827～1.576。结论 ROC曲线法是设定ELISA检测灰区的较理想方法,非灰区部分具备较低的假阳性率及假阴性率,能增加不同医院间结果的可比性,减少不必要的医疗纠纷。

多项式线性评价在自建生化检测系统中的初步应用

目的考查该医院检验科自建生化检测系统中国产试剂的线性程度,探讨多项式线性评价在自建生化检测系统中的应用。方法利用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP6-A指南及EP6-A补充的方法推荐的多项式回归分析方法判断统计学标准的线性和非线性,考查自建生化检测系统中国产试剂的线性程度。结果调查的14个项目精密度皆符合要求,线性分析为线性1的有8个,分别为ALT、AST、ALP、TG、Chol、BUN、Cr和UA;为线性2的有5个,分别为GGT、HDL-C、LDL-C、Glu和Mg;非线性的为CK-MB,CK-MB试剂不符合临床质量要求已经淘汰。结论多项式回归评价线性科学、可靠,将线性评价和临床应用有机结合,提高了临床实验室对检测项目评价的实用性,有助于指导自建生化检测系统中国产试剂的使用。

按年龄调整D-二聚体临界点结合Wells评分对下肢深静脉血栓形成的诊断效能

目的评价D-Dimer Plus、Innovance D-Dimer及按年龄调整临界值方法联合Wells评分对下肢深静脉血栓形成(deep venous thrombosis,DVT)的诊断价值。方法对疑似诊断DVT的患者(538例)以Wells评分表进行评分并行D-Dimer Plus、Innovance D-Dimer方法检测,以影像学检查作为临床确诊手段。结果 Wells评分对DVT的诊断有较高的特异度,但灵敏度较低。Innovance D-Dimer方法对DVT的诊断效能较D-Dimer Plus方法高,有较佳的灵敏度及阴性预测值,均达98%以上。若以年龄调整诊断点,则Innovance D-Dimer方法在特异度及阳性预测值均有进一步提升,有较佳的诊断效能。结合D-二聚体检测方法与Wells评分对DVT进行诊断,D-Dimer Plus方法在阳性预测值及阴性预测值均有提升; Innovance D-Dimer方法的灵敏度、特异度及阴性预测值变化不大,阳性预测值有较大提高,但总体诊断效能以Innovance DDimer按年龄调整临界值的方法最优。结论以Innovance D-Dimer结合年龄调整临界点方法对DVT有较佳的诊断效能。

门诊病人凝血四项分析前的质量控制

目的观察门诊病人标本采集和处理对凝血实验质量的影响。方法对200例门诊病人静脉采血后进行凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和凝血因子I(F ib)测定。结果200例标本中25份有误差,误差率为12.5%,在25份误差中采血量与抗凝剂比例有误者7份,占总误差的28.0%;血液未与抗凝剂充分混匀,有肉眼可见微小凝块者8例,占总误差32.0%;标本溶血者2例,占总误差的8%;离心速度2 500 r/m in与3 000 r/m in PT,TT无明显差异(P>0.05),APTT,F ib差异显著(P<0.05)。结论标本采集、处理不当可导致凝血测定结果出现误差,应加强门诊病人标本采集和处理的指导,做好分析前的质量控制工作。

多种血清肿瘤标志物联合检测在肝癌诊断中的应用价值分析

目的探讨甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原125(CA125)、谷氨酰转移酶(GGT)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)联合检测在肝癌诊断中的应用价值。方法以80例肝癌患者作为观察组,50例良性肝病患者为良性肝病对照组和30例健康体检者作为正常对照组,对其血液中的AFP、CA125、GGT、AFU进行联合检测。结果观察组血清AFP、CA125、GGT、AFU水平明显高于良性肝病对照组及正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);良性肝病对照组血清AFP、CA125、GGT、AFU水平较正常对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组单项阳性检出率从高到低依次为:GGT(71.25%)、AFP(66.25%)、AFU(63.75%)、CA125(61.25%),均低于联合检测(93.75%)(P<0.05)。结论多种血清肿瘤标志物联合检测能明显提高阳性检出率,对肝癌的诊断具有重要的应用价值,值得临床推广应用。