血流感染病原菌的分布与耐药性分析

目的了解上海长海医院血流感染患者的病原菌分布及其对抗菌药物的耐药性,为临床合理用药提供依据。方法采用自动化仪器法和纸片扩散法(K-B法)对分离于2013年1月至2014年12月的菌株进行药物敏感性试验,参照2014版CLSI M100-S24标准判断药敏结果,替加环素的判读参照FDA标准,头孢哌酮-舒巴坦的判读参照头孢哌酮标准(2014年CLSI M100-S24)。结果从血流感染患者中共分离出非重复细菌1 048株,排名前3位的为大肠埃希菌(29.5%)、凝固酶阴性葡萄球菌(15.8%)和肺炎克雷伯菌(13.8%)。细菌总数位于前5位的科室分别为消化内科、血液内科、普外科、泌尿外科和感染科。不同科室分离出的细菌种类和数目不同。药敏结果显示,产超广谱β内酰胺酶(ESBL)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为63.8%和38.6%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌占该菌总数的77.6%。泌尿外科分离的大肠埃希菌对头孢菌素耐药率高于总体水平,而消化内科分离的大肠埃希菌对β内酰胺类-酶抑制剂复合制剂和碳青霉烯类抗生素的耐药率高于总体水平和其他科室。血液内科、泌尿外科和神经外科分离的凝固酶阴性葡萄球菌对甲氧西林的耐药率较高,神经外科分离菌耐药率更为100%。烧伤监护室的肺炎克雷伯菌对所有检测抗菌药物的耐药率均高于总体水平,消化内科的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类和替加环素的耐药率高于总体水平。结论不同科室分离出的血流感染细菌分布及其对常用抗菌药物的耐药性呈现不同特点,应加强监测各重点病区的病原菌分布及其耐药性,以指导抗生素的合理应用。

化学法建立溃疡性结肠炎动物模型的研究进展

近年来,随着我国居民饮食的精细化及高脂饮食摄入量的增加,溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的发病率呈上升趋势,逐渐成为常见消化系统疾病和慢性腹泻的重要原因.该病反复发作,迁延不愈,部分患者可进一步发展为结肠癌.目前,关于UC的病理机制尚不完全清楚,临床上多使用抗炎药物对其进行,但疗效均不理想.因此,建立简便有效的动物模型对深入研究UC的发病机制及新的治疗方案具有重要意义.建立UC动物模型的方法有多种,本文针对实验常用动物大鼠、小鼠,就化学物质诱导法建立UC模型的机制、特点及其应用进行综述.

胃肠道平滑肌细胞作为eNOS基因转移靶细胞的研究

目的:构建内皮型一氧化氮合酶(eNOS)腺病毒表达载体,介导eNOS在胃肠道平滑肌细胞中稳定表达并评价表达产物eNOS的酶学活性.方法:构建牛eNOS的重组腺病毒表达载体Ad-eNOS,感染体外培养的猫下段食管及胃底部平滑肌细胞,采用Western blot、RT-PCR技术检测eNOS在平滑肌细胞中的表达,测定基因转移后NOS活性以及一氧化氮(NO)产量,并研究不同施加因素对NOS活性及NO合成的影响.结果:Ad-eNOS可高效感染体外培养的胃肠平滑肌细胞(MOI=50,感染效率=74%),Western blot、RT-PCR结果证实eNOS在平滑肌细胞中高效表达.Ad-eNOS感染细胞后基础NOS活性比感染前显著增高(93±13 vs 47±13 nkat/L,P＜0.05),培养液中累积的NO增加了3倍(45±13 vs16±7μmol/L,P＜0.05).分别加入L-精氨酸(10-4mol/L)、钙离子(10-4 mol/L)、EGTA(钙离子螯合剂,10-4 mol/L)及L-NAME(NOS抑制剂,10-3mol/L)后,NOS活性分别为94±8,173±25,29±6,58±11 nka/L,NO含量分别为48±14,106±18,6±2,17±11 μmol/L.结论:构建的重组腺病毒Ad-eNOS能够高效介导eNOS基因在消化道平滑肌细胞中表达,表达产物eNOS活性受钙离子浓度调节,其作用底物L-精氨酸并不是NO合成的限速步骤.