玉米矮花叶病毒HC-Pro的纯化及抗血清制备

本实验提纯了玉米矮花叶病毒 ( MDMV)的辅助成份—蛋白酶 ( HC- Pro) ,并制备了其抗血清。MDMV HC- Pro的分子量约为 57k D,提纯产量为 0 .3mg/ 10 0 g病叶。琼脂免疫双扩散测定证明MDMV HC- Pro抗血清的效价为 1∶ 16;微量免疫沉淀法测定时其效价为 1∶ 10 2 4。该抗血清只与MDMV HC- Pro有明显的反应 ,与健康玉米汁液和 MDMV无反应。MDMV HC- Pro抗血清可以专化性地抑制 HC- Pro的蚜传活性。

应用双倍PCR技术快速检测大豆胞囊线虫

描述了一种基于双倍PCR技术 ,用种特异性引物快速鉴定大豆胞囊线虫方法。应用两组引物扩增胞囊线虫的rDNA。第一组引物含有2个通用引物D3A和D3B ,用于扩增大亚基核糖体基因(28SrDNAgene)的D3扩展区 ;第二组引物包括大豆胞囊线虫种特异性引物GlyF1和一个通用引物rDNA2,用于扩增ITS2区的片断和部分28S基因。用此双倍PCR扩增技术检测了来自中国、俄罗斯、美国和巴西的53个大豆胞囊线虫群体 ,结果表明 ,用两组引物进行双倍PCR扩增 ,所有53个大豆胞囊线虫群体都产生两个明显的片断(181bpand345bp) ,其中181bp片断是SCN特异性引物GlyF1和rDNA2扩增出大豆胞囊线虫中特异性片断。在所测试的其它胞囊线虫群体 ,仅仅扩增出345bp的片断 ,而不能扩增出大豆胞囊线虫的特异性片断。用该项技术能从大豆胞囊线虫的单个胞囊或单头二龄幼虫的微量DNA中 ,扩增出大豆胞囊线虫的特异性片断 。