微波技术在烟草游离态及蛋白质结合态氨基酸分析中的应用研究

研究了微波萃取烟草中游离氨基酸和微波水解烟草蛋白质的样品前处理方法,对微波萃取和微波水解条件进行了优化。微波萃取后的游离氨基酸及微波水解后的氨基酸总量采用氨基酸分析仪测定,蛋白质中的氨基酸用差减法计算。微波萃取氨基酸的最佳条件为:盐酸浓度0.05 mol·L-1,物料比1∶20,微波萃取温度50℃,微波萃取时间10 min,该条件下得到的游离氨基酸萃取率与超声30 min的结果基本一致;微波水解蛋白质的最佳条件为:盐酸浓度6 mol·L-1,物料比1∶100,水解温度140℃,水解时间60 min,与传统水解24 h的结果基本一致。用微波辅助法萃取烟草中的游离氨基酸及水解烟草蛋白质,样品前处理时间大大缩短,分析结果令人满意。

有机-无机复混肥施用对广西典型烟田土壤肥力及烟草品质的影响

采用田间试验并选择典型高肥力、低肥力烟田土壤,设置茶籽粕+无机肥(T)、菜籽粕+无机肥(R)和花生粕+无机肥(P)3个处理,研究有机-无机复混肥施用对广西典型烟田土壤肥力和烟草品质的影响。结果表明:有机-无机复混肥施用可提高土壤微生物活性,加速有机物料矿化,促进土壤速效养分积累,改善土壤结构,尤其在低肥力水平下花生粕的添加表现最为明显;能促进总糖、钾、氯等元素在烟草中的积累,但有机物料添加对烟草品质的影响明显低于初始肥力烟田土壤。高肥力土壤有助于烟草中钾、氯等元素积累,但总糖、还原糖、糖碱比均显著低于低肥力烟田土壤。针对烟草工业需求,在实际生产中应重点关注中、低产田土壤,结合肥料调控开展优质烟叶原料生产。

烟草根黑腐病拮抗菌的分离鉴定和生防作用特性研究

为挖掘对烟草根黑腐病菌有较强拮抗效果,且可在烟株根部稳定定殖的生防菌资源,以烟草根黑腐病菌为靶标,利用稀释涂布法和平板对峙法分离筛选出高效拮抗活性菌株,对其进行系统发育分析以及粗脂肽抑菌活性检测;并运用PCR技术检测拮抗细菌的脂肽编码基因,利用趋化性及生物膜成膜等试验研究烟草根系分泌物及其产生的各种有机酸对拮抗菌根部定殖的影响。结果表明:从烟草根际土壤中分离得到两株Thielaviopsis basicola高效拮抗菌株S2-1和SNSY15-5,分子鉴定表明,S2-1和SNSY15-5均为芽孢杆菌属细菌;拮抗菌S2-1和SNSY15-5脂肽粗提物对T.basicola毒力较强,EC 50值分别为1.93和2.56 mg·mL^(-1),SNSY15-5含有参与脂肽类家族细菌素(bmyB)、生物素操纵子(bioA)和假定蛋白(yngG)合成的基因;S2-1菌株中含有参与脂肽类家族生物素操纵子(bioA)合成的基因;烟草品种K326根系分泌物产生的苹果酸对S2-1和SNSY15-5有较强的吸引作用,S2-1和SNSY15-5在苹果酸中的数量分别达到63.35×10^(4) CFU·mL^(-1)和42.35×10^(4) CFU·mL^(-1),K326烟草根系分泌物及其草酸可促进S2-1生物膜形成,而K326烟草根系分泌物及其柠檬酸则促进SNSY15-5生物膜形成。该研究结果为开发效果稳定的微生物菌剂提供理论基础。

烟草果胶和纤维素含量^(13)C MultiCP/MAS NMR同时测量

果胶和纤维素是烟草细胞壁的重要组成成分,其含量对烟草品质与安全性产生重要影响。传统分析方法难以实现果胶和纤维素的同时定量。本文在优化核磁共振波谱序列条件的基础上,采用固体^(13)C多重交叉极化/魔角旋转核磁共振波谱分析技术(^(13)C MultiCP/MAS NMR)建立了烟草果胶和纤维素含量的同时测量新方法。方法以聚半乳糖醛酸和微晶纤维素为标准物质,以3-(三甲基甲硅烷基)丙酸-d4钠盐(TMSP)做为内标物质,分别建立内标法标准曲线,相关系数R2为0.999 0和0.998 2。果胶测量的检出限和定量限分别为0.38和1.28 mg·g^(–1),精密度(RSD,n=5)小于3.05%。纤维素测量的检出限和定量限为1.01和3.32 mg·g^(–1),精密度(RSD,n=5)小于2.74%。应用本方法测量烟梗、烟草薄片和烟叶等不同类型样品中的果胶和纤维素含量,并对比烟草行业标准方法的测量结果,果胶含量的相对误差在-0.95%至4.51%之间,纤维素含量的相对误差在0.77%至2.46%之间。表明^(13)C MultiCP/MAS NMR方法快速,准确,适合批量样品的分析测量,为果胶和纤维素等细胞壁类大分子的同时定量分析提供重要技术支持。

烟草甲研究进展

综述了近10年来烟草甲生物学、生态学及防治技术的研究新进展,并对近年来研究的热点类似酵母的胞内共生菌在烟草甲体内的作用、天然产物和物理技术在烟草甲防治中的应用以及烟草甲对PH3产生抗药性等作了重点介绍。

利用生物酶降解烟草果胶的研究

研究了果胶甲酯酶、果胶裂解酶、多聚半乳糖醛酸酶、纤维素复合酶处理烟叶,细胞壁物质降解后,烟叶中果胶的含量与结构以及中性糖比例的变化。结果显示:4种生物酶可以有效降低烟叶中细胞壁类物质的含量,最高降幅可达17.8%;果胶甲酯酶和果胶裂解酶处理后的烟样,果胶的甲酯度显著降低,多聚半乳糖醛酸酶处理后果胶甲酯度略有增大;酶处理后果胶中性糖的含量均比对照样增加,但不同种类酶处理的中性糖比例有区别。果胶裂解酶和纤维素酶处理后,烟叶中性香气物质总量(不含新植二烯)分别提高了24.4%和21.9%。

硫酰氟熏蒸贮存片烟技术研究

研究了硫酰氟熏蒸对片烟质量的影响,并测定了硫酰氟熏蒸后片烟中氟的残留量。结果表明:硫酰氟的使用剂量为20 g/m3,熏蒸120 h,即CT(浓度与时间的乘积)值为2400时,烟草甲成虫、幼虫、蛹及卵全部死亡;硫酰氟处理对片烟常规化学成分影响不明显,总植物碱稍有下降;硫酰氟对片烟的质量无不良的影响;硫酰氟熏蒸后,片烟中氟的残留量增加幅度为3.1 mg/kg。

亚硝酸盐清除剂阻断烟草特有亚硝胺形成的研究

[目的]研究清除剂对烟草特有亚硝胺(TSNAs)形成的阻断作用。[方法]在pH为5.5的等物质的量比亚硝酸钠-降烟碱溶液中,分别添加6种不同的亚硝酸盐清除剂,考察各添加剂对溶液中亚硝化产物N-亚硝基降烟碱(NNN)形成的抑制效率。[结果]抗坏血酸、咖啡酸和阿魏酸能有效阻断NNN的形成,当添加剂-亚硝酸盐物质的量比为3.0∶1.0时,抑制率超过90%;二氢咖啡酸、儿茶素、绿原酸的抑制率均超过50%。将6种添加剂应用于混合型卷烟烟丝中进行烟草基质试验,结果表明,咖啡酸、阿魏酸、二氢咖啡酸和儿茶素等是TSNAs形成的有效抑制剂,当添加剂-亚硝酸盐物质的量比为3.0∶1.0时,抑制率均超过50%。[结论]咖啡酸、儿茶素和阿魏酸既能抑制pH=5.5溶液中NNN的形成,也可阻断烟草基质系统中TSNAs的形成。

BABA诱导烟草幼苗抵御干旱胁迫的研究

β-氨基丁酸(BABA)是一种高效的植物诱抗剂,能够增强植物对多种胁迫的抵御能力。通过施加外源BABA来减轻干旱胁迫对烟草幼苗的毒害,并从渗透调节物质,抗氧化酶系统来探讨其作用机理。结果表明,在干旱胁迫下,5 mmol·L-1 BABA可以有效地改善烟草幼苗生长状况,提高其相对含水量及存活率。BABA预处理不仅显著提高干旱胁迫下烟草幼苗渗透调节物质可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸含量,还增强烟草幼苗超氧化物酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性。此外,BABA预处理提高干旱胁迫下烟草幼苗过氧化氢(H2O2)含量,降低丙二醛(MDA)含量。综上,BABA诱导烟草幼苗抵御干旱胁迫是诱导植物渗透调节物质累积及抗氧化酶活性调节的综合结果。

BABA诱导烟草抵御高盐胁迫的初步研究

通过外源BABA处理观察其对高盐胁迫下烟草生长的调节作用,并从抗氧化系统和相关基因表达探讨其作用机理。结果表明:在高盐胁迫下,外源0.2 mmol/L BABA和0.5 mmol/L BABA处理均能显著促进烟草的生长,根长和鲜重均显著增加;与盐胁迫组相比,外源BABA处理能显著提高高盐胁迫下烟草幼苗体内还原型谷胱甘肽(GSH)、脯氨酸、叶绿素和H2O2的含量,同时还能增加烟株超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸还原酶(APX)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性;外源BABA还可通过降低高盐胁迫下烟株丙二醛(MDA)含量和相对电导率值来减轻高盐胁迫对细胞膜的损害。半定量PCR结果表明:BABA能够诱导脱落酸(ABA)调控基因Nt RAB18、Nt ERD10D和Nt ERD10B表达。由此认为BABA提高烟草的耐盐性是通过激发植物体内抗氧化系统和通过ABA途径诱导逆激基因上调的综合结果。

烟草甲体内共生菌的初步研究

烟草甲Lasioderma serricorne(Fabricius)体内有类似酵母的胞内共生物YLS,其对烟草甲有重要的营养和解毒作用.该文对YLS的细胞和菌落形态进行了观察,并通过菌落测定、液体培养和细胞质量测定等方法,以探明YLS的最适生长温度.结果表明:28～35℃比较适宜YLS的生长,35℃为最佳生长温度,而36～48 h是研究YLS的最佳时间.

分子信号调节物对烟草上部叶烟碱及其它化学成分影响研究初报

研究两种创伤信号分子调节剂(2-甲基-4-氯苯氧乙酸钠IRa,2-甲基-4-氯苯氧乙酸IRb)对烤烟打顶后烟叶中烟碱含量的影响。结果表明:两种信号分子调节剂能弱化打顶后烟叶中烟碱含量的增加,其效果IRa>IRb。在施N量较高的情况下处理株叶片氮含量低于对照株,对总糖、还原糖、钾、氯、石油醚提取物没有影响。结果还表明两种信号分子调节剂能促进上部叶的叶面积增加。

BABA诱导烟草抵御镉胁迫初步研究

通过施加外源BABA来减轻镉胁迫对烟草的毒害,并从抗氧化系统、离子含量及相关基因表达来探讨其作用机理。结果表明:0.2 mmol/L BABA和0.5 mmol/L BABA能使镉胁迫下的烟苗根长、鲜重及叶绿素含量显著增加;外源BABA处理不仅能显著提高镉胁迫下烟苗脯氨酸、谷胱甘肽(GSH)、还原型抗坏血酸(As A)、可溶性糖和总酚含量,还能增强超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸还原酶(APX)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性,降低过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量,可以促进烟苗根部镉的积累及降低地上部镉的含量。实时定量PCR结果表明:BABA参与Nt IRT1、Nt Nramp5、Nt PCS1、Nt GSH1、Nt HMA4、Nt PCR1、Nt PDR5b基因表达调控。综合来看,BABA缓解烟草镉胁迫可能是激发植物体抗氧化系统、降低地上部镉的积累及调节相关基因表达的综合结果。

茶氨酸诱导烟草幼苗抵御干旱胁迫的研究

通过施用茶氨酸来减轻干旱胁迫对烟草幼苗的毒害,并从抗氧化物质和抗氧化酶来探讨其作用机理。结果表明,在干旱胁迫下,0.25 mmol·L-1茶氨酸能显著改善烟草幼苗的生长情况,提高其存活率;外源茶氨酸预处理不仅能显著提高干旱胁迫下烟草幼苗谷胱甘肽(GSH)含量,还参与调节烟草幼苗超氧化物酶(SOD)过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸还原酶(APX)活性,降低相对电导率、脯氨酸、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量。茶氨酸诱导烟草幼苗抵御干旱胁迫是通过激发植物体抗氧化物质及抗氧化酶活性调节的综合结果。

氯化血红素诱导烟草抵御碱胁迫的初步研究

为研究外源氯化血红素(hemin)处理对碱胁迫下烟株生长和生理特性的影响,以云烟87为材料,从抗氧化系统、渗透调节系统、离子含量以及相关基因表达来探讨hemin对烟草抗碱的作用机理。结果表明:外源施加1μmol/L hemin和2μmol/L hemin能促进碱胁迫下烟株的生长;降低丙二醛(MDA)含量和相对电导率,提高超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸还原酶(APX)活力,同时增加叶绿素、脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白等含量,提高根系活力;还可以减少烟株体内Na^+积累,增加K^+、Ca^(2+)、Mg^(2+)吸收。相对定量PCR结果表明,hemin处理后Nt PDR1、Nt PDR3、Nt NAC和Nt GSH1基因表达上调。综上所述,hemin缓解烟株碱胁迫伤害是激发抗氧化系统和渗透调节系统、加强离子转运及调节相关基因表达综合作用的结果。

烟草诱导抗性的研究进展

综述了系统获得性抗性和诱导系统抗性在烟草上的研究现状,尤其是在不同激发子所诱导的烟草系统获得性抗性的信号转导、保护性酶系活性、与抗病性相关的物质变化等方面。

烟草苯丙氨酸解氨酶活力与多酚含量的关系研究

[目的]测定不同品种烟草幼苗中苯丙氨酸解氨酶(PAL)活力、比活力以及多酚含量,研究PAL活力与多酚含量的关系。[方法]3个烟草品种分别为西1#、东2#和中3#。[结果]不同酶提取缓冲液对测定的PAL活力值有影响,其中10%PVP的效果最好;烟草幼苗中的多酚含量高,则其PAL活力及比活力都较高,而且PAL活力与酶提取液中β-巯基乙醇的浓度呈正向相关关系。在试验材料中,多酚含量没有达到抑制PAL活力的水平。[结论]该研究可为探索改进PAL活力测定方法,明确多酚含量与PAL酶活力间的关系提供参考依据。

烟草中高级烷醇·植物甾醇和茄尼醇含量及形态分布研究

采用气相色谱法,同时分析测定了不同类型、不同品种、不同产地及不同部位的烟草样品中高级烷醇、植物甾醇及茄尼醇的含量,得出:不同类型烟草样品中的高级烷醇、植物甾醇及茄尼醇均主要以酯结合态的形式存在,植物甾醇和茄尼醇的含量呈现出了特定的规律,即白肋烟及烤烟中植物甾醇和茄尼醇含量较高,香料烟其次,而雪茄烟含量最低。不同品种烟叶中3类组分均以K326及红大的含量较高,云87、NC82及云85中含量较低。不同产地烟叶中高级烷醇、植物甾醇及茄尼醇含量分布均呈现出明显的地域性差异。不同部位烟叶叶片,植物甾醇以及茄尼醇的含量变化规律为:中部叶>上部叶>下部叶。

美国烟草用农药的健康风险评估及残留管理

烟草是美国一种重要的农作物,其经济重要性在美国农业上排名第九.在烟草生产中,单位面积上农药使用较多,名列第六,在马铃薯、番茄、柑橘、葡萄和苹果之后.

氰根与烟草过氧化物酶作用的傅里叶变换红外光谱研究

应用傅里叶变换红外光谱以及曲线拟合等技术,研究了氰根与烟草过氧化物酶同工酶Ⅱ(TOPⅡ )作用前后的二级结构的变化情况,定量地分析了各个二级结构的变化情况。结合氰根对TOPⅡ活性的抑制情况,从二级结构的角度解析了烟草过氧化物酶的结构与活性之间的关系。