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植物抗病性的分子生物学研究进展 被引量:45
1
作者 张德水 陈受宜 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期97-103,共7页
植物抗病性的分子生物学研究进展张德水陈受宜(中国科学院遗传研究所植物生物技术开放实验室,北京100101)MOLECULARBIOLOGYOFPLANTDISEASERESISTANCEZhangDeshuiChe... 植物抗病性的分子生物学研究进展张德水陈受宜(中国科学院遗传研究所植物生物技术开放实验室,北京100101)MOLECULARBIOLOGYOFPLANTDISEASERESISTANCEZhangDeshuiChenShouyi(PlantBiot... 展开更多
关键词 植物 抗病性 分子生物学
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植物的功能基因组学研究进展 被引量:43
2
作者 李子银 陈受宜 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期57-60,共4页
基因组研究计划包括以全基因组测序为目标的结构基因组学和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学两方面的内容。目前基因功能鉴定的方法主要有 :基因表达的系统分析(SAGE)、cDNA微阵列、DNA(基因)芯片、蛋白组技术以及基于转座子标签和T_... 基因组研究计划包括以全基因组测序为目标的结构基因组学和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学两方面的内容。目前基因功能鉴定的方法主要有 :基因表达的系统分析(SAGE)、cDNA微阵列、DNA(基因)芯片、蛋白组技术以及基于转座子标签和T_DNA标签的反求遗传学技术等。 展开更多
关键词 功能基因组学 SAGE CDNA微阵列 蛋白组 植物
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马尾松随机扩增多态性DNA标记的分离研究 被引量:10
3
作者 魏令波 唐谦 +2 位作者 郑先武 顾万春 李小兵 《林业科学》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期476-480,T001,共6页
马尾松随机扩增多态性DNA标记的分离研究魏令波,唐谦,郑先武,顾万春(中国林业科学研究院林业研究所北京100091)李小兵(中国科学院遗传研究所植物生物技术开放实验室北京100012)关键词马尾松,RAPD,Mend... 马尾松随机扩增多态性DNA标记的分离研究魏令波,唐谦,郑先武,顾万春(中国林业科学研究院林业研究所北京100091)李小兵(中国科学院遗传研究所植物生物技术开放实验室北京100012)关键词马尾松,RAPD,Mendelian分离随机扩增多态性DNA... 展开更多
关键词 马尾松 随机扩增多态性 DNA 遗传标记
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RAPD重建的大豆属植物的亲缘关系 被引量:35
4
作者 惠东威 庄炳昌 陈受宜 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1996年第6期460-468,共9页
利用8种RAPD引物(OPH-2、OPH-3、OPH-5、OPH-12、OPH-15、OPH-16、OPH-18和OPH-20)对大豆属的21份植物材料,其中包括Glycine亚属的10个种和Soja亚属的3个种,进... 利用8种RAPD引物(OPH-2、OPH-3、OPH-5、OPH-12、OPH-15、OPH-16、OPH-18和OPH-20)对大豆属的21份植物材料,其中包括Glycine亚属的10个种和Soja亚属的3个种,进行了基因组指纹图谱构建。通过对获得的基因组指纹图谱的量化分析,利用Unweightedpairgroupwithmathematicaverage(UPGMA)对大豆属中的各个种进行了亲缘关系重建。重建的亲缘关系表明:G.tomentella种中存在3种不同的进化类型,其分化距离已大于某些种种间的分化距离,它们可能是被形态遮蔽的3个种。Soja亚属内3个种的分化关系同前人的研究推断相同,其亲缘关系很近,这一结果支持将这3个种归并为一个种的观点。但是重建的亲缘关系未能显示出大豆属两个亚属的划分格局。 展开更多
关键词 大豆属 亲缘关系 RAPD
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植物盐胁迫应答的分子机制 被引量:38
5
作者 沈义国 陈受宜 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期365-369,共5页
:植物对盐胁迫的耐受反应是个复杂的过程 ,在分子水平上它包括对外界盐信号的感应和传递 ,特异转录因子的激活和下游控制生理生化应答的效应基因的表达。在生化应答中 ,本文着重讨论负责维持和重建离子平衡的膜转运蛋白、渗调剂的生物... :植物对盐胁迫的耐受反应是个复杂的过程 ,在分子水平上它包括对外界盐信号的感应和传递 ,特异转录因子的激活和下游控制生理生化应答的效应基因的表达。在生化应答中 ,本文着重讨论负责维持和重建离子平衡的膜转运蛋白、渗调剂的生物合成和功能及水分控制。这些生理生化应答最终使得液泡中离子浓度升高和渗调剂在胞质中积累。近年来 ,通过对各种盐生植物或盐敏感突变株的研究 ,阐明了许多盐应答的离子转运途径、水通道和物种特异的渗调剂代谢途径 ,克隆了其相关基因并能在转基因淡水植物中产生耐盐表型 ;另一方面 ,在拟南芥突变体及利用酵母盐敏感突变株功能互补筛选得到一些编码信号传递蛋白的基因 ,这些都有助于阐明植物盐胁迫应答的分子机制。 展开更多
关键词 盐胁迫 盐生植物 离子平衡 功能互补法 分子机制 耐受反应
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从植物细胞核分离大分子量核DNA 被引量:9
6
作者 邱芳 伏健民 王斌 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第11期1204-1207,共4页
研究了从植物中分离百万碱基对级大分子量核DNA的方法。该方法利用差速离心分离植物细胞核,经低熔点琼脂糖块或低熔点琼脂糖微珠包埋,蛋白酶K原位裂解后制备大分子量核DNA。结果表明,选择不同生长时期的材料和不同的包埋细胞核方式... 研究了从植物中分离百万碱基对级大分子量核DNA的方法。该方法利用差速离心分离植物细胞核,经低熔点琼脂糖块或低熔点琼脂糖微珠包埋,蛋白酶K原位裂解后制备大分子量核DNA。结果表明,选择不同生长时期的材料和不同的包埋细胞核方式对大分子量核DNA的制备有很大的影响,由黄化苗或幼嫩的绿叶为材料分离细胞核,进行胶块包埋是制备大分子量核DNA的最佳条件。利用该法获得的DNA分子量在200kb-5.7Mb之间,主要集中在2.2~5.7Mb之间;每一胶块DNAE量为18~20μg。与包埋原生质体制备大分子量核DNA的方法相比,该方法获得的DNA纯度较高,去除了大部分细胞器DNA的污染;易于被限制性内切酶部分和完全消化,其消化结果具可重复性。该方法操作简单、适用植物种类广泛,用该方法从水稻(OryzasativaL.)、苹果(MaluspumilaMill.)、大豆(Glycinemax(L.)Merr.)、玉米(ZeamaysL.)等多种植物材料中成功地制备了大分子量核DNA。该方法制备的核DNA适用于植物的脉冲交变电泳基因组分析和构建人工细菌染色体文库和人工酵母染色体文库。 展开更多
关键词 植物 大分子量核DNA 脉冲交变电泳 细胞核 分离
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重叠克隆群的研究进展 被引量:3
7
作者 曲雪萍 王斌 《生物工程进展》 CSCD 1999年第3期2-6,共5页
重叠克隆群的研究近年来取得了迅速发展,并被进一步运用到基因组测序、基因精确定位、基因图位克隆以及基因组织结构与功能研究等方面。本文着重讨论了构建重叠克隆群的策略、一般过程,同时也对构建重叠克隆群过程中存在的问题。
关键词 重叠克隆群 基因组 测序 图位克隆
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高覆盖率水稻BAC库的构建及抗病基因相关克隆的筛选 被引量:25
8
作者 王文明 江光怀 +2 位作者 王世全 朱立煌 翟文学 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第2期102-128,共27页
利用含Xa4、xa5和xa13 3个水稻白叶枯病抗性基因的累加系IRBB56构建了一个水稻细菌人工染色体文库。该文库包含55 296个克隆,平均插入片段为132kb。按水稻基因组为450Mb计,该文库覆盖14倍基因组,筛选出任一水稻基因或序列的概率为99.... 利用含Xa4、xa5和xa13 3个水稻白叶枯病抗性基因的累加系IRBB56构建了一个水稻细菌人工染色体文库。该文库包含55 296个克隆,平均插入片段为132kb。按水稻基因组为450Mb计,该文库覆盖14倍基因组,筛选出任一水稻基因或序列的概率为99.99%。用均匀分布的3个叶绿体基因和4个线粒体基因克隆作探针筛选文库,结果显示该文库中含细胞器基因组DNA同源序列的克隆数小于1%。用分布于水稻3条不同染色体、分别与Xa4、xa5和xa13连锁的DNA标记筛选文库,分别检测出11~106个阳性克隆,为克隆这些基因打下了基础。 该文库对水稻基因组的高度覆盖率和较大的插入片段,非常适合于物理作图和基因的分离和克隆。 展开更多
关键词 细菌人工染色体(BAC)文库 基因组 克隆 抗病 水稻 抗病基因
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山菠菜胆碱单氧化物酶基因(CMO)的克隆与分析 被引量:49
9
作者 沈义国 杜保兴 +1 位作者 张劲松 陈受宜 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-6,共6页
甜菜碱是一类广泛存在于生物体内的渗透保护剂。高等植物中 ,甜菜碱的生物合成经由胆碱→甜菜碱醛→甜菜碱两步反应完成 ,其中第一步反应 ,也是甜菜碱生物合成的限速反应 ,由胆碱单氧化物酶 (CMO)催化。本研究以耐盐植物山菠菜 (Atriple... 甜菜碱是一类广泛存在于生物体内的渗透保护剂。高等植物中 ,甜菜碱的生物合成经由胆碱→甜菜碱醛→甜菜碱两步反应完成 ,其中第一步反应 ,也是甜菜碱生物合成的限速反应 ,由胆碱单氧化物酶 (CMO)催化。本研究以耐盐植物山菠菜 (Atriplexhortensis)为材料构建了盐胁迫下的cDNA文库 ,用菠菜CMOcDNA为探针从中筛选获得一个长 1 77kb的cDNA克隆 ,测序结果表明该克隆包含一个完整的开放读码框 ,编码一个由 438个氨基酸构成的多肽 ,与菠菜和甜菜CMO的氨基酸序列同源性分别为 81%和 72 %。同菠菜和甜菜中的CMO序列相比 ,山菠菜CMO基因 (AhCMO)也具有保守的Rieske Type[2Fe 2S]簇结合区和保守的多铁原子核结合域。对盐处理条件下山菠菜CMO基因转录水平的研究表明CMO基因在盐胁迫情况下表达量增加约 3倍。将CMO与 35S启动子连接后转化烟草 (Nictianatabacumvar .Xanthi) ,获得了具有一定耐盐性状的转基因植株 ,在 1 2 %NaCl的盐浓度下生长良好。 展开更多
关键词 山菠菜 甜菜碱 胆单氧化物酶 盐胁迫 干旱
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栽培大豆与半野生大豆杂种F_2群体中RFLP标记的偏分离及其形成原因的分析 被引量:31
10
作者 张德水 陈受宜 +1 位作者 惠东威 庄炳昌 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1997年第4期362-367,共6页
本文研究了大豆56个DNA限制性片段长度多态性(RFLP)标记在一栽培大豆/半野生大豆杂种F2群体中的分离。结果表明,25%的RFLP标记表现了偏分离,偏离的方向主要趋于栽培大豆亲本,其形成原因主要是存在着配子体选择... 本文研究了大豆56个DNA限制性片段长度多态性(RFLP)标记在一栽培大豆/半野生大豆杂种F2群体中的分离。结果表明,25%的RFLP标记表现了偏分离,偏离的方向主要趋于栽培大豆亲本,其形成原因主要是存在着配子体选择。这对研究大豆的遗传及育种选择等有着重要的指导意义。 展开更多
关键词 偏分离 大豆 RFLP标记 杂种群体
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大豆灰斑病1号生理小种抗性基因的RAPD标记 被引量:11
11
作者 董伟 杨庆凯 +2 位作者 沈义国 邹继军 陈受宜 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第10期48-51,共4页
以高抗品种东农9674 为父本, 以高感品种东农87-104 为母本, 杂交得到F2 代群体。该群体经人工接种灰斑病1号生理小种后, 分别从抗、感材料中取15 株的叶片提取DNA组成抗、感池, 用820 个10m er随机引物... 以高抗品种东农9674 为父本, 以高感品种东农87-104 为母本, 杂交得到F2 代群体。该群体经人工接种灰斑病1号生理小种后, 分别从抗、感材料中取15 株的叶片提取DNA组成抗、感池, 用820 个10m er随机引物进行RAPD多态性分析, 其中3个引物在抗、感池间出现稳定的多态性标记OPK03840, OPM171700, OPO10950, 并在F2 代个体中表现出抗性与多态性标记协同分离的趋势, 这三个标记与抗性基因Rf1 的连锁顺序为OPK03840-Rf1-OPM171700-OPO10950, 连锁距离分别为10.4cM-Rf1-13.8cM-26.1cM。 展开更多
关键词 大豆 灰斑病 抗性基因 RAPD 分子标记 育种 生理
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九个水稻耐盐突变体的RFLP分析 被引量:11
12
作者 张耕耘 郭岩 +2 位作者 刘凤华 陈受宜 陈少麟 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1994年第5期345-350,共6页
用6 个可能与水稻耐盐性有关的DNA 探针对来自两个品系的5 个耐盐突变株系、3 个耐盐突变体及1 个弱耐盐突变体进行RFLP分析。结果有8 个耐盐突变体(株系)检测到DNA 水平的变化,6 个探针检测到具多态性的突变株系(... 用6 个可能与水稻耐盐性有关的DNA 探针对来自两个品系的5 个耐盐突变株系、3 个耐盐突变体及1 个弱耐盐突变体进行RFLP分析。结果有8 个耐盐突变体(株系)检测到DNA 水平的变化,6 个探针检测到具多态性的突变株系(体)的数目分别为RG4:6 个;RG711:6 个;Rab16:5 个;Rab10E6:2 个;Rab21:1 个;SalT:2 个;表明RG4、RG711 及Rab16三个位点有可能与耐盐性突变相关。多态性图谱中70.8% 为2 个以上的酶切图谱同时显示多态性,说明多数突变是由缺失。 展开更多
关键词 水稻 耐盐突变体 RFLP 分析
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Inducible Expression of Translation Elongation Factor 1A Gene in Rice Seedlings in Response to Environmental Stresses 被引量:13
13
作者 李子银 陈受宜 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第8期800-806,共7页
Differences of gene expression between salinity_stressed and control rice ( Oryza sativa L. ssp. indica ) cultivar “Zhaiyeqing 8' were compared using differential display PCR (DD_PCR) technique. Sequence an... Differences of gene expression between salinity_stressed and control rice ( Oryza sativa L. ssp. indica ) cultivar “Zhaiyeqing 8' were compared using differential display PCR (DD_PCR) technique. Sequence analysis of one salt_inducible cDNA clone revealed that this clone represented a new member of rice translation elongation factor 1A (eEF1A) gene family and was tentatively named REF1A. Northern blot hybridization using REF1A fragment as a probe was performed to investigate the expression of rice translation elongation factor 1A gene in response to various environmental factors. It was observed that expression of the eEF1A gene in rice shoots was dramatically induced by salinity stress or exogenous application of abscisic acid (ABA). The induction of this gene by ABA stress occurred more quickly than that by salinity stress. In addition, expression of rice translation elongation factor 1A gene was also induced by drought (15% PEG6000), cold (4 ℃) or heat_shock (37 ℃) stresses. The results suggested that the induction of translation elongation factor 1A gene expression by environmental stresses might reflect the general adaptive response of rice plants to the adverse circumstances. 展开更多
关键词 RICE Differential display PCR Translation elongation factor 1A Environmental factors Differential expression
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蛋白激酶:一个飞速发展的领域 被引量:3
14
作者 巩学千 陈受宜 《生物工程进展》 CSCD 1996年第1期11-14,共4页
:近年来,蛋白激酶(ProteinKinase)的研究取得了飞速的进展,这主要是因为分子生物学技术的不断完善以及我们对蛋白激酶的了解不断加深。发现的蛋白激酶的数量爆炸般增长,这不仅仅表现在对人、动物以及酵母的研究上,... :近年来,蛋白激酶(ProteinKinase)的研究取得了飞速的进展,这主要是因为分子生物学技术的不断完善以及我们对蛋白激酶的了解不断加深。发现的蛋白激酶的数量爆炸般增长,这不仅仅表现在对人、动物以及酵母的研究上,对于植物蛋白激酶的了解也在深入。蛋白激酶的作用几乎无处不在。它的研究处于生命科学领域的重要位置。 展开更多
关键词 蛋白激酶 结构 功能
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大豆分子遗传图谱的构建和重要农艺性状基因定位
15
作者 刘峰 陈受宜 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第S3期143-143,共1页
关键词 大豆 遗传图谱 分子标记 端粒相关序列 QTL
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拟南芥色氨酸生物合成途径中PAI基因编码区5′端序列对基因表达的影响
16
作者 何奕昆 刘新仿 李家洋 《中国科学(C辑)》 CSCD 1999年第3期303-309,339-340,共7页
将 3个非等位PAI基因的启动子与其编码区 5′端序列及GUS报告基因拼接成表达质粒 ,并转化拟南芥 .GUS活性分析表明 ,PAI基因编码区 5′端序列对维持PAI启动子所驱动的GUS活性是必须的 ,有无该序列对GUS活性影响极大 ,在PAI1和PAI3中相差... 将 3个非等位PAI基因的启动子与其编码区 5′端序列及GUS报告基因拼接成表达质粒 ,并转化拟南芥 .GUS活性分析表明 ,PAI基因编码区 5′端序列对维持PAI启动子所驱动的GUS活性是必须的 ,有无该序列对GUS活性影响极大 ,在PAI1和PAI3中相差 6 0~ 1 0 0倍 ,PAI2中相差 1倍左右 .GUS组织化学定位有相似结果 ,具 5′端序列时 ,PAI启动子所驱动的GUS在植株的不同组织器官中有不同程度的表达 ,在叶片的叶肉细胞、保卫细胞中表达 ,但在无叶绿体的表皮细胞中不表达 .因此认为PAI基因的 5′端片段所编码的多肽确有PTP的功能 ,PAI基因产物主要在质体 (叶绿体 )中表现出活性 . 展开更多
关键词 色氨酸 生物合成 PAI基因 基因表达 拟南芥
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植物高纯度大分子量核DNA的快速、简便制备方法 被引量:8
17
作者 伏健民 邱芳 +2 位作者 谢纬武 李传友 王斌 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第23期2570-2572,共3页
大分子量DNA(Megabase-size)的制备是构建YAC(Yeast artificial chromosome),BAC(Bacterial artificial chromosome)等大分子量基因组文库的前提,是绘制大尺度物理图谱的基础,还可以应用于重复序列的宏观研究.但因DNA在制备过程中易被... 大分子量DNA(Megabase-size)的制备是构建YAC(Yeast artificial chromosome),BAC(Bacterial artificial chromosome)等大分子量基因组文库的前提,是绘制大尺度物理图谱的基础,还可以应用于重复序列的宏观研究.但因DNA在制备过程中易被机械剪切和核酸酶消解,所以制备大分子量DNA是比较困难的.最初制备植物大分子量DNA是采用低熔点琼脂糖包埋原生质体的方法,但存在明显的不足:(Ⅰ)植物原生质体的培养费时、费力、费财;(Ⅱ)适应范围有限;(Ⅲ)细胞器DNA污染严重.随后出现的包埋纯化后完整细胞核的制备方法,虽然较好地克服了包埋原生质体方法的缺点,但其制备步骤仍然繁琐,制备的大分子量DNA与细胞残渣、酚类物质(例如苹果)、细胞器DNA及小分子量核DNA混在一起,严重地干扰后续的分子生物学分析与操作.为此,我们利用脉冲电泳技术探索和建立了完善的高纯度大分子量核DNA的制备方法,能有效地克服上述缺点. 展开更多
关键词 DNA 植物 大分子量 制备 纯度
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用栽培大豆与半野生大豆间的杂种F_2群体构建基因组分子标记连锁框架图 被引量:33
18
作者 张德水 董伟 +2 位作者 惠东威 陈受宜 庄炳昌 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第12期1327-1330,共4页
遗传图谱的构建,是基因组研究中的重要环节,可为基因定位与克隆及基因组结构与功能等研究打下基础.大豆是主要的油料作物,也是植物蛋白的来源之一。
关键词 大豆 分子标记连锁图 F2群体 栽培 杂种 基因组
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大豆1,5-二磷酸核酮糖羧化酶小亚基基因的转录表达分析 被引量:13
19
作者 贺超英 王伟权 +3 位作者 东方阳 张劲松 盖钧镒 陈受宜 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第16期1375-1380,共6页
1,5-二磷酸核酮糖羧化酶小亚基基因rbcS在植物基因组中呈多基因家族存在. 大豆中分离的3个全长的rbcS cDNA在核苷酸和氨基酸序列上具有极高的相似性. Southern杂交分析表明1,5-二磷酸核酮糖羧化酶小亚基(EC4.1.1.39)在大豆中由4~8个成... 1,5-二磷酸核酮糖羧化酶小亚基基因rbcS在植物基因组中呈多基因家族存在. 大豆中分离的3个全长的rbcS cDNA在核苷酸和氨基酸序列上具有极高的相似性. Southern杂交分析表明1,5-二磷酸核酮糖羧化酶小亚基(EC4.1.1.39)在大豆中由4~8个成员的基因家族编码. Northern分析表明rbcS的表达具有明显的器官特异性. 在叶片中表达量极高而在根中检测不到. rbcS基因对许多外界因子如水杨酸、 盐胁迫和干旱处理具有明显的应答反应. 但不同浓度的水杨酸和NaCl对rbcS基因的转录有不同程度的诱导. rbcS基因表达量分别在2.0 mmol/L的水杨酸和0.4% NaCl处理24 h时最高, 为相应对照的2.5~3.0倍. rbcS的转录具有明显的昼夜节律变化, 而且这种节律受低温和光照的影响. 展开更多
关键词 大豆 1 5-二磷酸核酮糖羧化酶小亚基基因 小杨酸 水分胁迫 昼夜节律 基因表达
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大豆中NBS类抗病基因同源序列的分离与鉴定 被引量:20
20
作者 贺超英 张志永 陈受宜 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1017-1021,共5页
植物抗病基因的克隆研究对于植物抗病育种和抗病机制的理解具有重要意义.根据预测结构域可将已知植物抗病基因分为 4类,其中以 NBS(nucleotide binding site)结构域为主. NBS结构域包括 P W(... 植物抗病基因的克隆研究对于植物抗病育种和抗病机制的理解具有重要意义.根据预测结构域可将已知植物抗病基因分为 4类,其中以 NBS(nucleotide binding site)结构域为主. NBS结构域包括 P W(激酶1a)、激酶2a和激酶3a.这为利用同源技术克隆植物抗病基因提供了可能.根据烟草抗花叶病毒N基因和拟南芥抗丁香假单孢杆菌RPS2基因设计兼并引物,从大豆抗花叶病毒品种科丰1号的基因组中扩增获得358个克隆,鉴定出4个通读的且与抗病基因NBS结构域同源的片段:KNBS1,KNBS2,KNBS3和KNBS4.Southern杂交表明NBS类抗病基因在大豆中为多拷贝家族;RFLP分析将KNBS4定位于F连锁群,而KNBS2则与大豆抗花叶病毒基因Rsa的SCAR标记同位于J连锁群.Northern分析表明KNBS2类在大豆的根、茎和叶中为低丰度组成型表达,这为最终克隆大豆抗病基因打下了基础. 展开更多
关键词 大豆 NBS结构域 抗病基因同源序列 连锁群定位 抗病机制 基因克隆 序列分离
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