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白喉和破伤风类毒素抗原ELISA检测方法的建立 被引量:4
1
作者 谭亚军 夏德菊 +5 位作者 李喆 晁哲 田霖 董国霞 侯启明 马霄 《中国医药生物技术》 2018年第6期488-492,共5页
目的建立定量检测白喉和破伤风类毒素抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法分别采用白喉、破伤风单抗包被酶标板,兔抗白喉、破伤风多抗作为二抗,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG抗体作为酶标抗体,以平行线法建立定量检测白喉和破伤... 目的建立定量检测白喉和破伤风类毒素抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法分别采用白喉、破伤风单抗包被酶标板,兔抗白喉、破伤风多抗作为二抗,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG抗体作为酶标抗体,以平行线法建立定量检测白喉和破伤风类毒素抗原含量的夹心ELISA法,并进行方法学验证。结果两种定量检测ELISA方法的验证结果均符合规定。检测白喉类毒素抗原ELISA方法的定量限为8.90×10-4Lf/ml,回收率为98.35%,批内变异系数(CV)≤10.59%,批间CV≤13.51%;检测破伤风类毒素抗原ELISA方法的定量限为2.13×10^(-3)Lf/ml,回收率为107.28%,批内CV≤13.96%,批间CV≤10.06%。结论建立了白喉、破伤风类毒素抗原ELISA检测方法,该法特异性强、准确度高、重复性好,可用于白喉破伤风疫苗产品的质量控制和生产过程控制。 展开更多
关键词 白喉 破伤风 抗原 白喉-破伤风菌苗 酶联免疫吸附测定
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新型百日咳疫苗研究进展 被引量:12
2
作者 骆鹏 马霄 《微生物学免疫学进展》 2018年第5期91-97,共7页
百日咳(whooping cough)是一种由百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)感染所引起的急性呼吸道传染病,严重时可导致婴幼儿死亡。近年来百日咳的复发流行表明,百日咳的防控效果不理想,现有疫苗的保护力衰减是其重要的原因,亟需研发新型百... 百日咳(whooping cough)是一种由百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis)感染所引起的急性呼吸道传染病,严重时可导致婴幼儿死亡。近年来百日咳的复发流行表明,百日咳的防控效果不理想,现有疫苗的保护力衰减是其重要的原因,亟需研发新型百日咳疫苗。现从不同研发角度对加强免疫、提高产能和优化工艺以及对全细胞百日咳疫苗(whole-cell pertussis vaccine,w P)、无细胞百日咳疫苗(acellular pertussis vaccine,a P)的改进,新抗原来源形式、应用新运送系统、新佐剂的新型百日咳疫苗作一概述。 展开更多
关键词 百日咳鲍特菌 疫苗 全细胞百日咳疫苗 无细胞百日咳疫苗
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重组金黄色葡萄球菌肠毒素A协同增强破伤风类毒素的免疫原性研究
3
作者 王丽婵 马霄 +4 位作者 张华捷 谭亚军 徐颖华 张庶民 侯启明 《中国医药生物技术》 2013年第3期188-191,共4页
目的重组超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)与Al(OH)3佐剂联合应用协同增强破伤风类毒素(TT)的免疫原性观察。方法将高、低两个剂量的TT分别与高、中、低3个剂量的重组SEA同时吸附一定浓度的Al(OH)3作为样品组,同时设置高、低剂量TT分... 目的重组超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)与Al(OH)3佐剂联合应用协同增强破伤风类毒素(TT)的免疫原性观察。方法将高、低两个剂量的TT分别与高、中、低3个剂量的重组SEA同时吸附一定浓度的Al(OH)3作为样品组,同时设置高、低剂量TT分别与同样浓度Al(OH)3的吸附组作为对照;各组分别腹部皮下免疫NIH小鼠8只,0.5ml/只;免疫4周后,摘眼球采血,分离血清,检测各组抗TT抗体的IgG水平。结果在TT高剂量组,高、中剂量的SEA均能增强抗TT抗体的IgG水平(P<0.05),而低剂量SEA组与对照组相比未能增强TT的免疫原性;在TT低剂量组,3个剂量的SEA均能显著增强TT的免疫原性,P<0.05。结论 TT联合重组SEA及Al(OH)3佐剂能诱导免疫后小鼠产生更强的体液免疫应答,SEA及Al(OH)3佐剂对TT具有协同免疫增强效应。 展开更多
关键词 超抗原 破伤风类毒素 佐剂 免疫 金黄色葡萄球菌肠毒素A
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第二代百日咳疫苗毒性国家标准品的建立 被引量:3
4
作者 骆鹏 卫辰 +8 位作者 王丽婵 晁哲 杨国友 徐永革 孙琦 叶娟 杨邦玲 祖俊 马霄 《微生物学免疫学进展》 2017年第4期21-26,共6页
目的建立第二代百日咳疫苗毒性国家标准品(简称二代毒性标准品)。方法选用百日咳疫苗生产菌株(编号CS株CMCC58003)进行发酵罐培养,将收获的百日咳菌液灭活后分装冻干后,作为第二代百日咳国家毒性标准品的候选品(简称候选毒性标准品)。... 目的建立第二代百日咳疫苗毒性国家标准品(简称二代毒性标准品)。方法选用百日咳疫苗生产菌株(编号CS株CMCC58003)进行发酵罐培养,将收获的百日咳菌液灭活后分装冻干后,作为第二代百日咳国家毒性标准品的候选品(简称候选毒性标准品)。以第一代百日咳疫苗毒性国家标准品为标准(简称一代毒性标准品),由4个单位协作标定候选毒性标准品,采用热加速法考察候选毒性标准品的稳定性。结果共获得检定合格的候选毒性标准品1 800支;经4个实验室协作标定,每支二代毒性标准品LPU为21,HSU为41;且稳定性良好。结论候选毒性标准品各项指标均符合要求,可作为第二代百日咳疫苗毒性国家标准品使用。 展开更多
关键词 百日咳疫苗 百日咳毒性国家标准品 协作标定
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两种不同类型无细胞百日咳疫苗诱导小鼠免疫应答分析 被引量:2
5
作者 王丽婵 晁哲 +3 位作者 卫辰 吴燕 骆鹏 马霄 《微生物学免疫学进展》 2018年第4期14-18,共5页
目的比较两种不同类型无细胞百日咳疫苗免疫小鼠后诱导体液免疫和细胞免疫应答的特点。方法将BALB/c小鼠分为3组(分别纯化Pa组、共纯化Pa组、PBS组),分别用稀释后的两种不同工艺生产的无细胞百日咳疫苗及PBS皮下接种,接种量0.5 m L/只,... 目的比较两种不同类型无细胞百日咳疫苗免疫小鼠后诱导体液免疫和细胞免疫应答的特点。方法将BALB/c小鼠分为3组(分别纯化Pa组、共纯化Pa组、PBS组),分别用稀释后的两种不同工艺生产的无细胞百日咳疫苗及PBS皮下接种,接种量0.5 m L/只,于第4周加强免疫,剂量与初免相同。于免疫后第1周、第4周和第5周取血,分离血清用于检测小鼠抗百日咳抗体Ig G水平(抗-PT和抗-FHA);同时于加强免疫后第7天,分离小鼠脾淋巴细胞,经刺激后,取其培养上清,用流式细胞微球芯片捕获法(cytometric bead array,CBA法)测定脾淋巴细胞经体外刺激后所产生的Th1、Th2和Th17型细胞因子的含量。结果对两种类型无细胞百日咳疫苗组检测的结果进行比较,在免后第4周,分别纯化Pa组和共纯化Pa组的抗-PT和抗-FHA Ig G水平差异无统计学意义(P>0.05);但在免后第5周,分别纯化Pa组的抗-PT和抗-FHA Ig G水平均高于共纯化Pa组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。经PT刺激后诱导产生的细胞因子,分别纯化Pa组的IL-4含量高于共纯化Pa组,差异具有统计学意义(P<0.05);分别纯化Pa组和共纯化Pa组的其他细胞因子差异均无统计学意义(P>0.05)。结论两种类型的无细胞百日咳疫苗免疫小鼠后均能诱导产生体液免疫应答和细胞免疫应答。 展开更多
关键词 无细胞百日咳疫苗 免疫应答 抗体 细胞因子
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吸附无细胞百白破联合疫苗成品内毒素含量检测 被引量:7
6
作者 卫辰 裴宇盛 +5 位作者 晁哲 骆鹏 谭亚军 王丽婵 马霄 侯启明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第4期385-389,共5页
目的 对氢氧化铝佐剂吸附的无细胞百白破联合疫苗(diphtheria,tetanus and acellular pertussis combined vaccine,adsorbed,DTaP)成品中内毒素含量进行测定,确定将内毒素检查方法纳入2015版《中国药典》中百白破类疫苗质量标准的可... 目的 对氢氧化铝佐剂吸附的无细胞百白破联合疫苗(diphtheria,tetanus and acellular pertussis combined vaccine,adsorbed,DTaP)成品中内毒素含量进行测定,确定将内毒素检查方法纳入2015版《中国药典》中百白破类疫苗质量标准的可行性和必要性。方法 参考《中国药典》三部(2010版)附录狱E建立动态浊度法,测定解吸附前后DTaP中细菌内毒素含量,并进行标准曲线的可靠性及干扰试验验证。结果 该方法在0.005-10 EU/ml范围内线性较好,r=-0.997 1。干扰试验样品回收率在50%-200%。实测样品内毒素值从低于检测限至433 EU/ml。不同厂家及同一厂家不同批次产品解吸附前后的内毒素测定值差异显著,CV值在36.9%-89.0%之间。结论 该方法可靠性、线性、回收率、灵敏度均符合要求,为进一步制定DTaP相关质量标准提供参考。现有热原检测方法不能全面反映DTaP成品中内毒素水平,有必要将内毒素检测纳入DTaP质量标准,以更好地控制疫苗安全性。 展开更多
关键词 无细胞百白破联合疫苗 内毒素含量
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SEA为载体蛋白的A/C群脑膜炎奈瑟菌结合物初步免疫效果评价 被引量:1
7
作者 王丽婵 谭亚军 +4 位作者 卫辰 张华捷 骆鹏 张庶民 马霄 《微生物学免疫学进展》 2017年第2期29-35,共7页
目的对以金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)为载体蛋白的A/C群脑膜炎奈瑟菌结合物的免疫效果进行初步评价。方法采用1-氰基-4-二甲氨基-砒啶四氟硼酸(1-cyano-dimethylamino pyridiniumtetrafluoroborate,CDAP)... 目的对以金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)为载体蛋白的A/C群脑膜炎奈瑟菌结合物的免疫效果进行初步评价。方法采用1-氰基-4-二甲氨基-砒啶四氟硼酸(1-cyano-dimethylamino pyridiniumtetrafluoroborate,CDAP)活化法,将SEA、破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)分别与A群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖(group A N.meningitidis capsular polysaccharide,GAMP)、C群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖(group C N.meningitidis cap-sular polysaccharide,GCMP)结合制备结合物;将结合物分别免疫BALB/c小鼠,腹部皮下免疫3次,于第1针免后第9天、第19天、第27天眼眶采血,分离血清备用;检测体液免疫及细胞免疫反应水平。结果 SEA与GAMP结合后能增强抗-GAMP Ig G抗体水平,第3次免后GAMP-SEA组多糖抗体水平达到1∶12 800,高于GAMP组1∶400,但GCMP-SEA组结果不理想。SEA与GAMP结合后均能激发细胞免疫反应,IFN-γ和IL-4的SFC与GAMP组比较均升高,且IFN-γ高于IL-4。SEA与GAMP、GCMP结合后Th1/Th2细胞亚群比值分别达到23.48和22.19,高于GAMP组(14.09)和GCMP组(16.73),差异有统计学意义(P<0.05),提示SEA与GAMP、GCMP结合后可激发细胞免疫。结论 SEA与GAMP、GCMP结合后既能增强GAMP、GCMP的免疫原性,提高体液免疫反应,又能激发细胞免疫反应,提示SEA具备作为A/C群脑膜炎奈瑟菌结合疫苗载体蛋白的可行性。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素A 破伤风类毒素 载体蛋白 A/C群脑膜炎奈瑟菌 结合物 免疫效果
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首批百日咳杆菌鼠源抗血清国家参考品的制备和标定
8
作者 王丽婵 骆鹏 +9 位作者 卫辰 晁哲 潘殊南 张霖阳 邓新 田奇 叶晓珂 肖詹容 朱涛 马霄 《微生物学免疫学进展》 2017年第4期17-20,共4页
目的制备和标定百日咳杆菌鼠源抗血清国家参考品。方法按《中华人民共和国药典》2015版(三部)(简称《中国药典》)相关要求,制备候选百日咳杆菌鼠源抗血清参考品(简称候选参考品),以WHO百日咳杆菌鼠源抗血清标准品(编号97/642)为标准,组... 目的制备和标定百日咳杆菌鼠源抗血清国家参考品。方法按《中华人民共和国药典》2015版(三部)(简称《中国药典》)相关要求,制备候选百日咳杆菌鼠源抗血清参考品(简称候选参考品),以WHO百日咳杆菌鼠源抗血清标准品(编号97/642)为标准,组织3家单位进行协作标定,并采用热加速试验对候选参考品进行稳定性观察。结果共制备合格候选参考品300支,其外观、水分、分装精度均符合《中国药典》的相关要求;协作标定结果显示,室内和室间几何变异系数(geometric coefficient of variation,GCV)均低于20%;经统计学分析,最终确定候选参考品中含PT-Ig G、FHA-Ig G、PRN-Ig G分别为95 IU/m L、917 IU/m L、102 IU/m L,95%可信区间分别为91.7~103.7 IU/m L、900.2~944.5 IU/m L、99.4~106.1 IU/m L;每支安瓿分别含PT-Ig G 19 IU、FHA-Ig G 183 IU、PRN-Ig G21 IU;候选参考品于-20℃放置15个月及37℃放置7 d、14 d、21 d和28 d后,各种百日咳组分抗体的酶标单位值均变化不大,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论首批百日咳杆菌鼠源抗血清国家参考品均符合《中国药典》的各项要求,且一致性、稳定性良好,可用于百日咳组分疫苗小鼠效力血清学方法的质量控制评价。 展开更多
关键词 百日咳杆菌 百日咳组分疫苗 鼠源抗血清 国家参考品
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肺炎链球菌表面蛋白A的制备与鉴定
9
作者 王丽婵 谭亚军 +4 位作者 卫辰 骆鹏 张庶民 侯启明 马霄 《中国医药生物技术》 2015年第4期335-339,共5页
目的通过基因合成法获取3种不同分支肺炎链球菌表面蛋白A(Psp A)的目的基因,制备重组蛋白。方法根据Gen Bank中Psp A相应分支菌株的基因序列、氨基酸序列,通过密码子优化合成目的基因,并与表达载体连接且转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3... 目的通过基因合成法获取3种不同分支肺炎链球菌表面蛋白A(Psp A)的目的基因,制备重组蛋白。方法根据Gen Bank中Psp A相应分支菌株的基因序列、氨基酸序列,通过密码子优化合成目的基因,并与表达载体连接且转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中诱导表达。表达产物经不同步骤层析纯化获得目的蛋白,对其进行免疫原性鉴定。结果人工合成3株菌株的Psp A基因序列经鉴定与Gen Bank的基因序列一致。3种蛋白在大肠杆菌中均以可溶形式表达,表达量在30%以上,经多步骤纯化其纯度达到90%。3种蛋白均能与阳性血清产生特异性抗原抗体反应。结论成功制备3种无标签Psp A蛋白,且具备与天然抗原相似的抗原性,为后续研究奠定基础。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 基因表达 纯化
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肺炎链球菌蛋白PspC的制备与鉴定
10
作者 谭亚军 王丽婵 +4 位作者 卫辰 张华捷 侯启明 张庶民 马霄 《中国医药生物技术》 2017年第5期397-401,共5页
目的对肺炎链球菌表面蛋白C(PspC)进行全基因合成、重组表达、纯化制备和鉴定。方法根据Gen Bank中Psp C的基因序列和氨基酸序列,通过密码子优化和全基因合成的方式获得目的蛋白基因,构建无标签、高效重组表达菌株,建立重组蛋白的纯化... 目的对肺炎链球菌表面蛋白C(PspC)进行全基因合成、重组表达、纯化制备和鉴定。方法根据Gen Bank中Psp C的基因序列和氨基酸序列,通过密码子优化和全基因合成的方式获得目的蛋白基因,构建无标签、高效重组表达菌株,建立重组蛋白的纯化制备方法,并进行抗原鉴定及免疫原性检测分析。结果人工合成的Psp C基因序列经鉴定与预期一致,目的蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量在30%以上,经两步纯化后纯度达到95%。重组蛋白能与肺炎链球菌阳性血清产生特异性抗原抗体反应,免疫小鼠后可诱导产生较高水平的蛋白特异性抗体。结论获得了重组肺炎链球菌蛋白Psp C,其具有与天然抗原相似的抗原性和免疫原性,为今后开展疫苗研制、载体蛋白应用等研究奠定基础。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 重组蛋白质类 肺炎链球菌表面蛋白C
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两种Lowry法检测百日咳疫苗原液蛋白含量的比较 被引量:9
11
作者 卫辰 骆鹏 +6 位作者 王丽婵 张华捷 晁哲 吴燕 侯启明 马霄 胡云章 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期519-524,共6页
目的比较《中国药典》三部(2015版)收录的两种Lowry法测定百日咳疫苗原液蛋白定量的差异,为原液蛋白准确定量和新版药典Lowry法的适用性确认提供依据。方法 9个实验室分别按照现行药典收录的两种Lowry法,对4家15批百日咳疫苗原液蛋白含... 目的比较《中国药典》三部(2015版)收录的两种Lowry法测定百日咳疫苗原液蛋白定量的差异,为原液蛋白准确定量和新版药典Lowry法的适用性确认提供依据。方法 9个实验室分别按照现行药典收录的两种Lowry法,对4家15批百日咳疫苗原液蛋白含量进行测定。并与凯氏定氮法检测结果进行比较。结果方法 1(未经酸沉淀Lowry法)实验室内测定结果的变异系数(CV)均值在1.7%~8.9%之间,实验室间测定结果的CV值在3.9%~9.3%之间;方法 2(酸沉淀Lowry法)实验室内测定结果的CV均值在3.6%~7.4%之间,实验室间测定结果的CV值在3.9%~18.1%之间。同一样品两种方法测定结果差异有统计学意义(P<0.001),结果呈相关性(R2=0.944 9)。在与部分样品测得的凯氏定氮法结果的比较中,方法 1差异有统计学意义(P<0.001),方法 2差异无统计学意义(P>0.05)。结论所有样品采用同一种Lowry方法测定时所得结果实验室内和实验室间一致性较好,采用方法 2测定结果明显低于方法 1,更接近凯氏定氮法结果真实值,表明酸沉淀对Lowry法百日咳原液蛋白定量有显著影响。与Lowry方法 1相比,Lowry方法 2更能准确反映百日咳疫苗原液的真实蛋白含量,且精密度、适用性均符合要求。 展开更多
关键词 百日咳 原液 蛋白定量 Lowry法
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b型流感嗜血杆菌奈瑟球菌荚D蛋白作为载体的膜多糖C群脑膜炎-蛋白结合物的免疫效果评价
12
作者 王丽婵 谭亚军 +2 位作者 卫辰 张华捷 马霄 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第10期1161-1166,共6页
目的对b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)D蛋白(protein D,PD)作为载体的C群脑膜炎奈瑟球菌荚膜多糖(group C meningococcal polysaccharide,GCMP)-蛋白结合物进行免疫效果评价,以确定PD作为GCMP蛋白载体的可行性。... 目的对b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)D蛋白(protein D,PD)作为载体的C群脑膜炎奈瑟球菌荚膜多糖(group C meningococcal polysaccharide,GCMP)-蛋白结合物进行免疫效果评价,以确定PD作为GCMP蛋白载体的可行性。方法采用1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟硼酸(CDAP)活化法,将重组PD、破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)分别与GCMP结合制备结合物;将GCMP及结合物分别经腹部皮下免疫雌性BALB/c小鼠,分为GCMP、GCMP-PD、PD、GCMP-TT、TT及阴性对照(生理盐水)组,每组12只,共免疫3次,分别于每次加强免疫前及末次免疫后7 d,经眼眶采血,分离血清,用于抗体水平检测及血清杀菌力试验(serum bactericidal assay,SBA);同时在末次免疫后7 d取脾脏,进行细胞免疫水平检测。结果蛋白与GCMP结合后能增强抗-GCMP抗体IgG水平,第3次免疫后,与单独GCMP组相比,GCMP-PD和GCMP-TT组小鼠血清抗-GCMP IgG水平均显著升高(F分别为5.294、14.917,P均<0.05),且产生免疫记忆,诱导IgG1产生,但GCMP-PD组低于GCMP-TT组(F=5.828,P<0.05);CMP-PD、PD组小鼠血清抗-PD IgG抗体水平各次免疫后均显著增长,第3次免疫后,GCMP-PD组抗-PD IgG抗体水平显著高于PD组(F=15.426,P<0.01),而GCMP-TT组低于TT组(F=211.207,P<0.001)。SBA结果显示,GCMP-PD组杀菌抗体滴度高于GCMP组(F=11.797,P<0.05),但低于GCMP-TT组(F=8.688,P<0.05)。流式细胞术结果显示,GCMP-PD组Th1、Th2细胞亚群比值与GCMP及GCMP-TT组相比,差异均无统计学意义(F分别为0.073、3.021,P均>0.05)。结论重组PD与GCMP结合后,既能增强多糖疫原性,提高体液免疫反应能力,也能激发细胞免疫反应,同时免疫后血清杀菌效果显著,提示PD具备作为GCMP蛋白载体的可行性。 展开更多
关键词 D蛋白 C群脑膜炎奈瑟球菌荚膜多糖 结合物 载体 体液免疫 细胞免疫
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外伤后破伤风疫苗和被动免疫制剂使用指南 被引量:16
13
作者 王传林 刘斯 +15 位作者 邵祝军 尹遵栋 陈庆军 马霄 马超 王青 王凌航 邓继修 李艺星 赵智娴 吴丹 吴疆 张丽 姚开虎 高源 谢旭 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1212-1217,共6页
外伤后破伤风是非新生儿破伤风的主要类型。为指导基层医疗机构做好外伤后破伤风的预防控制工作,尤其是外伤后的预防处置,降低破伤风发病率及病死率,中国疾病预防控制中心国家免疫规划技术工作组参考《2017年世界卫生组织破伤风立场文件... 外伤后破伤风是非新生儿破伤风的主要类型。为指导基层医疗机构做好外伤后破伤风的预防控制工作,尤其是外伤后的预防处置,降低破伤风发病率及病死率,中国疾病预防控制中心国家免疫规划技术工作组参考《2017年世界卫生组织破伤风立场文件》,以及国内外最新研究进展,制定了本指南。本指南主要介绍了外伤后破伤风预防处置的基本流程.破伤风疫苗和被动免疫制剂的使用方法及潜在外伤高危人群的暴露前免疫。 展开更多
关键词 破伤风 非新生儿 破伤风疫苗 被动免疫制剂 预防处置
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吸附破伤风疫苗效价测定方法比较及发展趋势分析 被引量:6
14
作者 董国霞 马霄 +2 位作者 田霖 谭亚军 侯启明 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期1041-1044,共4页
目的了解目前吸附破伤风疫苗效价测定采用的方法、最新的研究进展及其发展趋势。方法 主要以中国、欧洲、英国、日本和印度药典、WHO百白破疫苗质量控制指南、美国采用的方法及国内外该领域的文献为依据,进行归纳、总结和分析。结果与... 目的了解目前吸附破伤风疫苗效价测定采用的方法、最新的研究进展及其发展趋势。方法 主要以中国、欧洲、英国、日本和印度药典、WHO百白破疫苗质量控制指南、美国采用的方法及国内外该领域的文献为依据,进行归纳、总结和分析。结果与结论吸附破伤风疫苗效价测定方法在不久的将来可能以完全体外检测代替体内检测,进行相关方面的研究已经成为当务之急。 展开更多
关键词 吸附破伤风疫苗 效价 测定方法比较 发展趋势分析
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外伤后破伤风疫苗和被动免疫制剂使用指南 被引量:13
15
作者 王传林 刘斯 +15 位作者 邵祝军 尹遵栋 陈庆军 马霄 马超 王青 王凌航 邓继岿 李艺星 赵智娴 吴丹 吴疆 张丽 姚开虎 高源 谢旭 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2020年第1期111-115,127,共6页
外伤后破伤风是非新生儿破伤风的主要类型。为指导基层医疗机构做好外伤后破伤风的预防控制工作,降低破伤风发病率和死亡率,中国疾病预防控制中心国家免疫规划技术工作组参考《2017年世界卫生组织破伤风立场文件》和国内外最新研究进展... 外伤后破伤风是非新生儿破伤风的主要类型。为指导基层医疗机构做好外伤后破伤风的预防控制工作,降低破伤风发病率和死亡率,中国疾病预防控制中心国家免疫规划技术工作组参考《2017年世界卫生组织破伤风立场文件》和国内外最新研究进展,制定了本指南。本指南主要介绍了外伤后破伤风预防处置的基本流程、破伤风疫苗和被动免疫制剂的使用方法以及潜在外伤高危人群的暴露前免疫预防。 展开更多
关键词 非新生儿破伤风 破伤风疫苗 被动免疫制剂 外伤 预防处置
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无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法的建立 被引量:4
16
作者 马霄 卫辰 +2 位作者 谭亚军 徐颖华 侯启明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第9期1322-1324,共3页
目的 建立无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法。方法 依据活性PT的ADP核糖基化酶活性,设计并合成一段荧光标记的合成肽Gαi3C20,以其为底物,采用柱前衍生-HPLC法检测无细胞百日咳疫苗的毒性,并对建立的方法进行验证。结果 该方法的最低... 目的 建立无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法。方法 依据活性PT的ADP核糖基化酶活性,设计并合成一段荧光标记的合成肽Gαi3C20,以其为底物,采用柱前衍生-HPLC法检测无细胞百日咳疫苗的毒性,并对建立的方法进行验证。结果 该方法的最低检测限为1ng;最低定量检测限为8ng,线性范围为8~400ng/ml,区间内线性系数为0.999;用建立的方法对同一份样品平行测定10次,变异系数小于10%;该方法的回收率为94.9%;联合疫苗中的其他主要成分,如丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)、黏附素(pertactin,PRN)、白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)、破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)对检测结果无明显干扰。结论 建立了无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法,该方法有望替代现行的动物检查法,可加强我国百白破联合疫苗的质量控制,提高疫苗的质量。 展开更多
关键词 无细胞百日咳疫苗 毒性检测 高效液相色谱法
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肺炎链球菌致病因子及其疫苗的研究进展 被引量:4
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作者 王丽婵 侯启明 张庶民 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期474-480,共7页
肺炎链球菌为革兰氏阳性菌,是人体鼻咽部寄居的正常菌群之一,是儿童及老年人群社区获得性肺炎,菌血症、细菌性脑膜炎、鼻窦炎、急性中耳炎、急性下呼吸道感染的重要病原体。在高达5%~50%的成人和儿童中能分离到该菌。只有当机体... 肺炎链球菌为革兰氏阳性菌,是人体鼻咽部寄居的正常菌群之一,是儿童及老年人群社区获得性肺炎,菌血症、细菌性脑膜炎、鼻窦炎、急性中耳炎、急性下呼吸道感染的重要病原体。在高达5%~50%的成人和儿童中能分离到该菌。只有当机体抵抗力下降时该菌群才转变为致病菌。据估计,全球5岁以下儿童中每年因肺炎而死亡人数达到160万之多。在过去几十年中,青霉素能有效治疗肺炎链球菌感染,但是20世纪70年代以来,肺炎链球菌青霉素耐药菌株及其他抗生素耐药菌株的出现,导致了抗生素应用的局限性,也致使治疗耐药肺炎链球菌感染成为难题。肺炎链球菌疫苗的出现使肺炎链球菌疾病的预防成为可能。本研究将主要介绍肺炎链球菌的致病因素及肺炎链球菌疫苗的发展历程。 展开更多
关键词 肺炎链球菌感染 肺炎链球菌疫苗 致病因子 急性下呼吸道感染 社区获得性肺炎 革兰氏阳性菌 细菌性脑膜炎 耐药菌株
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第1代百日咳毒素国家参考品的标定 被引量:4
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作者 卫辰 晁哲 +10 位作者 王丽婵 吴燕 张霖阳 潘殊男 方习静 张立志 刘翠 王魁 程之铭 骆鹏 马霄 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第8期853-857,共5页
目的标定第1代百日咳毒素国家参考品。方法以WHO第1代百日咳毒素国际参考品JNIH-5为标定标准品,组织6个实验室采用CHO细胞簇集试验的方法对百日咳毒素候选参考品C1进行协作标定,并给予国际单位值。由中国食品药品检定研究院通过CHO细胞... 目的标定第1代百日咳毒素国家参考品。方法以WHO第1代百日咳毒素国际参考品JNIH-5为标定标准品,组织6个实验室采用CHO细胞簇集试验的方法对百日咳毒素候选参考品C1进行协作标定,并给予国际单位值。由中国食品药品检定研究院通过CHO细胞簇集试验对4和37℃放置7、14、21、28 d的C1进行热加速稳定性检测,-20℃放置36个月的C1进行实时稳定性检测,将C1用不同稀释液(水、PBS、50%甘油)复溶,于4、-20、-80℃分别放置1、7及14 d,检测复溶稳定性。结果 C1经6个实验室的协作标定获得104个有效结果,最终确定候选参考品簇集活性为3 000 IU/支。C1的纯度、外观、水分、无菌、分装精度均合格,与JNIH-5的抗原抗体结合能力差异无统计学意义(P>0.05),具有良好的实时稳定性、热加速稳定性,C1经50%甘油复溶后2周内稳定性较好。结论该候选参考品符合国家参考品的各项要求,可用于百日咳毒素CHO簇集试验及组分百日咳疫苗原液抗原纯度、安全性和免疫原性的检测。 展开更多
关键词 百日咳毒素 CHO簇集试验 参考品
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国内外破伤风相关疫苗的质量参数比较 被引量:1
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作者 董国霞 田霖 +2 位作者 谭亚军 侯启明 马霄 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期714-717,共4页
目的了解基础免疫阶段在我国市场上主要使用的国内外破伤风相关疫苗的关键质量参数及其水平。方法以国内外各厂家分别生产的10批次产品为依据,对其质量数据进行统计、分析和比较。结果国产产品和进口产品各有其优势所在,同时也均有需进... 目的了解基础免疫阶段在我国市场上主要使用的国内外破伤风相关疫苗的关键质量参数及其水平。方法以国内外各厂家分别生产的10批次产品为依据,对其质量数据进行统计、分析和比较。结果国产产品和进口产品各有其优势所在,同时也均有需进一步提升的空间。结论期望更多国内外疫苗厂家能针对自身产品特点,进一步提高产品质量,在未来制造出更安全、有效且使用便捷的新型疫苗。 展开更多
关键词 破伤风相关疫苗 质量参数 比较
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流感嗜血杆菌D蛋白作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白结合疫苗蛋白载体的免疫效果评价 被引量:1
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作者 王丽婵 谭亚军 +3 位作者 卫辰 张庶民 张华捷 马霄 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1023-1027,1032,共6页
目的对流感嗜血杆菌D蛋白(protein D,PD)作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白结合疫苗蛋白载体的免疫效果进行评价。方法采用CDAP活化法,将PD、破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)分别与A群脑膜炎奈瑟菌多糖结合制备结合物;将结合物分别免疫BALB/... 目的对流感嗜血杆菌D蛋白(protein D,PD)作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白结合疫苗蛋白载体的免疫效果进行评价。方法采用CDAP活化法,将PD、破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)分别与A群脑膜炎奈瑟菌多糖结合制备结合物;将结合物分别免疫BALB/c小鼠,腹部皮下免疫3次,每次加强免疫前及末次免疫后7 d经眼眶采血,分离血清,间接ELISA法检测抗体水平及亚类,同时在末次免疫后7 d取小鼠脾脏,检测细胞免疫水平。结果 PD与A群多糖结合后能增强抗-多糖抗体的IgG水平,第3次免疫后抗体水平达1∶12 800,显著高于单独多糖组(1∶400)(P<0.05);其脾细胞经多糖及多糖蛋白混合物刺激后,IFNγ和IL-4的斑点形成细胞数量与多糖组比较均升高(P<0.05);但Th1/Th2亚群比值与单独多糖组比较并未增高(P>0.05),反而显著低于GAMP-TT组和单独PD组(P<0.05)。结论重组PD与A群多糖结合后能够增强多糖的免疫原性,既可提高体液免疫反应能力,又可激发细胞免疫反应,提示PD具备作为A群脑膜炎奈瑟菌多糖蛋白载体的潜力。 展开更多
关键词 流感嗜血杆菌 D蛋白 A群脑膜炎奈瑟菌 荚膜多糖 载体 体液免疫 细胞免疫
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