海马内注射纤丝状Aβ_(42)诱导tau异常磷酸化的研究

目的 观察海马内注射纤丝状Aβ42 后神经元Ser 2 0 2位点磷酸化的tau蛋白 (PS2 0 2 tau)的表达 ,探讨Aβ42 与tau蛋白超磷酸化的关系。方法 应用立体定向技术对老年大鼠进行海马内注射纤丝状Aβ42 ,采用免疫组织化学染色方法 ,显示PS2 0 2 tau的表达情况 ,并进行图像分析。结果 纤丝状Aβ42 注射组双侧海马PS2 0 2 tau的表达明显高于正常组和双蒸水注射组 ,两侧海马PS2 0 2 tau的表达没有明显差异。结论 纤丝状Aβ42 能使PS2 0 2 tau的表达增加 ,提示它具有诱导tau蛋白超磷酸化的效应。

苯中毒与多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶假基因多态等的相关性研究

目的探讨慢性苯中毒与微核率、姊妹染色单体互换(SCE)、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)假基因多态的关系,为寻找苯中毒的易感者提供依据.方法对33例苯中毒病例与83例对照组进行微核率、SCE、PARP假基因多态的测定,并对其分布进行统计学分析.结果苯中毒病人外周血淋巴细胞微核率为0‰～6‰、中位数为2‰,对照组0‰～3‰,中位数为1‰;苯中毒病人SCE率为(6.31±1.26)次/细胞,对照组(5.59±0.18)次/细胞;苯中毒组与对照组微核率、SCE率差异有显著性(P＜0.05);苯中毒组和对照组的PARP假基因中B基因频率分别为0.104和0.116,苯中毒组与对照组PARP假基因多态分布一致(P＞0.05).结论慢性苯中毒可引起微核率、SCE的增高,未发现PARP假基因多态与慢性苯中毒有关联.

去甲斑蝥素抗肿瘤作用基础与临床研究进展

去甲斑蝥素（NCTD）是我国自行研制生产的新型抗肿瘤药物，是中药抗癌活性成分斑蝥素（C）去除1，2位两个甲基合成而得，具有显著的抗癌活性，其毒副作用较低且具有升高白细胞作用，对常见肿瘤细胞的生长有抑制作用。去甲斑蝥素能在细胞毒性、诱导凋亡、抗粘附转移、抑制肿瘤血管生成等多个环节发挥抗癌作用，并已初步应用于临床。现就这一方面的进展作一综述。

盐酸川芎嗪经腹腔注射在兔眼视网膜组织中的药代动力学

目的 测定腹腔注射盐酸川芎嗪后不同时间兔眼视网膜川芎嗪的浓度 ,计算其药动学参数 ,研究其药动学特点。方法 4 4只家兔随机分为 11组 ,每只家兔腹腔注射盐酸川芎嗪 80mg·kg-1,在用药前 (0h)和用药后 0 2 5、0 5、0 75、1、1 5、2、3、5、8、12h取视网膜 ,采用反向高效液相色谱法 (RP HPLC)进行测定。 3P87软件拟合药动学参数。结果 腹腔注射盐酸川芎嗪后 ,其浓度在正常家兔眼视网膜呈开放型二室模型。理论值高峰浓度 (Cmax)为 1 6 3mg·g-1,达收稿日期 :2 0 0 4-0 1-3 1,修回日期 :2 0 0 4-0 2 -2 8基金资助 :广东省自然科学基金 (张清炯 0 10 765 )、国家自然科学基金(杨锦南 3 0 3 0 0 467)和广东省中医药管理局科学基金 (邓新国 10 40 0 64 )资助项目作者简介 :邓新国 ( 1961-) ,男 ,博士 ,研究方向 :眼科药物的开发、药理、药效和药代动力学研究 ;胡世兴 ( 195 2 -) ,男 ,博士 ,美国波士顿哈佛医学院眼科及免疫学博士后研究员 ,教授 ,博士生导师 ,通讯作者 ,Tel:0 2 0 873 3 0 2 89,E mail:Markhu @2 63 .net峰时间 (Tmax)为 0 32h ,半衰期T1/ 2α为 0 35h ,T1/ 2 β为 2 5 0h ,清除率 (CL)为 7 89g·h-1。实测值 15min为 (1 36± 0 16 )mg·g-1,30min达高峰为 (2 5 9± 0 19)mg·

ClC-3反义寡核苷酸对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响

目的 研究ClC 3蛋白在T淋巴细胞增殖过程中的作用。方法 采用脂质体转染技术 ,将寡核苷酸导入细胞 ,免疫印迹 (WesternBlot)方法分析ClC 3蛋白表达 ;[3H] TdR参入法观察ClC 3反义寡核苷酸对细胞增殖的作用。结果 ①ClC 3反义寡核苷酸浓度依赖性地抑制ConA诱导的ClC 3蛋白的表达 ;②ClC 3反义寡核苷酸浓度依赖性地抑制ConA诱导的T淋巴细胞增殖。结论 ClC

刀豆蛋白A促进T淋巴细胞增殖与ClC-3蛋白的关系

目的 研究刀豆蛋白A(ConA)促进T淋巴细胞增殖与内源性ClC 3蛋白的关系。方法 免疫印迹 (Westernblot)法检测ClC 3蛋白表达 ;[3 H] TdR参入法观察ConA对细胞增殖的影响。结果 ①T淋巴细胞上有内源性ClC 3蛋白表达 ,分子量约为 80ku ;②ConA可浓度依赖性地促进T淋巴细胞增殖 ;③ConA刺激T淋巴细胞 2 4、4 8、72h后 ,ClC 3蛋白表达均增加 ;刺激 4 8h后ClC 3蛋白表达增加最多。④ConA可浓度依赖性地增加ClC 3蛋白表达。结论 T淋巴细胞上存在内源性ClC 3蛋白表达 ;ClC

T_4 DNA连接酶介导的5’RACE法克隆大鼠Nor 1全长cDNA

目的:克隆75AEST全长cDNA序列。方法:抽提在25mmol/L KCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5’RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5’端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-Teasy后进行序列测定以及同源性分性。结果:首轮5’RACE扩增出2.5kb序列后,75A EST鉴定为神经来源孤儿受体1(Nor1)基因的部分序列;再经过二次轮5’RACE,我们首次克隆Nor-1的全长cDNA序列。结论:T_4DNA连接酶介导的5’RACE是一种效率较高的克隆mRNA5’端未知序列的好方法,为进一步研究Nor1在小脑颗粒神经元存活或分化过程中的作用奠定基础。

反相高效液相色谱法同时测定广州部分地区肉类4种抗生素的残留量

〔目的〕高效液相色谱法同时测定肉类中磺胺嘧啶 (SD)、磺胺二甲基嘧啶 (SMZ)、土霉素 (OTC)、磺胺甲恶唑(SN2 )抗生素的残留量。〔方法〕色谱柱为ODS -C1 8,以 2mmol L醋酸铵 :乙腈 :80 :2 0 (pH =2 .0 3 )为流动相 ,流速 0 .8ml/min ,486紫外检测器 ,检测波长为 2 70nm。〔结果〕该方法各抗生素的线性范围均为 0 .0 1～ 1.0 μg/ml ,相关系数均为 0 .99以上 (n =5 ) ;最低检测限为 0 .0 1μg/ml;回收率均为 95 .6%～ 10 6.0 % ;日内、日间变异系数均在允许范围内 (小于 15 % )。〔结论〕该方法操作简便 ,是动物性食品残留抗生素的快速而准确的检测方法。

肝豆状核变性病与人体内铜的关系

为探讨肝豆状核变性发病机理与人体内铜的关系 ,结合本实验室分析条件 ,用原子吸收分光光度法对 5 0 9名患者的 2 4小时尿铜、血清铜含量进行了检测。结果表明 ,1 0 9名患者的 2 4小时尿铜含量远高于正常人水平 ,血清铜含量低于正常人水平 ,经诊断证实这些患者患有肝豆状核变性病。本文进一步对这些患者按不同年龄、不同性别进行了分析 ,为肝豆状核变性病的成因、发展、诊断及治疗提供参考依据。

DNA修复酶hMSH2缺陷与细胞遗传不稳定性

目的 研究hMSH2酶缺陷与细胞遗传不稳定性的关系。方法 测定hMSH2酶正常细胞HLF与hMSH2酶缺陷细胞人胚肺成纤维细胞 (HLFS)在甲基甲磺酸 (MMS)染毒后的半数抑制浓度 (IC5 0 )、核异常率及微核率。结果 HLF细胞 2 4hIC5 0 约为 7 90 μmol/L ,人胚肺成纤维细胞 (HLFS)细胞 2 4hIC5 0 约为 89 13 μmol/L ;2种细胞的微核率均随染毒剂量的增加而升高 ,且呈正相关 (P <0 0 5) ;2种细胞中、高剂量组与对照组相比 ,微核率均有显著性差异 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,而低剂量组均无显著性差异 (P >0 0 5) ;HLFS细胞微核率总体上较HLF细胞高 ,但是 2者之间无显著性差异 (P =0 0 8) ,染毒与转染之间无交互效应。核异常率没有随MMS染毒剂量的增加而升高的趋势 ;不同染毒剂量组HLFS的核异常率均明显高于HLF细胞 (P <0 0 1) ;2种细胞染毒剂量组与对照组相比核异常率在统计学上均无显著性差异 (P >0 0 5)。结论 DNA修复酶hMSH 2缺陷导致烷化耐受、核异常率及微核率增加 。

气相色谱法测定肝豆状核变性患者血浆中游离脂肪酸的含量

用气相色谱法测定了50例肝豆状核变性患者血浆中游离脂肪酸(FFA)的含量。该方法采用, 10% DEGS填充柱,FID检测器,甲醇、三氯甲烷提取后,用三氯化硼一乙醚甲脂化,测得精密度为5. 7%,日内、日间的变异系数分别为3% 和8 .9%。

DNA错配修复酶hMSH2缺陷细胞株的建立

目的 建立并鉴定DNA错配修复酶hMSH2缺陷细胞株 ,用于研究hMSH2基因的作用机制及其缺陷与肿瘤发生的关系。方法 运用基因工程的方法获得hMSH2cDNA片段 ,并反向克隆到绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1上 ,随后将构建好的hMSH2反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体转染入人胚肺成纤维细胞 (HLF) ,使之在HLF中表达 ,用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中hMSH2基因的表达水平。结果 构建了hMSH2反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体 ,并在真核细胞成功表达 ;hMSH2酶缺陷细胞株hMSH2基因的蛋白表达水平下降了 4 4 %。结论 hMSH2缺陷细胞株的成功建立和鉴定为hMSH2基因功能研究提供了一种有效手段。

肝豆状核变性149例误诊原因分析

目的:通过对肝豆状核变性(hepatoleticulardegeneration,HLD)患者病史的调查,分析该病的误诊原因,以提高肝豆状核变性的诊断水平。方法:以调查问卷方式对149例HLD患者的发病年龄、首发表现、误诊情况及家族史进行调查和统计分析。结果:发病年龄7～35岁,首发表现依次为神经症状(34%)、肝损害症状(27%)、骨关节损害症状(20%)、肾损害症状(13%);初期误诊率达79%,误诊时间超过1年占56%,误诊为肝炎、风湿关节炎、肾病综合征等;有家族史32例。结论:HLD患者好发于青少年,有明显的家族倾向,临床表现多样化是早期误诊的主要原因,加强对该病的认识可提高诊断率。

实验大鼠侵袭性肺曲霉病早期诊断的研究

目的建立高效液相色谱技术(HPLC)检测(13)βD葡聚糖的方法,并与巢式聚合酶链反应(PCR)方法进行比较,评价其在实验大鼠侵袭性肺曲霉病(IPA)早期诊断中的意义。方法将烟曲霉孢子注入实验大鼠左肺以制作IPA模型;采集各组实验大鼠血样及脏器标本,进行巢式PCR、HPLC及培养方法的检测。结果HPLC检测(13)βD葡聚糖最低检测限度为1～2pg/ml,临界值为15pg/ml。模型组检测值和阳性率均较对照组高,差异有统计学意义(P<0.01);随感染时间延长检测值和阳性率逐渐上升,各组差异有统计学意义(P<0.01);感染死亡大鼠血液标本的检测值与死亡时间呈负相关关系,其相关系数r为-0.949(P<0.01)。1周内HPLC方法敏感度(77.8%)和特异度(91.7%)均较巢式PCR高,但差异无统计学意义(P>0.05),两者敏感度均高于血培养,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论HPLC检测大鼠血中(1～3)βD葡聚糖浓度,在早期预测大鼠肺曲霉感染的发生、发展及预后判断方面明显优于传统的血培养,也要优于巢式PCR方法。

气相色谱-质谱选择离子法评价系统性真菌感染与血浆中D/L阿拉伯糖醇比值关系

目的 探讨系统性真菌感染与血浆中D/L阿拉伯糖醇经动物实验和临床观察 ,并比值的关系。方法 应用气相色谱 质谱联用技术检测实验性系统性念珠菌病 ;经血、尿、骨髓等常规真菌培养证实 ,有念珠菌、新生隐球菌、马尔尼菲青霉菌、曲霉菌等系统性真菌感染者 14例与 8例未经培养证实、但高度怀疑系统性真菌感染者血浆中D/L 阿拉伯糖醇比值 ,同时检测 31名健康人血浆中D/L 阿拉伯糖醇比值作为对照。结果 全部受试动物感染前血浆中D/L阿拉伯糖醇浓度皆低于最低检测值 ,感染后第 3天、第 7天和第 14天血浆中D/L阿拉伯糖醇比值分别为 2 35 9± 1 387;3 6 31±2 719;4 6 4 0± 2 0 4 5。 31名正常人血浆中D/L阿拉伯糖醇比值范围在 1 5 35± 0 92 4。 2 2例病人中D/L阿拉伯糖醇比值范围为 4 4 72± 2 0 94 ,14例经真菌培养阳性证实系统性感染者血浆中D/L阿拉伯糖醇比值 x为 4 15 7± 1 4 91;而 8例经真菌培养阴性 ,但高度怀疑真菌感染者血浆中D/L阿拉伯糖醇比值 x为 5 0 2 4± 2 991。结论 血浆中D/L阿拉伯糖醇浓度与系统性真菌感染关系密切 ,气相色谱 质谱选择离子法检测其血浆中浓度不仅可早期预测系统性念珠菌感染 ,也可用于检测其他系统性真菌感染 ,达到早期诊断的目的。