一项基于综合性大学的协同创新实证分析——以海洋微生物功能分子广东高校重点实验室为例

综合性大学的协同创新要以需求为导向,构建以任务为纽带的组织管理方式,突破学科间的壁垒,充分发挥高校自身人才、学科、科研等多方面优势,通过深度合作,实现"1+1>2"的科研突破。通过对海洋微生物功能分子广东高校重点实验室的建设进行总结,分析构建协同创新体的导向、组织管理方式、创新要素以及其资源汇集方式,实证分析实现协同创新的途径和方法。

海洋生物及其代谢产物管理系统的设计与实现

对海洋产物及其代谢产物的信息进行了分析,以化学类、生物类和药学类权威杂志为数据库信息来源,设计并建立了海洋生物及其代谢产物数据库(Marine Organism Metabolite Data Center,MOMDC)。MOMDC是一个包括海洋生物、代谢产物、生物学活性三方面信息的公益性网络数据库,目前已收录的信息为19 000条。

一种新型海洋来源的蒽环类化合物D19抗肿瘤活性及机制研究

目的探讨新型海洋源性蒽环类化合物D19的抗肿瘤作用及分子机制。方法采用四甲基二氮唑蓝(MTT)比色法、脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)、免疫印迹法(WesternBlotting)检测D19对人乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-435生长的影响及相关信号通路蛋白的变化。结果 D19对MCF-7、MDA-MB-435的半数抑制浓度(IC50)分别为4.01μmol/L和7.32μmol/L;D19具有有效诱导人乳腺癌细胞凋亡的作用;Western Blotting结果显示D19作用后细胞中的凋亡蛋白如caspase9以及下游的效应蛋白PARP都发生裂解。结论从细胞水平和分子水平证明新型海洋源性蒽环类化合物D19具有很强的抗乳腺癌活性,有可能发展成为治疗乳腺癌等其他实体肿瘤的先导化合物。

新型黑麦酮酸D衍生物D69抗乳腺癌活性研究

目的研究一种来源于海洋微生物次级代谢产物的新型黑麦酮酸D衍生物D69对人乳腺癌的体内外抑制活性,并初步探讨其分子机理。方法通过镜下观察以及MTT比色法检测D69的细胞毒作用,构建人乳腺癌裸鼠移植瘤模型研究D69体内抗肿瘤活性。结果 D69对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435和ZR-75-30的生长具有显著的抑制作用,且呈剂量依赖性增强。其对MDA-MB-435和ZR-75-30细胞半数抑制浓度(IC50)分别为0.031μmol/L和0.036μmol/L,而对人永生化乳腺上皮细胞HMEC的抑制作用较低,IC50为0.686μmol/L。人乳腺癌裸鼠移植瘤模型验证D69能显著抑制在体肿瘤的生长。结论 D69可能是一种潜在的乳腺癌化疗药物的先导化合物。

海洋新型蒽环类化合物D19对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435细胞周期及增殖的影响

目的研究海洋新型蒽环类化合物D19对人乳腺癌细胞MDA-MB-435的增殖和细胞周期的影响及其相关的分子机制。方法以0.5μmol/L的D19对MDA-MB-435经不同时间(0、1、2、3、4 d)处理后,以不加D19的细胞作为对照组,用MTT方法(四甲基偶氮唑蓝比色实验)检测不同孔的吸光率,分析D19对乳腺癌细胞增殖的影响。采用western blotting检测以0.5μmol/L的D19作用不同时间(0、16、24、48 h)后,细胞周期调节相关蛋白浓度及磷酸化水平的变化。进一步采用western blotting检测0.5μmol/L的D19作用不同时间(0、4、8、16、24、36、48 h)对与乳腺癌和细胞周期都密切相关的蛋白ATM的磷酸化水平的变化。结果 MTT实验显示D19能抑制MDA-MB-435细胞增殖。并且western blotting检测发现,随着D19作用时间的延长,Cyclin D1和CDK4表达水平逐步降低,Rb蛋白的磷酸化水平逐步降低,呈时间依赖性,且ATM磷酸化水平也随时间增加而增高。结论 D19能抑制MDA-MB-435细胞增殖,可阻滞MDA-MB-435细胞周期,其作用机制可能是通过激活ATM,从而抑制其下游的细胞周期调控蛋白Cyclin D1、CDK4的表达以及Rb的磷酸化来实现的。

利用荧光RT-PCR法检测环境水体中诺如病毒

目的：建立一种快速敏感的方法检测环境水体中的诺如病毒。方法：选择诺如病毒阳性的粪便标本,10倍梯度稀释,模拟被污染水体,用16%聚乙二醇8000-0.525mol/L NaCl溶液浓缩病毒,用实时定量RT-PCR检测病毒核酸。结果：重组质粒标准品做标准曲线,标准品拷贝数的对数（x）与Ct值的关系为Ct=39.886-3.485x,相关系数R2=0.995,灵敏度为100拷贝,比普通RT-PCR高1个数量级,比ELISA高3个数量级,重复性佳,回收率在14%~44%之间,随着样品中NV浓度降低而下降,。用实时定量RT-PCR、常规RT-PCR和ELISA方法检测了42份现场水样,阳性率分别为40%、24%和0。结论：为环境水体中诺如病毒的检测提供了一种灵敏、可行的定量检测方法。