科研教学一体化模式在耳鼻咽喉科学教学实践中的应用

目的探讨科研教学一体化模式在耳鼻咽喉科教学实践中的应用及效果。方法对中山大学2014级五年制医学系学生进行耳鼻咽喉科学理论授课,比较科研教学一体化模式和传统教学模式在教学实践中的异同,采用问卷调查方法和考试成绩评价教学效果。结果两组学生考试成绩比较,差异具有统计学意义。问卷调查显示,学生对科研教学一体化教学模式满意良好率达91%,在提高学生科研兴趣、科研思维能力、探索创新能力、感知医学新信息的能力等指标方面,科研教学一体化教学模式均优于传统教学模式;同时,调查显示,学生愿意报考耳鼻咽喉科学研究生及参加科研小组人数明显增加;此外,对教师问卷调查显示,科研教学一体化教学模式较好,丰富的教学内容有利于提高教师自身科研素质。结论科研教学一体化模式适应高等医学教育改革的发展趋势,注重激发学生科研兴趣和培养学生探索创新能力,提高学生综合素质,是一种较好的耳鼻咽喉科学教学模式。

耳鼻咽喉科临床见习教学存在的问题与对策

临床见习是医学生在掌握了一定医学基础理论后,把所学的理论与临床结合起来,培养其临床能力的重要阶段。针对耳鼻咽喉科临床见习中学生存在的问题,采用循序渐进、见习笔记结合见习后讨论的教学法,电视教材、多媒体课件和内窥镜监视系统等辅助教学工具系统教学,充分调动学生学习的积极性,将所学理论运用于实际,使学生掌握了正确的临床思维方法,提高了其分析问题、解决问题的能力,为下一阶段的临床实习和今后的医学实践打下了坚实的基础。

耳鼻咽喉科临床见习教学存在的问题与对策

临床见习是医学生在掌握了一定医学基础理论后,把所学的理论与临床结合起来,培养临床能力的重要阶段。针对耳鼻咽喉科临床见习中学生存在的问题,采用循序渐进、见习笔记结合见习后讨论的教学法,电视教材、多媒体课件和内窥镜监视系统等辅助教学工具系统教学,充分调动学生们学习的积极性,将所学理论运用于实际,使学生掌握了正确的临床思维方法,提高了分析问题、解决问题的能力,为下一阶段的临床实习和今后的医学实践打下了坚实的基础。

基于显微共聚焦拉曼光谱与多靶标适配体微流控技术鉴定鼻咽癌循环肿瘤细胞的方法

目的建立一种基于显微共聚焦拉曼光谱技术的鼻咽癌循环肿瘤细胞鉴定方法,实现对鼻咽癌循环肿瘤细胞的无接触、无标记检测。方法体外培养人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat和鼻咽癌细胞株Sune1,利用EpCAM、CD44、EGFR和波形蛋白适配体组装的纳米微流控芯片技术识别和亲和捕获单细胞,并使用显微共聚焦拉曼光谱技术对单细胞进行鉴定,得到单细胞拉曼光谱。以两种机器学习算法:支持向量机和线性判别分析构建分类器,对单细胞拉曼光谱进行建模分析。结果共采集得到474个Jurkat细胞与Sune1细胞的单细胞拉曼光谱,其峰位分析结果显示:与Jurkat细胞相比,Sune1细胞中的腺嘌呤、胸腺嘧啶和鸟嘌呤含量显著下降(P<0.0001);羟脯氨酸、蛋白质和脂类的含量显著上升(P<0.0001),差异有统计学意义。线性判别分析的预测准确率较高,能够有效区分两种细胞,预测准确率高达98.31%。结论本研究基于显微共聚焦拉曼光谱技术和机器学习算法,建立了一种可能适用于鉴定鼻咽癌循环肿瘤细胞的方法,可对鼻咽癌的临床微创诊断产生积极作用。

瘢痕性喉狭窄瘢痕组织中弹性纤维和胶原纤维分析

【目的】了解喉狭窄瘢痕组织中弹性纤维,Ⅰ型/Ⅲ型胶原纤维的含量和形态特征。【方法】喉部分切除术后瘢痕性喉狭窄13例患者的喉瘢痕组织为实验组及15例正常声带组织为对照组,分别进行苏木精鄄伊红染色,胶原纤维、弹性纤维复合染色,及Ⅰ、Ⅲ型胶原苦味酸鄄鄄天狼猩红染色,全自动图像分析系统下观察和计算。【结果】喉狭窄瘢痕组织中,细胞外基质排列紊乱,胶原纤维增多,弹性纤维含量(0.178±0.066)较正常声带中弹性纤维含量(0.374±0.055)明显减少(P<0.001);喉狭窄瘢痕组织Ⅰ型胶原的含量(0.382±0.199)较正常声带中Ⅰ型胶原含量(0.147±0.073)增加明显(P<0.05);喉狭窄瘢痕组织Ⅰ型/Ⅲ型比值(3.98±0.88)较正常声带组织(1.01±0.37)大(P<0.001)。【结论】弹性纤维及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维形态特征和含量改变可能是导致喉部分切除术后瘢痕性喉狭窄的病理基础。

成人气管切开机械通气并发气管狭窄的相关因素分析

【目的】探讨成人气管切开并行机械通气患者并发气管狭窄的影响因素。【方法】选择本院1994-2003年气管切开并行机械通气治疗的246例患者为研究对象，就性别、年龄、术前有否气管插管，术前插管时间、术后持续机械通气时间、既往气管切开史、更换气管套管次数、环甲膜切开及反复呼吸道感染、糖尿病、胃食管返流等11个相关临床因素，用x^2检验和Logistic回归进行单因素和多因素分析。【结果】本组病例中，并发气管狭窄28例(11.4％)，相关因素的单因素分析显示：术前插管时间(P=0.025)、术后持续机械通气时间(P=0.02)、反复呼吸道感染(P＜0.001)，糖尿病(P＜0.001)，胃食管返流(P=0.026)与气管狭窄发生有关。而多因素分析结果表明：术后持续机械通气时间、糖尿病、反复呼吸道感染、胃食管返流与发生气管狭窄明显相关。【结论】气管切开并行机械通气患者并发气管狭窄的影响因素是多方面的。统计学研究表明，术后机械通气持续时间、反复呼吸道感染、胃食管返流和合并有糖尿病等是其危险因素。

垂直喉部分切除术后喉狭窄瘢痕组织中细胞外基质的变化及意义

【目的】研究喉狭窄瘢痕组织的病理变化,了解细胞外基质的变化及意义。【方法】垂直喉部分切除术后2～3月出现瘢痕性喉狭窄10例喉瘢痕组织、非狭窄16例喉瘢痕组织为实验组及10例声带组织为对照组,分别进行Gomori蒺s醛品红法染色、Van Gieson(V.G)染色、苦味酸-天狼猩红染色及免疫组化染色,并在KONTRON IBAS2.5全自动图像分析系统下观察和计算阳性面积。【结果】喉狭窄瘢痕组织中,细胞外基质排列紊乱。与非狭窄喉瘢痕组织、声带组织比较,喉狭窄瘢痕组织中,胶原纤维含量(0.512±0.052)、Ⅰ型胶原纤维含量(0.376±0.015)及纤维连接蛋白表达量(0.472±0.033)明显增多,Ⅰ/Ⅲ型胶原纤维比值(3.32±0.27)明显增大,差异有统计学意义(P<0.05)。与声带组织比较,喉狭窄瘢痕组织中,弹力纤维含量(0.213±0.021)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】喉狭窄瘢痕组织中,胶原纤维和纤维连接蛋白等细胞外基质大量沉积。胶原纤维及弹力纤维含量、形态、排列改变,Ⅰ、Ⅲ型胶原数量和比例变化,可能与喉狭窄喉腔弹性差,喉瘢痕僵硬有关。纤维连接蛋白高表达可能与喉狭窄的瘢痕组织过度增生有关。

人喉部肿瘤与人类乳头状瘤病毒感染的相关性研究

背景与目的:研究显示人类乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)的感染与喉部肿瘤的发生密切相关,但由于研究方法不同,结果差异较大,本研究采用Meta分析法综合评价人喉部良恶性肿瘤的发生与不同类型人类乳头状瘤病毒感染的关系。方法:通过《中国生物医学文献数据库》收集所有国内有关喉部良恶性肿瘤与HPV关系的研究文献共123篇,其中符合研究标准的以聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)法检测HPV16或HPV6/11的成组对照研究共11篇,采用Fisher法和Meta分析法对收集到的文献进行综合的定性和定量研究。结果:所有文献中正常喉组织、喉癌、喉乳头状瘤、声带息肉HPV16的平均检出率分别为:10.8%、35.2%、27.5%、5.0%,而HPV6/11的检出率分别为:8.7%、18.6%、61.6%、21.9%。Fisher法和Meta法分析结果显示:①喉癌HPV16的感染率明显高于喉乳头状瘤和声带息肉(P<0.005),其合并优势比分别是喉乳头状瘤和声带息肉的2.8(1.7～4.7)和12.7(4.2～38.8)倍,其阳性检出率分别高22.0%(12.2%～31.8%)和39.0%(19.4%～58.6%);②喉乳头状瘤HPV6/11的感染率明显高于喉癌(P<0.005),其合并优势比是喉癌的16.4(5.6～48.1)倍,其阳性检出率比喉癌高56.0%(34.4%～75.6%);③喉癌和声带息肉的HPV6/11感染率无明显差异(P>0.05)。

垂直喉部分切除术后喉狭窄瘢痕组织中炎症细胞表达及意义

【目的】通过喉狭窄瘢痕组织的病理学研究,了解炎症细胞在狭窄瘢痕组织表达及意义。【方法】垂直喉部分切除术后2～3月出现喉狭窄10例和未狭窄16例喉瘢痕肉芽组织为实验组及10例正常声带组织为对照组,分别进行苏木精-伊红及免疫组化染色,观察组织切片中中性粒细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞表达,并在全自动图像分析系统下进行细胞计数。【结果】喉狭窄瘢痕组织与非狭窄喉瘢痕组织、正常声带比较,固有层炎症细胞大量聚集,主要以巨噬细胞和T淋巴细胞为主。比较非狭窄喉瘢痕组织及正常声带组织,喉狭窄瘢痕组织的中性粒细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞数量均明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。【结论】喉狭窄瘢痕肉芽组织中存在明显炎症反应,持续炎症反应可能是导致喉狭窄瘢痕肉芽增生重要因素之一。

基于图像分析的周围神经Karnovsky-Roots法染色规律的效果观察

目的基于图像分析探讨用于鉴别周围神经功能束的乙酰胆碱酯酶(AChE)染色Karnovsky-Roots法24小时内的染色规律,为基于乙酰胆碱酯酶染色的周围神经功能束三维重建确定标准化的孵育条件。方法新鲜人体截肢腓总神经标本,连续横断冰冻切片,片厚10μm,共切取56张,随机分为7组,每组8张切片,采用Karnovsky-Roots法进行乙酰胆碱酯酶孵育,其中1～6组分别为1、2、4、8、12和24 h,第7组切片为阴性对照组。采用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件对不同时间染色组图像进行图像分析,指标为:(1)AChE反应阳性区域的面积;(2)AChE反应阳性区域的平均光密度;(3)AChE反应阳性区域的累积光密度。组间结果采用SPSS13.0进行t-test统计检验,以P<0.05为有统计学差异。结果 8h组的平均光密度值与12 h组有显著性差异,而12 h与24 h的平均光密度值无显著性差异;8 h、12 h和24 h间的染色面积、累计光密度值均存在显著性差异,但镜下可观察到24 h组存在过度染色。结论孵育12～24 h间的染色效果趋于一致,染色结果稳定可靠,神经束功能性质鉴别容易,神经束膜与染色的神经纤维间有清晰的分界,利于轮廓获取,可作为基于乙酰胆碱酯酶染色的周围神经功能束三维重建的标准化的育条件。

静吸复合全麻时机械通气与自主呼吸对鼓室成形术患者肺功能的影响

目的探讨临床全麻中机械通气对肺功能的影响及保留自主呼吸的安全性和可行性。方法拟行单侧鼓室成形术患者53例,随机分为自主呼吸组(S组,25例)和控制呼吸组(M组,28例)。M组行快速诱导气管插管后予以机械通气,参数设定VT8ml/kg,RR10～12bpm,术中间断静脉滴注维库溴胺1～2mg维持肌肉松弛。S组慢诱导保留自主呼吸气管插管,术中不使用肌肉松弛药,保留自主呼吸。两组患者通过Datex气体监护仪调控术中麻醉气体(笑气复合异氟醚)MAC值1.2～1.3,必要时泵入丙泊酚(1～2)mg/(kg·h),控制BIS值40～60之间。记录两组患者各时间点的脉搏氧饱和度(SpO2),心率(HR),平均动脉压(MAP),胸腔体液含量(TFC),同时观察记录术中是否有呛咳,体动。两组患者均在气管插管后即时及150min抽取动脉血行血气分析得到pH值,PaO2,PaCO2,记录呼气末二氧化碳分压(PETCO2)并计算肺泡-动脉血氧分压差(P(A-a)DO2),呼吸指数(RI),生理死腔量与潮气量之比(VD/VT)。结果有10例患者因不同原因退出研究,共43例患者资料进入统计分析(M组n=23;S组n=20)。两组之间HR,MAP,TFC,P(A-a)DO2,RI,VD/VT,TFC的差异无统计学意义,组内不同时间点的P(A-a)DO2,RI,VD/VT差异也无统计学意义(P>0.05)。S组SpO2、pH值、PaO2低于M组,PaCO2,PETCO2高于M组(P<0.05),但均在正常范围或允许范围内。两组患者术中均未发生呛咳,体动。结论静吸复合全麻时,短时间的机械通气对无心肺功能障碍患者的肺气体交换功能无明显损伤作用;短时间的自主呼吸可提供充分的氧供,不引起危害性的二氧化碳潴留。

部分喉切除术后喉狭窄瘢痕组织中TGF-β_1和α-SMA的表达

【目的】研究喉狭窄瘢痕组织的病理变化,了解转化生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在喉狭窄瘢痕组织中表达及意义。【方法】垂直喉部分切除术后2～3个月出现喉狭窄10例和未狭窄16例喉瘢痕肉芽组织为实验组及10例正常声带组织为对照组,进行免疫组化染色,观察组织切片中TGF-β1和α-SMA的表达,并在KONTRON IBAS2.5全自动图像分析系统下进行阳性细胞计数。【结果】TGF-β1阳性表达主要分布于炎症细胞及成纤维细胞的胞浆,α-SMA阳性表达的主要分布于肌成纤维细胞胞浆。比较非狭窄喉瘢痕组织及正常声带组织,喉狭窄瘢痕组织的TGF-β1和α-SMA的表达均明显增强,阳性细胞数量差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】喉狭窄瘢痕组织的TGFβ1及α-SMA高表达,这些改变可能是喉狭窄发生重要内在因素。

磁共振薄层及特殊成像技术在突发性聋病因诊断中的价值

【目的】探讨磁共振(MRI)薄层及特殊成像技术在突发性聋病因诊断价值。【方法】分析60例突发性聋患者内耳MRI检查结果与听力检查及临床特征关系,探讨MRI明确病因的诊断价值以及何种情况下行MRI检查更合理。【结果】60例患者MRI检查结果 ,23例异常,阳性率为38.3%。异常结果分为3类,明确病因10例(16.6%),可能致病因素6例(10%)和无因果关系7例(11.7%),10例明确病因患者中,80%伴眩晕,均为重度以上感音神经性聋。重度以下聋组与重度以上聋组比较,眩晕发生率和MRI明确病因率差异有统计学意义(P<0.05)。行内耳MRI检查原因,22例患者为重度聋以上合并眩晕,住院后建议立即行内耳MRI检查,6例明确病因,检出率27.3%;25例患者治疗1周后效果差行MRI检查,4例明确病因,检出率16%。【结论】对于重度及以上聋突发性聋患者,MRI薄层及特殊成像技术能显著提高明确病因的诊断率。

全喉切除患者家庭支持与生活质量的相关性研究

目的探讨全喉切除患者的家庭支持与生活质量及两者之间的关系。方法采用家庭支持自评量表(MPSS—Fa)和生活质量自评量表(QQLQ),以随机抽样法,对在我院行全喉切除的65例患者进行问卷调查。结果全喉切除患者的生活质量与其家庭支持有显著的正相关关系。结论家庭支持对提高全喉切除患者的生活质量具有重要意义。

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

目的比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响。方法选取50例手术切除的新鲜骨标本,运用4种常用的脱钙液(14%硝酸、10%盐酸、20%甲盐酸和EDTA脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响。结果不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别。结论 14%硝酸脱钙能力最强,用时间最短,染色的效果最差;10%盐酸对骨组织的损伤小,HE染色的效果最好,但用时较长;20%甲盐酸脱钙能力和HE染色效果都介于10%盐酸和EDTA脱钙液之间;EDTA脱钙液脱钙用时最长,对骨组织的损伤最小。

增强型绿色荧光蛋白在人软骨细胞中的表达及修复重建人软骨示踪方法的研究

目的:检测增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescenceprotein,EGFP)基因在原代培养的人鼻中隔软骨细胞的转染效率及瞬时表达,建立原代培养的人鼻中隔软骨细胞的示踪方法,为用组织工程法修复重建人软骨寻求示踪方法提供依据。方法:在大肠杆菌中扩增pEGFP-N1质粒,通过Amaxa细胞核转染仪将pEGFP-N1质粒转入原代培养的人鼻中隔软骨细胞,应用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察其转染过程及瞬时表达情况,流式细胞仪检测其转染效率。结果:增强型绿色荧光蛋白在基因转染24h后得到了明显表达,48h后流式细胞仪检测其转化率为35.37%,且未影响软骨细胞的贴壁过程。结论:经pEGFP-N1质粒转染的原代培养的人软骨细胞仍能在体外存活,pEGFP-N1是转染原代培养的人软骨细胞较为理想的瞬时表达载体,也是组织工程化软骨形成过程的良好示踪剂。

视神经减压术的显微外科解剖基础

目的:为视神经减压术建立显微外科解剖基础。方法:在26侧经防腐固定的尸头标本上,进行视神经管和眼动脉及其周边结构的观察和测量。结果:视柱前端视神经管外膜与眶上裂硬膜融合变厚,形成凸向眶内的襞,厚度为(1.71±0.37)mm(1.14～2.38mm)。眼动脉有88.5%(23侧)于视神经管颅口底部内侧进入鞘膜,在襞前端内侧穿出入眶。视神经管外下壁与蝶窦外侧壁结合形成视神经一颈内动脉陷窝,长为(7.40±1.44)mm(5.60～10.10mm)。结论:(1)视神经减压应在视神经鞘膜内上方切开;(2)眼动脉减压应在视神经鞘膜切开骨性视神经管全长的基础上再向眶内延长1.14～2.38mm;(3)视神经-颈内动脉陷窝可作为视神经减压的解剖标志。

大鼠脑梗塞后功能恢复过程中Nogo-AmRNA及其蛋白质的表达

目的:研究神经生长抑制因子Nogo-A mRNA在大鼠缺血性脑梗塞脑内不同时点表达的变化与功能恢复的关系,探讨Nogo-A基因在缺血性脑梗塞中神经再生的作用。方法:建立缺血性脑梗塞(MCAO)模型,采用原位杂交法结合Western免疫印迹技术、功能评分,检测80只在不同时期缺血性脑梗塞大鼠脑内Nogo-A的表达量及其与功能恢复的关系。结果:原位杂交法显示:Nogo-A mRNA在脑梗塞后3 d下降,7 d后上升,2周达到高峰,第34、周保持第2周水平;Western免疫印迹显示:Nogo-A含量在脑梗塞后3 d下降,7 d后上升,3周达到高峰,第4周保持第3周水平。功能评分显示:在梗塞过程功能评分随时间推迟而升高,3周达到高峰,第4周保持第3周水平。结论:Nogo-A的转录及蛋白表达与大脑中动脉梗塞后脑卒中的功能恢复可能关系密切。

儿童腺样体肥大术后复发21例临床分析

目的探讨腺样体肥大手术切除后复发的原因及治疗措施。方法肥大腺样体切除术后复发的21例患者,进行常规鼻内镜检查,了解复发情况,鼻内镜下切除增生腺样体组织,并治疗相关疾病。结果复发21例腺样体增生明显,伴慢性鼻窦炎9例,分泌性中耳炎5例,经鼻内镜手术治疗,21例复发患者经手术全部治愈,随访6~12个月,治愈率100%。结论由于手术盲目性操作及术者经验不足,手术切除增生组织的范围、深度不能确切保证,是腺样体手术后复发的主要原因,此外,合并慢性鼻窦炎也是复发的重要因素。鼻内镜下直视手术操作简便,治疗腺样体肥大,疗效好。

病理HE切片常见的质量问题及处理方法

目的探索病理HE切片常见的质量问题,并提出相应的预防和处理方法,提高HE切片质量。方法回顾性地复习一定时期内本科所有的病理HE玻片,按照病理HE玻片中出现的质量问题进行总结、分析和分类,然后归纳。结果病理HE切片常见的质量问题基本上都是由于病理技术员经验不足、操作不当、责任心不强所造成。结论应加强从业病理技术员的系统而严格的工作培训,病理技术员要积极主动认真地工作,积累工作经验,端正工作态度,寻找出现质量问题的根源,提高HE切片的质量水平。