狼疮性肾炎合并肺胸膜病变的临床分析

目的 :探讨狼疮性肾炎 (LN)患者合并肺胸膜病变的特点及转归。方法 :回顾分析了资料完整的 170例LN合并肺胸膜病变的临床资料。结果 :6 4 5例LN中有 170例患者出现肺胸膜病变 ,占 2 6 .4 % ,其中伴有胸膜病变37.6 % ,胸腔积液 2 4 .1% ,间质性肺炎 2 7% ,急性狼疮肺炎 9.4 %。肺功能损害以弥散功能减低和小气道功能障碍为主。弥漫增生型LN发生肺部炎症性改变 ,胸膜腔渗出 ,并发心脏、神经损害的比率较其他类型显著增高。有肺胸膜损害的LN患者恶化死亡率显著高于无肺胸膜损害者 ,其病情较重 ,预后差 ,继发肺部感染更差。结论 :对已确诊为LN患者应定期作血常规及胸部X线检查 ,以便早期发现肺胸膜病变 ,调整治疗 。

基质金属蛋白酶及其组织抑制物在db/db小鼠糖尿病肾病中的表达和活性

[目的]探讨基质金属蛋白酶(MMP-s)和基质金属蛋白酶抑制物(TIMPs)在db/db小鼠糖尿病肾病发病机制中的作用。[方法]6例db/db小鼠肾组织标本,用蛋白质印迹法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白的表达,用白明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9活性。[结果]与db/m小鼠相比,db/db小鼠肾脏MMP-2、MMP-9蛋白质的表达分别下降了55.4％和30.1％(P<0.05);而TIMP-1和TIMP-2蛋白质表达分别上升了272.5％和48.8％(P<0.01)。db/db小鼠肾脏MMP-9的活性较db/m小鼠明显下降(85.9％,P<0.001);MMP-2的活性在db/db小鼠和db/m小鼠肾脏中均检测不到。[结论]db/db小鼠肾脏中MMP-s-蛋白表达和活性下降,而TIMPs蛋白表达上升,使细胞外基质降解减少,积聚增多,是db/db小鼠糖尿病肾病主要发病机制之一。

马兜铃酸肾病:一个仍需重视的问题

马兜铃酸肾病(aristolochic acid nephropathy,AAN)仍然是我国常见的慢性肾间质性疾病,其病程呈进行性发展至终末期肾脏病,所以AAN是一个仍需重视的问题。本文从马兜铃酸在体内的代谢、上皮间叶细胞转分化、组学研究、免疫炎症、自噬的角度综述了近年来马兜铃酸肾病的研究进展,旨在认识AAN发病机制,为进一步寻找干预靶点提供依据。

Fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎患者肾组织中的表达

目的:研究Ⅳ型弥漫增殖型狼疮肾炎、轻微性肾小球病变及正常肾组织中趋化因子fractalkine及其受体CX3CR1的表达,以及与CD68阳性巨噬细胞表达之间的相互关系,探讨fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎发病中的作用。方法:Ⅳ型狼疮肾炎患者的肾活检组织21例,轻微性肾小球病变患者的肾活检组织18例,光镜下正常的肾组织标本8例。采用免疫组织化学技术检测肾组织中fractalkine、CX3CR1及CD68的表达。结果:(1)正常肾组织和轻微性肾小球病变肾组织中fractalkine基本未见阳性表达;其受体CX3CR1阳性细胞和CD68阳性巨噬细胞仅偶见于肾小球及肾皮质间质中。(2)Ⅳ型狼疮肾炎肾小球和肾皮质间质中CX3CR1阳性细胞和巨噬细胞显著增多,且两者的表达显示高度的相关性(分别为r=0.956,P<0.01和r=0.965,P<0.01)。(3)Ⅳ型狼疮肾炎肾组织中fractalkine高表达于皮质肾小管上,fractalkine阳性皮质肾小管的百分比分别与肾皮质间质CX3CR1阳性细胞数和巨噬细胞数之间高度相关(分别为r=0.720,P<0.01和r=0.770,P<0.01)。结论:提示fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎的发病机制中可能占有重要地位。

连续性肾替代治疗中高糖和低糖置换液、透析液对血糖的影响

目的:探讨连续性肾脏替代治疗(CRRT)置换液或透析液糖浓度对患者血糖的影响。方法:在23例急性肾功能衰竭(ARF)的患者中,分别采用高糖和低糖置换液或透析液行CRRT,高糖组8例使用葡萄糖浓度高于50mmol/L的置换液或透析液,低糖组15例使用葡萄糖浓度低于10mmol/L的置换液或透析液,比较CRRT前后血糖浓度的变化。结果:高糖组CRRT后第一日血糖为(27.2±5.3)mmol/L,经置换液中加入胰岛素(每2g～4g葡萄糖加入1U胰岛素),以及皮下、静脉给予胰岛素后,5例血糖降至8.7mmol/L～17.3mmol/L,3例血糖仍在20.0mmol/L以上;低糖组患者CRRT后第一日血糖水平为(9.5±3.1)mmol/L,无需另外加用胰岛素,没有发生低血糖。结论:CRRT时使用低糖置换液或透析液,患者的血糖控制较好。

狼疮肾炎患者肾组织CD_(134)(OX_(40))表达的免疫组织化学分析

目的 :了解狼疮肾炎 (LN)肾组织中CD13 4 (OX40 )的表达并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系。方法 :用免疫组织化学方法对 4 0例LN患者肾组织CD13 4 的表达进行检测 ,并对其与LN的肾脏病理改变和肾功能损害的相关性进行分析。结果 :LN患者肾组织中 ,CD13 4 表达显著上调 ,尤其以WHOⅣ型LN更为明显。除系膜细胞、内皮细胞和远曲小管CD13 4 表达明显增强外 ,肾间质毛细血管和大血管内皮细胞亦有CD13 4 表达阳性的浸润细胞。LN肾组织CD13 4 表达与LN肾脏病理活动指数和肾功能损害显著相关。结论 :LN患者确实存在CD13 4 共刺激分子的异常表达 。

糖皮质激素对BXSB狼疮小鼠肾组织fractalkine/CX3CR1表达的影响

目的:研究BXSB狼疮小鼠肾组织趋化因子fractalkine及其受体CX3CR1的表达以及给予泼尼松治疗后的改变,探讨两者在狼疮肾炎发病机制中的可能作用。方法:12周龄雄性BXSB狼疮小鼠随机分成泼尼松治疗组(n=6)和实验对照组(n=6);另取同周龄雄性C57BL/6J小鼠6只作为正常对照组。正常对照组和实验对照组小鼠每天给予0.5mL生理盐水灌胃;泼尼松治疗组小鼠每天给予0.18mg/20gBW的泼尼松溶于0.5mL生理盐水灌胃。持续10周结束实验。应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹检测小鼠肾组织frac-talkine和CX3CR1 mRNA和蛋白的表达,并检测小鼠实验室指标以及肾脏组织病理学的变化。结果:BXSB狼疮小鼠肾组织fractalkine以及CX3CR1 mRNA和蛋白表达均较C57BL/6J小鼠明显增高,而经过泼尼松治疗后的BXSB小鼠两者的表达均较未治疗组(实验对照组)明显下降,同时伴有血清免疫球蛋白G(IgG)、IgM、血清抗双链脱氧核糖核酸(dsDNA)抗体水平以及血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)水平的明显改善,尿蛋白减少;肾小球内免疫复合物沉积和肾脏组织病理学改变亦显著减轻。结论:实验结果提示fractalkine/CX3CR1可能参与了小鼠狼疮肾炎的发病机制,且糖皮质激素可能通过抑制肾脏fractalkine的表达而发挥其治疗效应。

糖皮质激素预防逆行性肾盂肾炎大鼠肾脏纤维化的作用及其机制的初步探讨

目的 探讨糖皮质激素有否预防或减轻肾盂肾炎大鼠肾脏纤维化的作用。方法 雌性成年SD大鼠随机分为对照组和实验组:（1）正常对照组:未经任何处理;（2）实验组:建立逆行性肾盂肾炎模型,按治疗的不同分为4组:①早期治疗组;②延迟治疗组;③延迟加激素组;④未治疗组。所有实验对象在接种细菌前和接种细菌后分别检测血清肌酐、血尿素氮、尿渗透浓度、尿蛋白/肌酐比值、尿NAG酶及β2-m,膀胱穿刺取尿行细菌培养。接种细菌后12周处死大鼠取肾行大体标本、肾组织切片普通光镜检查、肾组织免疫组织化学检测胶原蛋白Ⅲ（COⅢ）和纤连蛋白（FN）在肾脏的表达。结果 早期治疗组无肉眼肾疤痕形成,肾小球未见明显异常,肾小管形态基本正常。延迟治疗组有明显肾疤痕形成,明显的间质纤维化、小管萎缩,尿渗透浓度在接种细菌后第8周开始下降,NAG酶在接种细菌后12周开始升高。延迟加激素组仅见轻度疤痕,疤痕外组织基本正常,与未治疗组和延迟治疗组比较差异有显著性意义。结论 糖皮质激素联合抗生素治疗可预防和减轻实验性肾盂肾炎间质纤维化。

振摇对腹膜表面层和腹膜功能的影响

目的:探讨腹腔振摇对腹膜表面层和腹膜功能的影响。方法:将12只雄性SD大鼠随机分成对照组(n=6)和振摇组(n=6);振摇组大鼠麻醉后经腹部插入静脉留置针,由留置针管注入25mL含[125I]-白蛋白的4.25%的葡萄糖透析液,在电摇床(100r/min)上行腹膜动力学试验;对照组大鼠则行常规腹膜动力学试验。腹膜动力学试验完毕后,取对照组和振摇组大鼠的腹膜组织,经含1%四氧化锇(OsO4)的氟化碳(FC75)固定液固定后,行电镜检查,经Bouin液固定后行常规病理检查(HE染色)。结果:振摇组大鼠的腹膜通透性显著高于对照组,表现为腹腔液体重吸收率明显增加,经毛细血管的超滤率明显下降,淋巴重吸收率明显增加,净超滤量明显下降,小分子溶质转运明显增高。电镜检查结果显示,振摇组的腹膜表面层明显薄于和疏松于对照组,腹膜组织常规病理学检查两组无明显差异。结论:腹腔振摇使腹膜通透性增高,同时破坏了腹膜表面层,提示腹膜表面层在控制腹膜通透性中起重要作用。

RANTES在狼疮肾炎肾组织中的表达及其意义

目的 了解狼疮肾炎 (LN)肾组织中化学趋化因子激活正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)的表达并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系。方法 采用微波免疫组织化学染色 (SP法 )和原位分子杂交技术检测LN肾脏RANTES的表达 ,并进一步分析其与LN活动指数、肾脏病理和功能损害的关系。结果 狼疮肾炎组织中RANTES表达显著增高 ,以WHOⅣ型为显著。RANTES在肾小球和肾小管均有表达 ,但肾小管表达更显著。LN肾组织RANTES表达与肾组织活动指数、肾脏病理改变和肾功能损害显著相关。结论 RANTES可能参与了LN的发病机制 ,肾组织中RANTES的表达可作为反映狼疮肾组织活动病变和进行性肾损害的参考指标。

细胞周期抑制蛋白p21^(cipl)在狼疮肾炎肾组织中的表达及其意义

目的 了解狼疮肾炎（ＬＮ）中细胞周期抑制蛋白ｐ２１^(ｃｉｐｌ)的表达并探讨其与肾脏病病理改变、细胞增生及ＬＮ肾组织活动性的关系。方法 采用微波免疫组织化学染色法检测ＬＮ肾组织ｐ２１^(ｃｉｐｌ)表达，并进一步分析其与肾小球增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）阳性细胞数、ＬＮ活动指数、细胞增生等肾脏病理改变的相关关系。结果 正常肾小球细胞无或仅有较弱 ｐ２１^(ｃｉｐｌ)。表达．ＬＮ肾小球细胞ｐ２１^(ｃｉｐｌ)的表达显著上调，尤以非Ⅳ型为显著。ＬＮ肾组织ｐ２１^(ｃｉｐｌ)阳性细胞数、ＰＣＮＡ阳性细胞数及ＬＮ肾组织活动指数显著负相关。结论 ｐ２１^(ｃｉｐｌ)在 ＬＮ肾小球细胞中呈高表达，且与肾小球细胞增生程度密切相关ｐ２１^(ｃｉｐｌ)可能参与ＬＮ发病的过程。

干扰素-γ和白细胞介素4对狼疮肾炎患者巨噬细胞炎症蛋白-1α产生的效应

目的 观察干扰素（ＩＦＮ）-γ、白细胞介素（ＩＬ）-４对狼疮肾炎（ＬＮ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）巨噬细胞炎症蛋白－１α（ＭＩＰ－１α）产生的效应，以探讨Ｔｈ１、Ｔｈ２ 因子是否对 ＬＮ ＭＩＰ－１α产生具有调控作用。方法 Ｅｌｉｓａ方法检测细胞培养上清液ＭＩＰ－１α，ＲＴ－ＰＣＲ检测 ＭＩＰ－１αｍＲＮＡ。结果 （１）ＩＦＮ－γ增强 ＬＮ患者 ＰＢＭＣ ＭＩＰ-１α蛋白及ｍＲＮＡ产生。（２）ＩＬ-４抑制 ＬＮ患者ＰＢＭＣ ＭＩＰ－１α蛋白及ｍＲＮＡ产生。（３）ＩＦＮ－γ、ＩＬ-４对正常组ＭＩＰ-１α产生无显著效应。结论ＩＦＮ-γ增强ＬＮ患者ＰＢＭＣ ＭＩＰ-１α产生而ＩＬ－４抑制 ＭＩＰ－１α产生。

缺血再灌注损伤后大鼠肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白的表达及其功能

目的探讨大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）后肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白（OAT）1和3表达及功能变化。方法建立大鼠IRI模型，于术后第1、2、4、6天取血及肾组织标本。常规测定Scr浓度及观察肾脏组织形态。分别用免疫组织化学和Western印迹检测肾脏组织OAT1和3蛋白表达。毛细血管电泳仪检测肾脏对氨基马尿酸（PAH）排泄率。钼蓝分光光度法测定基侧膜钠-钾-ATP酶（Na^＋-K^＋-ATP酶）活性。另设假手术组作对照。结果模型组大鼠术后第1天肾小管上皮细胞坏死脱落，管腔内可见大量管型，刷状缘消失，基底膜裸露；Scr显著升高。与假手术组比较，模型组大鼠肾组织匀浆及肾小管上皮细胞OAT1和OAT3表达增强；PAH排泄率降低[（0．53±0．15）比（4．00±0．67）ml／min，P〈0．01]；肾小管上皮细胞基侧膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性降低[（9．33±1．37）比（15．07±0．15）μmolPi·（mg蛋白）^-1·h^-1，P〈0．01]。损伤后第2天及第4天，损伤的肾小管逐渐修复，OAT1和3表达逐渐降低，PAH排泄率和Na^＋-K^＋-ATP酶活性逐渐增加；至第6天时肾小管基本恢复正常。结论急性肾缺血再灌注导致大鼠肾小管上皮细胞可逆性损伤，损伤初期肾小管OAT1和OAT3表达增强，转运有机阴离子功能下降，PAH排泄减少。

腹膜组织PPAR-γ、TLR4表达及STATl信号活化与LPS诱导大鼠急性腹膜炎的相关性研究

目的观察过氧化物酶体增殖因子活化受体-γ（PPAR-γ）、Toll样受体4（TLR4）及STAT1信号蛋白在脂多糖（LPS）诱导大鼠腹膜透析相关性急性腹膜炎中的表达，初步探讨LPS诱导大鼠腹膜透析相关性急性腹膜炎的发生机制。方法30只雄性SD大鼠根据LPS作用时间随机分成5组，每组6只。（1）对照组：腹腔注入4．25％乳酸盐腹膜透析液（简称腹透液，90ml／kg）；（2）LPS4h组：LPS1mg／kg腹腔注入后，随即注入腹透液；（3）LPS8h组：腹腔注入LPS4h后，再注入腹透液；（4）LPS12h组：腹腔注入LPS8h后，再注入腹透液；（5）LPS24h组：腹腔注入LPS20h后，再注入腹透液。腹透液留腹4h后处死大鼠，留取腹水、壁层及脏层腹膜组织。免疫组织化学染色检测腹膜组织PPAR-γ的表达；RT—PCR检测腹膜组织PPAR-γTLR4mRNA的表达；Westernblot检测腹膜组织PPAR-γ、TLR4、p-STAT1、STAT1蛋白的表达。ELISA法检测腹水中IL-6浓度，常规腹膜组织Masson染色和腹水白细胞计数。结果免疫组织化学研究结果显示大鼠腹膜间皮细胞结构性表达PPAR-γ。与对照组相比，LPS刺激后大鼠腹膜组织PPAR-γmRNA表达在4h显著下降（P〈0．05），8h明显升高（P〈0．01），12h及24h后差异无统计学意义；PPAR-γ蛋白表达在4h明显升高（P〈0．01），并持续高表达至24h（P〈0．01）；TLR4mRNA及蛋白表达在4h明显升高（P〈0．05），并持续高表达至24h（P〈0．05）。大鼠腹膜组织PPAR-γ与TLR4蛋白表达呈显著正相关（r=0．5936，P〈0．001）。LPS刺激4h后p-STAT1表达明显升高，持续至24h，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。LPS作用4、8h时大鼠腹水中IL-6浓度显著增高，与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05），12h后其浓度接近对照组水平。壁层腹膜石蜡切片Masson染色可见LPS作用不同时间组腹膜组织明显水肿；各组间腹水白细胞计数差异无统计学意义。结论腹膜组织PPAR-γ、TLR4的高表达及STAT1活化共同参与了LPS诱导的大鼠腹膜透析相关性急性腹膜炎症过程。

腹膜-肾综合征

残余肾功能（residual renal function,RRF）除与较好的溶质与液体清除相关外，还与循环炎性标志物的减少、血压的降低、左心室肥厚的减轻及血红蛋白水平的升高、营养状态改善及钙磷代谢平衡相关联。

脂多糖通过NF—κB途径上调大鼠腹膜间皮细胞表达CD40和ICAM-1

目的观察脂多糖（LPS）作用下大鼠腹膜间皮细胞NF-κB活性及其对CD40和细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响。方法分离及培养大鼠腹膜间皮细胞。LPS不同浓度作用12h及LPS（5μg／m1）作用不同时间点收集细胞；LPS（5μg／m1）或BAY11-7085（一种IκBα的磷酸化抑制剂）不同浓度（1μmol／L和5μmol／L）预处理3h加LPS，作用3h后收集细胞；采用RT-PCR方法检测CD40和ICAM-1 mRNA表达。采用蛋白印迹检测NF—κB和磷酸化NF-κB（p-NF-κB）蛋白表达。结果与常规培养基对照组相比，5μg／ml LPS组CD40和ICAM-1 mRNA表达显著升高（P〈0．05），10μg／ml LPS组显著高于5μg／ml LPS作用组（P〈0．05）。5μg／ml LPS作用下，ICAM-1 mRNA表达从1h开始升高，3h达到高峰，之后逐渐降低。CD40 mRNA表达在1h无显著变化，3h时迅速达到高峰，之后逐渐降低。常规培养的大鼠腹膜间皮细胞结构性表达p-NF-κB蛋白；加入LPS后，p-NF-κB蛋白表达显著增加，其中30min～1h表达最强，之后逐渐降低，至2h仍显著高于常规培养组（P〈0．05）。加入5κmol／LBAY11-7085后，LPS诱导的CD40和ICAM-1 mRNA表达显著降低（P〈0．05），与正常对照组相比差异无统计学意义。结论LPS以时间依赖和浓度依赖模式上调CD40和ICAM-1的表达。NF-κB信号途径参与调节LPS诱导的大鼠腹膜间皮细胞CD40和ICAM-1的表达。

罗格列酮通过核因子κB抑制脂多糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞CD40和胞间黏附分子1的表达

目的探讨罗格列酮对脂多糖（LPS）诱导的体外培养大鼠腹膜间皮细胞CD40和胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响以及调节机制。方法分离及培养大鼠原代腹膜间皮细胞。将细胞随机分为正常对照组、LPS（5mg／L）组、BAY11-7085（NF-κB抑制剂）组（5μmol／L预刺激3h后加入LPS作用3h）、不同浓度罗格列酮（过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体1配体）组（10、20μmol／L分别预处理3h再加入LPS5mg／L）、GW9662（过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体v拮抗剂）预处理组（预处理3h后加入罗格列酮10μmol／L，3h后再加入LPS5mg／L）和溶媒对照组。加入LPS后1h收集细胞检测核因子κB（NF—κB）p65水平；3h收集细胞分别检测CD40和ICAM-1基囚表达；24h收集细胞分别检测CD40和ICAM-1蛋白表达。RT-PCR法检测基因表达；Western印迹和免疫荧光方法检测蛋白表达及核因子磷酸化。结果（1）常规培养的腹膜间皮细胞表达基础量CD40和ICAM-1，LPS显著上调其表达（P〈0．05）；LPS作用1h时腹膜间皮细胞磷酸化NF-κBp65活化水平显著增高，与对照组差异有统计学意义（1．10±0．17比0．55±0．06，P〈0．05）。（2）NF-κB抑制剂BAY11—7085预处理后LPS诱导的磷酸化NF-κBp65水平、CD40和ICAM-1表达显著低于LPS组（0．22±0．11比1．10±0．17，P〈0．01；0．34±0．02比0．50±0．06，P〈0．05；0．35±0．16比0．74±0．03，P〈0．05）。（3）罗格列酮预处理后，LPS诱导的磷酸化NF-κBp65水平、CD40以及ICAM-1蛋白表达亦显著低于LPS组（0．77±0．08比0．90±0．10，P〈0．01；0．79±0．16比0．99±0．06，P〈0．05；0．83±0．20比1．22±0．13，P〈0．05）。GW9662和罗格列酮联合预处理后，LPS诱导的磷酸化NF-κBp65水平与罗格列酮预处理组差异无统计学意义，但CD40和ICAM-1表达显著高于罗格列酮预处理组（0．95±0．19比0．79±0．16；1．04±0．24比0．83±0．20，均P〈0．05）。结论NF-κB信号通路参与调节LPS诱导的腹膜间皮细胞表达CD40和ICAM-1。罗格列酮通过NF-κB途径下调CD40和ICAM-1表达，从而发挥抗炎作用。

持续性非卧床腹膜透析患者继发性甲状旁腺功能亢进相关因素分析

目的探讨持续性非卧床腹膜透析（CAPD）患者继发性甲状旁腺功能亢进（SHPT）的患病率及相关因素。方法分析2011年7月至2012年1月在本院腹膜透析中心规律随访的CAPD患者数据库资料。所有患者根据全段甲状旁腺激素（iPTH）分为甲状旁腺功能亢进组及甲状旁腺功能非亢进组。通过Logistic回归分析SHPT的相关影响因素。结果共纳入639例患者，SHPT的患病率为46．95％。Logistic多因素回归分析结果显示，低血红蛋白、低血钙、高血磷、高碱性磷酸酶、高血肌酐、高标准化蛋白分解代谢率（nPCR）及低钙透析液是SHPT的独立影响因素。结论CAPD患者中SHPT患病率较高，钙磷代谢异常、高蛋白饮食、肾性贫血及低钙透析液是影响SHPT发生的独立因素。