乳腺癌细胞株MCF-7/ADM中肿瘤干细胞的研究

目的:通过对阿霉素耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADM中乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)成分分析,观察化疗耐药处理的MCF-7乳腺癌细胞株是否可高效富集乳腺癌干细胞,为研究乳腺癌的发病机制提供思路。方法:MTT法分别测定阿霉素耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADM及其亲本细胞株MCF-7对阿霉素的IC50,计算其耐药倍数。通过细胞侧群(side population,SP)分析、球囊培养、流式细胞仪检测MCF-7/ADM及MCF-7中CD4+4CD2-4细胞比例三方面鉴定MCF-7/ADM和MCF-7中乳腺癌干细胞比例。结果:阿霉素耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADM相对于MCF-7对阿霉素的耐药倍数为37.1;MCF-7/ADM中SP细胞比例为(9.60±0.66)%,MCF-7细胞的SP细胞比例为(0.39±0.11)%;两者球囊形成率分别为(10.27±0.64)%和(1.03±0.15)%;两者的CD4+4CD2-4细胞比例分别为(64.87±3.87)%和(3.70±0.53)%,差异显著(P<0.05)。结论:阿霉素耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADM中乳腺癌干细胞比例明显高于MCF-7细胞。化疗耐药处理的MCF-7乳腺癌细胞株可高效富集乳腺癌干细胞,这对于乳腺癌发病机制的研究具有重要意义。

内生场热疗法治疗晚期肿瘤的临床分析

目的 探讨内生场热疗法在晚期肿瘤治疗中的安全性及近期疗效。方法 采用NRL-001型内生场热疗系统对74例恶性肿瘤进行384人次热疗。通过对皮肤灼伤、治疗中疼痛等的观察,评估其安全性,并经胸片、B超、CT等检查评价其近期疗效。结果 74例患者治疗过程中均无疼痛,仅1.3％(5/384)人次受到Ⅰ度皮肤灼伤。74例中,达CR(完全缓解)13.5％,PR(部分缓解)31.1％,而NC(没有缓解)55.4％。47例合并不同程度疼痛患者经内生场热疗后,87.3％有不同程度的缓解。结论 内生场热疗可望作为一种新型的安全有效的肿瘤辅助治疗手段。

鼻咽癌组织中iNOS的表达与肿瘤的浸润、转移

目的探讨诱生型一氧化氮合酶(iNOS)在鼻咽癌组织中的表达与肿瘤的浸润、转移的关系。方法应用免疫组化方法检测77例鼻咽癌患者活检石蜡包埋标本的iNOS与并分析它与肿瘤的浸润(T分期)与转移(N分期)的关系。结果iNOS在鼻咽癌组织中的阳性表达率为33.77%(26/77),iNOS表达与T分期、N分期呈正相关(P<0.05)。结论鼻咽癌组织中iNOS的表达肿瘤浸润与转移中起到促进作用。

晚期腹腔肿瘤热灌注化疗并射频高温治疗的剂量学与疗效分析

目的探讨晚期腹腔肿瘤腹腔热灌注化疗并射频(RF)加温时的温度剂量与疗效的关系。方法回顾分析本组在2001年1月-2002年5月,治疗的各类腹腔晚期转移性恶性肿瘤56例,所有患者均接受1～8次腹灌+RF+化疗。用RF对腹腔加温,测量腹腔及直肠温度。结果2点测温的患者82%(23/28例)腹腔温度达到40℃,3点测温68%(19/28例)达到40℃,腹腔与直肠温度基本相近。热剂量学指标与疗效分析显示,治疗次数、Tmax和Eq.40℃是影响患者的6个月存活率的主要因素。热灌注化疗+RF具有较好的止痛效果,毒副作用少。结论腹腔热灌注合并RF加温及化疗对晚期腹腔肿瘤患者有良好效果,建议治疗剂量应达到:腹腔Tmax温度在40℃以上,>40℃的时间>40min,治疗次数在4次以上。我们提出的剂量指标Eq.40℃.min,包含了腹腔温度39.5-42℃的全部生物效应,值得进一步使用和验证。

环磷酰胺、阿霉素、5-氟尿嘧啶方案与紫杉醇、顺铂方案治疗晚期乳腺癌的疗效比较

背景及目的:环磷酰胺、阿霉素、5-氟尿嘧啶方案(CAF方案)和紫杉醇、顺铂方案(TP方案)均是治疗晚期乳腺癌的有效方案,但TP方案给药复杂。我们对两组晚期乳腺癌病例进行回顾性分析,比较CAF方案及TP方案治疗晚期乳腺癌的客观疗效和不良反应。方法:经病理检查证实的晚期乳腺癌患者117例,按不同治疗方案分为CAF组和TP组,两组病例特征具可比性(P>0.05)。CAF组(66例):环磷酰胺600mg/m2,静脉推注,第1天;5-氟尿嘧啶600mg/m2,静脉滴注,第1、8天;阿霉素60mg/m2,静脉推注,第1天。TP组(51例):紫杉醇135mg/m2,静脉滴注3h,第1天;顺铂60mg/m2,静脉滴注,第2、3天。两组均以3周为1个疗程,至少接受2个疗程化疗。结果:CAF组初治病例有效率54.8%(17/31),复治病例有效率31.4%(11/35),总有效率42.4%(28/66);TP组分别为62.5%(15/24),59.3%(16/27),60.8%(31/51)。两组初治病例有效率差异无统计学意义(P>0.05,χ2检验),复治病例有效率及总有效率差异有统计学意义(P<0.05,χ2检验)。CAF组中位无进展时间7.8个月犤95%可信区间(confidenceinterval,CI)为5.3～10.8个月犦、中位生存时间17.8个月(95%CI为13.3～22.5个月);TP组分别为8.6个月(95%CI为6.5～12个月)和19个月(95%CI为15～25.5个月),两组差异均无统计学意义(P>0.05。

肿节风防治化疗后血小板减少症的研究

目的 :探讨肿节风对大剂量化疗后小鼠血小板减少的防治作用。方法 :本研究以Babl/c纯系清洁级小鼠为实验对象 ,通过大剂量 5 氟尿嘧啶腹腔注射复制血小板减少的动物模型 ,用肿节风稀释液从实验开始连续进行灌胃干预 ,分别在预处理前、化疗前、化疗后第 2、第 4及第 7天测定小鼠血常规 ;并在化疗后第 7天处死小鼠 ,行骨髓病理活检 ,观察骨髓造血情况。结果 :经过肿节风预处理后 ,化疗前单药干预组及联合干预组小鼠外周血小板数量显著高于同期对照组 (P <0 0 5 ) ,化疗后两个实验组小鼠的血小板数量与对照组相比无显著下降 (P <0 0 5 ) ,而两实验组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。骨髓病理检查结果提示 ,两实验组小鼠骨髓增生活跃 ,骨髓腔内可见巨核细胞 ,对照组小鼠骨髓增生低下 ,未发现巨核细胞。结论 :肿节风具有对抗大剂量 5 FU所造成的血小板减少的作用 ,从而预防并治疗化疗后血小板减少症的发生。

非小细胞肺癌组织中VEGF-C和VEGFR-3的表达及其临床意义

背景与目的:血管内皮生长因子-C(vascularendothelialgrowthfactorC,VEGF-C)和VEGFR-3是促进恶性肿瘤淋巴管形成的重要因子,其表达与恶性肿瘤的淋巴结转移关系密切。本文旨在研究VEGF-C和VEGFR-3蛋白在非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化方法检测77例NSCLC组织中VEGF-C和VEGFR-3表达情况,分析其与肿瘤淋巴管密度(lymphaticvesseldensity,LVD)、肿瘤的大小、癌的组织类型、组织分化程度、淋巴结转移情况、临床复发和术后生存期的关系。结果:77例NSCLC组织中有45例(58%)VEGF-C阳性,32例(42%)VEGFR-3阳性。NSCLC组织中VEGF-C表达与肿瘤组织的分化程度有关(r=-0.32,P=0.018);VEGF-C及VEGFR-3表达与肿瘤的淋巴结转移、LVD、肿瘤大小及术后生存期有关。NSCLC组织中VEGF-C与VEGFR-3表达相关(r=0.23,P=0.045)。结论:VEGF-C和VEGFR-3表达与NSCLC的淋巴结转移、预后相关,它的高表达提示肺癌患者容易出现淋巴结转移和预后不良。

吉西他滨固定剂量率输注联合奥沙利铂一线治疗晚期胰腺癌的Meta分析

背景与目的:有研究提示吉西他滨(Gemcitabine,GEM)固定剂量率(Fixed-doserate,FDR)输注治疗晚期胰腺癌似有较好的疗效,Meta分析也显示含铂类联合化疗优于GEM单药化疗,本文试图通过Meta分析,探讨GEMFDR输注联合奥沙利铂(GEMOX)一线治疗晚期胰腺癌的地位和价值。方法:通过MEDLINE、EMBASE、ASCO等数据库及论文集检索国内外的相关文献。选择治疗组为GEMOX方案化疗,对照组为标准GEM单药化疗的晚期胰腺癌随机对照试验。由2位评价者分别按上述检索策略收集资料,按纳入标准入选,主要对总生存率及主要不良反应进行Meta分析。结果:从182篇文献中筛选出符合纳入标准的2个随机对照试验,共涉及869例患者。与GEM单药组比较,GEMOX组半年生存率提高9%(95%CI0.03～0.16,P=0.005),1年生存率提高5%(95%CI-0.01～0.11,P=0.08),客观有效率提高6%(95%CI0.02～0.10,P=0.006);WHOⅢ/Ⅳ度贫血发生率下降5%(95%CI-0.08～-0.01,P=0.01),恶心/呕吐提高13%(95%CI0.08～0.18,P<0.001),神经毒性增加14%(95%CI0.04～0.24,P=0.009),粒细胞减少症、血小板减少症两组相似,差异无统计学意义。结论:现有的证据提示,GEM固定剂量率输注联合奥沙利铂组成的GEMOX方案一线治疗晚期胰腺癌可能有较好的应用前景,值得进行进一步的临床试验。

243例早期乳腺癌保乳治疗的效果分析

目的:分析总结早期乳腺癌保留乳房综合治疗的效果,观察5年无瘤生存率、总生存率和美容效果。方法:选择符合保留乳房标准的早期乳腺癌患者243例,实施保留乳房的局部广泛肿瘤切除手术及腋窝Ⅰ、Ⅱ水平淋巴结清扫或腋窝前哨淋巴结活检,对术中病理报告标本切缘阳性者实施再切除检验,保证切缘阴性后乳腺切除残腔放置银夹标记切除范围和深度。根据术后病理报告确定个体化的综合治疗。根据临床分期需要化疗患者常规行术后辅助全身化疗6个周期;常规放射治疗于术后或化疗2～3个周期后开始,患侧乳房放射剂量50Gy,瘤床部位根据肿瘤大小、所在部位和肿瘤标本切缘状况电子线补充照射10～20Gy。腋窝淋巴结有转移者预防性照射患侧锁骨上淋巴区域50Gy。放疗结束后继续化疗,化疗结束后开始三苯氧胺内分泌治疗5年。定期随访患者局部和全身情况。生命表法计算5年无瘤生存率和总生存率;按Harris标准评估美容效果;按RTOG标准评估急性和晚期放射性损伤。结果:243例早期乳腺癌符合保留乳房治疗标准,实施了保乳治疗并且能够接受定期随访,随访中位时间56个月(12～84个月)。7例患者出现局部区域复发;2例患者非肿瘤猝死。5年无瘤生存率93%,5年总生存率98%。美容效果及患者满意度均超过94%。所有患者均未出现严重的急性和晚期放射性损伤。结论:符合保乳治疗标准的早期乳腺癌施行保留乳房的综合治疗是可行的,绝大多数患者可以获得满意的美容效果,提高了早期乳腺癌患者的生存质量。

鼻咽癌组织中VEGF表达及MVD的临床意义

[目的]探讨鼻咽癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达及微血管密度(MVD)与癌生物学行为的关系。[方法] 采用免疫组化SP染色法检测114例病理确诊为鼻咽癌初治患者的鼻咽活检组织的Von Willebrand因子及VEGF的表达,分 析它们与鼻咽癌患者的复发、转移、临床分期、T分期、N分期等的关系。[结果]VEGF表达与肿瘤内MVD呈明显正相关(r= 0.681,P<0.05)。VEGF表达与肿瘤的临床分期、T分期及N分期密切相关(r分别为0.204、0.217、0.064,P<0.05), MVD与肿瘤的临床分期、T分期及N分期也密切相关(r分别为0.251、0.208、0.255,P<0.05)。肿瘤的复发及转移也与 VEGF的表达及MVD有显著相关(P<0.05)。[结论]鼻咽癌组织内VEGF表达、MVD与鼻咽癌的浸润、复发、转移密切相关; 治疗前鼻咽癌患者癌组织内的VEGF表达水平与MVD可作判断其预后的有效生物学指标。

MAGE-3多肽纳米疫苗对小鼠胃癌种植瘤抑瘤效应研究

背景与目的:纳米颗粒作为疫苗载体可保护抗原免受酶解,增强免疫原性,是一类极具开发潜力的新型疫苗载体。本实验制备负载CD4+CD8+T细胞表位MAGE-3多肽抗原的纳米疫苗,探讨其相关特性及抗肿瘤免疫。方法:利用自组装技术制备多肽/Chit-DC(壳聚糖-脱氧胆酸)载药纳米胶束,透射电镜观察纳米微观形态,荧光分光光度法计算负载率、载药量,并测定药物释放规律。流式细胞仪检测DC(树突状细胞)对药物的吞噬率,酶联免疫斑点实验(ELISPOT)和细胞毒性实验检测MAGE-3多肽纳米疫苗激活机体细胞免疫反应的状况。动物实验观察其体内抑瘤效应。结果:成功制备多肽/Chit-DC纳米胶束,药物包封率约为37%,载药量为17%。载药纳米颗粒中的多肽在pH7.4的PBS中释放缓慢,于48h达释放平台;在2mg/mL溶菌酶溶液中,药物有一定的突释现象,于24h达释放平台。ELISPOT和细胞毒性实验显示MAGE-3多肽纳米疫苗可以激活体内免疫反应而产生针对MAGE-3的CTL,特异性杀伤表达MAGE-3的肿瘤细胞。体内抑瘤实验显示,多肽纳米疫苗组相对肿瘤抑制率为37.81%。结论:MAGE-3多肽/Chit-DC纳米疫苗能有效激活体内的抗肿瘤免疫效应,抑制MFC小鼠前胃癌细胞的生长。

吉西他滨固定剂量率输注一线治疗晚期胰腺癌随机对照试验的Meta分析

目的：探讨吉西他滨固定剂量率（fixed dose rate，FDR）输注一线治疗晚期胰腺癌的价值。方法：通过MEDLINE、EMBASE、ASCO和ECCO等数据库及论文集检索相关文献，选择FDR组为吉西他滨FDR化疗，对照组为吉西他滨30min化疗的晚期胰腺癌随机对照试验（randomized controlled trial，RCT）。由2位评价者依据检索策略收集资料，按纳入标准筛选文献，主要对总生存率，其次是客观缓解率和毒副反应进行Meta分析。结果：从876篇文献中筛选出符合纳入标准的2个RCT，涉及648例患者。FDR组与对照组相比，FDR组1年生存率提高6％，95％CI为0．00～0．12，P=0．060；客观缓解率提高5％，95％CI为0．00～0．09，P=0．030；3～4度中性粒细胞减少症增加25％，95％CI为0．18～0．33，P〈0．000；血小板减少症增加19％，95％CI为0．13～0．26，P〈0．000；贫血增加8％，95％CI为0．02～0．13，P=0．007；恶心呕吐增加4％，RD=0．04，95％CI为0．00～O．12，P=0．160。结论：现有证据不推荐吉西他滨FDR输注常规临床应用，但值得进一步的临床试验。

吉西他滨联合化疗一线治疗晚期胰腺癌生存结果的亚组meta分析

【目的】Meta分析提示吉西他滨(GEM)联合化疗一线治疗晚期胰腺癌优于标准的GEM单药化疗,在此基础上进行亚组生存结果的meta分析及资料更新,旨在寻找确切有效的化疗方案。【方法】通过MEDLINE、EMBASE、ASCO、ECCO等数据库及论文集检索相关文献。按纳入标准筛选新增文献并进行资料更新。主要对各亚组进行半年生存率、其次是1年生存率的meta分析。【结果】17个随机对照临床试验(RCT)共3 821例患者纳入分析,按化疗方案分为GEM联合顺铂(GEMDDP)、GEM固定剂量率输注联合奥沙利铂(GEMOX)、联合5FU(GEMFU)、联合卡培他滨(GEMCAP)以及联合伊立替康(GEMIRI)等5个亚组,各亚组半年生存率的治疗优势(RD)分别为5%(P=0.24)、9%(P=0.005)、2%(P=0.46)、7%(P=0.03)和-1%(P=0.88);1年生存率RD为6%(P=0.11)、5%(P=0.07)、4%(P=0.19)、5%(P=0.08)和0(P=0.97)。【结论】现有的证据提示GEMOX、GEMCAP联合化疗方案一线治疗晚期胰腺癌,有较好的应用前景,值得进一步的临床试验。

Survivin在结肠癌组织中的表达及意义

背景与目的:Survivin蛋白是新近发现的凋亡抑制因子,研究表明Survivin蛋白在多种恶性肿瘤中高表达。本研究旨在探讨Survivin在结肠癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:应用免疫组化LSAB法对79例术前无放、化疗的结肠癌标本及其相应的癌旁组织和12例正常结肠组织进行Survivin检测,并结合肿瘤临床病理特征、预后进行分析。结果:癌旁组织及肿瘤组织Survivin阳性率分别为32.9%(26/79)与78.5%(62/79),正常结肠组织无Survivin表达,三者之间的阳性率有显著性差异(P均<0.05)。Survivin的表达与结肠癌患者年龄、性别、血型、血CEA水平、淋巴结转移、分化程度、浸润深度、Dukes分期均无显著性相关(P均>0.05)。以肿瘤细胞Survivin阳性率>25%作为Survivin高表达的标准,则Survivin高表达组结肠癌患者的3年生存率明显低于低表达组(39.96%vs63.56%,P=0.04)。Cox多因素风险模型分析发现上述因素中仅Dukes分期和Survivin是否高表达是影响预后的因素,Wald值分别为24.225和5.504,P值分别为0.000和0.019。结论:Survivin在结肠癌组织表达上调,提示该基因在结肠癌发生发展中起重要作用;Survivin过度表达提示预后不良,可作为判断结肠癌预后的独立指标。

正在进行的晚期胰腺癌临床试验

吉西他滨30分钟静脉滴注是晚期胰腺癌的标准治疗方案。为了更好的提高吉西他滨的疗效和改善胰腺癌患者的预后,临床上正在进行各种试验:更改用药方法;与其它化疗药物联合应用或替换为更有效的化合物。本文以互连网上注册的临床试验数据库(www.clinicaltrials.gov)为主要来源,检索了目前美国已注册的、正在进行的有关胰腺癌的临床试验,将其略作整理分类作一综述。

国内芬太尼透皮贴剂与口服吗啡控释片治疗中重度癌痛临床随机对照试验的Meta分析

目的:通过Meta分析,探讨国内芬太尼透皮贴剂与口服吗啡控释片在癌痛治疗中的临床应用价值。方法:检索中国生物医学文献库(CBMdisc)、中国期刊全文数据库、维普数据库(VIP)等国内数据库已发表的相关文献,收集国内有关芬太尼透皮贴剂与口服吗啡控释片治疗癌痛的随机临床对照试验(randomized controlled trials,RCTs),由两位评价者分别按检索策略收集并按纳入标准入选资料,分析指标为疼痛缓解率和毒副反应发生率。结果:12个研究共911例患者纳入分析,芬太尼透皮贴剂与口服吗啡控释片的疼痛缓解率分别是87.32%和89.14%(P=0.79);在不良反应方面,芬太尼透皮贴剂相比口服吗啡控释片便秘的发生率降低31%(P<0.00001),恶心呕吐的发生率降低26%(P=0.0002),头晕嗜睡的发生率降低10%(P=0.02)。结论:芬太尼透皮贴剂和口服吗啡控释片治疗中重度癌痛的效果相近,但芬太尼透皮贴剂不良反应的发生率可能较低,临床医生应根据患者个体情况合理选用。

COX-2和iNOS在肺癌组织中的表达及其临床意义

【目的】研究诱导型环氧化酶(COX-2)和一氧化氮合酶(iNOS)在肺癌组织中的表达及其临床意义。【方法】用免疫组化法检测42例肺癌组织中COX-2和iNOS蛋白表达。【结果】COX-2和iNOS表达的阳性率分别为31%和33%;COX-2表达与术后生存期的长短呈负相关;iNOS与肿瘤组织的分化程度密切相关,分化越低,iN-OS表达越强;COX-2与iNOS表达之间未见相关性。【结论】COX-2和iNOS在肺癌中表达与否与患者的预后相关。

高强度聚焦超声热疗治疗晚期原发性肝癌疗效观察

目的:探讨高强度聚焦超声(highintensityfocusedultrasound,HIFU)热疗治疗晚期原发性肝癌(肝癌)的疗效及不良反应。方法:应用HIFU热疗治疗肝癌患者42例,观察有效率、生存时间及不良反应。结果:42例共行HIFU热疗治疗188次,平均4.5次,有效率33%,治疗后疼痛、腹胀、纳差等症状均获得不同程度的缓解,功能状况评分较前改善。平均生存期26.3周,中位生存期为22周。主要不良反应为入射范围内肋骨疼痛及皮肤烧灼感、潮红,经对症治疗后好转,不影响后续治疗,未出现其他不良反应。结论:热疗治疗晚期肝癌有一定疗效,且不良反应少,值得进一步探讨。

耐药乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中microRNA的分析

目的本研究通检测乳腺癌细胞株MCF-7及其阿霉素耐药株MCF-7/ADR的microRNA的表达差异,探讨microRNA与乳腺癌化疗耐药的关系。方法MTT法检测MCF-7/ADR相对于其亲本细胞MCF-7的耐药性和耐药倍数;microRNA芯片和RT-PCR的方法比较阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADR与其对应的MCF-7乳腺癌细胞株microRNA表达差异。结果乳腺癌的阿霉素耐药株MCF-7/ADR相对于其亲本细胞系MCF-7对阿霉素的耐药倍数为33.2倍。microRNA芯片的结果显示耐药株MCF-7/ADR与亲本细胞系MCF-7比较有16个microRNA高表达,20个microRNA低表达;RT-PCR的结果进一步证实mir-221、mir222、mir-130a、mir-155在MCF-7/ADR中显著上调,而mir200a、mir-200b、mir-200c、mir-421在MCF-7/ADR中显著下调。结论MCF-7/ADR与MCF-7的microRNA的表达存在着差异,提示microRNA参与乳腺癌化疗耐药,为进一步研究microRNA在乳腺癌耐药机制中的作用打下基础。