云南省大姚县青石棉污染区恶性胸膜间皮瘤与致瘤性猿猴病毒SV40的关联研究

背景我国云南省楚雄彝族自治州大姚县5%地表散布蓝色青石棉,是恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)的高发区。致瘤性猿猴病毒SV40(simian virus 40,SV40)是一种小型环状双链DNA多瘤病毒,可使人和动物多种组织类型的正常细胞发生恶性转化并促进肿瘤生长。早年的流行病学调查显示,大姚县青石棉污染区恶性间皮瘤发病率高出一般人群几十倍,该地区MPM的发生是否与致瘤性SV40相关尚未见报道。目的本研究旨在探讨致瘤性猿猴病毒SV40是否与云南省大姚县青石棉污染区MPM的发生相关。方法收集大理大学第四附属医院(楚雄彝族自治州第一人民医院)和大姚县人民医院胸外科2014年1月-2019年12月诊治的51例(其中40例有石棉暴露史)MPM患者的肿瘤组织和12例非MPM患者的胸膜组织(包括肺大疱、肺结核等疾病)。同时,体外培养人正常胸膜间皮细胞LP9、Met5A(SV40转化的间皮细胞)和MPM细胞系NCI-H28(上皮型)、NCI-H2052(肉瘤型)、NCI-H2452(双相混合型)。提取各组细胞和组织基因组DNA后,用3组低污染风险引物(SVINT、SVfor2和SVTA1)对SV40大T抗原(TAg)的基因片段分别进行聚合酶链式反应(PCR)扩增检测,用两种SV40 TAg相关抗体(PAb101和PAb416)分别进行Western blotting和免疫组织化学染色,检测MPM肿瘤组织和MPM细胞系中是否存在SV40 TAg蛋白表达。结果PCR、Western blotting和免疫组化染色结果均显示Met5A细胞系中SV40为阳性,含有SV40 TAg基因和蛋白质。而各种MPM细胞系NCI-H28、NCI-H2052和NCI-H2452中SV40均为阴性。在12例非MPM组织和51例MPM组织中,3组低污染风险引物的PCR反应均为阴性。在12例非MPM组织和51例MPM组织中,两种抗体的免疫组化染色均未检测出SV40 TAg。结论云南省青石棉污染区MPM的发生与SV40病毒感染的关系可能不密切,青石棉暴露可能才是导致MPM发生的主要原因。

基于Tau蛋白磷酸化探讨中医药干预阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是一种以进行性认知功能障碍和记忆减退为主要特征的神经退行性疾病,Tau蛋白过度磷酸化是该病的主要发病机制之一。Tau蛋白是主要分布于中枢神经系统神经元轴突的微管相关蛋白,其过度磷酸化则丧失与微管结合的能力,造成微管解聚、轴突转运障碍,形成Tau聚集体,进而引起神经细胞的凋亡,导致AD的发生。研究表明中医药可以通过多通路、多靶点调控Tau蛋白磷酸化来干预AD。主要以Tau蛋白磷酸化为切入点,对干预AD中医药的种类和作用机制进行总结,以期为中医药防治AD的研究提供参考。

美洲大蠊粪便中微生物的分离和鉴定及其抗菌活性分析

【目的】探究美洲大蠊Periplaneta americana粪便中具有抗菌活性的真菌和放线菌,为抗菌药物的开发提供微生物来源。【方法】利用稀释涂布法与选择培养法,从云南省大理白族自治州巍山县美洲大蠊养殖场收集的美洲大蠊成虫粪便中分离纯化放线菌和真菌;采用牛津杯琼脂扩散法检测菌株代谢产物对6种病原细菌大肠杆菌Escherichia coli、粪肠球菌Enterococcus faecalis、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus)、铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa和鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium的抗菌活性;通过16S rDNA和ITS rDNA基因测序鉴定抗菌活性菌株,并利用邻接法构建抗菌活性菌株系统发育树。【结果】从美洲大蠊成虫粪便中分离出真菌17株,放线菌19株。共有6株真菌和12株放线菌表现出不同程度的抗菌活性,其中真菌EPAF15-EPAF17及放线菌EPAA12和EPAA17对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和鼠伤寒沙门氏菌表现出较为广谱的抗菌活性。系统发育分析显示,具有抗菌活性的真菌隶属于镰刀菌属Fusarium、生丝毕赤酵母属Hyphopichia和丝孢酵母属Trichosporon;具有抗菌活性的放线菌隶属于链霉属Streptomyces。【结论】美洲大蠊成虫粪便中具有种类丰富的可培养微生物,其中的抗菌活性真菌和放线菌的发现不仅能作为进一步深入挖掘新型抗菌活性天然药物的重要微生物储备资源,也为特境微生物资源的充分利用提供了新的思路。

生物活性肽调控细胞凋亡作用机制的研究进展

生物活性肽相较于传统药物具有副作用小、安全性高的特点,逐渐在被人们接受,在治疗疾病和开发功能性食品的过程中极为重要。氧化应激对机体造成严重损害,如何清除氧化应激产生的活性氧是我们目前面临的重大难题,而生物活性肽能够抑制氧化应激诱导的细胞凋亡。本文对生物活性肽通过线粒体途径和死亡受体途径抑制正常细胞凋亡和促进癌细胞凋亡以及通过促进线粒体自噬来调控细胞凋亡的作用机制进行综述,以期充分了解生物活性肽的生理功能及其作用机制,为生物活性肽作用机制的深入研究及其开发利用提供参考依据。

云南松松塔抗HIV-1活性提取物急性毒性实验研究

目的:研究云南松松塔抗HIV-1活性提取物的急性毒性,对其用药安全性进行初步评价。方法:急性毒性实验采用最大给药量法,松塔提取物一次灌胃给药25 g/kg,观察小鼠在14 d内毒性表现,14 d后测量小鼠体重,脏器质量并对肝脏和肾脏作病理组织学检查。结果:急性毒性实验未见明显毒性。空白组与给药组各脏器指数差异无统计学意义,病理检查结果各组均未见异常。结论:本次实验结果显示,松塔活性提取物未见急性毒性反应。

云南省臂金龟科一新纪录种--阳彩臂金龟

2015年8月16日在云南省红河州境内（注：为保护该物种,故未给出详细采集信息）进行昆虫资源调查过程中,采集到臂金龟科Euchiridae一对雌雄昆虫,经查阅《中国珍稀昆虫图鉴》《中国生态大图鉴》等相关文献,确认该昆虫为阳彩臂金龟Cheirotonus jansoni Jordan,属国家Ⅱ级重点保护动物,是我国稀有的珍稀昆虫（陈树椿,1999;张巍巍,李元胜,2011）,这也是该物种首次在云南省被发现。阳彩臂金龟隶属于鞘翅目Coleoptera金龟总科Scarabaeoidea臂金龟科。

基于代谢组学的中医药防治肝纤维化的研究进展

代谢组学可以定性和定量地研究机体在内部和外部因素作用下,代谢物质的动态变化与病理生理之间的相关性。近年来,中药通过多靶点和多通路在预防和治疗肝纤维化方面具有明显优势,已成为预防和治疗肝纤维化的研究热点。本文总结了近年来代谢组学在中医药抗肝纤维化领域的研究实例。

云南松松塔抗HIV活性提取物对人冠状病毒229E抑制活性的研究

目的:评价云南松松塔抗HIV活性提取物(以下简称“松塔提取物”)对人冠状病毒(HCoV)-229E的抑制活性,初步明确其作用靶点。方法:构建HCoV-229E S蛋白介导的细胞-细胞融合模型及假病毒模型,检测松塔提取物对HCoV-229E的抑制活性;利用时间-移除实验明确作用靶点,时间-添加实验确定其作用时间。结果:松塔提取物能够抑制HCoV-229E S蛋白介导的细胞-细胞融合现象发生,半抑制浓度(IC50)为(0.136±0.010)mg/mL;能有效抑制HCoV-229E假病毒感染,IC50为(0.069±0.015)mg/mL;时间-移除实验以及时间-添加实验显示松塔提取物靶向于HCoV-229E S蛋白,作用在感染早期(1 h前);不同浓度松塔提取物对293T及Huh-7细胞无明显毒性作用。结论:松塔提取物能靶向HCoV-229E S蛋白,在感染早期抑制HCoV-229E的感染,是一种安全性高的候选药物。

基于代谢组学的中医药防治心力衰竭的研究进展

心力衰竭(HF)是一种发病率和死亡率均较高的心血管疾病,中医药是我国临床防治HF的重要手段,但其具有作用机制尚不明确,缺乏临床证据。本文基于代谢组学就中医药防治HF的研究进行综述,以期为临床应用中医药防治HF提供参考。

结核分枝杆菌Rv0081基因编码蛋白的生物信息学分析

运用生物信息学分析软件预测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Rv0081蛋白的生物学特征及筛选潜在的优势抗原表位。从NCBI数据库获取Mtb Rv0081蛋白的氨基酸序列,利用生物信息学分析软件ProtParam、ProtScale及TMPRED分析Rv0081蛋白的理化性质及亲疏水性;TMHMM、SignalP-5.0 Server预测蛋白的跨膜区及信号肽;NetNGlyc-1.0 Server、NetPhos 3.1 Server分别预测蛋白的糖基化位点及磷酸化位点;STRING预测能与Rv0081相互作用的蛋白;分别运用SOPMA、SWISS-MODEL预测蛋白的二、三级结构;综合运用softberry、WoLF PSORT预测蛋白的亚细胞定位;运用DNAStar预测蛋白的B细胞抗原表位;综合运用SYFPEITHI、NetCTL 1.2 Server、Net MHC pan 4.1 server预测蛋白的CTL细胞抗原表位;综合运用SYFPEITHI、Net MHCII pan 4.0 server预测蛋白的Th细胞抗原表位。结果表明,Rv0081蛋白由114个氨基酸组成,相对分子质量为12356.32,亚细胞定位于细胞质中,为稳定的疏水性蛋白,无跨膜区和信号肽,含有1个糖基化位点及9个磷酸化位点;二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,结构较松散;与hycE、hycP、Rv0088、Rv0083、hycD、hycQ、Rv0082、devR、Rv0080及Rv0079蛋白存在相互作用关系;综合分析各软件预测结果筛选出6个优势B细胞抗原表位、6个优势CTL细胞抗原表位及7个优势Th细胞抗原表位。Mtb Rv0081蛋白具有较多潜在的候选B、T细胞抗原表位,可作为研发新型结核疫苗的候选抗原。

肠道菌群与2型糖尿病及中医药干预研究进展

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)是临床上常见的代谢性疾病,发病机制复杂,随着患病率的逐年增加,引发了全球的广泛关注。研究表明肠道菌群紊乱与T2DM的发生发展之间存在一定关联性,肠道菌群代谢物、肠屏障改变和生物钟紊乱等均会影响T2DM的发生发展。研究证实中医药可以通过调节肠道菌群紊乱,达到一定的降低血糖的效果。对肠道菌群参与2型糖尿病的作用机制以及中医药通过调节肠道菌群治疗T2DM的研究进行总结,为以肠道菌群为切入点防治T2DM提供新的契机。

基因测序技术在发现昆虫体内噬菌体中的应用

采用系统综述评价利用基因测序技术发现昆虫体内噬菌体的可行性。以“宏基因组”“扩增”“昆虫”“肠道微生物”“噬菌体”“metagenomics”“amplification”“insects”“gut microbes”“phage”为关键词,通过PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库及维普数据库对2000年1月至2022年6月发表的相关文献进行检索。按照纳入、排除标准筛选文献并对纳入文献进行定性分析。结果表明,根据纳入、排除标准,从227篇文献中筛选出合格的文献8篇,其中1篇为利用宏基因组测序技术从昆虫体内分离出噬菌体,其余7篇文章均为通过基因扩增测序技术发现昆虫体内存在WO噬菌体相关序列。宏基因组测序技术及基因扩增后测序均可发现昆虫体内是否存在噬菌体。宏基因组测序技术与PCR扩增测序技术结合可了解昆虫肠道内微生物的丰度及功能,以及噬菌体侵染情况和种类分布情况。

昆虫性信息素的研究进展

药用昆虫作为中药的重要组成部分,相关医药研发日益获得重视。昆虫性信息素的研究应用也因此受到关注。目前,昆虫性信息素主要用于农林业害虫防治。本文在简述昆虫性信息素的化学成分、释放及应用的同时,对昆虫性信息素在昆虫大量诱捕、干扰交配、配合治虫等在药用昆虫资源的开发中的应用也进行初步探讨。

云南松松塔多糖含量测定两种方法的比较

通过对云南松松塔中多糖的含量的测定,比较硫酸-蒽酮和硫酸-苯酚两种常用多糖测量方法。通过精密度试验、稳定性试验、回收率试验等方面,对硫酸-蒽酮和硫酸-苯酚两种常用多糖测量方法进行比对。结果表明:硫酸-苯酚法在云南松松塔多糖含量测定中较硫酸-蒽酮法优越,硫酸-苯酚法测定云南松松塔多糖含量时,操作简便,精密度、稳定性高,为云南松松塔等植物的多糖含量测定提供了参考。

人线粒体转录终止因子1(hMTERF1)蛋白的生物信息学分析

为了预测和分析人线粒体转录终止因子1（human mitochondrial transcription termination factor 1,hMTERF1）蛋白的结构与功能。采用生物信息学的方法对hMTERF1进行系统的分析与研究,包括hMTERF1的理化性质、跨膜区和信号肽、亚细胞定位、二级结构功能域、蛋白质的功能分类预测、多重序列比对与系统发育树构建、三级结构建模。结果表明：hMTERF1蛋白分子量为45.78 kD,等电点为9.49,不具有信号肽和跨膜区。该蛋白定位于细胞线粒体,N端1-57个氨基酸为前导肽序列。其二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲,包含6个MTERF基序,三级结构显示结果与二级结构预测结果相符。蛋白质多重序列比对和聚类分析显示,hMTERF1蛋白与黑猩猩、大鼠、小鼠等哺乳动物的MTERF1蛋白具有高度同源性,在系统发育树上聚为一簇。hMTERF1的生物信息学分析为进一步探索hMTERF1蛋白的功能提供参考资料和理论依据。

美洲大蠊提取物CII-3体内外抗HSV-2实验研究

目的:研究美洲大蠊提取物CII-3抗HSV-2作用。方法:通过MTT法和CPE法测定美洲大蠊提取物CII-3抗HSV-2活性,计算其TC50、IC50及TI。以雌性小鼠生殖器疱疹为动物模型,在小鼠阴道内注射50μL HSV-2病毒原液,1次/d,连续7 d造模。以ACV为阳性对照,采用灌胃给药治疗10 d。应用ELISA试剂盒检测小鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-2的水平变化;称量小鼠免疫器官重量,计算脏器指数。结果:美洲大蠊提取物CII-3有抑制HSV-2致细胞病变的作用,其TC50值为190.55μg/m L,IC50值为28.71μg/m L,TI值为6.64μg/m L;美洲大蠊提取物CII-3能够提高小鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-2的水平,同时能够使小鼠的免疫器官重量增加。结论:美洲大蠊提取物CII-3有抗HSV-2作用,其抗病毒作用可能是通过提高机体免疫功能来实现。

经皮给药系统皮肤模型的研究进展

经皮给药系统(transdermal drug delivery system,TDDS)的皮肤模型是指构建能够模拟人体皮肤结构和功能,并用于研究和评估药物在经皮给药过程中的吸收、渗透及药效等方面的实验模型。该模型可代替传统人体皮肤实验,减少药物开发过程中对人体皮肤的使用,为经皮制剂的研发提供一种便捷、可控且经济高效的方法。针对经皮给药系统的皮肤模型,本文从药物经皮吸收途径出发,对目前常用的动物皮肤模型、人工皮肤模型、重组人体皮肤模型进行介绍,并对其优缺点及应用进行了分析,为经皮制剂的研发提供参考。

二甲双胍在恶性肿瘤治疗中的研究进展

近年来二甲双胍潜在的抗肿瘤效果在肿瘤治疗领域引起了广泛关注。本文综述了二甲双胍在恶性肿瘤治疗中的研究进展,发现其在消化系统恶性肿瘤(胆道癌、胃癌、食管癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌)、生殖系统恶性肿瘤(前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、宫颈癌)、非小细胞肺癌、肾细胞癌和黑色素瘤等治疗中显示出应用潜力。二甲双胍可抑制肿瘤细胞的增殖并延长患者的总生存期,其作用机制包括但不限于抑制线粒体复合物Ⅰ活性、激活腺苷一磷酸活化蛋白激酶/p53信号通路、阻滞细胞周期等。二甲双胍与化疗药物的联合使用显示出了减毒增效的潜力,其能增强胆道癌、卵巢癌和黑色素瘤细胞对化疗药物的敏感性,改善胃癌和结直肠癌细胞对化疗药物的耐药性,并减少乳腺癌患者在化疗过程中的毒性反应。二甲双胍还被用作免疫调节剂,应用于食管癌、结直肠癌、宫颈癌、非小细胞肺癌以及黑色素瘤患者的免疫治疗。

KRAB相关蛋白1(KAP1)在恶性肿瘤发生发展中的作用研究进展

KRAB相关蛋白1(KRAB-associated protein 1,KAP1)是最早于1996年通过亲合色谱分离并克隆得到的一种转录辅因子,因能与含KRAB结构域的锌指蛋白家族(zinc family proteins,ZFPs)成员结合而得名。KAP1是一种具有多功能的蛋白质,它参与组蛋白修饰与染色质重塑、调节DNA甲基化、作为转录共调控因子参与基因调控、参与DNA损伤反应等,并存在磷酸化、乙酰化等多种翻译后修饰。KAP1的表达水平与多种人类恶性肿瘤的发生发展密切相关,并影响肿瘤预后。因此,KAP1有望成为恶性肿瘤的诊断标志物或治疗新靶点。本文主要综述KAP1的结构、功能及其与人类恶性肿瘤发生发展的关系,并进一步探讨KAP1在恶性肿瘤研究中的应用前景,以期为恶性肿瘤的临床诊断和治疗提供参考依据。

线粒体转录延伸因子在人脑胶质瘤组织中的表达及预后意义

目的:研究TEFM基因在人脑胶质瘤组织中的表达情况,并探讨其与脑胶质瘤患者临床病理特征及预后的相关性。方法:采集我校附属医院2019年01月至2021年06月经手术切除后病理确认的68例脑胶质瘤组织及35例非肿瘤脑组织。采用qRT-PCR、Western blot法和免疫组化SP法检测脑胶质瘤组织和非肿瘤脑组织中TEFM mRNA和蛋白的表达水平。分析TEFM基因mRNA表达量与脑胶质瘤患者临床病理参数的相关性。根据随访资料采用Kaplan-Meier生存曲线分析TEFM mRNA表达量和患者预后的相关性。采用COX回归模型分析患者预后的独立风险因素。结果:免疫组织化学结果显示,TEFM蛋白主要表达于细胞质,且在不同级别脑胶质瘤组织中的阳性表达率(91.18%)明显高于非肿瘤脑组织中的阳性表达率(37.14%),组间差异极显著(P<0.01)。Western blot和qRT-PCR结果显示,TEFM蛋白和mRNA在脑胶质瘤组织中均显著增高(P<0.01)。脑胶质瘤患者TEFM基因mRNA表达量与患者年龄、病理分级、病理类型、偏侧性及幕上位置均显著相关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,TEFM mRNA表达水平显著影响脑胶质瘤患者的总生存期(overall survival,OS)和无病生存期(disease-free survival,DFS),TEFM高表达的患者OS和DFS显著缩短(Log-rank P<0.05);根据COX多因素回归模型分析表明,年龄、病理分级、病理类型和异柠檬酸脱氢酶(IDH1)突变情况是对脑胶质瘤患者预后造成影响的独立风险因素(P<0.05)。结论:与非肿瘤脑组织相比,TEFM蛋白和mRNA在脑胶质瘤组织中表达均明显增高,且TEFM高表达的患者OS和DFS明显缩短。