罕见心脏多发血管瘤1例

1临床资料18岁女性患者,反复胸闷、心悸、乏力30 d,渐重入院。查体:心率:71次/min,呼吸:21次/min,血压:123/80 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)。心尖可闻及收缩期Ⅲ/6级粗糙性杂音。剑突左侧可闻及收缩期Ⅱ/6级收缩期粗糙性杂音。经胸超声心动图示:二尖瓣后瓣瓣尖部可见一大小约(2×1.3)cm,活动度较大的赘生物样占位病变。三尖瓣隔瓣处可见一大小约(3.2×4.4) cm赘生物样占位,基底宽,活动度不大。EF:58%,FS:30%。

早期护理对心血管外科手术病人康复预后的影响研究

探讨早期护理在心血管外科手术临床中的应用价值。方法:从2017年1月-2019年1月于我院行心血管手术的患者中选取64例为研究对象,根据就诊时间分为对照组和观察组,每组32例。对照组实施常规护理,观察组实施早期护理,对比两组患者术后生活质量、依从性及满意率差异。结果:通过护理干预,两组患者术后各项指标均有所提高,观察组生活质量、依从性及满意率均优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:早期护理在心血管手术临床中有确切的应用效果,可显著改善患者术后生活质量、促进患者恢复,值得在临床中应用并推广。

心脏外科冠脉搭桥的连续护理应用效果

本文针对冠脉搭桥术后患者行连续护理方式下的患者临床满意度和护理效果展开研。方法:针对在我院行冠脉搭桥手术的患者作为护理临床研究的对象。随机抽取2019年5月到2020年5月之间收治的患有该病患者50例,作为实验研究的样本案例。为保证临床研究的客观性和准确行,将这50例患者以抽签的方式划分为两组,一组为观察组,一组为对照组。两组患者所采取的护理方式不同,对比两组患者的实验研究结果的数据,分析两组患者在临床表现和护理满意度方法的差别,研究连续性护理在此类患者护理应用中的优势作用。结果:与常规行护理作为研究的比对,连续性护理方式其在提升患者满意度方面,具有良好的护理效果。结论:连续性护理方式在临床应用中收效显著,因此各大医院应对其给予高度重视,并积极进行使用。

心脏手术相关急性肾损伤病理生理、诊断及风险评估研究进展

急性肾损伤(AKI)是心脏手术后常见的严重并发症,可导致患者术后死亡风险增加。若未及时、有效治疗,患者术后将出现肾功能不全,严重时出现慢性肾脏病,需要持续床旁血液透析治疗。心脏手术相关AKI(CSA-AKI)的发病机制复杂,涉及多种因素,目前存在多种相关病理生理学理论。除诊断标准外,生物标志物的探索和验证是CSA-AKI诊断领域的研究重点。常见的策略包括维持肾血流灌注、个体化血压目标、液体平衡的管理、有目标导向的氧气输送和避免肾毒性药物。未来深入研究CSA-AKI的病理生理、诊断及风险评估将有助于降低CSA-AKI相关死亡率,改善患者预后。

新媒体宣教在心外科围手术期中的应用研究

目的探究新媒体宣教在心外科围手术期患者中的应用效果。方法选取2022年1月-2023年1月于本科室行心脏手术的患者200例,平均分为实验组及对照组各100例,分别采用新媒体宣教护理与传统媒体宣教护理,出院时进行问卷调查,对比分析2组患者主动配合情况和住院时间。结果实验组患者主动配合率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组患者住院时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新媒体宣教可提高患者依从性,主动配合治疗,促进患者术后尽快康复、缩短住院时间、减轻经济负担。

过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞改善异位移植心脏存活

目的:探讨过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)改善大鼠腹腔异位移植心脏的存活机制。方法:通过慢病毒载体GV308携带IDO基因转染大鼠骨髓间充质干细胞构建过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞。建立大鼠腹腔异位移植心脏模型,经尾静脉给予相应细胞处理:(1)利用超声心动图检测移植心脏心功能变化。(2)采用小动物活体成像系统评估移植心脏局部荧光强度。(3)再取各组受体大鼠的脾脏,采用流式细胞技术检测CD40、CD86、CD80、MHCⅡ、CD274、CD45RA、CD45RA+CD45RB、Treg细胞的表达情况。(4)取各组移植心脏,采用HE染色评估炎性细胞浸润情况。(5)利用液相芯片检测各组血清IL-1ɑ、IL-4、IL-1β、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-18、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3因子的变化情况。结果:(1)给予相应细胞处理,可见过表达IDO-BMSCs处理后2 d移植心脏的EF、FS较其余各组有提高。(2)采用小动物活体评估可见过表达IDO-BMSCs组移植心脏局部荧光强度最强。(3)给予干预措施后2 d可见过表达IDO-BMSCs组脾脏细胞CD40、CD86、CD80、MHCⅡ、CD45RA、CD45RA+CD45RB表达降低,而CD274、Treg细胞的表达增高。(4)采用液相芯片检测各组提取血清可见在2 d时,过表达IDOBMSCs组血清中IL-1α、IL-4、IL-1β、IL-2、IFN-γ、IL-18是降低的;IL-10、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3表达量是升高的。HE染色证实过表达IDO-BMSCs组炎性细胞浸润少于其他组。结论:过表达IDO的BMSCs可以通过有效调节免疫DC、T细胞及细胞因子,从多个免疫层面改善移植心脏存活。

罕见心脏巨大脂肪瘤1例报道

1临床资料21岁男性患者于2021-05-20因反复胸闷、心悸12 d入院。查体:心率:71次/min,呼吸:21次/min,血压:123/80 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)。心脏查体未闻及病理性杂音。经胸超声心动图示:心脏外,左、右房顶部见占位性病变。大小约(3.98×3.09)cm的低回声不均质块影。心脏其余结构未见异常。射血分数(EF)70%。心脏MRI示:左心房下缘,右心房顶占位,短T1信号,长T2信号,大小约3.8 cm(前后径)×5.5 cm(左右径)×4.4 cm(上下径),考虑脂肪瘤,见图1。心脏血管三维CT示:腹主动脉主干及其主要分支未见异常。门静脉主干及其主要分支未见异常。右心房外可见团块状脂肪密度影大小约(3×4)cm,右房受压见图2。术前其余化验指标未见异常。

冠状静脉窦型完全性肺静脉异位引流三房心矫治1例

1临床资料1.1基本情况患者58岁,女性,于2023-04-12入院。患者诉反复胸闷、胸痛5年余入院。查体:心率:68次/min,呼吸:20次/min,血压:136/87 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)。心脏查体:胸骨左缘(2~3)肋间闻及柔和的Ⅲ~Ⅳ/Ⅵ级吹风样收缩期杂音。

二尖瓣置换同期行心房颤动射频消融术死亡相关风险因素分析

目的探讨心脏外科手术同期行心房颤动射频消融死亡的风险因素。方法选取2003年1月至2023年1月于云南省第一人民医院心外科收治的二尖瓣狭窄合并心房颤动患者90例,行二尖瓣置换术同期行心房颤动射频消融术。根据手术结果分为手术成功组(n=70)和术后死亡组(n=20)。收集两组患者术前一般基线资料,包括性别、年龄、高血压、糖尿病、卒中(或短暂性脑缺血发作)史、吸烟史、慢性阻塞性肺疾病(COPD)史、心房颤动类型(持续性心房颤动、永久性心房颤动)、纽约心功能分级、射血分数、左房大小、术前肺动脉高压程度、术前血小板数量、血红蛋白及术中主动脉阻断心脏停跳时间。利用独立样本t检验及单因素Logistic回归分析对两组患者术前及术中数据资料进行统计分析,以明确心脏外科手术同期行心房颤动射频消融死亡的风险因素。结果两组患者在性别、年龄、高血压史、糖尿病史、卒中(或短暂性脑缺血发作)、吸烟史、合并慢性阻塞性肺气肿(COPD)史等方面比较,均无显著性差异(P>0.05)。与手术成功组相比,术后死亡组患者永久性心房颤动、纽约心功能Ⅱ级以上及射血分数≤45%比例高(P<0.05),左房直径>6 mm、术前肺动脉高压程度>50 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)、术前60 g/L≤血红蛋白计数≤80 g/L比例高(P<0.05),术中心脏停跳时间>100 min比例高(P<0.05)。单因素Logistic回归分析结果表明,永久性心房颤动、纽约心功能Ⅱ级以上、射血分数≤45%,左房直径>6mm、术前肺动脉高压>50mmHg、术前60g/L≤血红蛋白≤80g/L及术中心脏停跳时间>100min与心脏外科手术同期行心房颤动射频消融死亡有独立的关联。结论术前患者为永久性心房颤动、心功能Ⅱ级以上、射血分数≤45%、左房直径>6mm、肺高压>50mmHg、术前血红蛋白值≤80 g/L以及预计术中心脏停跳时间>100 min,这些因素均可增加患者手术的死亡风险。当患者术前及术中各项指标达到上述指标时,建议慎重考虑心脏外科手术同期行术中心房颤动射频消融术。

急性Stanford A型主动脉夹层动脉瘤手术死亡风险因素研究

目的探讨急性Stanford A型主动脉夹层动脉瘤手术死亡风险因素。方法选取2009年10月—2016年1月云南省第一人民医院收治的急性Stanford A型主动脉夹层动脉瘤患者167例,根据手术结果分为手术成功组(n=131)和术后死亡组(n=36)。采用回顾性研究方法,收集两组患者的一般资料[包括性别、年龄、是否吸烟、是否行经皮冠状动脉介入术(PCI)、是否行胸部手术及有无慢性阻塞性肺疾病(COPD)、外周血管疾病、胸痛、恶心/呕吐、腹痛、低血压]、实验室检查指标(包括血红蛋白、血小板)及术中停循环时间、弓部处理方式。结果两组性别、吸烟率、PCI率及外周血管疾病、恶心/呕吐发生率间差异无统计学意义(P>0.05),而年龄、胸部手术率及COPD、胸痛、腹痛、低血压发生率间差异有统计学意义(P<0.05)。两组血红蛋白水平间差异无统计学意义(P>0.05),而血小板计数及其分布间差异有统计学意义(P<0.05)。两组术中停循环时间分布及弓部处理方式间差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、胸部手术、胸痛、腹痛、低血压、血小板计数、术中停循环时间、术中弓部处理方式是急性Stanford A型主动脉夹层动脉瘤手术死亡的风险因素(P<0.05)。结论患者的年龄越大,既往行胸部手术,术前出现胸痛、腹痛和低血压,术前血小板计数偏低,术中停循环时间延长及弓部采用三分支吻合方式增加了急性Stanford A型主动脉夹层动脉瘤手术死亡风险。

采用高速离心及ExoQuick-TC法提取小鼠骨髓间充质干细胞来源外泌体比较及鉴定

比较及鉴定超高速离心法及ExoQuick-TC法提取小鼠骨髓间充质干细胞来源外泌体。采用BCA蛋白检测可见ExoQuick-TC法提取的外泌体蛋白含量高于超高速离心法提取的蛋白含量。Exosome Antibodies,Array&ELISA Kits检测可见ExoQuick-TC法提取外泌体的纯度优于超高速离心法提取的纯度。两种方法提取的外泌体电镜下形状无差异,随机选取3个电镜视野进行计数可见ExoQuick-TC法提取外泌体数量多于超高速离心法提取外泌体。ExoQuick-TC法提取的外泌体具有更高的产量及纯度。

骨髓间充质干细胞SCA-~1+/CD45^+/CD31^+亚群的归巢能力

背景:自2003年,美国FDA率先批准自体骨髓干细胞移植治疗心肌梗死性疾病以来,已有大量临床及基础研究报道,但报道结果却不尽相同,其中很重要的一点就是干细胞无法有效到达心肌损伤部位(即干细胞归巢)。目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞各亚群在心肌修复中的归巢能力。方法:以小鼠心肌干细胞表面分化抗原筛查小鼠骨髓间充质干细胞,再以CD45、CD31为标准分选得到小鼠骨髓间充质干细胞4个亚群。采用Transwell小室检测各亚群组细胞的归巢能力。将各亚群细胞注入心肌梗死48 h小鼠体内,注射后48,96 h及7 d处死小鼠取其心脏完成小动物活体成像并检测其荧光强度。结果与结论:小鼠骨髓间充质干细胞SCA-1+/CD45+/CD31+亚群归巢能力优于其他亚群。小动物活体成像提示干细胞注射48 h,96 h及7 d时SCA-1+/CD45+/CD31+亚群平均荧光强度优于其他亚群,SCA-1+/CD45+/CD31+亚群迁移率最高,说明SCA-1+/CD45-/CD31-群体有向受损心肌归巢的趋势。

过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞通过分泌外泌体增强其抗凋亡能力的研究

目的探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)是否通过分泌外泌体(Exosome)增强其细胞抗凋亡能力,进而提高心肌梗死后心功能。方法 2017年1—12月选取健康4周龄SPF级C57BL/6小鼠45只,通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠BMSCs构建过表达GATA-4小鼠BMSCs并加入基因开启剂强力霉素(DOX),而后采用Exo Quick-TC提取BMSCs分泌的Exosome,并检测Exosome纯度、电镜下观察其形态。体外实验:与过表达GATA-4 BMSCs分泌的Exosome共同培养的心肌细胞为A组(体外),与空载体BMSCs分泌的Exosome共同培养的心肌细胞为B组(体外),与BMSCs分泌的Exosome共同培养的心肌细胞为C组(体外),低氧(1%)无血清条件下培养的心肌细胞为D组(体外),正常条件下单独培养的心肌细胞为E组(体外),各组均培养48 h,后采用流式细胞术检测各组心肌细胞凋亡率,采用Western blotting法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、细胞色素C表达水平。体内实验:选取12只小鼠建立心机梗死模型,造模成功48 h后经尾静脉注射80 000μg的Exosome,其中A组(体内)注射过表达GATA-4 BMSCs分泌的Exosome,B组(体内)注射空载体BMSCs分泌的Exosome,C组(体内)注射BMSCs分泌的Exosome,另取3只心肌梗死未处理小鼠作为D组(体内),3只正常小鼠作为E组(体内)。于注射Exosome后48 h采用心脏超声仪(PHILIPS EPIQ 7C)评估各组小鼠心功能。完成心脏彩超后采用原位免疫组化法评估心肌梗死小鼠心脏凋亡细胞数量。结果 Exosome表达量为0.272 5,Exosome纯度为5.25×108个,电镜可见Exosome大小40~100 nm。A组(体外)细胞凋亡率低于B组(体外)、C组(体外)、D组(体外),但高于E组(体外)(P<0.05)。A组(体外)Caspase 8、细胞色素C表达水平低于B组(体外)、C组(体外)、D组(体外)及E组(体外)(P<0.05)。A组(体内)小鼠射血分数(EF)、环比收缩(FS)前后差值高于B组(体内)、C组(体内)、D组(体内)及E组(体内)(P<0.05)。A组(体内)小鼠心肌细胞凋亡细胞数量高于E组(体内),而低于B组(体内)、C组(体内)、D组(体内)(P<0.05)。结论过表达GATA-4 BMSCs分泌的Exosome可以通过增强BMSCs抗凋亡能力,进而有效改善心肌梗死后小鼠的心功能。

过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞修复心肌损伤的效果研究

目的探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)修复心肌损伤的机制。方法于2015年3月—2016年12月,选取60只健康4周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠,分离BMSCs,采用流式细胞检测CD29、CD44、CD11b、干细胞抗原1(SCA-1)表达率。通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠BMSCs,构建过表达GATA-4-BMSCs,并加入基因开启剂多西环素(DOX),采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测转染72 h后过表达GATA-4-BMSCs中GATA-4 m RNA表达水平,并以未转染为阴性对照组。建立小鼠心肌梗死模型,经尾静脉注射BMSCs(n=3)、空载体-BMSCs(n=3)、过表达GATA-4-BMSCs(n=3)500μl,并将心肌梗死未处理组(n=3)及正常小鼠(n=3)同时给予喂食含有DOX的液体作为对照1组及对照2组。通过心脏彩超检测给予干预措施72 h后心功能改善情况。选取正常小鼠正常喂养(n=3)作为对照3组。采用小动物活体成像检测心脏区域荧光强度,番茄凝集素评估心肌梗死局部心肌血管数量,免疫组化检测心肌梗死局部C-kit阳性细胞数量。结果小鼠BMSCs CD29表达率为98.0%,CD44表达率为100.0%,CD11b表达率为0.1%,SCA-1表达率为99.5%。过表达GATA-4-BMSCs组GATA-4 m RNA表达水平为(78.17±1.32),高于阴性对照组的(0.57±0.34)(t=2.576,P<0.05)。各组小鼠射血分数(EF)、环比收缩(FS)变化值比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中过表达GATA-4-BMSCs组EF、FS改善幅度高于对照1组、对照2组、BMSCs组和空载体-BMSCs组(P<0.05)。各组小鼠心脏区域荧光强度、心肌血管数量、C-kit阳性细胞数量比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中过表达GATA-4-BMSCs组心脏区域荧光强度、C-kit阳性细胞数量多于对照1组、对照2组、对照3组、BMSCs组和空载体-BMSCs组(P<0.05),心肌血管数量多于BMSCs组和空载体-BMSCs组。结论过表达GATA-4-BMSCs可以通过增强"归巢"效应、促进心肌梗死局部血管增生、有效动员C-kit阳性细胞修复心肌损伤。

过表达GATA-4骨髓间充质干细胞以外泌体修复心肌损伤的相关microRNA

背景:GATA-4是与心脏发育特异相关的锌指样转录因子,前期实验发现过表达GATA-4的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分泌的外泌体(exosome)与BMSCs共培养时可以促使BMSCs表达出更多的心肌特异性抗原。当其与心肌细胞在低氧环境下培养可以抑制心肌细胞的凋亡。目的:探讨过表达GATA-4的BMSCs分泌exosome修复心肌损伤的相关microRNA,从分子水平对其生物学效应进行探讨。方法:(1)通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠BMSCs,构建过表达GATA-4小鼠BMSCs,并加入基因开启剂强力霉素,然后采用ExoQuick-TC法提取分泌的exosome;(2)实验设5组:GATA-4-BMSCs-exosome+BMSCs共培养组、空载体-BMSCs-exosome+BMSCs共培养组、BMSCs-exosome+BMSCs共培养组、BMSCs单独培养组、心肌细胞单独培养组。培养24 h采用Q-PCR定量检测心肌特异性抗原cTnT、α-actin、connexin 43、Desmin的表达;(3)实验设5组:GATA-4-BMSCs-exosome+心肌细胞共培养组、空载体-BMSCs-exosome+心肌细胞共培养组、BMSCs-exosome+心肌细胞共培养组、心肌细胞单独培养组,在低氧(体积分数为1%)无血清培养条件下培养24 h诱导细胞凋亡。以正常条件下单独培养的心肌细胞作为阴性对照组,采用流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率;(4)采用Agilent microRNA芯片检测过表达GATA-4小鼠BMSCs分泌exosome内有关细胞分化及抗凋亡的microRNA。结果与结论:(1)Q-PCR和流式细胞技术检测结果显示:过表达GATA-4-BMSCs分泌的exosome可以有效促进BMSCs向心肌细胞转化且具有极强的抗凋亡能力;(2)Agilent microRNA芯片检测结果显示:涉及细胞分化的关键microRNA:mmu-miR-199a-3p(microRNA为上调);mmu-miR-1894-5p(microRNA为下调)。涉及细胞抗凋亡的关键microRNA:mmu-miR-199a-3p、mmu-miR-20a-5p、mmu-miR-330-3p,这3个基因均为上调。其中mmu-miR-199a-3p即涉及细胞分化又涉及细胞抗凋亡,为重点首先需要验证的microRNA。

感染性心内膜炎患者手术死亡相关风险因素研究

目的探讨感染性心内膜炎(infecfine endocarditis,IE)手术死亡风险因素。方法选取2008年1月至2018年1月云南省第一人民医院收治的IE患者80例,根据手术结果分为手术成功组(n=60)和术后死亡组(n=20)o采用回顾性研究方法,收集两组患者的一般资料(包括性别、年龄,有无外周血管疾病,是否吸烟,是否行胸部手术,有无腹痛、胸痛、恶心及低血压)、实验室检查结果及术中停止循环时间。结果最终入选80例IE患者,其中手术成功组60例(75%),术后死亡组20例(25%)。两组年龄[手术成功组(46.2±0.3)岁,术后死亡组(51.3±1.9)岁,P=0.013]、胸痛发生率(手术成功组18.3%,术后死亡组90.0%,P=0.000)、腹痛发生率(手术成功组8.3%,术后死亡组55.0%,P=0.000)、低血压发生率(手术成功组3.3%,术后死亡组75.0%,P=0.000)及血小板计数(PLT)发生率(手术成功组76.7%于60×10^9/L﹤PLT≤150×10^9/L,术后死亡组75.0%于43×10^9/L≤PLT≤59×10^7L,P=0.000)、术中停止循环时间(手术成功组85%60 min矣停止循环时间名120 min,术后死亡组85%120 min<停止循环时间专250 min,P=0.000)比较差异有统计学意义(P<0.05);而性别、吸烟率及外周血管疾病、恶心/呕吐发生率两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。单因素Logistic回归分析结果表明,年龄(B=-0.0441,P=0.0021)、胸痛(B=-0.0321,P=0.0000)、腹痛(B=-0.0125,P=0.0311)、低血压(B=-0.2818,P=0.0312)、PLT(B=-0.1631,P=0.0025)、停止循环时间(B=-0.2513,P=0.0000)与死亡有独立的关联。结论感染性心内膜炎患者的年龄>60岁,术前出现胸痛、腹痛和低血压,术前PLT越低,术中停止循环时间延长,均能增加手术死亡风险。

GATA-4在心肌损伤修复中的作用机制研究进展

GATA-4是调控心脏基因表达的重要转录因子,参与了心脏正常发育、功能基因表达和心肌肥大的病理过程。GATA-4在心脏发育的早期起重要作用,抑制胚胎干细胞中GATA-4的表达可阻断胚胎干细胞向心肌细胞分化,增强GATA-4的表达则增加胚胎干细胞向心肌细胞分化。并且GATA-4还具有抗细胞凋亡的作用,GATA-4在心肌肥大期间成体心肌细胞的凋亡过程中具有重要的作用。通过增加促存活基因的表达,可改善细胞的存活。其在心肌损伤修复、缺血性心脏病治疗等方面成为目前研究的热点。

瓣膜置换手术同期直视射频消融治疗房颤影响因素分析

目的探讨瓣膜置换手术同期直视射频消融治疗房颤影响因素。方法2010年1月至2013年12月共完成100例瓣膜疾病手术治疗，同时术中直视射频消融治疗房颤，术后随访6—33个月，平均（19．8±8．7）个月，其中70例患者维持窦性心率，304例患者再次转为房颤心率。回顾两组患者的左房直径、房颤病史的长短、年龄、性别、随访时间、瓣膜置换类型。结果两组患者年龄、性别、随访时间、瓣膜置换类型均无显著性差异（P〈0．05）；两组患者左房直径、房颤病史的长短具有显著性差异（P〈0．05），窦性心律组的左房直径、房颤痛史均较房颤心律组明显较小、较短。结论左房直径（〈60mm）、房颤病史的长短（〈7年）是影响房颤治疗效果的主要因素。

外泌体对过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化能力促进作用的研究

目的探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)通过外泌体促进BMSCs向心肌细胞分化的能力。方法 2016年1—6月选取健康4周龄SPF级C57BL/6小鼠10只,通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠BMSCs,构建过表达GATA-4的BMSCs,并加入基因开启剂多西环素(DOX)。采用Exo Quick-TC提取分泌的外泌体。将GATA-4-BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养(A组)、空载体-BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养(B组)、BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养(C组)、BMSCs单独培养(D组)及小鼠心肌细胞单独培养(E组)72 h,采用荧光染色定性检测和反转录聚合酶链式反应(qPCR)定量检测肌钙蛋白T(cTnT)、α肌动蛋白(α-actin)、Connexin 43、肌间线蛋白(Desmin)的表达。结果免疫荧光定性检测结果显示,A组GATA-4-BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养72 h可见细胞核被DAPI染为蓝色,表达出绿色的cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin;B、C、D组可见细胞核被DAPI染为蓝色,没有表达出绿色的cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin;E组可见细胞核被DAPI染为蓝色,表达出绿色的cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin。qPCR法检测结果显示,5组cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中E组cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin表达水平较A组升高;A组和E组cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin表达水平较B组、C组和D组升高(P<0.05)。结论过表达GATA-4的BMSCs分泌的外泌体可以有效促进BMSCs向心肌细胞分化。

小鼠骨髓间充质干细胞SCA-1^+/CD45^+/CD31^+亚群自身抗凋亡基因研究

目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)亚群SCA-1^+/CD45^+/CD31^+抗凋亡的分子基础。方法以小鼠心脏干细胞表面分化抗原检测BMSCs后以CD45、CD31为标准分选得到4个亚群。体外将4个亚群采用无血清低氧(5%)培养,流式细胞术检测各组的凋亡率。分别将细胞注入心梗48 h小鼠体内于注射后48 h完成心功能测定。可见SCA-1^+/CD45^+/CD31^+组抗凋亡能力最强,心脏彩超提示心功能恢复亦优于其他各组。采用基因芯片完成Agilent小鼠全基因4×44K芯片从分子水平对SCA-1^+/CD45^+/CD31^+亚群抗凋亡能力进行探讨。结果将SCA-1^+/CD45^+/CD31^+与其他组有关于凋亡基因进行聚类分析及Network结果共同比较可见两者无交集,以上述差异基因4倍表达为标准,因而以Network结果为主。可见NFk B1、RB1、E2F1为感兴趣基因。结论小鼠BMSCs为一多克隆的细胞群体。SCA-1^+/CD45^+/CD31^+抗凋亡及改善心功能方面优于其他亚群;其分子机制在于NFk B1、RB1、E2F1基因表达较其他亚组多见。