淫羊藿苷对抑郁症模型小胶质细胞表型转化的调控作用

探索淫羊藿苷抗抑郁的作用机制,将SPF级KM小鼠分为空白组、模型组、盐酸氟西汀组(10 mg/kg)、淫羊藿苷高(50 mg/kg)、低(25 mg/kg)剂量组。除空白组外,其余各组小鼠采用56 d慢性不可预知温和应激建立抑郁症模型。造模第1 d开始灌胃给予各组小鼠相应药物,连续56 d。于给药后第53~56 d,进行行为学测试。末次给药后,取材。酶联免疫吸附剂实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测脑组织匀浆白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)检测脑组织中IL-6、IL-10、诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、分化簇206(cluster of differentiation 206,CD206)mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)检测脑组织iNOS、CD206蛋白表达。体外培养小鼠小胶质细胞(BV-2),采用细胞增殖与毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)法检测淫羊藿苷的细胞毒性。BV-2细胞暴露于100μg/mL脂多糖及15μg/mL、25μg/mL的淫羊藿苷24 h后,收集细胞。免疫荧光技术检测细胞iNOS、CD206蛋白表达。研究结果表明,慢性不可预知温和应激致抑郁症模型制备成功,淫羊藿苷可降低抑郁症小鼠脑组织IL-6水平及IL-6、iNOS mRNA表达,升高脑组织IL-10、5-HT、DA、NE水平及IL-10、CD206 mRNA表达;降低脑组织iNOS蛋白,升高CD206蛋白表达;改善模型小鼠抑郁症样行为。淫羊藿苷可降低LPS刺激的BV-2细胞iNOS蛋白表达,升高CD206蛋白表达。结果表明,淫羊藿苷抑制小胶质细胞M1表型转化,促进M2表型转化,从而改善模型小鼠抑郁样行为。

华山参化学成分及其抗氧化活性研究

目的:分离并鉴定中药华山参95%乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇溶性部位的化学成分。方法:采用硅胶、十八烷基硅烷键合硅胶和葡聚糖凝胶等柱色谱方法,以及半制备型高效液相色谱法等分离手段对华山参根95%乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇溶性部位进行分离,通过核磁共振、质谱法等技术对所得化合物进行结构鉴定,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基模型对所得化合物的抗氧化活性进行评价。结果:从华山参正丁醇部位中分离得到3个化合物,分别鉴定为法筚枝苷(1)、苄基-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、阿魏酸(3);从乙酸乙酯部位中分离得到9个化合物,分别鉴定为异香草酸(4)、顺式阿魏酸(5)、3-吲哚甲酸(6)、阿魏酰胺(7)、反式阿魏酸酰对羟基苯乙胺(8)、N-反式-对-香豆酰基章鱼胺(9)、3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-N-[2-(4-羟基苯基)-2-甲氧基乙基]丙烯酰胺(10)、lactariolideⅠ(11)、coriolide(12);化合物3、5和化合物7~10质量浓度为0.3 mg·mL^(-1)时对DPPH自由基有一定的清除作用。结论:化合物1~12为首次从该植物中分离得到,化合物3表现出较强的抗氧化能力。

白术中新桉叶烷倍半萜类成分及其SREBPs抑制活性

采用正相硅胶、Sephadex LH-20、ODS、HPLC等色谱手段,对中药白术的化学成分进行研究,从白术干燥根茎95%乙醇提取物中分离得到3个倍半萜类化合物,并根据波谱数据和理化性质对其结构进行鉴定,分别鉴定为2个桉叶烷倍半萜(7Z)-8β,13-diacetoxy-eudesma-4(15),7(11)-diene(1)、7-oxo-7,8-secoeudesma-4(15),11-dien-8-oic acid(2)及1个愈创木烷倍半萜guai-10(14)-en-11-ol(3)。其中化合物1和2为新化合物,化合物3为首次从菊科中分离得到。化合物1~3对SREBPs均具有一定的抑制作用。

天智颗粒对VD大鼠海马SYN、PSD95表达及突触可塑性的影响

目的:观察天智颗粒对血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠认知功能障碍及神经元突触可塑性的影响。方法:采用双侧颈总动脉永久性结扎法制备VD模型,将造模成功大鼠按体质量分为模型组、多奈哌齐组(0.45 mg·kg^(-1))及天智颗粒低(0.66 g·kg^(-1))、中(1.32 g·kg^(-1))、高(2.65 g·kg^(-1))剂量组,另设假手术组,每组12只。灌胃给药8周后,Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力;HE染色观察海马CA1区神经元损伤情况;透射电子显微镜观察海马CA1神经元突触结构改变情况;Western Blot检测海马组织突触素(synaptophysin,SYN)、突触后致密蛋白95(postsynaptic density protein 95,PSD95)的蛋白表达水平。结果:与模型组比较,天智颗粒组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),平台所在象限时间占比和平台穿越次数明显增多(P<0.05),海马神经元突触间隙宽度显著减小(P<0.01),海马组织SYN、PSD95蛋白表达水平显著升高(P<0.05);HE染色及透射电镜观察显示,天智颗粒可明显改善VD大鼠海马CA1区神经元排列紊乱和突触超微结构损伤。结论:天智颗粒能明显改善VD模型大鼠认知障碍,机制可能与其修复神经元及突触超微结构损伤、提高SYN、PSD95蛋白表达水平从而改善突触可塑性有关。