PI3K/AKT2在胃癌组织表达及其与临床病理特征和生存期的关系

目的探讨PI3K、AKT2在胃癌、癌旁组织中的表达,分析其表达水平与临床病理特征和预后的关系。方法用组织芯片和免疫组织化学法检测189例胃癌组织、54例癌旁组织、32例正常胃黏膜中PI3K、AKT2的表达。结果胃癌、癌旁组织和正常胃黏膜PI3K阳性表达率分别是76.7%、25.9%和25.0%。AKT2阳性表达率分别是75.7%、27.8%和37.5%。胃癌组织PI3K表达与有无淋巴结转移、浸润深度、分化程度和Lauren分型有关(P<0.05),与肿瘤大小无关(P>0.05)。AKT2表达与肿瘤大小、有无淋巴结转移、浸润深度、分化程度、Lauren分型有关(P<0.05)。单因素生存分析显示,PI3K、AKT2阳性组对胃癌患者生存期的影响有统计学意义(P<0.05),Cox多元回归分析显示,AKT2的异常表达可以作为影响胃癌预后的独立因素(P<0.05)。结论 PI3K/AKT2细胞信号传导通路参与胃癌的发生、发展、浸润转移,是胃癌发生的晚期事件。AKT2的表达可以作为胃癌预后的独立指标。

乳腺癌组织中微淋巴管分布及密度的临床病理意义

目的探讨乳腺癌组织中微淋巴管分布、密度及其与相关临床病理因素之间的关系,分析乳腺癌淋巴结转移的可能机制。方法应用免疫组化SABC法检测50例乳腺癌及其相应癌旁正常乳腺组织中D2-40的表达,并分别计数其微淋巴管密度(microlymphatic density,MLD)。结果乳腺癌组织中的MLD明显高于癌旁正常组织(P<0.01),且肿瘤不同区域中MLD有所差异,肿瘤边缘区MLD均值显著高于癌旁正常组织及肿瘤中心区均值(P<0.01);肿瘤中心区MLD与正常组织MLD无显著性差异(P>0.05);肿瘤边缘区MLD与乳腺癌的临床分期、淋巴结转移状态相关(P<0.01),与年龄、肿瘤大小、组织分型及雌、孕激素受体状态无关(P>0.05)。结论1)乳腺癌组织中存在淋巴管,且分布存在异质性,淋巴管主要分布于肿瘤边缘区,肿瘤边缘区MLD与淋巴结转移、临床分期状态相关,其MLD的增加可能与乳腺癌的侵袭及转移相关;2)乳腺癌组织中的MLD检测可作为评估乳腺癌淋巴结转移状况的一项辅助指标,为判断乳腺癌患者预后及确定临床治疗方案提供实验和理论依据。

右美托咪定通过影响脊髓ERK1和CREB磷酸化改善大鼠肠易激综合征内脏痛

目的探讨右美托咪定(Dexmedetomidine,Dex)对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)内脏痛大鼠结肠和脊髓的保护作用,及其对细胞外信号调节蛋白激酶1(extraeellular signal regulated kinase1,ERK1)和环磷腺苷反应元件结合蛋白(cyclic adenosine monophosphate response element binding protein,CREB)磷酸化的影响机制。方法将40只SPF级足月雄性SD大鼠(6~8 g)采用结直肠自制球囊扩张(colorectal dilatation,CRD)刺激来构建大鼠IBS模型。动物实验分为正常组、模型组、Dex组、Dex+pc组,模型组、Dex组、Dex+pc组接受CRD刺激,正常组实验动物不做任何处理。造模成功后Dex组动物每日腹腔注射5μg/kg的盐酸右美托咪定注射液,Dex+pc组动物每日腹腔注射5μg/kg的盐酸右美托咪定注射液和pc DNA3.1-CREB,正常组、模型组大鼠腹腔注射等剂量的生理盐水和100 nmol/L的pc DNA3.1-CREB-NC。TUNEL染色检测各组大鼠脊髓组织中的细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测大鼠脊髓组织中ERK1和CREB的mRNA的表达;Western blot检测大鼠脊髓组织中p-ERK1、p-CREB的表达。结果与正常组比较,模型组、Dex组、Dex+pc组大鼠脊髓组织中的细胞凋亡率、ERK1和CREB的mRNA的表达、p-ERK1、p-CREB的表达明显升高(P<0.05),与模型组比较,Dex组、Dex+pc组大鼠脊髓组织中的细胞凋亡率、ERK1和CREB的mRNA的表达、p-ERK1、p-CREB的表达明显下降(P<0.05);与Dex组比较,Dex+pc组大鼠脊髓组织中的细胞凋亡率、ERK1和CREB的mRNA的表达、p-ERK1、p-CREB的表达明显升高(P<0.05)。结论右美托咪定能抑制慢性功能性内脏痛大鼠脊髓组织的细胞凋亡,可能通过抑制ERK1和CREB的磷酸化来发挥结肠和脊髓组织的保护作用。

LncRNA(HOTAIR)/miR-206/TAGLN2信号轴调控甲状腺乳头状癌细胞的侵袭

目的探讨lncRNA(HOTAIR)/miR-206/TAGLN2信号轴调控人甲状腺乳头状癌(PTC)细胞系TPC-1侵袭的分子机制。方法收集兰州大学第一医院甲状腺乳头状癌组织和癌旁组织,用RT-qPCR和Western blot检测PTC组织和癌旁组织中HOTAIR、miR-206和TAGLN2的表达;构建miR-206过表达和HOTAIR低表达的TPC-1细胞。RT-qPCR和Western blot检测mRNA和蛋白的表达,Transwell小室法实验检测TPC-1细胞系的侵袭能力。结果与癌旁组织相比PTC组织中HOTAIR表达量增加2.48倍,miR-206-5p表达量降低至0.6,TAGLN2及其蛋白表达量增加(P<0.05);过表达miR-206后,TPC-1细胞中TAGLN2的蛋白表达量减少(P<0.05),且TPC-1细胞的侵袭能力受到了抑制。敲低HOTAIR后,TPC-1细胞中miR-206表达增加,TAGLN2表达降低,同时TPC-1细胞的侵袭能力也明显降低(P<0.05)。结论在甲状腺乳头状癌中,降低HOTAIR的表达水平,可促成miR-206的过表达,进一步抑制TAGLN2的表达,最终可降低甲状腺癌的侵袭能力。

卵巢成熟型囊性畸胎瘤合并类癌及黏液性囊腺癌1例报告

患者女性,72岁,主诉下腹坠胀不适3个月余,近期出现尿急、尿频等不适,平素月经规律,于25年前自然绝经。2013年10月于兰州军区总医院妇科就诊。妇科检查：盆腔可扪及一大小约20 cm×20 cm肿物,质硬,活动度尚可。实验室检查：CEA为6.7μg/L。B超检查：盆腔内显示以囊性为主的混合型14.7 cm×11.9 cm肿物,壁厚,内见光带分隔及不规则较强回声。行子宫全切术、双侧附件全切术、大网膜切除术。

血清糖类抗原19-9与血红蛋白及嗜酸粒细胞分数鉴别自身免疫性胰腺炎与胰腺癌的临床价值研究

目的探讨糖类抗原19-9(CA19-9)、血红蛋白(Hb)、嗜酸粒细胞分数(EO)鉴别自身免疫性胰腺炎(AIP)与胰腺癌的临床价值。方法选择2012年6月—2017年6月就诊于长沙医学院的28例AIP患者(AIP组)及同期经术后病理检查确诊为胰腺癌的50例患者(胰腺癌组)为研究对象,检测和比较其Hb、白细胞计数(WBC)、EO及血清淀粉酶、脂肪酶、免疫球蛋白(Ig)、IgG、IgG4、CA19-9、癌胚抗原(CEA)。采用多因素Logistic回归分析进一步分析影响患胰腺癌发病的因素。同时分析Hb、EO、血清CA19-9与血清IgG4的相关性分析。绘制Hb、EO、血清IgG4、血清CA19-9及血清CA19-9联合血清IgG4鉴别AIP和胰腺癌的ROC曲线,计算ROC曲线下面积(AUC)。结果 AIP组Hb、血清CA19-9、血清CEA低于胰腺癌组,EO及血清淀粉酶、脂肪酶、Ig、IgG、IgG4高于胰腺癌组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示Hb[OR=1.284,95%CI(1.091,2.511)]、EO[OR=1.272,95%CI(1.124,1.839)]、血清IgG4[OR=1.397,95%CI(1.320,2.479)]及血清CA19-9[OR=1.415,95%CI(1.371,1.754)]是胰腺癌发病的影响因素。Hb(r=0.547,P=0.023)、EO(r=0.486,P=0.031)和血清CA19-9(r=0.642,P=0.012)与血清IgG呈正相关。Hb、EO、血清IgG4、血清CA19-9及血清CA19-9联合血清IgG4鉴别AIP与胰腺癌的AUC分别为0.701、0.661、0.764、0.803、0.872。结论 Hb、EO、血清IgG4、血清CA19-9是胰腺癌发病的影响因素;血清CA19-9联合血清IgG4鉴别AIP和胰腺癌的临床价值优于Hb、EO、血清IgG4、CA19-9,可作为临床潜在诊断指标。

基质金属蛋白酶及其抑制因子在胎儿皮肤内的表达特征及其意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-3、MMP-9及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）、TIMP-2在不同发育时期胎儿皮肤中的表达特征及其可能的生物学意义。方法24例被测标本中包括不同胎龄（12～40周）的胎儿皮肤。用免疫组化方法和病理技术检测这5种蛋白在胎儿皮肤中定位和表达量的变化规律。结果MMP-2、MMP-3、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2在不同时期的胎儿皮肤内均有表达，它们主要分布于表皮细胞、成纤维细胞、毛囊和汗腺上皮细胞以及血管内皮细胞的胞浆中。在早期（胎龄12～18周）妊娠胎儿皮肤中，MMP-2、MMP-3、MMP-9蛋白呈强阳性表达，随着胎儿生长发育，这些蛋白的阳性率逐渐降低，在晚期（胎龄27～40周）妊娠胎儿皮肤中这些蛋白的阳性细胞率均明显低于早期妊娠胎儿（P均〈0．05）。TIMP-1和TIMP-2呈相反的变化规律，在早期妊娠胎儿皮肤中表达水平较低，而在晚期妊娠胎儿皮肤中这两种蛋白阳性细胞率增大，显著高于早期妊娠胎儿（P均〈0．05）。结论MMP-2、MMP-3、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2可能对皮肤的发生、结构功能的维持以及创伤后修复起重要作用。在早期妊娠胎儿皮肤中，MMP-2、MMP-3、MMP-9高表达以及TIMP-1和TIMP-2低表达可能与胎儿皮肤创面无瘢痕愈合密切相关。

组织芯片观察CD44^＋/CD166^＋结直肠癌干细胞的形态及分布

背景:越来越多的研究将CD44作为结直肠癌干细胞的一个特异性的标志物。目的:观察结直肠癌干细胞CD44+/CD166+在原发性结直肠癌组织中的数量、位置及分布方式。方法:取61份结直肠癌、10份正常肠黏膜组织及18份伴不典型增生的结直肠腺瘤标本制成42点的共3块组织芯片。结果与结论:免疫组织化学双染结果显示,正常肠黏膜中未见CD44+/CD166+细胞,在伴不典型增生腺瘤中可见极少量CD44+/CD166+细胞,结直肠癌中可见到少量CD44+/CD166+双阳性细胞。双阳性细胞主要分布在结直肠癌腺管基底侧,呈灶状或散在分布;细胞呈立方形,胞浆稀少,胞核规则,呈卵圆形或高柱状,随着结直肠癌分化程度的降低,数量增多,且其数量在浸润较深的癌巢中较多。提示结直肠癌干细胞的数量、位置、分布方式及其形态有助于结直肠癌的诊断及判断预后。

膜联蛋白A1的表达差异同乳腺癌发生发展相关性的初步研究

目的检测膜联蛋白A1(Annexin A1)在正常乳腺组织、乳腺良性增生、癌前病变及乳腺癌中的表达,以探讨其表达差异同乳腺癌发生发展的相关性。方法应用免疫组织化学SABC方法和蛋白印迹检测乳腺正常组织、良性病变(纤维腺瘤)、癌前病变(乳腺囊性增生症)、非浸润性导管癌、浸润性导管癌中Annexin A1的表达情况。结果Annexin A1的染色评分在20例癌旁正常乳腺组织为1.5328±0.45603;在20例良性病变为1.3250±0.56928;在20例癌前病变为0.9125±0.40324;在20例非浸润性导管癌为0.1550±0.20125;在40例浸润性导管癌为0.1038±0.12004。正常乳腺组织、乳腺囊性增生症、乳腺癌3组间差异显著(P<0.01)。乳腺囊性增生症、良性增生、乳腺癌3组间差异显著(P<0.01)。良性增生与正常组织之间,非浸润导管癌与浸润性导管癌之间无显著差异(P>0.05)。乳腺癌中Annexin A1表达水平与乳腺肿瘤大小及临床分期有关(P<0.05),与患者绝经与否、乳腺癌组织学分级、淋巴结转移与否等无显著差异(P>0.05)。蛋白印迹结果与上述结果一致。结论Annexin A1表达水平在乳腺癌及其癌前病变组织中有不同程度的下调,下调程度与乳腺癌发生的危险性及恶性度密切相关,提示Annexin A1可以作为乳腺癌发生趋势预测、早期诊断、评价预后具有重要应用价值的指标。

基质金属蛋白酶及其抑制因子在增生性瘢痕中的表达特征及意义

目的：研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制因子(TIMP-2)在增生性瘢痕和正常皮肤中的表达特征。方法：用免疫组化技术检测这三种蛋白酶在12例增生性瘢痕和6例正常皮肤中的表达变化规律。结果：在正常皮肤中,MMP-2、MMP-9和TIMP-2的阳性率分别为(2．13±2．36)%、(16．25±18．72)%、(25．38±12．47)%。在增生性瘢痕中,三种蛋白的阳性细胞率明显升高(P＜0．01),其中MMP-2和MMP-9主要定位于表皮细胞和成纤维细胞上,含有TIMP-2蛋白的阳性细胞也主要为表皮细胞和成纤维细胞。结论：MMP-2、MMP-9和TIMP-2可能对皮肤的发生、结构功能的维持以及创伤后修复起重要作用。

白细胞介素-1通过JNK信号通路调控Schlafen2基因的表达

目的:在多效生长因子(Ptn)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞Ptn-siRNA B/MEF241中,研究白细胞介素-1(IL-1)调控Schlafen2(Slfn2)基因表达的机制。方法:应用Northernblot检测Ptn沉默细胞Ptn-siRNAB/MEF241处于不同生长密度时Slfn2基因的表达变化,以确定Ptn沉默细胞中Slfn2基因的表达是否受到某种分泌性细胞因子的调控;用不同浓度的IL-1α中和抗体及IL-1受体拮抗剂处理Ptn沉默细胞,通过Northern blot检测细胞内Slfn2表达的抑制情况;用不同浓度的IL-1α中和抗体及IL-1受体拮抗剂处理Ptn沉默细胞不同时间,通过Western blot检测细胞中JNK磷酸化水平;Northern blot检测SP600125(JNK/MAPK通路抑制剂)对Ptn沉默细胞中Slfn2基因表达的影响。结果:Ptn沉默细胞中Slfn2基因的表达水平同细胞密度相关;用中和抗体和受体拮抗剂阻断IL-1通路,Slfn2表达受到显著抑制;IL-1受到抑制会影响JNK通路的活化;阻断JNK通路,Slfn2的表达受到显著抑制。结论:IL-1可以通过JNK通路诱导Slfn2的表达。

瘦素的生物学特性及其诱导的信号传导途径

瘦素(1eptin,Lep)一直以来被认为是抑制肥胖症的主要物质,是ob基因的表达产物。Ob基因1994年由zhang等人使用定位克隆技术发现,在小鼠中该基因定位于6号染色体,而在人类细胞中则分布于7号染色体上,这两种不同种属的基因编码同一种蛋白质,显示了在物种之间具有极高的同源性。Ob^-/ob^-突变小鼠在个体发育早期即出现肥胖,进食过量,低温,高胰岛素血症,高血糖及其它代谢和神经内分泌异常等病症。在人类。

神经甾体在肝性脑病中的研究进展

肝性脑病(hepatic encephalopathy,HE)是由慢性或急性肝脏疾病引起的神经精神症候群的一种医学现象.神经甾体是以胆固醇及其前体为原料,由中枢神经系统多种细胞(神经元、少突胶质细胞、星形胶质细胞)合成.神经甾体通过基因和非基因效应参与HE的病理生理.一方面,神经甾体结合并调节不同的神经元膜受体,包括γ-氨基丁酸A受体(gamma amino butyric acid-A receptor,GABA-A)、N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-Daspartic acid receptor,NMDA)、5-羟色胺3(5-hydroxytryptamine 3,5-HT3)受体及阿片受体等;另一方面,神经甾体结合于细胞内受体来调节基因表达.值得一提的是,神经甾体通过抑制海马突触活性的长时程增强效应(long-term potentiation,LTP)参与HE的病理生理.神经甾体有望为肝性脑病治疗提供新的途径.

颅内血管外皮细胞瘤囊变坏死与P73表达相关性的研究

目的:探讨颅内血管外皮细胞瘤(HPC)的MRI表现囊变坏死与P73因子表达的相关关系。方法:采用免疫组织化学法(S-P法),用抗P73抗体对29例颅内HPC组织标本进行标记并分析,对肿瘤MRI图像上囊变坏死情况进行评分,对照做相关分析。结果:29例颅内HPCP73均呈阳性表达,与对照组血管瘤型脑膜瘤组之间具有统计学意义(P<0.01);随着肿瘤囊变坏死MRI评分的增高,P73阳性表达水平也提高(P<0.05)。结论:颅内HPCMRI表现囊变坏死与P73的表达程度相关,可做为分析肿瘤治疗和预后的参考。

Survivin在胃腺癌、异型增生组织中的表达及临床意义

目的:探讨凋亡抑制基因Survivin在胃癌、胃黏膜异型增生组织中的表达及临床意义,为胃癌的诊断及治疗提供一定的实验和理论依据。方法:应用免疫组织化学SP法检测50例胃腺癌、32例异型增生组织和20例正常胃黏膜中Survivin的表达。结果:Survivin在胃癌、轻、中、重度异型增生和正常黏膜中的阳性表达率分别为56%、9%、10%、54.5%、0%,轻、中度异型增生组织中Survivin的阳性表达率明显低于重度异型增生和癌组织中的表达(P<0.01),而在重度异型增生和癌组织间差别无显著性(P>0.05);Survivin的表达与胃癌的组织分化、浆膜侵犯、淋巴结转移、临床分期呈正相关(P<0.05),与年龄及肿瘤大小无相关性(P>0.05)。结论:Survivin在胃癌及异型增生组织中呈异常表达,且该基因蛋白与胃癌的临床病理因素相关,提示Survivin在胃癌的发生发展中起重要作用,检测Survivin的表达,不仅有助于了解胃癌的发病机制,还可作为癌前或交界性病变发展演变的监测指标,此对胃癌的早期诊断及指导治疗均有重要意义。

凹凸棒粉凝胶剂治疗小鼠急性腹泻的实验观察

目的观察并评价凹凸棒粉（坡缕石，attapulgite）凝胶剂对消化道黏膜的保护作用及治疗急性腹泻的效果。方法给各组小鼠灌胃蓖麻油或番泻叶水煎液0．5ml，30min后，分别给予其生理盐水（NS）、思密迭、凹凸棒粉甲壳素凝胶剂、凹凸棒粉琼脂凝胶剂、凹凸棒粉阿拉伯胶凝胶剂、凹凸棒粉西黄芪胶凝胶剂、凹凸棒粉羟甲基纤维素凝胶剂、凹凸棒粉白芨胶凝胶剂、凹凸棒粉卡波姆凝胶剂。观察6h内小鼠的累积腹泻次数，并比较各组间的疗效。结果与模型组相比，各给药组均有显著性差异（P〈0．05），且凹凸棒粉甲壳素凝胶剂组疗效均优于其他给药组。结论凹凸棒粉凝胶剂能有效治疗急性腹泻，因其主要成分凹凸棒粉无毒副作用，吸附性能强，见效快，疗程短，且国内地产资源丰富，故有较好的开发及应用前景。

凋亡相关基因bcl-2和bax在小儿神经母细胞瘤中的表达及其意义

神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）是一种发展迅速、恶性程度及死亡率高、预后极差的小儿常见的恶性肿瘤.为探讨细胞凋亡调控基因bax、bcl-2蛋白及bcl-2mRNA在小儿神经母细胞瘤中的表达,我们进行了以下研究.

人瘦素蛋白在大肠杆菌中的融合表达和纯化

目的构建人瘦素因子(Leptin)的原核表达质粒pGEX-4T-3-LEP,并诱导该基因在原核细胞中大量表达。方法采用逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)和DNA重组技术,从人皮肤成纤维细胞内将编码人Leptin的cDNA序列克隆至原核表达载体pGEX-4T-3上,选取阳性克隆扩增后,提取DNA进行酶切鉴定和测序。同时应用SDS．PAGE和蛋白质印迹方法对其表达产物进行特异性鉴定。结果克隆出的Leptin基因的cDNA由469bp组成,包括翻译起始密码子、编码序列和终止密码子等部分,含有Letinp基因的cDNA的表达质粒pGEX-4T-3在DH5a细菌体内能够表达,并且随着诱导时间的延长,Leptin基因的表达量增加,重组Leptin蛋白主要存在于包涵体中。结论Lepfin基因可以在原核细胞中获得表达,为深入研究该蛋白在创伤愈合中的具体作用奠定了基础。