数字实验平台与病理科实践在病理学中的应用

病理学是基础医学与临床医学的桥梁学科,是许多疾病诊断中最可靠的方法,在临床医学实践中被称为“医生的医生”。因此病理学在医学中占有极其重要的地位。教学改革是高校的必经之路,在病理学实验教学过程中通过转变传统教育理念,把知识的传授者转变为学习的组织者、引导者、合作者,帮助学生通过自主探索和合作交流来理解和牢固掌握的病理专业知识。鉴于病理学的高度直观性及实践性,重视病理学实验教学是提高病理学教学质量的重要保障。文章主要探讨利用线上形态学数字实验平台辅助学生自主学习并通过医院病理科实践系统性培养医学生临床实践能力,构建理论知识与临床实践相结合的全程教学体系,实现对学生学习兴趣、自主学习能力、临床思维、综合分析问题能力、临床胜任力的整体提升。

影响涎腺导管癌预后的临床病理因素和免疫组化标记物

目的:探讨影响涎腺导管癌(salivary duct carcinoma, SDC)患者预后的临床病理因素和免疫组化标记物。方法:回顾性分析23例SDC患者的临床资料并进行随访,采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色、免疫组织化学染色和人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)银染原位杂交(silver-enhanced in situ hybridization, SISH)检测,并进行生存回归分析。结果:23例SDC患者中男性20例,女性3例;发病年龄39~86岁,平均年龄63.91岁;15例肿瘤发生于腮腺,8例发生于颌下腺;随访结果,术后4例复发,4例死亡,其余患者生存良好,中位随访时间43个月。肿瘤组织呈导管内筛状、巢状、实性、腺管状、条索状。在筛孔状及实性结构的中心可见粉刺样坏死。瘤细胞较大,胞浆嗜酸性、颗粒状,胞核大、多形性,核仁明显,染色质粗,核分裂像易见。免疫表型:CK7(23/23);雄激素受体(androgen receptor, AR)(21/23);巨囊性病液体蛋白15(giant cystic disease liquid protein, GCDFP15)(17/23);p53(16/23);CK5/6(11/23);HER2(10/23),GATA结合蛋白3(GATA binding protein 3,GATA3)(10/23);CK14(3/23);p63(2/23)。不表达S-100,Ki-67增殖指数5%~80%。从免疫组织化学标记物和临床病理特征的关系,CK5/6阳性患者临床分期多为Ⅲ/Ⅳ期(P=0.009),而AR、HER2、GATA3、Ki-67增殖指数与患者的临床病理特征相关性无统计学意义(P>0.05)。单因素、多因素生存分析结果显示临床分期是影响患者OS的危险因素(P=0.042)。结论:SDC侵袭性强,易复发和转移,CK5/6阳性患者预后不佳。

AB-PAS染色在临床病理诊断中的应用价值

目的 探讨AB-PAS染色在临床病理诊断中的应用价值。方法 对包括肺黏液表皮样癌、胃印戒细胞癌、膜性肾病和真菌感染在内的40例病理标本进行AB-PAS染色,判定组织内是否含有黏液、糖原或是真菌感染,从而辅助这类疾病的临床病理诊断。结果 通过AB-PAS染色,肺黏液表皮样癌肿瘤细胞胞质呈现紫红色或蓝色的液滴状;组织细胞样的胃印戒细胞癌,可呈蓝色或紫红色;膜性肾病可清晰地显示增厚的基底膜;真菌菌丝及孢子均呈阳性,曲菌菌丝在显呈紫红色,杂乱排列,粗细均匀,有隔,分支状,常呈45°的锐角分支;放线菌的菌丝呈紫红色,交织形成菌落,周围部分菌丝排列成放线状,菌丝末端膨大成棒状。结论 AB-PAS染色可直观观察到组织内的黏液、糖原和真菌等物质,可用于诊断及鉴别一些分泌黏液、糖原的肿瘤以及判定引起感染性疾病的真菌类型,为疾病的诊断及鉴别诊断提供重要依据。

临床病理学融入病理学教学实践中的应用

病理学是连接基础医学与临床医学的一门桥梁性学科,临床病理学是利用病理学的知识和方法对送检的人体标本做出最终疾病诊断的一门病理学分支学科。在临床医学本科病理学教学实践中,将临床病理学与多学科病例讨论(multiple disciplinary team,MDT)结合运用于其中,可以更加有效地整合基础和临床各种教学资源,培养学生养成对疾病整体和全面认识的理念,认识疾病本质,激发学生的学习热情,有助于深化和巩固教学效果和提高教学满意度,从而使学生更有效地掌握临床病理学知识,尽快协助医学生树立并提高他们的临床思维能力,为临床学习奠定扎实的基础,期望能在今后的病理学教学中进一步优化、推广和应用。

乳头状肾细胞癌病理分型和形态谱系演变研究进展

乳头状肾细胞癌(papillary renal cell carcinoma,PRCC)是来源于肾小管上皮细胞的低度恶性肿瘤,传统PRCC的分型是根据癌细胞形态特征分为Ⅰ型和Ⅱ型,在实际工作中不少病例兼具Ⅰ型和Ⅱ型的特征而难以准确分型,传统分型已无法适应现实需求。近年对PRCC的形态学改变及分子遗传学改变研究已取得较大进展,陆续发现了PRCC的多种亚型,大大拓宽PRCC的形态学谱系。该文针对这些研究进展作一综述,以期提高PRCC的病理诊断、分子分型和治疗预后等方面的认识水平。

双源CT双能量虚拟平扫对直肠癌壁外血管侵犯的诊断价值

目的:探讨双源CT双能量虚拟平扫(VNC)对直肠癌壁外血管侵犯(EMVI)的术前诊断价值。方法:选取2019年11月至2021年12月间拟手术治疗的150例直肠癌患者术前行双源CT双能量虚拟平扫,女性64例(42.7%)、男性86例(57.3%),平均年龄为(62.3±11.8)岁。两名高年资影像科医师独立分析术前影像资料(包括ctEMVI情况及有无局部淋巴结浸润和远处转移),判断是否存在术前EMVI。以手术病理结果为金标准,分别评价VNC诊断EMVI的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值并采用受试者操作特征(ROC)曲线下面积评价其诊断效能。结果:150例直肠癌患者中,术后病理证实56例(37.3%)为EMVI阳性,94例(62.7%)为EMVI阴性。医师1对EMVI评价准确性、敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为86%、80.36%、89.36%、81.82%、88.42%,AUC为0.831(95%CI 0.756~0.905);医师2的准确性、敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为88.67%、80.36%、93.62%、88.24%、88.89%,AUC为0.870(95%CI 0.802~0.938),医师1与医师2的评估结果一致性较高(k=0.943)。结论:双源CT双能量虚拟平扫对直肠癌EMVI术前评估具有一定的诊断价值。

46例肺多形性癌PD-L1表达免疫细胞浸润密度与预后的关系

目的:探讨肺多形性癌(pleomorphic carcinoma,PC)不同病理亚型的临床病理特征、肿瘤免疫微环境(tumor immune microenvironment,TIME)及其预后差异,为肺PC患者的分层管理和精准治疗提供依据。方法:回顾性分析内蒙古医科大学附属医院2016年6月至2022年12月收治的46例肺PC患者的临床病理资料,分别对其性别、年龄、肿瘤大小、临床分期、上皮标记物和组织学亚型(混合型和单纯型)等因素进行总生存期(overall survival,OS)的单因素和多因素Cox比例风险回归分析,观察混合型和单纯型组PD-L1表达与免疫细胞浸润特点以及TIME类型。结果:单因素分析显示临床分期(P=0.019)是影响患者OS的危险因素,病理亚型(P=0.048)和中性粒细胞浸润(P=0.007)是影响患者OS的保护因素,多因素分析显示临床分期(P=0.044)和中性粒细胞浸润(P=0.003)是影响患者生存的2个独立因素。肿瘤细胞PD-L1表达和肿瘤免疫微环境分析显示,混合型组CD4+T淋巴细胞浸润密度比单纯型组高(P=0.009),单纯型组PD-L1表达和CD163+M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumorassociated macrophages,TAM)浸润密度比混合型组高(P=0.002),混合型组以Ⅱ型和Ⅲ型TIME为主,单纯型组以Ⅰ型和Ⅲ型TIME为主。结论:肺PC具有异质性的形态学和独特的TIME,肺PC应根据形态学和TIME进行分层管理才能提高免疫治疗效果。

CDK4/6抑制剂阿贝西利联合顺铂对人胃癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨CDK4和CDK6(CDK4/6)抑制剂阿贝西利与顺铂联合作用对人胃癌细胞生物学行为的影响。方法:利用生物信息学网站UALCAN在线分析TCGA数据库,获取人胃癌组织与正常胃组织中CDK4/6基因表达情况;培养人胃癌细胞SGC-7901,采用Western blot检测细胞中CDK4/6蛋白的表达。利用细胞增殖实验检测顺铂和阿贝西利单独作用24 h的半数抑制浓度,然后将细胞分为空白对照组、0.5μg/mL顺铂组、10μmol/L阿贝西利组、10μmol/L阿贝西利和0.5μg/mL顺铂联合组,分别作用24、48、72 h后采用CCK-8法、流式细胞术、划痕实验、Transwell实验检测各组中SGC-7901细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭情况。结果:生物信息学分析表明CDK4/6蛋白在人胃癌组织中的表达显著高于正常胃组织(P<0.05)。Western blot实验显示,与对照组相比,人胃癌细胞SGC-7901中CDK4/6蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05)。CCK-8实验结果显示最接近IC50值的顺铂浓度为0.5μg/mL,阿贝西利浓度为10μmol/L,故后续选择此浓度进行试验。与空白对照组、顺铂组、阿贝西利单独组相比,阿贝西利联合顺铂组的细胞增殖抑制率明显增强且具有时间依赖性(r=0.949,P<0.01),细胞凋亡率亦显著升高(P<0.01),迁移和侵袭能力均显著减弱(P<0.01)。结论:CDK4/6在人胃癌组织和细胞中的表达均显著升高,CDK4/6抑制剂阿贝西利联合顺铂显示出协同作用,可显著抑制人胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进其凋亡。

病理组织切片制作不佳影响诊断的补救方法

目的如何制作一张优质的病理组织切片。方法对组织切片制作过程中出现的问题进行补救。结果经补救后,制作的组织切片不脱片,无皱褶,镜下诊断与实际块数相符。结论通过补救处理后制出的切片完整,效果较好,完全能满足病理医生的诊断需求。

刚果红染色在临床病理诊断中的应用价值

目的探讨刚果红染色在临床病理诊断中的应用价值。方法对30例HE染色下呈现均质粉染区域的声带息肉、甲状腺髓样癌、淀粉样变肾小球肾炎的标本进行刚果红染色,从而判定其变性的性质是淀粉样变性还是玻璃样变性,进而辅助诊断疾病。结果其中21例有淀粉样变性的区域经刚果红染色颜色呈现为红色或砖红色,而9例具有玻璃样变的病例无此颜色变化。结论刚果红染色可用于鉴别淀粉样变性与玻璃样变性,为某些疾病的诊断提供线索,从而有助于疾病的诊断与鉴别诊断。

多种模式教学方法在临床肾活检病理教学中的实践与思考

肾活检病理检查对于肾脏疾病的临床诊断,指导治疗及预后判断起到了至关重要的作用。多种原因:如对正常肾脏组织结构认识不足、肾脏疾病临床表现与病理不对应、肾活检病理术语多且繁杂等导致了临床肾活检病理学习成为临床肾脏内科医师的难点。针对临床肾活检病理教学的特殊性及难点,从肾脏基础知识、肾活检基本技术、肾活检病理诊断、临床与病理联系、肾活检病理网络学习等多个方面对于如何提高临床肾活检病理教学进行了探讨,希望能起到良好的教学效果,供临床同行参考学习。

年轻化间充质干细胞条件培养基促进小鼠创面愈合的研究

背景间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)条件培养基无细胞疗法是创伤修复领域的一种新型治疗方案,但其治疗效果受间充质干细胞状态的影响。目的探究年轻化MSC培养基对小鼠创面愈合的作用。方法建立间充质干细胞复制性衰老(传代至15~20代)模型,检测其衰老指征;使用小分子化合物[丙戊酸(valproic acid,VPA)和RepSox]逆转衰老间充质干细胞并验证逆衰老效果。分别收集衰老MSC培养基与年轻化MSC培养基。用收集到的两种条件培养基培养人成纤维细胞,使用CCK-8实验、Ki-67免疫荧光、划痕实验和Transwell实验检测这两种条件培养基对成纤维细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。分别用衰老MSC培养基、年轻化MSC培养基和0.9%氯化钠注射液治疗C57BL/6小鼠背部皮肤全层缺损模型,评估3种治疗方法对创面愈合的影响。结果与衰老的间充质干细胞相比,经小分子处理后衰老间充质干细胞SA-β-gal阳性率降低(P<0.01),且免疫荧光检测显示其衰老基因P21、P16表达降低(P<0.01)。经年轻化MSC培养基处理的成纤维细胞增殖、迁移和侵袭能力增强(P<0.01)。创伤模型显示,与对照组相比,年轻化MSC培养基治疗组小鼠创面愈合速度加快(P<0.01);年轻化MSC培养基治疗组小鼠创面HE染色显示表皮细胞再上皮化加快(P<0.01)、Masson染色显示创面胶原沉积量增加(P<0.01)、CD31免疫荧光染色显示创面血管量增加(P<0.01)。结论年轻化MSC培养基对小鼠创面修复或有促进作用。

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较

目的对两种脱钙方法进行比较,获得简单、便捷、快速适用于临床病理制片的脱钙方法。方法观察两种脱钙液:5%硝酸脱钙液(硝酸5 ml加入95 ml蒸馏水)和快速脱钙液(含36%-38%盐酸8 ml、冰醋酸5 ml、水杨酸10 g、蒸馏水87ml),在常温及微波条件下对骨组织脱钙及HE切片染色效果的影响。结果常温条件下,5%硝酸使组织结构有些破坏,染色效果不佳。微波条件下,使用快速脱钙液对骨组织结构损伤小,染色效果佳,适合于临床病理的骨组织制片。结论标本经快速脱钙液处理后,其切片质量大大提高并远远优于普通脱钙液。

涎腺肌上皮瘤34例病理特征与免疫表型的关系

目的探讨涎腺肌上皮瘤的病理特征与免疫表型的关系。方法回顾性分析34例涎腺肌上皮瘤的临床病理特征,采用免疫组化EnVision两步法检测肌上皮细胞标志物CK(AE1/AE3)、Calponin、S-100、SMA、SOX-10、vimentin的表达情况。结果34例涎腺肌上皮瘤中,上皮样型11例(11/34,32.3%),梭形细胞型13例(13/34,38.2%),浆细胞样型7例(7/34,20.6%),透明细胞型3例(3/34,8.8%);上皮样型中上皮性标志物CK(AE1/AE3)和肌源性标志物SMA和Calponin表达最强,梭形细胞型和浆细胞样型对肌源性标志物表达强于上皮性标志物,透明细胞型对上皮性标志物和肌源性标志物表达最弱。SOX-10在34例涎腺肌上皮瘤中均呈弥漫阳性且表达强度在各种肌上皮细胞间无显著差异。结论涎腺肌上皮瘤的肌上皮形态与免疫表型具有相关性,SOX-10作为一种肌上皮细胞标志物具有较高的敏感性。

异时性腮腺和肺黏膜相关淋巴组织淋巴瘤1例并文献复习

黏膜相关淋巴组织(mucosa-associated lymphoid tissue,MALT)淋巴瘤是一种结外低级别B细胞淋巴瘤,常原发于胃、肺、甲状腺、腮腺、乳腺、眼附件等,通常被认为是一种生物学行为相对惰性的肿瘤,偶见复发与转移[1-5]。现已有原发于胃[6]、肝脏[7]和甲状腺[8]的MALT淋巴瘤在经过最初的诊断和治疗后发生肺转移的报道。

乳腺癌患者循环肿瘤细胞及其激素受体、人表皮生长因子受体2表达意义的研究进展

乳腺癌作为女性发病率最高的肿瘤,严重威胁女性生命健康,同时肿瘤具有高度异质性,也给检测及治疗带来困难。液体活检突破常规组织学活检壁垒,其无创、便捷、实时的特征在精准医疗中展现出巨大潜力。循环肿瘤细胞(CTC)检测作为液体活检中最具代表性的检查手段被广泛应用于临床。本文基于循环肿瘤细胞特点及特性以及对目前循环肿瘤细胞检测技术的介绍,结合乳腺癌经典分子标志物雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER2)在肿瘤细胞上的表达发现,在乳腺癌疾病的进展及转移过程中ER、PR及HER2表达会发生动态改变。因此,通过检测CTC上ER、PR及HER2受体的表达情况,可以及时发现肿瘤细胞的动态变化,有助于实时监测复发及转移,及时调整治疗方案,从而从最大程度上改善乳腺癌患者的预后。

肾穿刺组织病理标本的固定及染色方法

目的：改进和完善肾穿刺病理标本的固定方法和染色技术，提高染色的质量，增加染色效果的稳定性。方法：对本科室97例肾穿刺病理标本采用特殊固定方法，并对染色方法、染色步骤加以总结。结果：97例肾穿刺病理标本的冰冻切片，免疫荧光染色、HE、过碘酸雪夫试剂（PAS ）、三色（Mas-son）、六胺银（PASM）、刚果红等染色完全能满足病理诊断的需求。结论：我病理科所采用的固定方法稳定可靠，染色步骤上缩短了时间，提高了染色效果，为临床病理诊断工作提供了可靠的保证。

p53、p16和Ki67在卵巢上皮性癌中的表达及其临床病理意义

目的:探讨p53、p16和Ki67在卵巢上皮性癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:收集2016-01~2018-12内蒙古医科大学第一附属医院20例卵巢良性肿瘤组织和60例卵巢上皮性癌组织标本,应用免疫组织化学法检测其中p53、p16和Ki67的表达情况;对60例上皮性卵巢癌患者的临床数据进行回顾分析。结果:p53、p16和Ki67在卵巢上皮性癌组织中的表达水平远远高于卵巢良性肿瘤组织中的表达水平(P<0.05)。p53、p16和Ki67的表达水平与卵巢上皮性癌患者年龄、组织类型、组织分级和FIGO分期明显相关。p53突变、p16与Ki67高表达三者相互之间均有显著相关性,成正相关(P<0.05)。经计算p53、p16和Ki67三项联合诊断灵敏度最高。结论:卵巢上皮性癌发生恶变的过程中与p53、p16以及Ki67的表达异常有关,且与卵巢上皮性癌组织类型有关,可能作为诊断和预后的特异性抗体指标。

30例弥漫型恶性胸膜间皮瘤的临床病理特征

目的:探讨弥漫型恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)的临床病理特征。方法:回顾性分析30例弥漫型MPM,总结其组织病理学形态、间皮细胞相关抗体包括Calretinin(CR)、MC、CK5/6、D2-40、WT-1、CKAE1/AE3、Vimentin、CK7表达情况。结果:30例弥漫型MPM中,男性20例,女性10例,年龄33~77岁,上皮样型16例(16/30,占53.3%)、肉瘤样型8例(8/30,26.7%)和双相型6例(6/30,20%)。上皮样型瘤细胞强表达CR,还可表达MC、D2-40,肉瘤样型常表达Vimentin、CKAE1/AE3,CR和D2-40局灶阳性,双相型二种瘤细胞均表达WT-1。结论:弥漫型MPM组织学和细胞学形态多样,需要与多种疾病鉴别,正确诊断弥漫型MPM需一组间皮细胞相关抗体联合应用。

1例腺泡状软组织肉瘤的临床病理特征

采用光镜及免疫组织化学等方法对1例腺泡状软组织肉瘤(alveolar soft part sarcoma,ASPS)进行临床及病理回顾性分析并综合文献复习。该例患者因右臀部肿物14年入院,CT提示右侧臀大肌内见卵圆形稍低密度肿物,肿物质软,切面呈实性,直径约5 cm。光镜下可见特征性腺泡状结构形成,肿瘤细胞体积大,细胞质丰富,可见嗜酸性细胞质,核内核仁明显可见。部分区域可见血管内瘤栓形成。免疫组织化学结果示该例肿瘤细胞转录因子E3(transcription factor E3,TFE3),神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)阳性;肌调节蛋白(MyoD1),肌细胞生成素(Myogenin)细胞质阳性;CD31,平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)在肿瘤细胞中阴性,但在腺泡状结构间的血管壁为阳性;结蛋白(Desmin)阴性,Ki-67增殖指数<20%。酶消化后PAS染色示:细胞质内可见嗜伊红色细颗粒状及红染的棒状结晶,此为ASPS的特征性改变。半定量RTPCR结果示:该例肿瘤表达A SPL-TFE3 1型融合基因mRNA。ASPS多见于青少年和青年,但多数患者早期出现血道转移,最终预后欠佳。结合临床和病理学特征及基因诊断,可作出正确的病理诊断。本例患者于手术切除后2年出现肺多发转移灶及髂骨转移病灶,后行帕左帕尼(小分子抗血管生成靶向药)治疗后,肿物明显缩小。目前病情趋于稳定,但该肿瘤临床生物学行为难以确定,需对患者进行长期随访。