医学微生物实验教学中开展自主性实验的尝试

本文阐述了在医学微生物学实验课教学改革中开展自主性实验方面的有益尝试，并就自主性实验课的选项，内容设置，学时安排、考核、及教学效果评估等方面进行简要介绍。

肺部感染的微生物谱变迁

肺部感染是指由微生物等感染因子引起的肺组织炎症和病变,临床可表现为肺炎、支气管炎和细支气管炎等疾病,甚至危及生命,其发病率高、传播范围广,对人类健康造成严重威胁。由于疫苗及抗生素的普及、人类社会及环境因素变化、临床介入诊疗技术的广泛使用及免疫功能低下人群的增加等因素,导致肺部感染病原谱日趋复杂,主要表现为经典的肺部感染病原体的流行规律发生改变、新发病原体不断出现、耐药性微生物感染日趋严峻、机会感染持续增加,这些变迁给肺部感染性疾病的防治提出了新的挑战。本文围绕肺部感染的微生物谱变迁进行简要综述,以助于采取有效措施对肺部感染进行预防和控制。

戊型肝炎病毒的基因组结构及生物学功能研究进展

戊型肝炎病毒(HEV)是发展中国家引起急性病毒肝炎的重要病原体之一。HEV有4个主要基因型,1型和2型只感染人,通过污染的水源引起暴发流行;3型和4型属于人畜共患病原体,常引起散发病例。为进一步阐明HEV的致病和跨种系传播机理,本文就近年来在HEV基因及其蛋白质的生物学特性和功能研究方面取得的进展进行综述。

两种培养基对铜绿假单胞菌和大肠埃希菌生物被膜厚度的影响

目的探讨营养成分不同的两种培养基对临床分离的铜绿假单胞菌和大肠埃希菌形成生物被膜形态的影响。方法使用电击转化将pSMC21转入临床分离的3株铜绿假单胞菌和3株大肠埃希菌体内,构建表达绿色荧光蛋白的菌株。在Luria-Bertani(LB)和M9葡萄糖基础培养基中以盖玻片为支持表面,进行细菌生物被膜的连续培养。经过12天的培养周期,使用共聚焦激光扫描显微镜检测盖玻片上生物被膜的厚度。使用方差分析检验每个样本5个测量值的重复性,并用配对T检验来分析同一株细菌在两种培养基中生物被膜的厚度变化。结果pSMC21可以在6株临床分离株中稳定表达绿色荧光蛋白;每个样本5个测量值重复性好,其差异无统计学意义(P=0.46);大肠埃希菌在LB和M9培养基中形成生物被膜平均厚度的差异无统计学意义(t=-0.42,P>0.7),而铜绿假单胞菌在LB培养基中形成的生物被膜更厚,其差异有统计学意义(t=3.46,P<0.02)。结论铜绿假单胞菌所形成生物被膜的平均厚度因培养基成分的不同而有显著差异,而大肠埃希菌所形成生物被膜的平均厚度则不受培养基成分不同的影响。

医学微生物学教学中文献综述的应用

当今医学微生物学进展迅速，新发和再发传染病仍然严重威胁人类，仅仅传授教科书中的知识远远不能满足教学、临床实践和科研的需要。北京大学医学部病原生物学系在医学微牛物学教学中开展了文献综述的教学改革尝试，以此促进学生拓展知识面并提高学生分析、综合、写作和交流协作等能力。教学改革受到了学生的肯定。

成人乙型肝炎疫苗接种专家建议

为了实现2030年消除病毒性肝炎公共卫生危害的目标,发挥乙型肝炎疫苗接种降低乙型肝炎病毒新发感染的作用,中华预防医学会组织专家制定了《成人乙型肝炎疫苗接种专家建议》。本建议旨在科学地指导成人乙型肝炎疫苗接种,提升人群免疫屏障、降低乙型肝炎病毒感染率和乙型肝炎发病率。

医学微生物学实验教学中培养学生综合素质的探索

医学实验教学是使学生将已掌握的理论知识充分发挥在实验过程中,培养学生分析问题、解决问题能力的综合教学方式。我们以循序渐进的方式分两个步骤将学生从以往被动地接受知识的消极状态改变为主动获取知识的积极状态,提高了学生的参与意识,培养了学生创新精神与创新能力。

肝硬化门静脉高压食管胃静脉曲张出血的防治指南

1概述门静脉高压症是指由各种原因导致的门静脉系统压力升高所引起的一组临床综合征,其最常见病因为各种原因所致的肝硬化。

不同处理和保存条件下体外HCV RNA稳定性研究

对献血者或病人进行HCV核酸检测时，如果标本的采集、处理、保存不当，会造成病毒核酸降解，从而影响检测结果的真实性。本研究的目的是对不同抗凝剂、不同温度、不同保存时间下的HCV RNA病毒稳定性进行研究，以考察常规采供血过程中，标本采集及保存方式对NAT检测的影响。采集7例HCV RNA阳性献血者的血样，采用不同的抗凝剂、经不同的温度和不同的时间保存后，采用荧光定量PCR方法测定HCV RNA病毒含量，考察HCV RNA的稳定性。结果表明：①不同抗凝剂抗凝的全血于4℃保存48小时过程中，病毒含量下降至原滴度的42．7％；EDTA抗凝组各时间点的滴度均低于其它3组（分别相当于其它3组的67．6％-25．1％）。②ACD抗凝的全血在4、25和37℃保存48小时．病毒含量分剐下降到原滴度的53．8％、72．5％、29．8％。③ACD抗凝的全血离心分离出血浆，4℃或25℃继续保存7天，病毒含量分别下降至原滴度的70．9％和25．1％。④ACD抗凝的全血分离的血浆，反复冻融4次，病毒含量下降到原滴度的38．9％。结论：①用于核酸检测的标本应该用无菌采血管采样；②在无菌采血管采样的前提下，核酸检测标本用未抗凝血、EDTA、ACD、CPDA抗凝血均可；③采集的全血应避免放置37℃以上，ACD抗凝全血在4℃、25℃保存48小时内、37℃保存14小时内，HCV RNA病毒仍较为稳定；④分离后的血浆应避免放置25℃以上，ACD抗凝全血分离后的血浆在4℃保存7天，25℃保存3天，HCV RNA病毒仍比较稳定；⑤血浆标本应避免多次冻融，但冻融3次的血浆HCV RNA病毒含量仍然较为稳定；⑥无菌采样对维持病毒的稳定性非常重要；单纯的机械性溶血并不会明显导致病毒的降解；只要注意无菌的问题和有合适的核酸提取方法去除血红素，HCV RNA病毒实际上比以前认为的要稳定得多。

肝硬化腹水及相关并发症的诊疗指南

1概述腹水（ascites）是失代偿期肝硬化患者常见且严重的并发症之一,也是肝硬化自然病程进展的重要标志,一旦出现腹水,1年病死率约15%,5年病死率为44%~85%[1-2]。因此,腹水的防治一直是临床工作中常见的难点和研究的热点问题。2001年4月,世界胃肠病学组织（WGO）制订了《临床指南：成人肝硬化腹水的治疗（2001）》。2004年美国肝病学会（AASLD）制订了《成人肝硬化腹水处理指南》,并于2009年和2012年进行了更新。

中国北方5城市慢性乙型肝炎患者的基因分型

目的 了解中国慢性乙型肝炎 (CHB)患者中的基因分型情况。方法 根据GenBank中 18株HBVS基因核苷酸序列 ,设计共同的外引物及其因型特异性内引物 ,对中国北方 5个城市 5 95例CHB患者血清进行基因分型 ,并对A、B、C及B、C混合型各一株进行测序。结果 5 95例血清标本中 ,A型 8例 ,占 1 4 % ;B型 5 3例 ,占 8 9% ;C型 36 0例 ,占 6 0 5 % ;B、混合型 112例 ,占 18 8% ;A、C混合型 14例 ,占 2 4 % ;A、B混合型 15例 ,占 2 5 % ;A、B、C混合型 6例 ,占 1 0 % ;未分型者 2 7例 ,占 4 5 %。 5城市间在B、C及B、C混合型的分布上有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,4份测序结果与PCR基因分型法一致。结论 在 5个城市CHB患者中HBV基因型以C型为主 ,B型次之 ,并见各种混合基因型感染 ,各地区在主要基因型分布上存在显著性差异。

肝硬化腹水及相关并发症的诊疗指南

腹水（aseites）是失代偿期肝硬化患者常见且严重的并发症之一，也是肝硬化自然病程进展的重要标志，一旦出现腹水，1年病死率约15％，5年病死率约44-85％。因此，腹水的防治一直是临床工作中常见的难点和研究的热点问题。

广西地区猪、鼠、狗戊型肝炎病毒感染血清学分析

目的了解广西地区猪、鼠和狗血清中抗-戊型肝炎病毒(HEV)IgG抗体流行情况。方法应用HEV基因1型开放读码框(ORF)2和ORF3多肽包被酶标板,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗猪、羊抗鼠和羊抗狗建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测猪、鼠和狗血清中抗-HEV IgG。结果总抗-HEVIgG阳性率为31.84%(170/534),其中猪血清抗-HEV IgG阳性率为26.40%(66/250),鼠血清抗-HEV IgG阳性率为43.02%(77/179),狗血清抗-HEV IgG阳性率为25.71%(27/105)。结论猪、鼠和狗血清中存在HEV感染,鼠抗-HEV IgG阳性率最高。

肝硬化门静脉高压食管胃静脉曲张出血的防治指南

一、概述 门静脉高压症是指由各种原因导致的门静脉系统压力升高所引起的一组临床综合征，其最常见病因为各种原因所致的肝硬化。门静脉高压症基本病理生理特征是门静脉系统血流受阻和（或）血流量增加，门静脉及其属支血管内静力压升高并伴侧支循环形成，临床主要表现为腹水、

HBV母婴传播阻断效果及影响因素分析

目的评价应用不同剂量乙型肝炎疫苗(Hep B)联合乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)阻断HBV母婴传播的效果及HBV母婴传播的影响因素。方法选取2012年7月-2015年2月在吉林大学第一医院进行HBV母婴阻断的785对乙型肝炎孕妇及其新生儿作为研究对象,根据孕妇产前HBV血清学标志物检查结果,对HBs Ag单阳性、HBs Ag与HBe Ag双阳性母亲的新生儿制订不同剂量阻断方案,在出生后2 h内分别注射10μg或20μg Hep B联合100 IU HBIG,并于1、6月龄继续接种Hep B。对入组孕妇及婴儿进行长期随访,采集婴儿7和12月龄静脉血检测HBV血清学标志物。计数资料组间比较采用χ2检验或Fisher确切概率法,组间HBV DVA的比较经对数转换后采用Mann-Whitney U秩和检验。探讨HBV相关因素采用非条件Logistic回归分析,并做影响HBV母婴传播的多因素分析。结果 785例新生儿中,HBs Ag阳性但HBe Ag阴性的529名孕妇所生的新生婴儿无一感染,阻断成功率为100%;256例HBs Ag与HBe Ag双阳性孕妇所生新生儿中,有14例婴儿感染,阻断成功率为94.53%。母亲HBe Ag阳性、HBV DNA>108IU/ml与阻断失败密切相关(P<0.001)。本研究未发现母亲的分娩方式、新生儿喂养方式等因素与阻断失败有关。探讨干预依从性时发现,首针疫苗未得到及时足量注射的新生儿更易发生感染。进一步Logistic回归分析发现,母亲HBV DNA>108IU/ml、首针疫苗未及时或未足量接种及男性婴儿更易发生HBV母婴传播。结论 HBs Ag阳性母亲的新生儿经过联合免疫后,可有效提高HBV母婴阻断成功率。母亲的感染状态、病毒载量和首针疫苗注射情况是影响HBV母婴传播阻断成功与否的决定性因素。

不同剂量HBIG联合乙肝疫苗阻断HBV母婴传播效果的随机对照研究

目的 :评价乙肝疫苗联合不同剂量乙型肝炎免疫球蛋白(hepatitis B immunoglobulin,HBIG)对HBV母婴阻断的效果,探讨有效经济的联合免疫阻断方法。方法:将HBsAg阳性母亲的新生儿随机分为100 IU HBIG免疫组和200 IU HBIG免疫组,分别在出生12 h内注射100 IU或200 IU HBIG,同时新生儿都按0、1、6的程序接种10μg乙肝疫苗,在婴儿7个月龄时观察HBV母婴阻断效果。结果:100 IU、200 IU组母婴阻断成功率分别为98.3%、98.0%,两组的阻断效果无明显差异,结合母亲HBV感染状态分析,两组的阻断效果亦无明显差异。结论:在新生儿HBV母婴阻断中,100 IU HBIG或200 IU HBIG联合10μg乙肝疫苗的主被动联合免疫可获相似的阻断效果。

肝硬化腹水及相关并发症的诊疗指南

1概述 腹水（ascites）是失代偿期肝硬化患者常见且严重的并发症之一,也是肝硬化自然病程进展的重要标志,一旦出现腹水,1年病死率约为15%,5年病死率约为44%～85%.因此,腹水的防治一直是临床工作中常见的难点和研究的热点问题.

蔓越莓制剂抑制P菌毛阳性大肠埃希菌对红细胞黏附作用的研究

目的:利用蔓越莓抑制P菌毛阳性大肠埃希菌对P血型红细胞黏附作用的体外模型,检测中国(国产1组和2组)和美国(美国组)3个不同产地蔓越莓制剂抑制细菌对红细胞的黏附作用。方法:以P菌毛阳性大肠埃希菌与人P血型红细胞结合引起的血凝现象为基础,辅助染色标本和显微镜镜下观察,分别检测蔓越莓在水制剂中和二甲基亚砜(DMSO)中的血凝抑制作用。结果:美国产蔓越莓水制剂和DMSO制剂最低有效血凝抑制浓度分别为11.25g/L和5.11g/L;国产1组蔓越莓水制剂和DMSO制剂最低有效血凝抑制浓度分别为9.38g/L和17.04g/L;国产2组蔓越莓DMSO制剂最低有效血凝抑制浓度为20.45g/L,而其水制剂在体外实验中未见有效的血凝抑制作用。结论:不同产地的蔓越莓制剂对P菌毛阳性大肠埃希菌引起的血凝现象均有不同程度的抑制作用,提示蔓越莓制剂具有不同程度的抑制P菌毛阳性大肠埃希菌对细胞的黏附及致病作用。

敲减单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)UL30蛋白表达可抑制HSV-2复制

按照shRNA(small hairpin RNA)设计要求,选择编码单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA多聚酶催化亚单位的UL30(unique long 30,UL30)基因序列保守区域,设计、合成并构建表达UL30序列特异性siRNA(short interfering RNA)的质粒载体pUL30.通过磷酸钙转染法将其转染入HEK(human embryonic kidney)293细胞中,用蛋白印迹法检测对HSV-2 UL30蛋白表达的影响,观察受染细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),终点滴定法测定细胞上清液中病毒感染滴度(50%tissue culture infective dose,TCID50).结果表明,针对UL30基因的siRNA能有效抑制UL30蛋白表达,同时显著抑制受染细胞的CPE,降低上清液中病毒感染滴度.提示本研究建立的针对UL30基因特异性siRNA能有效阻断HSV-2在HEK293细胞内的复制,UL30基因是一个潜在的抗HSV-2复制的药物靶标.