人感染甲型H1N1流感病毒重症死亡病例的病理学观察

目的:观察人感染甲型H1N1流感病毒重症死亡病例各主要脏器的病理改变。方法:按传染病尸体解剖要求对3例死亡病例进行系统解剖,并获得心、肝、脾、肺、脑和肾等全部脏器,组织常规HE染色和革兰氏染色,光学显微镜下观察。结果:3例病例主要致死性病变位于肺,呈现弥漫性肺泡损伤改变(坏死性细支气管炎、肺泡腔内有浆液性和/或纤维素性渗出、肺出血、肺透明膜形成),其中1例病程较长者部分区域伴肺泡上皮增生和肺间质纤维化,且合并细菌感染及肺脓肿,可见血管壁坏死,血管内血栓形成,1例有心肌水肿,1例有脑出血和脑液化性坏死。结论:人感染甲型H1N1流感病毒后主要累及呼吸系统,患者最终因急性呼吸窘迫综合征和多器官功能衰竭死亡。

家族性先天性无虹膜合并白内障患者晶状体前囊膜异常的临床病理学研究

目的:观察先天性无虹膜家系并发白内障患者的晶状体前囊膜的病理学变化,探讨晶状体前囊膜变薄,变脆的病理学机制及对手术方案的意义。方法:收集家族性先天性无虹膜并发白内障患者术中的晶状体前囊膜或晶状体,分别进行光镜和电镜检查。结果:家族性先天性无虹膜合并白内障患者的晶状体前囊膜明显脆弱、变薄。光镜和电镜见晶状体上皮细胞呈变性、坏死、脱失,致使上皮细胞层不连续;有的病例晶状体上皮细胞局灶性增生、复层化;前囊膜表层板层结构均变薄甚至消失。结论:晶状体上皮细胞的退行性和增殖性改变可能是导致先天性无虹膜合并白内障患者的晶状体前囊膜变薄、囊膜的脆弱性增加的原因。提高对前囊膜脆弱性的认识,有助于减少术中囊膜的并发症,达到安全的手术结果。

肾混合性上皮间质肿瘤病理学特点

目的:探讨肾混合性上皮间质肿瘤(mixed epithelial and stromal tumor of the kidney,MESTK)的临床病理学特点。方法:观察1例罕见的青春期男性MESTK的临床资料、镜下组织学表现、免疫组织化学染色特点及鉴别诊断并复习相关文献。结果:患者为16岁男性。临床表现主要为排尿不畅,右腰腹部肿物。影像学检查示肾巨大囊实性占位性病变。病理检查示肿瘤肉眼呈囊实性结构,镜下由上皮和间质成分共同构成,上皮成分主要为小至中等大的腺管,间质为疏松排列的梭形细胞,可见束状分布的平滑肌组织但缺乏女性卵巢间质样成分。免疫组织化学染色示,上皮细胞AE1/AE3阳性,间质细胞雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone recep-tor,PR)、平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)、结蛋白(Desmin)、波形蛋白(Vimentin)阳性,部分上皮ER、PR、CD10、Vimentin阳性,上皮成分及间质成分HMB-45、S-100、α-抑制素(α-inhibin)及WT-1阴性。患者行肿瘤切除术后随访5个月未见复发。结论:MESTK为具有独特组织病理学特点的一种罕见的发生于肾的肿瘤,多见于围绝经期女性,大部分患者有长期激素类药物应用史和/或肥胖史或子宫/双侧附件手术史,本例特殊之处在于患者为青春期男性,且无激素类药物应用史和/或肥胖史或泌尿生殖系统手术史,考虑青春期体内激素水平的剧烈波动可能为年轻男性发生本病的重要诱因。

血管炎性周围神经病临床病理学研究

目的总结不同类型血管炎性周围神经病临床和病理学特点,提出病理诊断要点以指导临床诊断。方法回顾分析11例血管炎性周围神经病患者之临床表现、实验室检查和神经肌肉组织活检特点,观察神经、肌肉和皮肤组织病变。通过免疫组织化学染色检测神经微丝蛋白、髓鞘碱性蛋白、外周髓鞘蛋白22、S-100蛋白,以及人类白细胞抗原DR、CD68、CD3、CD20表达变化,分别观察神经轴索、髓鞘、施万细胞病变和炎性细胞浸润情况;免疫荧光染色检测免疫球蛋白IgA、IgM、IgG和补体C3在血管壁沉积情况;特殊染色检测肌肉病变程度。结果血管病变以神经束周和外膜小血管CD3+T细胞浸润为主,呈活动性血管炎(3例)或非活动性血管炎(8例)改变,8例中4例呈血管纤维闭塞性改变严重、炎性细胞浸润较轻,4例以血管周围炎为主、血管壁本身病变不明显。神经病变以轴索变性为主(6例)或轴索变性伴髓鞘松解和脱失(5例),大直径有髓纤维明显减少,甚至呈终末期改变。肌肉组织活检呈神经源性萎缩。病理诊断为系统性血管炎性周围神经病8例[原发性系统性血管炎5例(抗中性粒细胞胞质抗体相关性小血管炎2例、Churg-Strauss综合征1例、免疫相关性间质性肺疾病2例)和继发性系统性血管炎3例(干燥综合征)],以及非系统性血管炎性周围神经病3例。结论血管炎性周围神经病的神经改变以轴索病变为主,血管炎病理改变呈多样性,不能仅以活动性血管炎作为唯一的病理诊断标准。因此对于临床可疑血管炎性周围神经病患者应完善血液免疫学指标检查和神经组织活检,必要时联合肌肉组织活检以明确诊断。

分子病理学在临床上的应用

目的 :举例说明北京大学基础医学院病理学系目前将分子生物学技术应用于临床病理诊断。方法 :采用PCR、RT PCR、PCR RFLP、TGGE、DNA序列分析及免疫组化等分子病理学方法辅助诊断。结果 :(1)滑膜肉瘤 :有特征性的t(X ;18) (p11.2 ;q11.2 ) ,产生融合基因SYT SSX ,故采用RT PCR法检测滑膜肉瘤的SYT SSX融合基因的转录子有助于滑膜肉瘤的病理诊断 ,SYT SSX融合基因根据基因断裂点位置不同 ,分为SYT SSX1和SYT SSX2两种 ,其中SYT SSX1阳性的滑膜肉瘤预后较差 ,因此可作为预后判断指标。 (2 )大细胞间变性淋巴瘤 :部分病例显示t(2 ;5 )(p2 3;q35 ) ,产生NPM ALK融合基因和融合蛋白 ,通过免疫组化法检测NPM ALK融合蛋白 ,将大细胞间变性淋巴瘤分为ALK(+)和ALK(- )两个亚型 ,ALK(+)预后较好 ,具有判断预后价值。 (3)家族性高胆固醇血症 (简称FH) :研究FH的低密度脂蛋白受体基因 (LDLR)的突变对于遗传监测和动脉粥样硬化的防治具有重要意义。我们采用温度梯度凝胶电泳 (简称TGGE)及DNA测序方法研究LDLR基因突变。 (4 )长期拉米呋啶治疗所致的HBVDNA多聚酶基因YMDD突变的快速检测 :拉米呋啶是目前最有效的抑制HBV复制的药物 ,但长期用药会导致部分患者的HBVDNA多聚酶基因发生YMDD区段突变而对拉米呋啶耐药。

儿童霍奇金淋巴瘤流行病学及病理学特点

淋巴瘤是15岁以下儿童常见恶性肿瘤，占儿童全部恶性肿瘤的10％。根据北京的数据显示淋巴瘤是我国15岁以下儿童第三常见恶性肿瘤；上海的统计资料显示其在我国儿童的发病率约为1．08／10万人，与香港的数据基本一致，但较美国（1．6／10万人）为低。淋巴瘤分为非霍奇金淋巴瘤（NHL）和霍奇金淋巴瘤（HL）两大类。流行病学资料显示，就整体而言，NHL较HL常见，在西方HL所占比例约30％，在我国约10％。

27例可疑胸腺上皮性肿瘤的临床病理学研究

目的：应用胸腺上皮性肿瘤世界卫生组织最新分类（WHO），对胸腺上皮性肿瘤进行分型，初步研究其临床病理学特征和免疫表达特点，筛选有效的鉴别诊断标记物。材料方法：收集可疑为胸腺上皮性肿瘤27例进行HE染色形态学分类和CD45RO，CD20，CK1（细胞角蛋白低分子量）、CDh（高分子量），EMA（上皮细胞膜抗原）免疫组化染色，某些需鉴别诊断加染了CgA(嗜铬素），Syn（突触素），S－100，CD5，TdT（末端转移酶）等。镜下观察对比进行统计学处理。结果：依据WHO分类，27例中胸腺瘤为17例（A型1例，AB型2例，B1型1例，B2型6例，B3型7例）；胸腺癌5例（上皮样角化型癌3例，基底细胞样癌1例，透明细胞癌1例）；神经内分泌肿瘤1例（类癌）；生殖细胞肿瘤1例（精原细胞瘤）；淋巴组织增生1例；恶性淋巴瘤2例（结节硬化型霍奇金淋巴瘤1例，纵隔硬化性大B细胞淋巴瘤1例）。胸腺瘤中，除胸腺小体和部分梭形上皮外，基本上不表达EMA，而各型上皮对CKh有较强的表达。胸腺癌中，EMA表达有所增强。胸腺瘤中淋巴细胞大多数为CD45RO阴性，部分胸腺瘤中有CD20阳性细胞。17例胸腺瘤中9例伴有重症肌无力，发病率为52．9％，胸腺癌中发病率为0。结论：①胸腺上皮性肿瘤多见于成人。②在鉴别胸腺瘤与其他非上皮性肿瘤时，CKh比较理想，EMA基本无用。③ 出现B淋巴细胞的胸腺瘤与重症肌无力有较高的相关性；胸腺癌与重症肌无力无关。

乙型肝炎病毒转基因小鼠病理学观察

目的 观察乙型肝炎病毒 (HBV)ayw亚型转基因小鼠的肝、肾等组织的病理改变。方法 选取 15只5～ 48周龄的清洁级C57BL 6J HBV转基因小鼠及 15只C57BL 6J小鼠为对照进行病理大体观察 ,并取心、肝、脾、肺、肾、肠等组织 ,切片HE染色和免疫组化特殊染色后进行光镜观察。结果 C57BL 6J HBV转基因小鼠肝脏产生局部明显的炎症反应 :肝细胞肿胀、毛玻璃样变性、灶性坏死伴淋巴样细胞浸润 ,可见肝细胞质内嗜酸性小体 ,局部可见巨核肝细胞 ,偶见多核肝细胞 ,心、脾、肺、肾、肠等脏器未见明显的病理改变 ,免疫组化分析说明 ,血清HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原 )为阳性的 15只小鼠肝组织有HBsAg的存在 ,且HBsAg的分布呈胞质型 ,但不存在于脾、肺、心等组织中 ,血清HBsAg为阴性的 15只小鼠其心、肺、肝、脾、肾、肠等组织中均未见HBsAg的存在 ;发现两只 48周龄C57BL 6J

弥漫性神经内分泌细胞肿瘤病理学:共性与异质性

19世纪末,人们发现在肠胰腺等器官上皮中存在散在分布的常规染色呈阴性的所谓“透明细胞”,进一步发现这类细胞具有分泌颗粒,与金属铬结合反应,即嗜铬性细胞,受到内分泌细胞研究的影响,推测其可能类似内分泌细胞[1]。组织学研究进一步发现神经内分泌细胞不仅存在于肠黏膜,也存在于其他上皮组织。1938年,基于胰腺和肠道神经内分泌细胞的研究,并在总结既往观察的基础上,奥地利病理学家Frie-derich Feyrter提出神经内分泌细胞组成弥漫性神经内分泌系统的概念。

病理学教学从传统模式到网络课程

病理学的教学经历了传统的教学模式、电化教学、多媒体计算机辅助教学等阶段发展到网络课程 ,教学质量和教学效率不断提高。网络课程在充分发挥多媒体和网络技术的优势的同时 ,又注意到改造传统病理学教学 (大课讲授和实验室实习 )的形式 ,使之具有现代化的内涵 。

儿童青少年经典霍奇金淋巴瘤临床病理学特点分析

目的探讨儿童青少年经典霍奇金淋巴瘤（CHL）的临床病理学特点。方法对1997年-2013年在我院诊断为CHL的儿童青少年（≤18岁）病例资料进行回顾性分析。结果儿童青少年CHL共169例，男性131例，女性38例，男女性别比约3．4：1。中位发病年龄10（3～18）岁。整组病例中，18例因组织过少难以准确进行组织学分型，其余151例病例中，混合细胞型（MC）最为常见（占65％），其次为结节硬化型（Ns）和富于淋巴细胞型（LR），分别为21％和14％。115例（68％）与EB病毒相关。按年龄分组显示：≤6岁者48例（29％），7～14岁者81例（48％），15～18岁者40例（23％）。比较上述三个年龄段病例组EB病毒的检出率和组织学亚型的分布，结果显示差异均有显著性（分别为90％、69％、40％和80％、64％、50％，P值均〈0．001）。结论儿童青少年CHL较多见于6—14岁儿童，但EB病毒阳性CHL更多见于≤6岁儿童，EB病毒阴性CHL更多见于15～18岁患者。MC是儿童青少年CHL中最常见的组织学亚型，但在15～18岁病例组中，NS为最常见亚型。

尤文肉瘤临床病理学及分子遗传学研究进展

尤文肉瘤是一种好发于儿童及青少年,具有不同程度神经外胚层分化的小圆细胞恶性肿瘤,近年来发病率呈上升趋势,其预后与发病部位、大小、病变范围、手术切缘等多种因素有关。虽然化放疗联合手术治疗使尤文肉瘤患者的生存状况得到了较大改善,但复发和转移患者的预后仍较差,5年生存率不足30%。尤文肉瘤中的特异性染色体易位已成为重要的辅助诊断指标,除EWS和ETS家族基因融合外,还存在FUS-ETS基因融合。近年来又发现一些少见的融合亚型,包括EWS与锌指蛋白家族成员等非ETS基因的融合,如EWSR1-PATZ1、EWSR1-POU5F1、EWSR1-SP3和EWSR1-NFATc2等,这些融合基因不但在尤文肉瘤诊断和鉴别诊断中发挥重要作用,也为阐明尤文肉瘤发生、发展的机制和靶向治疗提供了线索。

荧光原位杂交检测乳腺癌人表皮生长因子受体2基因扩增及与临床病理特征的关系

目的:探讨荧光原位杂交法(fluorescencein situhybridization,FISH)及免疫组织化学法(immunohistoche-mistry,IHC)检测乳腺癌人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor2,HER-2)的一致性,及HER-2基因扩增与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:对北京大学第三医院病理科2008年1月至10月的乳腺浸润性导管癌病例中选取的41例进行HER-2基因扩增的FISH检测和蛋白表达的IHC检测,并对HER-2基因扩增与雌激素受体(estrogen receptor,ER)、组织学分级、癌周脉管内癌栓、腋窝淋巴结转移的关系进行统计学分析。结果:41例乳腺浸润性导管癌中,HER-2基因扩增患者15例,为IHC检测+++者8例,++者6例,+者1例,阴性者0例,分别占IHC+++、++、+及阴性者病例总数的88.89%(8/9)、42.68%(6/14)、8.33%(1/12)及0%(0/6)。HER-2基因扩增率在不同组织学分级的乳腺浸润性导管癌中差异无统计学意义(P=0.095)。HER-2基因扩增率在ER阴性及弱阳性(+)组高于ER强阳性(++或+++)组(P=0.018),可见脉管内癌栓组高于未见脉管内癌栓组(P=0.000),同侧腋窝淋巴结有转移组高于腋窝淋巴结无转移组(P=0.025)。结论:FISH技术可较稳定地应用于乳腺癌HER-2基因扩增的检测,IHC++的患者需进一步行FISH检测;HER-2基因扩增与ER表达呈负相关,与癌周脉管内癌栓、腋窝淋巴结转移呈正相关。

改革考试模式,加强病理教学与临床的密切联系

改革方式在理论考试时 ,增加病例分析 (临床病理分析 ) ,分别要求同学进行观察题、诊断题和分析题的解答。并用计算机多媒体系统 ,进行标本、切片图象的滚动播放 ,供同学自主选择观察。 134名考生 ,及格者 130人。各分数段组 ,因观察题扣分率均低于诊断题和分析题错误者。及格组 ,因诊断错误扣分比例高于因分析错误扣分者。不及格组则反之。

髓母细胞瘤分子亚型中CD8+T淋巴细胞浸润的临床病理特点

目的:研究CD8+T细胞在髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)各个分子亚型中的浸润特点,分析CD8+T细胞浸润与患者预后的关系,以及C-X-C基序趋化因子11(C-X-C motif chemokine ligand 11)的表达及其受体CXCR3在CD8+T细胞中的表达情况,为进一步探索MB中CD8+T细胞浸润可能的调节机制提供临床病理依据。方法:筛选2012—2019年间来自多所医学中心、具有完整临床资料的MB患者共48例(4个分子亚型各12例),利用NanoString PanCancer IO360 TM基因表达检测平台对48例MB患者的肿瘤标本进行转录组学分析,对患者肿瘤组织的石蜡切片进行CD8免疫组织化学染色分析,验证各亚型MB中CD8+T细胞数量的差异。通过数据库生物信息学分析,探讨CD8+T细胞浸润与患者预后的关系及各种趋化因子在各亚型MB中的表达差异,并采用双重免疫荧光染色验证MB中CD8+T细胞表面CXCR3受体的表达情况,探讨CD8+T细胞浸润至肿瘤内的可能分子机制。结果:MB的WNT亚型中的CD8+T细胞特征指数相对较高,提示WNT亚型中的CD8+T细胞数量显著高于其他三个亚型,这一现象通过CD8免疫组织化学染色方法以及R2在线数据分析平台对美国基因表达数据库Gene Expression Omnibus(GEO)进行数据挖掘得到了证实,且CD8+T细胞增多与患者的生存期呈正相关。数据库分析显示,CXCL11在WNT亚型MB中的表达量明显高于其他三个亚型。免疫荧光染色结果显示,CD8+T细胞表面存在CXCL11的受体CXCR3,提示CD8+T细胞可能通过表面受体CXCR3受CXCL11趋化至MB的微环境中。结论:CD8+T细胞在WNT亚型MB中的浸润相对多于其他亚型,其机制可能与CXCL11-CXCR3趋化因子系统的激活相关,且肿瘤内CD8+T细胞浸润较多的患者预后较好,此结果可能为MB中CD8+T细胞浸润调节机制提供有益的临床病理依据,为未来MB的免疫治疗提供新的潜在治疗靶点。

肿瘤侵袭转移过程中基质金属蛋白酶作用机制系列研究

针对肿瘤侵袭转移过程中基质金属蛋白酶 (MMPs)及其抑制物的作用和调节机制进行了较深入的系列研究。在包括肺癌、前列腺癌和黑色素瘤的几组具有不同转移潜能的人肿瘤细胞系中 ,癌细胞产生MMP 2和MMP 9的能力与其侵袭转移能力密切相关。进一步通过反义基因转染技术证实 ,抑制MMP 9基因表达可以明显降低高转移癌细胞的体外侵袭及裸鼠体内自发转移能力。将金属蛋白酶组织抑制因子TIMP 1,TIMP 2和TIMP 3基因分别导入高转移癌细胞 ,可以观察到转染细胞的侵袭转移能力受到明显抑制。说明通过选择性抑制MMPs基因表达或增强TIMPs基因表达均可在一定程度上达到抑制肿瘤侵袭转移的目的。与此同时 ,我们应用定时控制表达技术分别将正义或反义MMP 9基因导入MMP 9不表达或高表达的黑色素瘤细胞 ,通过四环素控制的分子开关成功实现了MMP 9基因的定时控制表达 ,为提高临床基因治疗的效果提供了初步实验依据。

骨骼肌活组织检查病理诊断技术的改进及应用

目的:对300例骨骼肌活组织检查(活检)标本进行组织学切片和染色,总结分析技术方法的操作过程和改进,重点探讨各种肌酶及非酶组织化学染色技术在神经肌肉病诊断中的应用选择和价值。方法:将标本经异戊烷-液氮速冻后进行冰冻切片,应用HE及Gomori三色(GMR)、糖原(PAS)、脂肪(油红O)等特殊染色,肌球蛋白三磷酸腺苷酶(ATP酶)、还原型辅酶Ⅰ四唑氮还原酶(NADH-TR)等酶组织化学染色,并对各种染色技术进行调整和改进。结果:标本经异戊烷-液氮速冻及恒冷切片,可以有效避免产生冰晶。GMR染色主要显示线粒体及肌纤维变性坏死的病变,油红O染色显示肌纤维内有无脂质增多,PAS染色主要显示糖原和糖蛋白。对于肌肉组织,应用冰冻切片优于石蜡切片。NADH-TR及ATP酶染色可以区分两型肌纤维,并可观察肌纤维内部结构及线粒体酶的变化等。结论:通过骨骼肌酶与非酶组织化学染色技术,可以清晰地显示出两型肌纤维的分布情况及各种特征性的病理改变,几种方法可互为补充。