报告单分析在检验医学科免疫亚专业住院医师规范化培训中的应用探索

报告单分析是检验医学科住院医师规范化培训非常重要的教学活动,目前尚无相关指南性文件。北京大学第一医院根据《住院医师规范化培训基地标准(2022年版)》检验医学科培训细则要求,在检验医学科免疫亚专业进行报告单分析的教学活动,增强了住院医师的工作能力,使其收获成就感并提升自信心,住院医师普遍反馈良好。该教学活动形成“计划-准备-实施-效果评价-改进”全流程闭环管理,促进检验医学科住院医师规范化培训质量的提升。

检验科SARS标本检测安全管理介绍

目的 :为防止SARS患者的标本对实验室人员的感染和污染环境 ,制定适应本科室实际情况的恶性传染病实验室规章制度。方法 :(1)加强安全观念教育 ,制定生物安全制度 ,明确安全职责 ,实行科主任、各组组长、消毒隔离监督员三级监督制 ;(2 )建立专用实验室或SARS工作区 ,由指定专人进行操作 ,实验室内按照安全消毒工作指南定时定期对空气、地面、门窗、台面以及仪器等进行消毒 ;(3)工作人员进入、离开实验室必须按要求采取防护措施 ;(4 )SARS样本的采集、运输和前处理等过程均要注意预防渗漏和溅出 ,SARS标本的分类、显微镜检查和酶联免疫测定在生物安全柜中进行 ,检测后一切污染过的物品和用具按照规定进行处理。结果 :SARS爆发至今 ,检验科尚无一例工作人员感染SARS。结论 :我们的防范措施是切实可行而有效的 。

2009年秋季北京市3家哨点医院甲型H1N1流感病毒监测结果特征分析

目的回顾分析2009年秋季北京市3家哨点医院甲型H1N1流感监测结果,为科学防控提供指导。方法回顾分析2009年5月8日～12月31日北京市西城区、海淀区、朝阳区3家哨点医院对甲型H1N1流感病毒监测情况,共计2632例流感样病例入选。其中,男性1418例,女性1214例,年龄1～98岁;采用real-time PCR方法对入选病例咽拭子标本进行甲型H1N1病毒核酸检测,同时全血细胞计数仪检测血常规。结果 2632例流感样病例中,甲型H1N1流感病例占流感样调查人群的14.7%。其中,男性H1N1病例占其调查人群的15%,女性H1N1病例占其调查人群的14.3%,二者统计学无显著性差异(P<0.01)。易感人群以7～18岁中小学生为主(占甲型H1N1流感病例的53.4%);5～7月份甲型H1N1流感病例以输入性病例为主(占同期甲型H1N1流感病例的88.5%),9、10月份多起聚集性疫情致本地感染病例达到高峰(占甲型H1N1流感病例的37.2%);甲型H1N1流感病例主要以发热(98%),咳嗽(95%),喉咙痛(81%),流涕(76%)为主要症状就诊,甲型H1N1流感组与病毒检测阴性组比较,H1N1患者白细胞总数与血小板计数明显偏低,差异具有统计学意义。而与非H1N1型甲型流感组比较,血常规各指标无显著性差异(P>0.05)。结论本次甲型H1N1流感的临床表现及血常规检查与普通季节性流感相似,北京地区9、10月份是其最适流行季节,最适温度范围12～23℃,7～18岁中小学生是主要防控对象。

免疫固定电泳检测室内质量控制样品的研制和评价

目的 制备适用于琼脂糖凝胶免疫固定电泳(IFE)检测的室内质量控制样品,并对其均匀性、稳定性、适用性进行评价。方法 依据实验室内部研制质量控制样品相关指南要求,基于临床样本,自制琼脂糖凝胶IFE检测阴性、弱阳性、阳性质控品,并对其进行均匀性、稳定性和适用性评价。结果 3个浓度水平质控品的均匀性良好。质控品开瓶后,2~8℃冷藏保存4个月,检测结果一致性较好;不启封-40℃冰箱冻存5年,检测结果一致性较好;同品牌其他系列检测系统和不同品牌检测系统检测结果一致性也较好。结论 制备的琼脂糖凝胶IFE检测室内质量质控样品具有良好的均匀性、稳定性、适用性,可满足临床实验室质量控制要求。

2023年美国预防临床服务指南工作组《儿童和青少年血脂异常筛查推荐声明》解读

家族性高胆固醇血症和多因素所致血脂异常是导致儿童期血脂异常的重要原因,而儿童期血脂异常可能导致早发动脉粥样硬化性心血管疾病甚至威胁生命。已有众多指南和声明提出不同的儿童和青少年时期血脂筛查策略。2023年美国预防临床服务指南工作组(USPSTF)针对儿童家族性高胆固醇血症及多因素血脂异常筛查的利弊进行了系统综述,并发布《儿童和青少年血脂异常筛查推荐声明》,目前尚无充足的证据评估针对20岁以下儿童青少年血脂异常筛查的益处或危害,呼吁对此开展进一步深入研究,并建议临床医生根据自己的判断决定是否进行筛查。

全国细菌耐药监测网2014—2021年血标本分离毗邻颗粒链菌的耐药性变迁

目的了解全国临床血标本分离毗邻颗粒链菌的耐药性变迁,为临床治疗提供依据。方法按照全国细菌耐药监测网(CARSS)技术方案的要求开展细菌耐药监测工作,参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准,分析2014—2021年CARSS成员单位血标本分离毗邻颗粒链菌对抗菌药物的敏感性数据。结果2014—2021年CARSS成员单位每年血标本临床分离毗邻颗粒链菌为83~152株,2017年后呈逐渐增多趋势。血标本分离毗邻颗粒链菌对万古霉素敏感率为100%,对美罗培南的敏感率为93.7%,对头孢曲松、头孢噻肟、头孢吡肟的敏感率为90%左右,对左氧氟沙星的敏感率为82.8%,对青霉素的敏感率为65.0%,对红霉素和克林霉素的敏感率较低,分别为32.7%、46.8%。2014—2021年毗邻颗粒链菌对部分抗菌药物的敏感率有不同程度上升,对头孢吡肟、美罗培南的敏感率有所下降。结论临床血标本毗邻颗粒链菌检出数量呈上升趋势,且对青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类、氟喹诺酮类、大环内酯类均呈现不同程度耐药,但尚未发现对万古霉素耐药的菌株。

1例c.1117C>T/c.7288-9T>G复合杂合突变所致血管性血友病家系的发病机制分析

目的探讨1例血管性血友病(vWD)家系的诊断及发病机制。方法家系收集。收集北京大学第一医院就诊的先证者及其家系成员(共4人),检测活化部分凝血活酶时间(APTT)、血管性血友病因子抗原(vWF:Ag)和活性(vWF:Ac)、凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)、vWF瑞斯托霉素辅因子(vWF:RCo),进行瑞斯托霉素诱导血小板聚集试验(RIPA)、vWF胶原结合(vWF:CB)试验,对先证者及其家系成员进行诊断。提取先证者及其家系成员外周血基因组DNA,进行全外显子测序,分析vWF基因突变,采用生物信息分析工具进行基因突变位点致病性分析,探讨先证者发病机制。结果先证者(Ⅲ_(1))的APTT轻度延长、FⅧ:C正常、vWF:Ag、vWF:Ac、vWF:RCo和vWF:CB明显减低,1.0 mg/mL和1.25 mg/mL的RIPA无明显聚集;父亲(Ⅱ_(3))的APTT、FⅧ:C、vWF:Ag、vWF:Ac和vWF:CB均正常,vWF:RCo轻度减低;母亲(Ⅱ_(4))的APTT、FⅧ:C、vWF:Ag、vWF:RCo和vWF:CB均正常,vWF:Ac明显减低;哥哥(Ⅲ_(2))的APTT、FⅧ:C均正常,vWF:Ag、vWF:Ac、vWF:RCo及vWF:CB均不同程度减低;父亲(Ⅱ_(3))、母亲(Ⅱ_(4))和哥哥(Ⅲ_(2))的1.0 mg/mL RIPA均无明显聚集。基因分析显示先证者(Ⅲ_(1))存在vWF基因c.7288-9T>G和c.1117C>T复合杂合突变,其父亲(Ⅱ_(3))存在vWF基因c.7288-9T>G杂合突变;母亲(Ⅱ_(4))和哥哥(Ⅲ_(2))存在vWF基因c.1117C>T杂合突变。结论先证者为2A型vWD,其vWF基因c.1117C>T和c.7288-9T>G杂合突变可能是导致该先证者发病的原因。

北京地区孕前及孕早期妇女TORCH感染情况调查

目的通过化学发光免疫分析法测定北京地区育龄妇女血清中TORCH抗体,对其感染的阳性率进行调查,为本区域孕妇保健提供参考依据。方法调查对象为在我院进行孕前筛查和孕12周前普查的妇女,共计5 870名,TORCH抗体的测定采用化学发光免疫分析法(CLIA)。结果TORCH-IgM抗体总阳性率达19.3%,其中以单纯疱疹病毒(Ⅰ+Ⅱ)感染阳性率最高,为10.5%。调查发现秋冬季节为弓形虫、风疹病毒感染的相对高发期,巨细胞病毒(CMV)感染在夏秋季节发病率较高。IgG类抗体中CMV IgG的阳性率最高,达92.4%。结论北京地区孕前和孕早期妇女TORCH感染率较高,积极的进行监测以预防先天性TORCH感染是非常必要的。

北京市城区人群血脂异常的分布和相关因素分析

目的 分析血脂异常在北京市人群中的分布情况。方法 横断面调查法调查北京市城区12391例成人血脂水平,分析低HDLC、高LDLC、高TC、高TG的年龄性别分布,与糖尿病、高血压、肥胖的关系,并用非条件多元Logistic回归分析与其相关的危险因素。结果 血脂异常在人群中有相当高的发生率,并呈低龄化的趋势。男性发生率增高的年龄段在30～40岁,女性在40～50岁之间。50岁以前,男性发生率高于女性;50岁后,女性的发生率显著高于男性。血脂异常也常常与其他心血管危险因素合并存在,以与肥胖、高血压的聚集尤为突出。分析与血脂异常相关的因素发现,除高LDLC和高TC外,低HDLC和高TG均与肥胖、吸烟量呈正相关,而与体育运动呈负相关。结论 血脂异常的防治十分紧迫,人群防治措施可根据分布特点而实施。增加体育运动,减轻体重对降低血脂异常有十分重要的意义。

Zeste同源物2增强子在桥本甲状腺炎B淋巴细胞亚群中的表达及其抑制剂的治疗机制及效果研究

背景甲状腺自身抗体是诊断桥本甲状腺炎(HT)的标志,B淋巴细胞在HT的发病机制中发挥重要作用。Zeste同源物2增强子(EZH2)是一种表观遗传学蛋白,在淋巴细胞的发育与功能调控中扮演重要角色。目的本研究探讨EZH2在HT甲状腺组浆母细胞及浆细胞中的表达,进一步探讨EZH2抑制剂在实验性自身免疫甲状腺炎(EAT)模型中的治疗作用。方法收集北京大学第一医院2010—2020年6例行甲状腺手术的患者,取肿瘤对侧的甲状腺组织(HT及正常甲状腺组织各3例),通过RNA-seq筛选B淋巴细胞相关基因的表达情况;收集16例HT患者的甲状腺组织和8例健康对照(HD)甲状腺组织,分别利用免疫组化及免疫荧光验证EZH2在HT甲状腺组织中B淋巴细胞中的表达;收集25例HT甲状腺细针穿刺液(FNA)、19例HT外周血以及12例健康人外周血样本应用流式细胞分析检测EZH2在浆母细胞及浆细胞中的表达改变。将15只7周龄NOD.H-2^(h4)小鼠EAT模型分为对照组(n=5)、EAT无注射(n=5)或注射EZH2抑制剂GSK126处理组(10 mg/kg,腹腔注射3次/周,n=5),8周后观察甲状腺炎症程度及甲状腺球蛋白抗体(TgAb)水平的改变。结果RNA-seq结果显示,相较于正常甲状腺组织,HT甲状腺组织中EZH2水平上调,一些与B淋巴细胞表型相关的基因例如CD19、CD27、CD38、CD52相应增加。免疫组化结果显示,16例HT甲状腺组织标本中EZH2免疫组化染色均可在生发中心(GC)见到阳性细胞,呈强阳性,8例正常甲状腺组织染色中未观察到阳性细胞。HT甲状腺组织中EZH2染色高表达在GC区,EZH2特异性地表达在CD_(19)^(+)B淋巴细胞中。流式细胞术检测结果显示HT FNA样本中CD_(19)^(+)B淋巴细胞、浆母细胞及浆细胞比例均高于HD外周血、HT外周血样本(P<0.01),HT FNA样本中EZH2在CD_(19)^(+)B淋巴细胞、浆母细胞中的阳性比例高于HT外周血(P<0.005)。小鼠实验中,EAT组甲状腺的淋巴细胞浸润较对照组增加。GSK126处理组炎症程度评分和TgAb水平高于对照组,低于EAT组(P<0.001)。结论EZH2在HT甲状腺组织CD_(19)^(+)B淋巴细胞中表达异常升高,可能促进了B淋巴细胞分化成浆细胞进而促进自身抗体生成破坏甲状腺,EZH2抑制剂可以减缓EAT模型甲状腺炎症程度。浆母细胞中EZH2表达增加可能参与了HT的发病机制,EZH2可能成为治疗HT的新靶点,相关机制需要进一步深入研究。

外科监护室耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因型研究

目的：了解外科监护室产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectram β-lactamases，ESBLs)的大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌的耐药性和基因型。方法：琼脂稀释法测定临床分离株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentra-tion，MIC)值，分别用 TEM、SHV 和 CTX-M 的特异性引物扩增临床菌株和接合子的超广谱β-内酰胺酶基因。接合试验提取接合子质粒进行聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)，产物测序，确定基因类型。结果：93.5%的菌株含 CTX-M 基因，38.7%的菌株含 SHV 基因，87.1%的菌株含 TEM 基因。测序明确了 TEM-1，CTX-M-1，3，14，22等基因类型。结论：外科监护室大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因以 CTX-M 为主。

产ESBLs肠杆菌科细菌中整合子参与多重耐药机制研究

目的 观察产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL s)菌株的多重耐药情况 ,并分析产 ESBL s菌株中整合子的存在 ,同时对整合子的特性进行了初步研究。方法 采用 VITEK GNS药敏板测定庆大霉素等 13种抗菌药物对 12 6株产 ESBL s的肠杆菌属细菌的最低抑菌浓度 (MIC)。PCR技术检测整合子基因 ,应用 PCR定位技术和 DNA测序研究整合子插入耐药基因的情况。结果产 ESBL s的菌株对第三代头孢菌素、氨基糖苷、喹诺酮、磺胺类代表药如头孢噻肟、庆大霉素、培氟沙星、磺胺甲口恶唑 /甲氧苄氨嘧啶 (SMZ/ TMP)的耐药率分别为76 .2 %、6 7.5 %、76 .2 %、6 3.5 % ,对碳青霉烯类的亚胺培南全部敏感。产 ESBL s菌株质粒上存在三种大小不同的整合子 (扩增片段 94 0、180 0、2 6 0 0 bp) ,含有二氢叶酸还原酶基因和 β-内酰胺酶基因和核苷转移酶基因。结论 产 ESBL s菌株和非产 ESBL s菌株相比呈多重耐药 ,产 ESBL s菌株存在不同类型的整合子结构 ,含有多种耐药基因。整合子可以在细菌种内和种间引起多重耐药的水平传播。

4种消除M蛋白对血清尿酸检测干扰的方法比较分析

目的比较稀释法、聚乙二醇(PEG)沉淀法、超滤膜过滤法和手工计算法4种方法在清除M蛋白干扰尿酸检测中的差异,评估其在临床应用中的价值。方法对受M蛋白干扰的血清标本分别采用稀释法(去离子水和生理盐水)、PEG沉淀法、超滤膜过滤法和手工计算法进行尿酸检测和计算,以超滤膜过滤法的结果为参考值,比较4种清除M蛋白干扰的方法的价值。结果稀释法中,去离子水和生理盐水不同倍数稀释后结果与超滤法结果的相对偏倚分别为:3倍稀释-32.38%、-60.66%,5倍稀释-26.23%、-46.72%,10倍稀释-22.13%、-30.33%。PEG沉淀法与超滤法的相对偏倚为-3.28%,10例对照样本PEG沉淀前后的偏倚在-3.80%~2.34%之间。超滤膜过滤法的结果与患者原始结果相对偏倚为687.10%。手工计算法与PEG沉淀法和超滤膜过滤法的偏倚分别为-1.64%和1.69%,10例对照样本偏倚在-4.62%~0%之间。结论4种清除M蛋白干扰尿酸检测的方法在准确性、便捷性、经济性和实用性方面各有优劣。PEG沉淀法和超滤膜过滤法检测的准确度最高,但操作较繁琐,耗材成本较高。稀释法操作简单,实用性、经济性较好,但准确度较差。手工计算法需要对尿酸的检测参数及仪器检测原理有较好的掌握,其计算结果与超滤膜过滤法接近,方便经济快捷,可作为临床常规方法。

北京地区人群血清抗交叉反应性糖类决定簇IgE检测与分布特征分析

目的通过调查北京地区人群抗交叉反应性糖类决定簇IgE(anti-CCDIgE)与血清变应原特异性IgE(sIgE)的情况及其与年龄、性别等的相关性,评估anti-CCDIgE分布趋势,分析引发anti-CCDIgE分布的特点,为anti-CCDIgE的临床诊治及预防提供参考依据。方法采用斑点免疫印迹方法 (dot-IBT)对1 377例体检人群进行anti-CCDIgE及19种变应原sIgE的检测。分析anti-CCDIgE与sIgE的关系及不同特征人群anti-CCDIgE阳性率差异。结果北京地区人群总体anti-CCDIgE阳性率为23.7%(327/1 377)。anti-CCDIgE阳性率与血清变应原sIgE阳性项目数呈线性正相关(r=0.986,P<0.05)。女性anti-CCDIgE阳性率(25.3%,260/1 028)高于男性(19.2%,67/349),有过敏症状者anti-CCDIgE阳性率(45.2%,80/177)高于无过敏症状者(20.6%,247/1 200),差异均有统计学意义(χ2值分别为5.344和51.610,均P<0.05)。不同年龄、职业人群anti-CCDIgE阳性率间差异均无统计学意义(P>0.05)。各阳性变应原项目中anti-CCDIgE阳性率居前5位的分别是屋尘(44.6%)、蟑螂(33.9%)、狗上皮(22.6%)、树(22.1%)、虾(21.7%)。结论北京地区人群中anti-CCDIgE阳性率较高,sIgE检测中如有多种sIgE阳性,提示可能存在anti-CCDIgE的干扰,在临床准确判断变应原过敏时应充分考虑anti-CCDIgE的存在。

北京、香港和中国台湾地区成人血清肌酐参考区间的初步调查

目的对北京、香港和中国台湾地区成人血清肌酐(Cr)参考区间进行调查,观察不同地区人群Cr水平的差异,为肾功能损伤诊断提供客观实验室证据。方法选择北京、香港和中国台湾3个地区年龄不同、生活背景相似的健康成年志愿者,用问卷调查方式收集研究对象基本资料;用同位素稀释质谱法(参考方法)定值、互通性良好的标准物质验证血清Cr测定方法的准确性;观察3个地区人群血清Cr水平的一致性;其后连续2次测定研究对象血清Cr,观察结果的稳定性。结果 3次调查所用的血清Cr检测法准确性、一致性良好;3地区人群血清Cr水平无显著性差异(P>0.05);男性和女性血清Cr水平差异显著(P<0.01);3次调查血清Cr的分布规律接近,调查结果稳定、一致。合并3次调查人群(共3 297人,男性1 071人,女性2 226人)结果,血清Cr呈非正态分布,采用P2.5～P97.5设立参考区间。女性<60岁与>60岁的血清Cr水平差异显著(P<0.01)。<60岁女性参考区间:43.3～72.7μmol/L,>60岁女性参考区间:43.9～81.9μmol/L。男性血清Cr水平随年龄变化不显著,参考区间59.6～99.6μmol/L。结论北京、香港和中国台湾地区成人血清Cr水平无显著差异,可设立性别特异、女性年龄特异的统一参考区间。