病鸽肠道中蜡样芽孢杆菌的分离及鉴定

猪传染性胃肠炎病毒（Transmissiblegastroenteri．tisvirus，TGEV）属于冠状病毒科冠状病毒属，是引起仔猪病毒性腹泻的重要病原。由猪传染性胃肠炎病毒引起的猪传染性胃肠炎是一种急性、高度接触性传染病，以呕吐、严重水样腹泻、脱水和对2周龄以内仔猪的高度致死率为特征。不同年龄及品种的猪对猪传染性胃肠炎病毒均易感，

五株猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及序列分析

为研究猪流行性腹泻病毒的流行情况并分析该病毒的培养特性,对甘肃、北京、河北、山西、浙江五个猪场送检的疑似猪流行性腹泻病猪小肠内容物,用RT-PCR方法进行检测,证明为猪流行性腹泻病毒核酸阳性。然后将阳性病料进行传代培养、病毒含量测定以及特异性检验,证明获得五株猪流行性腹泻病毒,分别命名为Ningxia9、Beijing5、Gaocheng8、Shanxi1、Zhejiang08。对分离的毒株进行S基因全长测序及氨基酸序列分析。结果表明：五株分离毒株在盲传19代开始出现明显的细胞病变,盲传到24代,出现稳定的细胞病变且五株分离毒株的24代病毒含量在104.5-5.0TCID50/m L之间;用S蛋白进行进化树分析表明,五株分离毒株与近年来国内流行毒株亲缘关系很近,在同一个进化分支上;分离的五株野毒株之间的氨基酸同源性高达99.2%-99.9%,而这五株野毒与Gen Bank上提交的2011年、2012年分离的野毒株的之间的氨基酸同源性为98.4%-99.9%;实验室分离毒株及国内近年流行毒株均与国内外经典毒株存在一定的共性,即特定位置氨基酸的插入、缺失或置换。

2013—2016年中国部分地区猪伪狂犬病野毒株感染血清学调查

为了解2013—2016年中国部分地区猪伪狂犬病(PR)野毒感染及其分布情况,采用gE-ELISA方法对采自8个省市742个猪场16 675份血清样品进行了猪伪狂犬病野毒感染的血清学调查。结果表明:742个猪场中有549个PR野毒阳性场,猪场阳性率为73.99%;16 675份血清中有6 298份为阳性血清,血清阳性率为37.77%。在所检测的8个省市中以北京、天津、河北、河南的场阳性率和血清阳性率较高。说明我国部分地区普通存在PRV野毒感染,并呈散发性流行,提示我国规模化猪场的PR防治工作仍需加强。

PCV2b Cap蛋白重组杆状病毒的构建及鉴定

猪圆环病毒(PCV)能够引起多种综合征和疾病,给养猪业造成了较大的经济损失。PCV2毒株在2003年后以PCV2b取代PCV2a成为临床感染的猪群中最为流行的基因型。PCV基因组为单股负链环状DNA,其中ORF2编码病毒核衣壳蛋白Cap蛋白,Cap蛋白是主要的免疫原性蛋白。本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统将PCV2b的Cap蛋白基因克隆到杆状病毒载体中,通过制备杆粒、转染sf9细胞,获得表达PCV2b Cap蛋白的重组杆状病毒毒株,从IFA、SDS-PAGE及Western-blotting分析结果可以看出,该重组杆状病毒毒株成功表达了PCV2b Cap蛋白,为制备PCV2b Cap蛋白亚单位疫苗打下基础。