增强化学发光免疫分析技术

将抗体或抗原以共价键或其它形式与酶偶合,形成酶标记抗体或酶标记抗原。酶标记抗原或抗体保留免疫学活性和酶学活性,因而既有抗原抗体反应的特异性,又有酶促反应的生物学放大作用。 固相非均相酶免疫测定法应用固相载体作为免疫吸附剂。

利用细菌荧光素酶建立酶联免疫吸附试验检测抗-HBs的研究

目的利用细菌荧光素酶作为示踪物,建立一种灵敏度高、特异性强、性能稳定、操作简便、无环境污染的生物发光酶酶联免疫检测技术(Bioluminescent enzyme linked immunosorbent assay BELISA)。方法用戊二醛作为交联剂,将细菌荧光素酶标记到乙型肝炎表面抗原上,使酶标记物具有酶和抗原的双重活性,采用双抗原夹心法检测。结果最适的标记条件为:细菌荧光素酶与乙型肝炎表面抗原的比例2:1,pH值7.0,反应温度室温(22℃),反应时间2小时,0.1％戊二醛用量50μl/ml标记物。所建立的生物发光酶酶联免疫试验检测抗-HBs灵敏度2.5mIU/ml,变异系数(CV)<15％。与抗-HAV·IgM阳性血清、抗-HCV阳性血清无交叉反应,阻断试验成立。对200份抗-HBs阴性血清(RIA-、ELISA-)进行BELISA检测,确定抗-HBs阴性血清光量子数为50MV/20s。对98份抗-HBs阳性血清(RIA+)进行BELISA和ELISA检测,BELISA检出98份阳性,与RIA符合率100％,而ELISA与RIA的符合率为89.9％,可见BELISA灵敏度与RIA相同。结论用细菌荧光素酶为示踪物建立的生物发光检测技术灵敏度高,特异性强,可取代放射免疫分析和以辣根过氧化物酶为示踪物建立的酶联免疫检测技术。

纤维素载体的酶免疫测定技术

纤维素载体的酶免疫测定技术黎皓（北京生化免疫制剂中心开发室）程伯鲲（中国预防医科院流研所微生物室）自１９６６年Ｎａｋａｎｅ建立酶标记抗体技术以来，酶免疫测定技术（ＥｎｚｙｍｅＩｍｍｕｎｏａｓ－ｓａｙｓ，ＥＩＡ）在很多领域得到广泛应用，被认为是继放射免...

固相放射免疫分析一步法检测HBsAg试剂的研究

采用位点配对法筛选单克隆抗体,研制固相放射免疫分析一步法检测HBsAg药盒,对此药盒的各项性能指标及临床应用进行了全面的考核。实验证明,其为临床检验,尤其血源筛选,保证输血血液及血液制品的质量,切断乙型肝炎输血传染提供了技术上的保障。

金属硫蛋白测定方法──银饱和分析法

本方法是基于Ａｇ￣＋与ＭＴ的高亲合力及ＭＴ的对热稳定性，向含ＭＴ的溶液中加入过量的Ａｇ￣＋，待反应完全后，再逐次加入血红蛋白，以结合剩余的Ａｇ￣＋，加热使血红蛋白沉淀，与ＭＴ结合的Ａｇ￣＋则完全存在于上清液中，通过测定其中Ａｇ￣＋的含量，便可计算出ＭＴ的浓度。

金属硫蛋白吸收与代谢动力学研究

通过给小鼠分别灌胃 Na12 5I和 12 5I标记的金属硫蛋白 (12 5I- MT) ,研究了 MT的吸收与代谢动力学。首次发现经口给药时 ,MT可以被完整吸收 ,遵从一级吸收的二室模型 ,峰值吸收率约 2 % ,分布和清除半衰期分别为 0 .94和 15.3h,胃残留量大、残留时间长。

乙型肝炎导向干扰素在荷瘤鼠体内的分布实验

将2，2，15细胞接种裸鼠，制得抗乙型肝炎病毒（HBV）动物模型。用125I标记乙型肝炎导向干扰素（T－IFN），观察放射标记物（125I－T－IFN）在荷瘤鼠体内的分布情况，以评价T－IFN在体内的抗HBV导向治疗作用。结果显示，125I－T－IFN在各组织浓度顺序依次为：瘤＞心＞肝＞脾＞肾，且瘤组织与其它各组织比较，有明显差异（P＜0．01）。结果表明，在HBV动物模型体内，T－IFN相对浓集于可分泌HBsAg的瘤区。实验结果显示了T-IFN导向治疗HBV感染的可行性。

氧自由基致口腔粘膜损伤的组织细胞学观察

最新研究表明氧自由基在复发性口腔溃疡形成过程中具有重要作用。陈谦明等用甲基紫精(PQ)作为氧自由基发生剂,用叙利亚金黄地鼠建立了稳定的氧自由基损伤口腔溃疡模型[1],本实验室也曾研究了自由基对口腔粘膜损伤过程中微循环的变化[2]。为了更深入探讨氧自由基致口腔溃疡的发病机理。

自由基和自由基清除剂

自由基和自由基清除剂邵惠训（北京生化免疫制剂中心）人体的器官和组织是由分子构成，分子是由原子构成。原子又可分为原子核和电子。原子呈中性，电子带负电荷，原子核带等量正电荷。当两个原子结合成一个分子时，每个原子各自给出等量的电子绕对方和自己旋转，形成结合...

胃酸、胃蛋白酶及胰蛋白酶对金属硫蛋白稳定性的体外研究

本文在体外研究了模拟胃酸，胃蛋白酶及胰蛋白酶存在时，对兔肝ＺｎＭＴ－２稳定性的影响。在ｐＨ１．５ＨＣｌ－生理盐水中，兔肝ＺｎＭＴ－２的一级分解速率常数ｋ１＝８．０６×１０（－５）Ｓ（－１），酸解半衰期ｔ（１／２）＝２．４小时。在上述条件下，胃蛋白酶存在时，５～１０分钟兔肝ＺｎＭＴ－２降解５０％。而在ｐＨ８．５的碳酸钠缓冲液中，兔肝ＺｎＭＴ－２对胰蛋白酶有较强的稳定性，在２０小时后约有１０％的兔肝ＺｎＭＴ－２被降解。

聚合酶链反应及其在病毒学工作中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain reaction,PCR)又称体外基因放大技术,是一种在体外将特异性DNA序列进行高效扩增的方法。DNA或RNA均可作为模板(template),进行扩增。由于逆转录酶的作用,将mRNA转化为cDNA。模板DNA热变性解链,两个寡核苷酸引物(oligonucleotide primers)分别连结在待扩增的DNA片段两侧。

病毒性肝炎诊断试剂的现状和发展

病毒性肝炎是一种古老的传染病。在六十年代以前,我们依据流行病学调查资料,对病毒性肝炎进行大致分型。从六十年代以后,逐步建立了特异性的诊断手段,将病毒性肝炎主要分为五个类型:甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎和戊型肝炎。逐步建立了灵敏度高的。

HRP-HBVDNA探针在临检应用中的研究

本文介绍了一种简便的检测血清ＨＢＶＤＮＡ 的方法。参照Ｒｅｎｚ 等人的标记方法，构建了直接酶标ＨＲＰＨＢＶＤＮＡ 探针。此探针经与固定在硝酸纤维素滤膜上的血清靶ＤＮＡ 杂交后，可通过化学发光自显影检测技术观察结果。敏感度可检测０－１ｐｇ 靶ＤＮＡ，相当于同位素探针的灵敏度。对６３ 份ＨＢｓＡｇ ＨＢｅＡｇ 和ＡｎｔｉＨＢｃ ＥＬＩＳＡ 阳性血清以及２４ 份ＨＢｓＡｇ ＡｎｔｉＨＢｃ 阳性，ＨｂｅＡｇ 阴性血清用ＨＲＰＨＢＶ ＤＮＡ 探针进行检测，结果探针ＨＢＶ ＤＮＡ 阳性率分别为１００ ％ （６３） 和５８ ％ （１４） ；对５０ 份ＨＢｓＡｇ，ＥＬＩＳＡ 阴性和ＡＬＴ 正常的血清，探针ＨＢＶ ＤＮＡ 全部阴性。实验结果表明本方法具有很大的推广应用价值。

新生儿苯丙酮尿症筛查方法及临床意义

新生儿苯丙酮尿症(Phenylketonuria,PKU)是一种父母单染色体隐性遗传性疾病,典型的PKU是一种由于苯丙氨酸羟化酶先天缺陷引起的。该酶缺乏,苯丙氨酸代谢受阻,体内苯丙氨酸过多而其他氨基酸不足,直接影响蛋白质合成,影响聚核蛋白合成与稳定性,影响神经髓鞘合成,患几呈现进展性大脑损害,出现癫痫和脑电图变化。此外,由于酪氨酸不足,同时高浓度苯丙氨酸尚可抑制酪氨酸酶的活性,因此患儿多伴有皮肤和毛发色素沉着低下。

错配的双链RNA及其稳定性研究

研究了核糖胞嘧啶和脲嘧啶共聚物的酶促合成条件。共聚物ＰｏｌｙＣｘＵ与ＰｏｌｙＩ在类似生理盐水条件下形成错配的双链ＲＮＡ，然后对ＰｏｌｙＩ：Ｃ和错配的双链ＲＮＡ对核酸酶的敏感性及紫外熔化曲线进行了比较研究。

核酸饮食疗法──医疗保健的新途径

本文简明扼要叙述了核酸的生理功能，澄清了由于体内核酸的缺乏和不足将导致人体的衰老、病变或死亡的原因。进一步阐明了核酸饮食疗法对延缓衰老、维持健康、治疗疾病的重要作用。本文还介绍了北京南方生物资源研究所研制开发的来福（ＬＩＦＥ）系列核酸调料及食品添加剂：美味增强剂，美味素，超级调料及生命素，以及这些产品的开发对我国营养保健事业的发展所起的作用。并介绍了核酸饮食疗法一食谱及执行此疗法的三原则。

核酸探针及其在临床上的应用

核酸探针已开始应用于临床诊断、法医鉴定、食品及加工检测,环境保护检测和农业畜牧业等领域中。美国临床化学会已把核改探针作为临床诊断的重点研究开发项目,在我国也开始了这方面的研究,并取得了一定的进展,因此,有必要对核酸探针及其在临床上的应用作一分析。

国产与进口α-^(32)p-dATP用于HBV DNA探针的对比研究

随着基因工程及分子生物学的快速进展,对检测基因所必需的探针及其应用研究已提到日程上来。为此制备国产的长臂生物质及光敏生物素已作为国家重大课题进行研究。鉴于同位素探针的高度敏感性及特异性,其在国内、外的有关工作中至今仍占有相当的比重。我们在制备^(32)P HBV DNA探针诊断药盒的过程中,对国产的和英国的α-^(32)P-dATP进行对比试验。

HRP化学发光体系在基因检测中的应用

随着分子生物学及其相关学科的飞速发展,基因检测技术不断得到创新并且日趋完善,核酸探针是检测特异、互补序列的有力工具,是基因检测技术中一项重要内容。核酸探针不仅对胎儿性别、亲子关系和个体差异从分子水平上进行准确的分析判别。

利用T氏诱生剂大量生产单克隆抗体的研究

本文重点报道了作者本人研制发明的T氏诱生剂诱发小鼠腹腔肿瘤大量生产McAb的过程及其有关的统计学和免疫学分析结果.本研究利用T氏诱生剂诱发试验的小鼠共50只,平均每只鼠可收获纯化的McAb约为150mg左右,生产周期仅需9～12 d,而用传统的诱生腹腔肿瘤法生产McAb,平均每只鼠只收获纯化的McAb约14mg左右.本研究所生产的McAb的量约是传统法的10倍,这在国内外尚属首创.投入生产约一年多的实践证明,T氏诱生剂可在短期内诱发小鼠腹腔的杂交瘤细胞分泌大量的、高活性的McAb.利用T氏诱生剂诱发小鼠腹腔肿瘤法生产McAb具有产量大、纯度高、活性强、生产周期短、成本低、方法简便等优点.