SETD5介导AKT1磷酸化调控结肠癌细胞的迁移和5-FU敏感性

目的:探讨含SET结构域蛋白5(SETD5)对结肠癌细胞增殖、迁移和对5-氟尿嘧啶(5-FU)药物敏感性的影响及机制。方法:常规培养结肠癌细胞,用Lipofectamine 2000将siSETD5-NC、si-SETD5-1~3质粒转染至HT-29细胞中,将其分为对照组(未处理)、si-SETD5-NC组、si-SETD5组和si-SETD5+SC79组,si-SETD5+SC79组HT-29细胞转染质粒的同时用10µmol/L SC79处理。qPCR法检测NCM460、HT-29和LoVo细胞中SETD5 mRNA表达,流式细胞术、细胞划痕法、WB法和CCK-8法分别检测各组HT-29细胞的凋亡情况、迁移能力、相关蛋白的表达,以及对5-FU的敏感性。结果:SETD5 mRNA在HT-29、LoVo细胞中均呈高表达(均P<0.01)。在HT-29细胞中成功地敲减了SETD5 mRNA(P<0.01)。敲减SETD5 mRNA可明显抑制HT-29细胞的增殖活性(P<0.01)、迁移能力(P<0.01)、相关蛋白(SETD5、p-PI3K、p-AKT1、p-mTOR蛋白)的表达(均P<0.01)、促进细胞凋亡(P<0.01),且提高其对5-FU的敏感性(P<0.01),这些作用均可被AKT激活剂SC79部分阻挡(P<0.05或P<0.01)。结论:SETD5在HT-29、LoVo细胞中高表达,SETD5通过PI3K/AKT1通路促进结肠癌HT-29细胞的增殖、迁移,且降低其对5-FU的敏感性,SETD5是结肠癌临床诊断、治疗的潜在靶点。

湖北省胃肠道肿瘤病人围手术期静脉血栓栓塞症多中心调查及分析

目的调查分析湖北省胃肠道肿瘤病人围手术期静脉血栓栓塞症(VTE)防治现状。方法回顾性分析2019-01-01至2019-12-31湖北省胃肠外科联盟成员医院收治的行手术治疗的胃肠道肿瘤病人VTE防治相关临床资料。结果收集62家医院调查问卷7751份,其中有效问卷共计7474份,有效率96.4%。所有病人中,术前736例(9.8%)接受恰当预防措施,7012例(93.8%)术前行D-二聚体检查,2301例(30.7%)术前行下肢静脉超声检查。术后451例(6.0%)病人接受恰当预防措施。术后6434例(86.1%)病人行D-二聚体检查;1675例(22.2%)行下肢静脉超声检查,其中164例发生下肢深静脉血栓(DVT),20例病人发生肺动脉栓塞(PE),有5例PE病人住院期间死亡。结论当前湖北省胃肠道肿瘤病人围手术期下肢静脉超声检查及恰当预防比例偏低,围手术期VTE规范化防治水平有待提高。

直肠癌永久性造口患者的心理弹性及其与病耻感和心理痛苦的相关性

目的:了解直肠癌永久性造口患者的心理弹性现状,并探讨患者心理弹性与病耻感及心理痛苦的相关性。方法:采用方便抽样,选择2016年11月至2017年10月在我院进行治疗的104例直肠癌永久性造口患者为研究对象,采用自行设计的一般资料调查表、心理弹性量表(ConnorDavidson Resilience Scale,CD-RISC)、社会影响量表(Social Impact Scale,SIS)及心理痛苦温度计(Psychological Distress Thermometer,DT)对患者进行测评。结果:直肠癌永久性造口患者心理弹性得分为52.22±8.78,患者病耻感总分为60.21±11.44,中度及以上心理痛苦检查率为59.62%。患者心理弹性中坚韧与病耻感中社会排斥、内在羞耻感、社会隔离及心理痛苦呈负相关(P<0.05);自强与病耻感各维度及心理痛苦呈负相关(P<0.01);乐观与病耻感各维度及心理痛苦呈负相关(P<0.05或P<0.01)。结论:直肠癌永久性造口患者心理弹性水平较低,提高患者心理弹性水平可有效降低患者病耻感,缓解患者心理痛苦,从而提升患者生活质量。

肠道屏障功能检测在急性肠梗阻患者诊疗中的临床意义

目的探讨血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LC)及细菌内毒素(BT)检测在急性肠梗阻患者诊疗中的临床意义。方法选取2018年1月—2019年3月在华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院胃肠外科住院治疗的急性肠梗阻患者69例作为研究对象(实验组)。选择同期在该院诊疗的非肠道疾病患者20例作为对照组。根据术中肠管缺血损伤情况,将实验组分为轻损伤组40例和重损伤组29例。测定两组患者的血清DAO、D-LC和BT水平,并比较其手术前后的变化。结果实验组各时间点血清DAO、D-LC和BT水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);实验组术前2 h、术后第1天和术后第3天血清DAO、D-LC、BT水平较对照组高升高(P<0.05);术后第7天实验组血清D-LC水平与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),血清DAO和BT水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);重损伤组与轻损伤组的DAO、D-LC和BT水平比较,不同时间点有差异(P<0.05),两组间有差异(P<0.05),变化趋势有差异(P<0.05)。结论血清DAO、D-LC和BT水平在急性肠梗阻患者体内动态变化,可作为急性肠梗阻的辅助诊断指标和病情评估指标,手术前后定期检测在急性肠梗阻诊疗中具有重要的临床意义,值得临床进一步推广应用。

结直肠癌中miR-330-3p-RUVBL1信号轴对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中miR-330-3p-RUVBL1信号轴对肿瘤增殖、凋亡的影响。方法分析Oncomine数据库中结直肠癌RUVBL1 mRNA的表达情况;利用Kaplan-Meier生存曲线分析RUVBL1 mRNA表达水平与CRC患者生存预后之间的相关性;免疫组化法检测临床CRC标本癌组织和正常结直肠组织RUVBL1蛋白的表达情况。荧光素酶报告基因实验分析RUVBL1与miR-330-3p的靶向关系;荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测CRC临床标本癌组织和正常结直肠组织miR-330-3p的表达情况;利用脂质体转染结直肠癌HT-29细胞,过表达或沉默miR-330-3p的表达;运用CCK-8法检测过表达miR-330-3p对HT-29细胞活力的影响和对顺铂敏感性变化,利用流式细胞仪检测过表达miR-330-3p对HT-29凋亡的影响;利用Western blot检测转染miR-330-3p后HT-29细胞中RUVBL1蛋白的表达情况和细胞凋亡相关蛋白的表达情况。结果数据库分析结果显示RUVBL1 mRNA在CRC中高表达;RUVBL1基因的表达水平与结直肠癌患者生存预后之间存在相关性,RUVBL1高表达患者的总体生存率明显低于低表达RUVBL1的患者(P=0.0077);免疫组化结果显示RUVBL1在CRC组织中的表达水平较正常结直肠组织明显增高;qRT-PCR结果显示CRC临床标本癌组织中miR-330-3p的表达水平明显低于正常结直肠组织(P<0.01);过表达miR-330-3p的HT-29细胞中RUVBL1的表达明显下调,细胞内促凋亡蛋白Bax、cleaved-Caspase-3的蛋白表达水平均上调,而Bcl-2表达水平下降;过表达miR-330-3p的HT-29细胞凋亡增加,且对顺铂的敏感性增强。结论RUVBL1在CRC中高表达,其表达水平与CRC患者生存预后相关;RUVBL1是miR-330-3p的潜在靶点,miR-330-3p可能通过抑制RUVBL1表达促进结直肠癌细胞凋亡。

腹腔热灌注化疗对进展期结直肠癌患者肠黏膜屏障功能的影响

目的通过对比进展期结直肠癌患者行腹腔热灌注化疗和未进行腹腔热灌注化疗围手术期血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、内毒素(ET)的水平,探讨腹腔热灌注化疗对患者肠道黏膜屏障功能的影响。方法选取华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院2018年7月至2019年12月进展期结直肠癌患者62例,随机分为观察组(热灌注化疗组,HIPEC组)和对照组(非热灌注化疗组,Non-HIPEC组)各31例。两组均行腹腔镜下结直肠癌根治性切除术,HIPEC组分别于手术完成即刻、术后第3天进行腹腔热灌注化疗治疗,Non-HIPEC组均未进行腹腔热灌注化疗治疗,其它治疗两组均相同;采用酶法检测两组患者手术前1天及手术后第1、4、6、10天外周静脉血血清DAO、D-LA、ET水平。结果HIPEC组、Non-HIPEC组手术后第1天、第4天、第6天血清DAO、D-LA水平较术前明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05);术后第4天、第6天血清ET水平较术前有升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。HIPEC组术后第1天、第4天、第6天血清DAO、D-LA水平较Non-HIPEC组明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05);而两组术后血ET水平比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论进展期结直肠癌患者手术后腹腔热灌注化疗可导致其肠道黏膜损伤和通透性增加,对肠道黏膜屏障功能造成一过性损伤。

身心综合训练配合肺活量练习对食管癌患者术后护理质量及情绪、呼吸功能恢复的影响

目的探讨身心综合训练配合肺活量练习在改善食管癌(esophageal cancer, EC)患者术后护理质量及情绪、呼吸功能中的应用价值。方法选取2017年8月~2018年11月就诊于本院行手术治疗的食管癌患者共83例作为研究对象,采用随机数表法分为实验组和对照组,术后给予对照组常规护理干预,实验组在此基础上增加身心综合训练配合肺活量练习,比较两组术后情绪及呼吸功能恢复情况。结果所有患者均顺利完成手术,经护理后,实验组呼吸功能、心功能改善优于对照组(P<0.05),日常活动能力比较无明显差异(P>0.05);实验组患者焦虑、抑郁情绪改善情况优于对照组(P<0.05);实验组生活质量评分结果高于对照组(P<0.05);术后肺部并发症发生率比较,两组无明显差异(P>0.05)。结论食管癌术后开展身心综合训练配合肺活量练习能有效纠正患者不良情绪,提高生活质量及肺功能,有推广应用价值。

健康控制点对造口还纳术后并发症疗效及Rosenberg量表评分的影响研究

目的探讨健康控制点对造口还纳术后患者临床并发症的疗效及对Rosenberg自尊量表评分的影响。方法选取华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院胃肠外科2017年6月一2018年12月102例行肠道造口还纳术的患者,采用随机表法分为健康控制组和对照组各51例,对照组采用常规护理,健康控制组在对照组基础上行健康控制点管理,对比2组患者并发症发生情况和Rosenberg自尊量表评分。结果治疗后健康控制组患者3个月内并发症总发生率[3.9%(2/51)]低于对照组[15.7%(8/51)],差异具有统计学意义(U=1.98,P=0.048);治疗前,2组患者评分差异无统计学意义(t=0.635,P=0.527),治疗后,2组患者评分均较前增加,差异具有统计学意义(健康组t=29.031,P=0.000;对照组t=17.909,P=0.000),健康控制组明显高于对照组,差异具有统计学意义(t=9.756,P=0.000)。结论健康控制点管理可有效降低造口还纳术后患者临床并发症发生率,提高患者自尊心,值得临床应用推广。

沉默维甲酸诱导蛋白14蛋白在胃癌组织芯片中的表达及其临床意义

目的探讨沉默维甲酸诱导蛋白14(RAI14)在胃癌组织的表达及临床意义。方法选择带有随访信息的胃癌组织芯片(HStmA180Su18),采用用免疫组织化学二步法检测癌组织和癌旁组织中RAI14的表达水平,用SPSS 21.0软件分析RAI14表达水平与临床病理特征及癌预后关系进行统计学分析。结果RAI14主要在胞质中表达,癌组织中RAI14表达量显著高于癌旁组织(9.59±2.78比3.03±1.54,P<0.01);RAI14表达水平与病理分化程度(rs=0.280,P<0.01)、肿瘤浸润深度(rs=0.353,P<0.01)、淋巴结转移(rs=0.514,P<0.01)、临床分期(rs=0.496,P<0.01)正相关。Kaplan-Meier生存率分析显示胃癌患者总生存率与RAI14表达负相关(χ^(2)=55.984,df=2,P<0.01)。多因素COX回归分析显示RAI14高表达[比值比(OR)=1.223,95%可信区间(CI):1.124~1.361,P<0.01]和临床分期(OR=3.118,95%CI:1.897~5.539,P<0.01)为影响总生存率的单因素独立危险因素。结论RAI14是胃癌潜在的致癌基因,是胃癌预后的独立风险因素之一。

锌指蛋白217在胃癌组织芯片中的表达及其意义

目的检测癌基因锌指蛋白217（ZNF217）在胃癌组织芯片中的表达，探讨其与胃癌侵袭转移和预后的关系。方法收集经手术切除和病理诊断的120例胃癌石蜡标本，制作组织芯片，采用免疫组织化学技术检测ZNF217蛋白。并且对120例胃癌患者随访，检测不同预后患者胃癌组织中ZNF217的表达。结果ZNF217在正常胃黏膜和胃癌中的高表达率分别为30．0％（36／120）和70．8％（85／120），其差异有统计学意义（P〈0．05），伴淋巴结转移的胃癌中ZNF217的表达水平要高于无淋巴结转移的胃癌（P〈0．05）；ZNF217的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、癌肿部位、临床分期和远处转移密切相关（P〈0．05）；而且胃癌中ZNF217低表达的患者生存时间要显著长于高表达者（P〈0．05），ZNF217是影响胃癌预后的独立因素（P〈0．05）。结论ZNF217的表达增强与胃癌的发生、浸润和转移有关。

微小RNA-518b对肝癌细胞株增殖凋亡及侵袭的影响及其机制

目的研究微小RNA(miRNA,miR)-518b对肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响.方法实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-518b在肝癌和正常肝细胞株的表达.HepG2细胞株分成miR-518b过表达组(miR-518b组)、阴性对照组(miR-Con组)及空白对照组(Blank组).噻唑蓝(MTT)测定增殖,流式细胞术测定凋亡,Transwell测定侵袭.分光光度比色法测定半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8、Caspawe-9活性,蛋白质印迹法(Westernblot)测定Rap1b蛋白表达,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用t检验.结果miR-518b在肝癌细胞株中表达下调.转染后72、96h,miR-518组吸光度(A)490nm低于miR-Con组(0.66±0.07比0.94±0.08,t=3.291,P<0.05)及(0.86±0.07比1.47±0.10,t=3.943,P<0.01),凋亡率高于miR-Con组及Blank组[(21.4±3.2)%比(7.5±1.2)%比(6.8±1.1)%,t=13.287,P<0.05].miR-518b组Caspase-3、Caspase-9相对活力高于miR-Con组和Blank组(2.10±0.20比1.02±0.04比1.04±0.05,t=16.287,P<0.05),(2.20±0.20比1.03±0.03比1.04±0.03,t=16.298,P<0.05).3组Caspase-8相对活力差异无统计学意义(t=8.288,P>0.05).miR-518b组侵袭细胞数少于miR-Con组和Blank组(74±10比151±15比153±12,t=17.276,P<0.05),Rap1b表达量低于miR-Con组和Blank组(0.38±0.03比1.03±0.06比1.05±0.04,江19.642,P<0.05).结论miR-518b在肝癌细胞株中下调表达,过表达miR-518b可抑制增殖和侵袭,诱导凋亡,其机制与Caspase-3、Caspase-9上调及Rap1b下调表达有关.

微小RNA-448靶向沉默维甲酸诱导蛋白14抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的探讨胃癌细胞微小RNA-448(miR-448)对沉默维甲酸诱导蛋白14(RAI14)的靶向调控作用及对细胞增殖侵袭迁移的影响。方法用miR-448转染人胃癌细胞株和胃正常上皮细胞GES-1,利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和双荧光素酶报告实验确认miR-448是否对RAI14具调控作用。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测和Transwell实验进一步确证所筛选miR-448对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响,两组比较采用t检验。结果与GES-1比较,miR-448在SGC790细胞株中表达最低(2.22±0.18比8.11±0.26,t=7.67,P<0.01);miR-448可结合到RAI14 mRNA的3’UTR区降低荧光素酶活性至62%;增殖实验中,与mimic NC组比较,miR-448可显著抑制SGC790增殖率(0.71±0.07比1.38±0.04,t=2.96,P<0.01);在侵袭和迁移实验中,与阴性对照组比较,miR-448可显著抑制SGC790侵袭[(60.33±1.52)/视野比(137.66±3.21)/视野,t=3.79,P<0.01]和迁移[(50.0±2.0)/视野比(92.67±2.08)/视野,t=2.49,P<0.01]。结论miR-448可能通过靶向于RAI14 mRNA进而抑制其蛋白表达,最终负调控胃癌细胞的增殖迁移和侵袭。