体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化

目的:探讨成年大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)向神经细胞体外定向诱导分化的条件。方法:从正常SD大鼠骨髓中分离获取MSC,体外培养扩增纯化后传代于塑料培养皿中,采用丁羟茴醚(BHA)和二甲亚砜(DMSO)对传至3～5代的细胞进行体外诱导分化,采用免疫细胞化学对诱导后的细胞进行鉴定。结果:诱导1 h、2 h、3 h后有部分细胞表达神经干细胞标志蛋白nestin,且随诱导时间延长呈下降趋势;诱导5 h后,大部分细胞具有典型神经元形态,表达神经元标志物-神经元特异性烯醇化酶(NSE),少部分细胞呈星型胶质细胞状,表达胶质细胞标志物-胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结论:骨髓间充质干细胞可以在体外培养扩增并诱导成为神经元样细胞和星型胶质样细胞。

小鼠胚胎干细胞定向分化为神经干细胞过程中microRNA的变化

目的用生物芯片技术分析胚胎干细胞定向分化为神经干细胞过程中microRNA(miRNA)的表达变化,筛选调控的分化的miRNA,研究分化调控机制。方法胚胎干细胞在含LIF培养基中培养3d后,采用经典5步培养方法定向诱导向神经干细胞分化,采用nestin作为神经干细胞标记进行鉴定,送检胚胎干细胞及神经干细胞,提取总RNA以及小分子RNA,经荧光标记后与miRNA基因芯片杂交,获得胚胎干细胞诱导前后miRNA表达谱。结果1)胚胎干细胞在含LIF培养过程中保持未分化状态,Oct-4、碱性磷酸酶表达阳性;2)经典五步法诱导胚胎干细胞定向分化为神经干细胞,nestin阳性细胞为85%;3)通过基因微阵列分析,有90个miRNA的改变显著,其中68个表达上调,22个表达下调。结论miRNA可能对胚胎干细胞定向分化为神经干细胞过程起到关键作用。

膀胱电针治疗脊髓病变神经源性尿潴留的疗效观察

目的:观察膀胱电针治疗脊髓病变患者尿潴留的疗效。方法:脊髓病变伴尿潴留患者72例,按意愿分为观察组42例和对照组30例,2组均给予常规治疗,观察组还给予膀胱电针治疗。观察2组治疗前后尿潴留改善情况,评估2组生活质量。结果:治疗后,2组膀胱残余尿明显减少(P<0.05),观察组的残余尿量低于对照组(P<0.05)。观察组和对照组的总有效率分别为95.2%、66.7%,2组疗效比较有显著性差异(P<0.01)。治疗后,观察组的生存质量明显好于对照组,有显著性差异(P<0.01)。结论:膀胱电针能有效地改善脊髓病变患者膀胱功能,减轻尿潴留。

轻型颅脑损伤病人血清高迁移率族蛋白B1、泛素C末端水解酶L1和神经元特异性烯醇化酶水平变化及与预后的相关性分析

目的分析轻型颅脑损伤(MHI)病人血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平变化及与预后的相关性.方法2017年1月~2019年1月收治的84例MHI病人为MHI组,根据格拉斯哥预后量表(GOS)分为预后不良组(23例)和预后良好组(61例),另选取同时期57例来我院体检健康者为对照组.对比各组血清HMGB1、UCH-L1、NSE水平.多因素Logistic回归分析MHI病人预后不良影响因素,ROC分析血清HMGB1、UCH-L1、NSE水平对MHI病人不良预后的预测价值.结果MHI组血清HMGB1、UCH-L1、NSE水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).预后不良组复合损伤、并发症比例和血清HMGB1、UCH-L1、NSE水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05).复合损伤、HMGB1、UCH-L1、NSE为MHI病人预后不良独立影响因素(P<0.05).ROC曲线显示,HMGB1+UCH-L1+NSE预测MHI不良预后的AUC明显大于HMGB1、UCH-L1、NSE单独预测.结论MHI病人血清HMGB1、UCH-L1、NSE水平明显提升,与预后密切相关,联合检测可提升MHI不良预后预测价值.

水通道蛋白-4与视神经脊髓炎

视神经脊髓炎（NMO）是主要累及视神经和脊髓的严重致残性中枢神经系统炎性病变[1-2]。视神经脊髓炎通常呈一个复发病程,并且在复发之间没有明显缓解,因此导致累积的、不可逆的、快速进展的残疾发生。过去的几十年里,视神经脊髓炎被认为是多发性硬化（MS）的一个亚型,然而最近几年,在视神经脊髓炎患者体内发现了一种血清抗体,

难治性癫癎患者中神经节苷脂GM1抗体和谷氨酸脱羧酶抗体的研究

目的:研究难治性癫癎与血清神经节苷脂GM1抗体(GM1-A)及谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-A)水平的关系,探讨其免疫学机制。方法:应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定60例难治性癫癎(IE组)和60例非难治性癫癎(NE组)患者及60例健康对照组(HC组)血清GM1-A和GAD-A水平。结果:GM1-A和GAD-A水平,IE组与HC组和NE组比较显著增加(P<0.05),NE组与HC组比较差异无显著性意义。结论:GM1-A和GAD-A水平与难治性癫癎关系密切,提示难治性癫癎与自身免疫有关。

针刺三阴交对痛经患者脑葡萄糖代谢的影响

目的:探讨针刺三阴交治疗痛经的中枢作用机制。方法:对6例痛经患者行经疼痛时行右侧三阴交假针刺和针刺,用数字疼痛强度分级法比较刺激前后疼痛情况,并在假针刺和针刺时利用正电子发射断层摄影技术(positronemissiontomograph,PET)对痛经患者行18FFDG脑功能成像,用SPM软件分析,获得针刺激活的脑解剖功能区。结果:假针刺前后疼痛值差异无显著性意义(P>0.05),针刺三阴交后疼痛值比针刺前明显降低(P<0.01)。针刺右侧三阴交引起痛经患者多个与疼痛相关脑区被激活,针刺使同侧豆状核(苍白球、壳)、同侧小脑、同侧岛叶、双侧背侧丘脑、同侧中央旁小叶、双侧杏仁体、对侧中脑黑质、双侧第Ⅱ躯体感觉区、同侧海马回、同侧扣带回前部、对侧下丘脑乳头体葡萄糖代谢增强,大脑皮质小区域葡萄糖代谢降低。结论:针刺三阴交能明显缓解痛经患者疼痛,其机理为针刺三阴交可激活皮质、皮质下边缘系统和小脑与疼痛相关脑区,可能通过平衡与疼痛有关的中枢网络而减轻疼痛,神经内分泌也可能在治疗中起作用。

针刺三阴交的PET脑功能研究

目的探讨针刺三阴交的中枢作用机制。方法利用正电子发射断层摄影技术(positronemissiontomograph,PET)对6例女性健康志愿者行针刺右侧三阴交前后的18氟标记脱氧葡萄糖(18FFDG)脑功能成像,用统计参数图(Statisticalparametricmapping,SPM)方法进行分析,获得针刺三阴交引起的脑内葡萄糖代谢变化区域。结果对侧第一躯体感觉区,对侧第一躯体运动区,双侧辅助运动区(BA6)和对侧前辅助运动区(BA8)、前扣带回(BA24、BA32)、双侧背外侧前额叶(BA9)和对侧中间前额叶(BA10)葡萄糖代谢增加。枕叶舌回(BA17、BA18)、海马和多个马旁回(BA28、BA35、BA30)葡萄糖代谢降低。结论三阴交穴位的临床作用与针刺后脑葡萄糖代谢变化的脑功能区所施控的功能具有良好的对应性,说明大脑在针刺三阴交对机体的调节中起重要作用,因此大脑可能是穴位治疗疾病的中枢基础。

原发性痛经患者^(18)F-FDG PET脑显像研究

本研究通过比较原发性痛经和健康者^18F-脱氧葡萄糖（FDG）PET脑显像,探讨原发性痛经的中枢机制,现报道如下.

得气、针刺手法与针刺治疗原发性痛经疗效的关系

目的:观察得气、针刺手法对针刺治疗原发性痛经疗效的影响,探讨手法、得气与针刺镇痛疗效三者之间关系。方法:对90例原发性痛经患者按照完全随机的方法分成针刺手法组和针刺非手法组。对患者得气感觉的程度按照0～4分的量度进行评估。记录针刺治疗前后患者的疼痛程度(VAS)、疼痛持续时间及伴随症状来评估疗效。结果:手法组的有效率显著高于非手法组(P<0.001)。两组在疼痛程度、疼痛持续时间上差异均有统计学意义(P<0.001)。得气指标与痛经疗效指标之间呈正相关(R=0.654,P<0.001)。结论:得气对针刺治疗原发性痛经的疗效起着决定性的作用。通过施行手法,可以使患者的得气感增强,从而进一步提高针刺的疗效。

2-氯化腺苷通过调节戊四氮点燃癫痫小鼠脑组织P糖蛋白水平减轻组织脑损伤

目的观察2-氯化腺苷(2-CAdo)对戊四氮(PTZ)点燃癫痫小鼠脑内P糖蛋白(PGP)表达的影响。方法随机将C57BL/6小鼠40只,分为对照组(n=8)、PTZ组(n=16)和2-CAdo组(n=16),PTZ组和2-CAdo组小鼠腹腔注射30 mg/(kg·d)PTZ制备慢性点燃癫痫模型,对照组腹腔注射等量生理盐水,观察小鼠在PTZ点燃过程中癫痫发作情况(点燃率、点燃潜伏时间、发作开始时间和发作持续时间)。癫痫模型成功后,2-CAdo组小鼠连续腹腔注射2-CAdo[0.6 mg/(kg·d)]2周,对照组和PTZ组腹腔注射等量生理盐水。2周后将小鼠全部处死,采用HE染色观察小鼠大脑皮层和海马区的形态,Western blot法检测小鼠大脑皮层和海马中PGP水平,免疫组织化学染色检测PGP在小鼠大脑皮层和海马中的表达和定位。结果癫痫发作时,小鼠表现出全身颤抖、毛发竖起,精神萎靡、食欲不振、冲撞笼栏等异常行为。HE染色结果显示,2-CAdo组小鼠大脑皮层及海马脑组织损伤程度较PTZ组轻。在小鼠大脑皮层中,2-CAdo组PGP蛋白表达量明显低于对照组和PTZ组;而在海马中组织中,2-CAdo组和PTZ组PGP蛋白表达量又显著性高于对照组,尤其以2-CAdo组最为明显。结论 2-CAdo能够减轻癫痫所致的脑组织损伤,并且能下调大脑皮层PGP蛋白表达和上调海马区PGP蛋白的表达。

β-环糊精键合蚀刻开管毛细管电色谱柱的制备与评价

研究环糊精键合蚀刻毛细管柱的制备方法,考察了电渗流性质及其电色谱性能;其电渗流大小和方向都可调控;有效分离了碱性蛋白和硝基苯酚位置异构体;对安息香和氨基酸衍生物对映异构体能部分分离。

头颅局部亚低温与依达拉奉治疗脑出血的疗效

脑出血又称自发性脑出血,是原发性非外伤性脑实质内出血,发病率、致死率及致残率均极高,约占急性脑血管病的20％ ～40％,急性期病死率为30％～ 40％,在渡过急性期后,约有90％的患者遗留不同程度的肢体偏瘫、失语等功能障碍[¨,为家庭和社会带来沉重负担.因此,如何促进脑出血患者的功能恢复,降低致残率,成为神经学科的研究热点.本研究探讨头颅局部亚低温与依达拉奉用于脑出血的效果.

缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血再灌注后谷氨酸的影响

目的:研究缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血再灌注后谷氨酸(Glu)浓度变化的影响。方法:建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,将36只雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、脑缺血再灌注(I/R)组和缺血后适应(I Postcond)组,每组12只。应用高效液相色谱检测缺血脑组织匀浆Glu浓度。结果:局灶脑缺血再灌注6 h后,I Postcond组Glu浓度相较I/R组明显降低(P<0.01),局灶脑缺血再灌注24 h后,I Postcond组Glu浓度较I/R组低,但两者差异亦无显著性(P>0.05)。结论:本研究表明,I Postcond能够减轻MCAO大鼠模型中I/R损伤。细胞间隙Glu清除的加速可能是其重要保护机制之一。

缺血后适应对局灶性脑缺血再灌注大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的影响

目的研究缺血后适应对局灶性脑缺血再灌注大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的影响。方法30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组和缺血后适应组。建立大鼠大脑中动脉栓塞模型。假手术组线栓插入后立即拔出；脑缺血再灌注组大鼠脑缺血60min后拔出线栓；缺血后适应组大鼠脑缺血60min后，再灌注20S、再缺血20s，反复5次后恢复再灌注。于术后24h、72h进行神经功能评分。应用单细胞凝胶电泳检测大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤情况。结果与假手术组比较，脑缺血再灌注组和缺血后适应组大鼠术后24h、72h神经功能评分明显降低，外周血淋巴细胞DNA单链与双链损伤均明显增加（均P〈0．01）。与脑缺血再灌注组比较，缺血后适应组大鼠术后24h、72h神经功能评分均明显增高，外周血淋巴细胞DNA单链与双链损伤均明显减少（均P〈0．01）。与术后24h比较，脑缺血再灌注组和缺血后适应组大鼠术后72h外周血淋巴细胞DNA单链与双链损伤均明显减少（P〈0．05～0．01）。结论缺血后适应可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后外周血淋巴细胞DNA的损伤，具有神经保护的作用。

不同剂量依达拉奉对急性脑梗死患者外周血淋巴细胞DNA损伤的影响

目的研究不同剂量依达拉奉对急性脑梗死患者外周血淋巴细胞DNA损伤的影响。方法急性脑梗死患者90例,随机分为3组:观察1组、观察2组和对照组,每组30例。入院后予以常规治疗,观察组在常规治疗基础上每日加用依达拉奉注射液静脉滴注(观察1组:30 mg/d,每日1次;观察2组:30 mg/d,每日2次)。总疗程7d,观察比较3组患者治疗后外周血淋巴细胞损伤和NIHSS评分。结果观察1组、2组治疗后NIHSS评分均低于治疗前(P<0.05),且观察1组、2组患者治疗后的NIHSS评分显著低于对照组(P<0.05)。3组治疗后外周血淋巴细胞DNA损伤均较治疗前减轻(P<0.05)。在中性单细胞凝胶电泳试验中,观察1组和观察2组患者治疗后外周血淋巴细胞DNA损伤均较对照组减轻(P<0.05),且观察2组轻于观察1组(P<0.05);但在碱性单细胞凝胶电泳试验中观察2组与观察1组比较无显著差异(P>0.05)。结论大剂量依达拉奉保护急性脑梗死外周血淋巴细胞DNA损伤效果更显著,对改善脑梗死预后更具意义。

小鼠受精卵显微注射影响因素的体外研究

目的:利用体外培养探讨受精卵显微注射的影响因素的作用。方法:获取小鼠受精卵,在其他条件固定的情况下,分别比较不同的注射基因浓度,在CZB(加HEPES)操作液中显微操作时间以及注射前受精卵的质量对显微注射后的胚胎体外培养结果的影响。结果:基因浓度越高,受精卵发育越差,操作时间不同的卵发育无明显差异,质量好的受精卵发育较好,质量差的几乎不发育。结论:选用较低的基因浓度,良好的操作介质CZB(加HEPES),使用质量好的受精卵,会提高显微注射的效率。

老年脑梗死合并房颤56例

心房纤颤简称“房颤”，最主要的并发症是脑栓塞。与动脉硬化性脑卒中相比，房颤导致的脑卒中死亡率更高”，住院时间越长，遗留的神经损害和功能障碍越重。为了进一步了解老年患者房颤与脑梗死之间的相关性，更好地指导其治疗，本文回顾性分析我院接诊的脑梗死合并房颤的老年患者及单纯脑梗死老年患者的临床特点。