中药㕮咀历史与现代研发

中药饮片的传承创新是中医药发展的动力源泉,随着中医药现代化推进及人民健康用药的需求,亟需推动中药饮片的传承创新发展。㕮咀作为传统炮制方法,应用历史悠久,通过其加工制备的饮片提取利用率高、质量均一、疗效稳定,便于临床调剂,且仍保留传统饮片鉴别特征,具有广阔开发前景。本文系统梳理关于㕮咀历代古籍及文献资料,总结㕮咀饮片的临床应用及发展优势。在此基础上,提出建立㕮咀饮片的文献考证、炮制加工、工业化生产、质量与安全评价的研究体系,实现㕮咀饮片的研究及开发利用,以促进中药炮制的传承创新与中药饮片产业高质量的发展。

蟾蜍油炮制工艺及质量评价方法研究

目的:优化蟾蜍油干燥工艺,并建立以高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱及氨基酸含量测定为主的质量评价方法。方法:以氨基酸和浸出物为指标,进行蟾蜍油热风干燥、自然阴干、冷冻干燥及真空干燥工艺的优选,分别考察了热风干燥的加热温度、加热时间、物料厚度,冷冻干燥的预冻时间、冷冻干燥时间,真空干燥的温度及时间对蟾蜍油的影响。采用HPLC建立15批蟾蜍油的指纹图谱,确定共有峰并进行相似度评价;同时,采用柱前衍生化法测定氨基酸含量。结果:蟾蜍油最佳工艺为不叠加样本,50℃热风干燥11 h。HPLC指纹图谱中共确定7个共有峰,相似度均大于0.99;异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸质量分数分别为0.40%~0.57%、0.57%~0.78%、0.54%~0.75%、0.26%~0.86%。结论:所确定的工艺及质量评价方法简便、重复性好,可为蟾蜍油的加工炮制及质量评价提供参考。

酒大黄(唐古特大黄)配方颗粒超高效液相色谱指纹图谱及化学模式识别研究

目的为酒大黄(唐古特大黄)配方颗粒的质量评价提供参考。方法采用超高效液相色谱(UPLC)法,色谱柱为CORTECS UPLC T3柱(100 mm×2.1 mm,1.6μm),流动相为甲醇-0.05%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.25 mL/min,检测波长为265 nm,柱温为35℃,进样量为1μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)建立21批样品的UPLC指纹图谱,并进行相似度评价。采用聚类分析(CA)法、主成分分析(PCA)法、正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)法评价样品质量,并筛查标志性成分。结果共标定并指认出18个共有峰。21批样品的指纹图谱相似度均大于0.950,3种分析方法均将样品分为3类,OPLS-DA法分析显示,异莲花掌苷、白藜芦醇-4'-O-β-D-(6''-O-没食子酰)葡萄糖苷、儿茶素、大黄酚、没食子酸、番泻苷A、莲花掌苷和大黄酚-1-O-β-D-葡萄糖苷为制剂的标志性成分。结论该方法简单可行,可为酒大黄(唐古特大黄)配方颗粒的质量评价提供参考。

南瓜子饮片标准汤剂的制备及质量标准的研究

目的 制备南瓜子饮片标准汤剂,建立其质量评价方法,为制定南瓜子配方颗粒质量标准提供参考依据。方法 按照传统煎煮方法制备15批南瓜子饮片标准汤剂,测定其出膏率范围,并建立了饮片标准汤剂质量标准,包括采用薄层色谱法(TLC)以丙氨酸为对照进行定性鉴别,采用高效液相色谱法(HPLC)建立特征图谱及质量分数测定方法,并计算其转移率。结果 15批南瓜子饮片标准汤剂出膏率范围为10.4%~18.3%,均值为15.1%;薄层色谱斑点清晰,分离度好,比移值适当;苯丙氨酸质量分数范围为0.56~1.99 mg/g,均值为1.43 mg/g,转移率范围为42.7%~86.1%,均值为69.7%,所建立的特征图谱呈现13个特征峰,相似度均大于0.9。结论 建立了南瓜子饮片标准汤剂的质量标准,测定方法全面、准确,可为南瓜子配方颗粒的标准制定提供参考。

系统鉴定法鉴别不同基原马勃的研究

目的:在性状、显微以及DNA分子等不同层面对市场流通的马勃药材进行鉴别研究,为药用马勃的基原鉴定提供参考依据。方法:从药材市场采集到以马勃为名的36批样品,分别观察和描述其子实体的性状特征,采用光学显微镜观察菌丝、利用扫描电镜观察孢子的显微特征,同时结合DNA条形码技术,对不同来源的马勃商品进行鉴定。结果:36批马勃商品分别鉴定为大马勃Calvatia gigantea(Batsch ex Pers.)Lloyd或紫色马勃Calvatia lilacina(Mont.et Berk.)Lloyd,以及混伪品龟裂静灰球菌Bovistella utriformis(Bull.)Demoulin&Rebriev。结论:该研究分别在完整药材、孢子形态以及ITS序列中筛选出具有鉴别意义的特征,对于保障马勃物种的真实性具有重要意义。

地龙矫臭工艺的改良策略

目的:优选最佳矫臭工艺,改善地龙水提物腥臭气味。方法:以志愿者的主观感受为评判标准,优选改善地龙腥臭气味的矫臭剂种类、包合工艺,并评估矫臭剂对地龙水提物质量的影响。结果:加入薄荷素油β-环糊精包合物可显著改善地龙水提物腥臭气,提升气味接受度,且对地龙水提物质量无影响。薄荷素油β-环糊精包合物的最佳包合工艺为薄荷素油与β-环糊精的用量比例为1∶8,β-环糊精与水的用量比例为1∶3,胶体磨研磨时间为30min。结论:优选的矫臭工艺可有效降低地龙水提物腥臭气味,显著提升药物依从性,且不影响产品质量,具有较高的应用推广价值。

苍耳子标准汤剂的质量标准研究

目的建立苍耳子标准汤剂的质量标准。方法按照传统煎煮方法制备12批苍耳子标准汤剂,测定其出膏率范围;采用高效液相色谱法(HPLC法)建立苍耳子标准汤剂的特征图谱;采用薄层色谱法(TLC法)以绿原酸对照品、苍耳子对照药材为参照进行定性鉴别。结果12批苍耳子标准汤剂的出膏率波动范围为6.0%~9.9%,均值为8.1%。共标定10个共有峰,指认8种成分,分别为新绿原酸(峰2)、绿原酸(峰3)、隐绿原酸(峰4)、咖啡酸(峰5)、1,3-O-二咖啡酰基奎宁酸(峰6)、异绿原酸B(峰7)、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸(峰8)、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸(峰10)。薄层鉴别色谱斑点清晰,分离度好,比移值适当。结论建立了苍耳子标准汤剂的质量标准,测定方法全面、准确,可为苍耳子配方颗粒的质量标准制定提供参考。

十大功劳叶UPLC特征图谱及多指标成分含量测定研究

目的建立十大功劳叶特征图谱,采用相似度、系统聚类分析和主成分因子分析,对不同产地药材质量差异进行对比分析,并评价其质量水平。方法以Waters CORTECS shield RP 18(100 mm×2.1 mm,1.6μm)为色谱柱,以乙腈-0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液为流动相,进行梯度洗脱,柱温为30℃,流速为0.3 mL·min^(-1);检测波长为326 nm,对15批十大功劳叶样品进行检测。结果共确定特征峰10个,指认了其中3个成分为4-O-咖啡酰基奎宁酸甲酯、绿原酸甲酯和咖啡酸甲酯。15批样品的相似度在0.913~0.987。系统聚类分析结果显示,15批不同产地药材可聚为3类,共提取两大主成分,累积方差贡献率高达87.842%。15批药材4-O-咖啡酰基奎宁酸甲酯含量为0.015%~0.038%,绿原酸甲酯含量为0.145%~0.380%,咖啡酸甲酯含量为0.014%~0.166%,3种成分总含量为0.189%~0.575%。结论本试验建立了十大功劳叶特征图谱及多指标成分含量测定方法,可用于鉴别十大功劳叶的真伪以及评估十大功劳叶的质量。

芡实配方颗粒高效液相色谱特征图谱和4个成分含量测定

目的建立芡实配方颗粒高效液相色谱特征图谱,并测定其中腺苷、没食子酸、鸟苷和鞣花酸的含量。方法以Shim-pack GIST C18-AQ(4.6 mm×150 mm,3.0μm)为色谱柱,以乙腈-0.5%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温20℃,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长258 nm。建立芡实配方颗粒特征图谱,并借助中药色谱指纹图谱相似度系统评价其相似度。结果芡实配方颗粒特征图谱共确定了9个共有峰,并指认了7个共有峰成分,其中峰2为腺苷、峰3为没食子酸、峰4为鸟苷、峰6为短叶苏木酚酸、峰7为柯里拉京、峰8为尿石素M5、峰9为鞣花酸。样品相似度均在0.96以上。含量测定结果显示,腺苷含量为0.169~0.344 mg·g^(-1),没食子酸含量为0.469~1.956 mg·g^(-1),鸟苷含量为0.162~0.439 mg·g^(-1),鞣花酸含量为0.101~0.617 mg·g^(-1)。结论建立的芡实配方颗粒特征图谱及主成分含量测定方法重现性好、适用范围广,可为芡实配方颗粒的质量控制提供参考。

基于薄层色谱和指纹图谱的百合成分差异性研究

目的:建立卷丹、百合、细叶百合3个基原药材及对应蜜百合鉴别的薄层色谱法(TLC)和指纹图谱方法,对各基原药材所含有的化学成分进行差异性研究。方法:采用Ultimate XB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;建立21批不同基原百合药材高效液相色谱法指纹图谱,并进行相似度评价、聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析,评价不同基原百合的异同。同时采用硅胶G薄层色谱板,分别以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水(18∶2∶1.5∶1)、乙醚-正丁醇-冰乙酸(3∶9∶6)为展开剂,建立不同基原百合药材及蜜百合的薄层色谱区分方法,全面展现不同基原百合及蜜百合中化学成分特点。结果:指纹图谱结果显示,不同基原百合药材差异明显,卷丹、百合、细叶百合样品分别标定8、12、8个峰,共有成分为高泛酸、王百合苷H、王百合苷A,而王百合苷I存在于百合、细叶百合中,2-乙酰王百合苷A存在于卷丹中;不同基原百合的相似度评价结果(均小于0.50)显示其成分差异较大;经统计分析发现,不同基原百合分别聚为一类;峰12(2-乙酰王百合苷A)、峰13、峰14、峰11(王百合苷I)、峰3(高泛酸)是卷丹、百合、细叶百合的差异性成分。TLC结果表明,不同基原百合的色谱斑点存在明显差异,可与指纹图谱结果相互印证;而蜜百合TLC存在蔗糖、果糖、葡萄糖斑点,百合药材仅存在蔗糖斑点,这种成分差异来源于炼蜜。结论:所建立的指纹图谱及TLC可对百合药材进行质量评价,且能快速、准确、直观地反映不同基原百合药材及蜜百合中含有的成分差异,为不同基原百合药材和蜜百合的质量控制及区分鉴别提供参考。

垂序商陆配方颗粒的HPLC指纹图谱研究与商陆皂苷甲含量测定

目的为垂序商陆的质量控制提供参考。方法建立高效液相色谱(HPLC)法,测定19批垂序商陆配方颗粒指纹图谱并进行相似度评价、聚类分析(CA)和主成分分析(PCA),结合正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)筛查不同批次垂序商陆配方颗粒的差异成分;通过HPLC-ELSD测定配方颗粒中商陆皂苷甲成分。结果垂序商陆配方颗粒HPLC指纹图谱共标定了9个共有峰,通过与对照品比对,确定了峰1为腺苷、峰2为鸟苷、峰3为L-色氨酸、峰5为刺桐碱、峰8为商陆皂苷甲。19批垂序商陆配方颗粒指纹图谱相似度均在0.89以上,CA、PCA和OPLS-DA均将样品分为了3类,在OPLS-DA模型下,以VIP值大于1筛选出3个差异性标志物,分别为L-色氨酸(3号峰)、商陆皂苷甲(8号峰)和刺桐碱(5号峰)色谱峰。19批配方颗粒样品中商陆皂苷甲的含量在1.8~7.6 mg/g之间。结论所建立的HPLC指纹图谱,结合化学计量学分析方法和商陆皂苷甲含量测定方法,能较为全面地评价垂序商陆配方颗粒的质量。

两面针药材、饮片、标准汤剂与配方颗粒量值传递的研究

目的采用HPLC法对两面针药材、饮片、标准汤剂与配方颗粒的特征图谱和氯化两面针碱质量分数进行相关性研究,并考察化学成分的传递与差异。方法采用Agilent 5 TC C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为271 nm,流速为1 mL/min,进样体积为10μL,柱温为25℃。结果以两面针对照药材和木兰花碱、氯化两面针碱、白屈菜红碱为参照,建立了15批两面针药材、饮片、标准汤剂冻干粉与3批配方颗粒的多成分HPLC特征图谱,确定了7个共有特征峰。两面针药材、饮片、标准汤剂冻干粉、配方颗粒HPLC对照指纹图谱之间相似度计算结果均大于0.90。饮片到标准汤剂冻干粉的氯化两面针碱含量转移率为9.2%~19.0%,均值为13.8%,SD为3.51%,均值±2SD范围为6.8%~20.8%,未出现离散值,传递性较好。结论两面针药材、饮片、标准汤剂与配方颗粒的主要化学成分基本相同;HPLC特征图谱各主要特征峰相关性良好。所建立的质量评价模式能够反映两面针从饮片到配方颗粒多成分的整体面貌,为两面针配方颗粒的质量控制提供了依据。

北刘寄奴标准汤剂指纹图谱及含量测定研究

目的:建立北刘寄奴标准汤剂的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱和多成分定量分析方法。方法:采用HPLC建立北刘寄奴标准汤剂指纹图谱,并采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)进行相似度评价。通过聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值>1为标准筛选影响质量差异的标志物。采用HPLC测定木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、毛蕊花糖苷、木犀草素的含量。结果:北刘寄奴标准汤剂指纹图谱有11个共有峰,各批样品相似度均大于0.90,指认峰1为咖啡酸、峰3为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、峰4为毛蕊花糖苷、峰6为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、峰7为异类叶升麻苷、峰10为木犀草素、峰11为芹菜素。CA结果表明,18批样品分为4类:S16~S18为一类、S4和S12为一类,S9、S11和S14为一类,其余批样品聚为一类。PCA结果表明,3个主成分的累积方差贡献率为89.019%。OPLS-DA表明,峰11、峰9、峰7、峰5、峰4、峰10是影响北刘寄奴标准汤剂质量的关键性成分。18批北刘寄奴标准汤剂中毛蕊花糖苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、木犀草素质量分数分别为0.38%~2.17%、0.13%~0.73%、0.06%~0.21%。结论:建立的指纹图谱和含量测定方法操作简单,具有良好的重复性和重现性,可用于评价北刘寄奴标准汤剂的质量差异,对其质量控制及整体性评价具有一定的意义。

蜈蚣药材、饮片、标准汤剂与配方颗粒的特征图谱相关性研究及量值传递分析

目的建立蜈蚣药材、饮片、标准汤剂与配方颗粒的高效液相色谱(HPLC)特征图谱,并测定其中次黄嘌呤、苯丙氨酸成分的含量,考察四者之间化学成分的传递与差异。方法采用Dikma Platisil ODS-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇和水为流动相梯度洗脱,流速为1 mL·min^(-1),柱温为25℃。以含量、特征图谱共有峰传递数及相似度为主要评价指标,分析其量值传递规律。结果18批蜈蚣药材、饮片、标准汤剂及3批配方颗粒特征图谱均有8个共有特征峰,与各自对照特征图谱相似度均大于0.90,指认出尿嘧啶、酪氨酸、次黄嘌呤、黄嘌呤、苯丙氨酸、肌苷、鸟苷、色氨酸8种成分,并测定其含量,未出现离散数据。结论蜈蚣药材、饮片、标准汤剂与配方颗粒的主要化学成分基本相同,HPLC特征图谱相关性良好,8种成分在测定范围内与峰面积线性关系良好。所建立质量评价模式能够反映蜈蚣4种形态多成分的整体面貌,为蜈蚣配方颗粒质量控制提供数据支撑。

橘红药材、饮片、标准汤剂与配方颗粒的指纹图谱相关性研究

目的建立橘红药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC指纹图谱,并分析其相关性和差异性。方法采用CORTECS T3色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm),乙腈(A)和0.05%磷酸水溶液(B)为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.1 mL·min^(-1),检测波长为300 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以橙皮苷为参照峰,测定15批橘红药材、饮片、标准汤剂与3批配方颗粒;采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行相似度评价,确定共有峰,并进行聚类分析。结果橘红药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC指纹图谱均确定了12个共有峰,并指认了其中7个峰,峰4为维采宁-2,峰6为阿魏酸,峰7为柚皮芸香苷,峰8为橙皮苷,峰10为川陈皮素,峰11为3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮,峰12为橘皮素。橘红药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒四者与相应对照指纹图谱的相似度均大于0.980;相关性分析的结果表明大部分共有峰显著相关;系统聚类分析结果表明,药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒之间无显著性差异。饮片到配方颗粒的质量分数转移率在21.7%~26.8%,均值为24.8%,在均值的±30%范围,未出现离散,说明传递性较好。结论橘红药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的主要化学成分组成基本相同,指纹图谱相关性良好,可为橘红配方颗粒生产过程的质量控制提供参考。

基于标准汤剂的地耳草配方颗粒质量标准研究

目的以地耳草标准汤剂为基础建立其配方颗粒的质量标准,为地耳草配方颗粒质量评价提供参考。方法采用高效液相色谱法测定饮片、标准汤剂及配方颗粒中槲皮苷、异槲皮苷的质量分数,计算2种成分转移率,并且采用高效液相色谱建立了标准汤剂及配方颗粒特征分析方法。结果15批标准汤剂样品中槲皮苷、异槲皮苷的质量分数为13.66~32.11 mg/g,4.00~16.81 mg/g,转移率为45.7%~63.5%,37.8%~56.9%,3批配方颗粒槲皮苷的质量分数为16.16、17.02、16.52 mg/g,转移率为55.2%、58.2%、55.3%,异槲皮苷的质量分数为7.61、7.93、7.56 mg/g,转移率为45.0%、48.8%、44.7%;各样品特征图谱与对照图谱的相似度均大于0.90,所建立的特征图谱标定共有峰7个,其中指认了4个,峰3为异槲皮苷、峰5为槲皮苷、峰6为白前苷B、峰7为槲皮素;聚为2类,2种主成分的累积方差贡献率达84.85%。结论所创建的质量分数测定及特征图谱HPLC方法的专属性强、重复性好、合理准确,得到的地耳草标准汤剂、配方颗粒一致性良好,可以对地耳草配方颗粒的质量进行控制和整体性评价提供参考。

蜈蚣的炮制历史沿革、化学成分及药理作用研究进展

蜈蚣为我国传统的动物类中药材,具有息风镇痉、通络止痛、攻毒散结的功效。蜈蚣炮制历史悠久,早在南北朝就有炒制的记载,其后出现烧、焙、姜制、酒制等多种炮制方法,炮制后毒性降低、矫味矫臭、质地酥脆、便于粉碎和临床应用。目前报道蜈蚣的主要成分有蛋白质、氨基酸、脂类等,具有抗肿瘤、抗凝血、抗心肌缺血、镇痛抗炎、抗菌、抗惊厥、抗衰老、促进消化、调节免疫等药理作用。该文从蜈蚣的炮制历史沿革、化学成分及药理作用等方面进行论述,以期为蜈蚣的相关研究提供参考。

一测多评法同时测定酒续断配方颗粒中6种成分的含量

目的采用UPLC法对酒续断配方颗粒的6个含量指标马钱苷酸、川续断皂苷Ⅵ、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C进行含量测定,并应用一测多评法同时测定6个指标的含量,为其质量控制提供依据。方法采用超高效液相UPLC-UV,以ACQUITYHSST3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为220 nm,流速0.3 ml/min,进样体积2μl,柱温30℃。同时测定酒续断配方颗粒中马钱苷酸、川续断皂苷Ⅵ、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C 6种成分的含量,采用一测多评法,以绿原酸为内参物,通过相对校正因子测定马钱苷酸、川续断皂苷Ⅵ、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C含量,同时采用外标法测定多批酒续断配方颗粒中这6个指标成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证一测多评法的准确性。结果建立相对校正因子重现性良好,采用相对校正因子计算的含量值与实测值之间无明显差异。结论本研究建立的测定方法鉴别快捷、准确、重复性良好,可为酒续断配方颗粒质量控制的评价提供数据依据。

UPLC-DAD法同时测定不同产地黄芩中4种成分的含量

建立超高效液相色谱-二极管阵列检测器法(UPLC-DAD)测定不同产地黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等4个化学成分的含量。采用UPLC-DAD法,采用Endeavorsil C_(18)色谱柱(150.0 mm×2.1 mm,1.8μm),乙腈-0.1%磷酸水为流动相梯度洗脱,检测波长为280 nm,流速0.3 mL/min^(-1),柱温为30℃。4个化合物分离度良好,呈现较好的线性关系(r>0.9998),平均加样回收率均在98.93%~99.72%,RSD≤2.13%。结果显示4个被测成分在不同产地及批次之间含量差异较大。该方法简单准确,省时高效,可为不同产地黄芩药材质量控制提供一定的科学依据。

补骨脂配方颗粒提取工艺研究

优选补骨脂配方颗粒最佳水提取工艺,以出膏率、补骨脂素和异补骨脂素总含量及转移率为考察指标,根据单因素考察结果,以煎煮时间、加水量和煎煮次数3个因素设计正交实验方案。结果提取次数和加水量对指标成分的提取率有显著影响,补骨脂配方颗粒的最佳提取工艺为提取3次,加水倍量分别为16/14/14倍,煎煮时间为1.5/1.5/1.5 h。该工艺条件可有效提高补骨脂中两个成分的转移率,可为补骨脂配方颗粒的生产工艺提供一定的参考依据。