晚期糖基化终末产物受体在波动性高糖致人冠状动脉内皮细胞凋亡中的作用

目的研究持续性高糖(CHG)和波动性高糖(IHG)环境下,人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)的细胞凋亡情况,并探索HCAECs细胞凋亡是否由晚期糖基化终末产物受体(RAGE)介导发生。方法取对数生长期的HCAECs分为4组:①正常血糖组(CNG组,5 mmol/L葡萄糖);②持续性高糖组(CHG组,20 mmol/L葡萄糖);③波动性高糖组(IHG组,5 mmol/L和20 mmol/L葡萄糖每8 h波动1次);④波动性甘露醇对照组(IM组,5 mmol/L和20 mmol/L甘露醇每8小时波动1次,保持与波动性高糖相同的波动性渗透压环境)。不同条件处理后的HCAECs,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞活力,流式细胞术检测HCAECs细胞凋亡情况,Westernblot检测Caspase-3、RAGE的蛋白表达水平变化,qRT-PCR检测RAGE的转录水平变化情况。用靶向RAGE的shRNA慢病毒敲低HCAECs中RAGE的表达量,观察IHG中Caspase-3的活化表达情况。结果与CNG组相比,CHG组和IHG组细胞活力均降低(P<0.05),但IHG组细胞活力更低(P=0.035);IHG组细胞凋亡率增加(P=0.028),Caspase-3活化状态(P=0.037)和RAGE表达量显著增加(P<0.05)。用靶向RAGE的shRNA慢病毒敲低RAGE表达水平,发现波动性高糖导致的细胞凋亡情况得到明显改善(P<0.05)。结论波动性高糖可通过增强RAGE表达,促进细胞凋亡,引起HCAECs损伤。

线粒体靶向治疗糖尿病肾病

线粒体在维持肾脏固有细胞正常功能中发挥了重要作用,糖尿病导致的高血糖状态,可引起线粒体稳态失衡和氧化应激反应,进而介导肾脏固有细胞损伤,参与糖尿病肾病的发生和发展。因此,靶向线粒体稳态失衡机制以及降低线粒体氧化损伤的小分子药物,有望为糖尿病肾病的治疗提供新的手段。本文将从靶向线粒体融合与分裂的干预、靶向线粒体生物发生的干预、靶向线粒体抗氧化剂及靶向线粒体自噬的干预等方面,综述近年来的最新研究进展。

脑源性神经营养因子与抑郁治疗相关性的研究进展

抑郁症是临床最常见的精神疾病之一,具有较高的死亡率和致残率,严重影响患者生活质量。近年来对于抑郁症的治疗研究不断深化,发现重度抑郁症患者海马和外周血中脑源性神经营养因子(BDNF)水平降低。BDNF是调节神经环路发育和功能的关键因子,是参与神经元分化和生长、突触形成和可塑性、维持大脑神经元结构和功能的重要分子。在许多神经退性型疾病的发生及其相关药物作用机制研究中都有重要作用。BDNF也逐渐成为治疗抑郁研究中的重要生物标志物。文章就BDNF的生物学功能、BDNF与抑郁症之间的关系以及BDNF与抑郁治疗的相关性进行综述。

同源物2增强子在喉癌细胞上皮-间充质转化中的作用

目的同源物2增强子(EZH2)在喉癌组织上皮-间充质转化(EMT)中的作用尚不清楚。文中旨在探讨EZH2在喉癌细胞EMT中的作用。方法根据喉癌细胞系分为:TU177、SNU46、M4E、Tu686)和人类鼻咽上皮细胞(HNPECs)NP69。选取EZH2蛋白表达较高的TU177和Tu686细胞系转染EZH2si-RNA,其中转染效果高的为EZH2-1组,转染效果较低(沉默EZH2)的为EZH2-2组,对照为转染空载体的si-NC组。通过qRT-PCR和Western blot检测喉癌组织和细胞中EZH2、分泌的卷曲相关蛋白1(SFRP1)及组蛋白H3(H3K27me3)上赖氨酸27的三甲基化的表达。转染si-EZH2、si-SFRP1、oe-SFRP1或H3K27me3上调后,通过CCK-8检测细胞活力,免疫印迹法检测E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白、β-连环蛋白、c-Myc和CyclinD1的蛋白水平,免疫荧光法检测波形蛋白的表达。通过qPCR检测SFRP1启动子中H3K27me3的富集水平。结果与癌旁组织相比,癌组织中EZH2的mRNA及蛋白水平升高(P<0.05)。细胞活力结果显示,si-EZH2-1组细胞活力较si-NC组有所下降(P<0.05)。Western blot和免疫荧光法检测结果显示,si-EZH2-1组E-钙粘蛋白的表达明显增加,而N-钙粘蛋白的表达明显降低(P<0.05),波形蛋白的荧光强度减弱。与si-NC组相比,si-EZH2-1组的H3K27me3蛋白水平明显降低(P<0.05)。ChIP-qPCR检测结果显示,si-EZH2-1组SFRP1启动子中H3K27me3的富集水平较si-NC组显著降低(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot检测结果显示,si-EZH2-1组中SFRP1的表达明显高于si-NC组(P<0.05)。结论EZH2可以促进喉癌细胞的EMT发生,为喉癌临床管理提供了一种全新的策略。

大黄酸对过氧化氢致心肌细胞线粒体损伤的保护作用机制

目的探讨大黄酸是否通过调节线粒体功能保护过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞损伤。方法应用H_(2)O_(2)建立心肌细胞损伤模型,实验分为3组:对照组(不用H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)组(以H_(2)O_(2)诱导心肌细胞H9c2损伤)、大黄酸组(H_(2)O_(2)刺激心肌细胞H9c2造模,1μg/mL大黄酸干预)。采用噻唑蓝法检测细胞活力,电镜检测线粒体超微结构,JC-1检测线粒体膜电位,Western blot检测蛋白p-Drp1、Drp1、OPA1、Bax、Bcl-2及Caspase 3表达水平。结果与对照组相比,H_(2)O_(2)组能明显抑制细胞活力(P<0.05),大黄酸组中3个浓度均能显著增加细胞活力,大黄酸浓度为1μg/mL细胞活力最显著(P<0.01)。对照组线粒体轮廓完整,棱嵴清晰;H_(2)O_(2)组线粒体肿胀,轮廓模糊,棱嵴消失,可见空泡化改变;大黄酸组线粒体与H_(2)O_(2)组相比,形态得到明显改善。与对照组比较,H_(2)O_(2)组细胞浆中绿色荧光增强、线粒体内红色荧光减弱;与H_(2)O_(2)组相比,大黄酸组线粒体内红色荧光增强、细胞浆中绿色荧光减弱。与对照组比较,H_(2)O_(2)组OPA1和Bcl-2表达降低,而p-Drp1、Bax和Caspase 3显著增加(P<0.05);大黄酸组OPA1、Bcl-2明显增加,而p-Drp1、Bax和Caspase 3显著降低(P<0.05)。结论大黄酸能够减轻H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞损伤,其可能是通过保护线粒体形态和功能,调节线粒体动力学蛋白,抑制凋亡而实现。

大株红景天注射液及红景天苷对心血管疾病的作用机制研究进展

大株红景天注射液及其有效成分红景天苷在心血管疾病的防治方面具有显著效果,其机制可能与抗心律失常,抗心脏毒性,抗心肌损伤,抗动脉粥样硬化,抗“血瘀证”,抗糖尿病心血管疾病,抗心肌肥厚等多重药理作用有关。文章对大株红景天注射液及红景天苷关于心血管疾病的作用机制进行综述,以期推动大株红景天注射液及红景天苷在心血管疾病防治中的机制研究及临床用药。

O-GlcNAc糖基化修饰在肾脏疾病中的研究进展

O-GlcNAc糖基化(O连接N-乙酰氨基葡萄糖糖基化)修饰是常见的蛋白质翻译后修饰之一,涉及将O-连接的β-N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)添加在蛋白质上的丝氨酸/苏氨酸残基上,在各种细胞过程中起着重要作用,包括代谢、信号转导和细胞凋亡。O-GlcNAc糖基化修饰异常与多种疾病的发生密切相关,包括癌症、糖尿病、心血管疾病和神经退行性疾病等。近年来的研究表明,蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰也广泛参与肾脏疾病的发生与发展。因此,为了解O-GlcNAc修饰在常见肾脏疾病中的变化,文章就O-GlcNAc糖基化修饰在肾脏(胚胎)发育、基因突变或肾脏发育异常相关性疾病中的研究进行综述,为未来继续研究肾脏疾病中O-GlcNAc糖基化修饰的扰动并以此为靶点研发出特异性治疗方式提供参考。