关于现用实验动物饲养器材优缺点及改进建议

关于现用实验动物饲养器材优缺点及改进建议李丽王祥银李力（中国人民解放军南京军区福州总医院动物实验科，福州３５０００１）为了创造合格的实验动物饲养环境，保证实验动物质量，使实验动物能更好地满足生物医学实验研究的需要，合格的实验动物饲养器材是必不可少的。...

SD大鼠肌腱冷冻维持温度选择的实验研究

目的 :探讨不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对肌腱超微结构的影响 ,为同种异体肌腱保存移植提供依据。方法 :实验组设计维持温度为 -4 5℃、-5 0℃、-5 5℃、-60℃、-65℃、和 -70℃组 ,以 15 %二甲基亚砜为低温保护剂 ,对SD大鼠肌腱进行上述温度冷冻预处理 ,液氮中保存 1周 ,HE染色组织学观察和透射电镜肌腱超微结构观察。结果 :电镜下 -4 5℃组胶原纤维排列较稀疏 ;-60℃组多数腱细胞胞浆水肿 ,核膜不完整 ;-65℃组胞浆内细胞器破坏 ;-70℃组部分腱细胞坏死脱落。 -5 0℃组和-5 5℃组与对照组之间差异不明显 ,肌腱组织超微结构得到良好保持。结论 :肌腱组织冷冻预处理的维持温度在 -5 0℃～ -5 5℃之间 ,-5 0℃是肌腱组织冷冻预处理的最佳维持温度值 ,可获得具有大部分生物活性的肌腱。

冷冻预处理温度对SD大鼠周围神经超微结构的影响

目的 探讨不同冷冻预处理温度对周围神经超微结构的影响。 方法 以 15 %二甲基亚砜 (DMSO)为低温保护剂 ,采用两步冷冻步骤对 SD大鼠坐骨神经进行 - 4 5 ,- 5 0 ,- 5 5 ,- 6 0 ,- 6 5和 - 70℃冷冻预处理 ,- 196℃液氮保存 1周 ,复温后光镜和透射电镜观察。 结果 - 5 0℃冷冻预处理和液氮保存的的大鼠坐骨神经 ,超微结构保持良好。其余各温度组的神经呈髓鞘增厚、疏松 ,脱髓鞘、髓鞘断裂 ,轴索萎缩 ,局部裸露 ,雪旺细胞肿胀、坏死等轻重不同的冷冻损伤表现。 结论 周围神经冷冻预处理温度在 - 5 0～ - 5 5℃之间 ,- 5 0℃是其最佳温度值。

冠状静脉窦的解剖及其在心脏逆行灌注中的临床意义

目的为临床选择逆行灌注的操作技术及提高灌注效果提供解剖学依据。方法取福尔马林固定的成年尸体心脏标本50例,重点观察冠状静脉窦属支的引流情况及冠状静脉窦口与房室结动脉的解剖关系。结果心中静脉在冠状静脉窦的开口距窦口的最短距离为(3.4±1.5)mm,左室后静脉、心小静脉汇入心中静脉者分别占30%和4%,心中静脉与心小静脉单独开口于右心房者分别占12%和2%。房室结动脉距冠状静脉窦口前、后点的距离分别为(4.9±2.5)和(9.9±4.2)mm,与窦口长轴成(21.2±15.6)°的交角。窦口左右两侧的心房壁厚度为(1.1±0.2)mm。结论直视下不带气囊的插管法较其他方法更具有解剖学优势,但在作窦口的荷包缝合时应充分考虑右房底壁厚度及窦口与房室结动脉的关系。为提高逆行灌注效果,应尽可能辅以顺行灌注、采用直视下不带气囊的插管法,以及对较大的异位心中静脉开口考虑附加灌注。

不同时段缺血对SD大鼠肌腱组织超微结构的影响

目的 探讨不同时段缺血对 SD大鼠肌腱组织超微结构的影响。 方法 采用两步冷冻步骤 ,以 15 %DMSO为低温保护剂 ,对 SD大鼠肌腱进行冷藏缺血和常温缺血实验 ,缺血时间为 1,2 ,3,4 ,5 ,6和 8h,- 5 0℃温度冷冻预处理 ,液氮保存 1w,透射电镜观察。 结果 肌腱缺血 1～ 2 h,冷藏组与对照组之间无明显差异 ,常温组腱细胞轻度水肿 ;缺血 3～ 4 h,冷藏组少数腱细胞细胞质肿胀 ,常温组腱细胞细胞质水肿 ,个别腱细胞膜不完整 ;缺血 5～ 6 h,冷藏组腱细胞细胞质肿胀 ,常温组腱细胞质破坏脱落 ,核膜尚完整 ;缺血至 8h,冷藏组个别腱细胞肿胀、胞膜不完整 ,常温组多数腱细胞质破坏脱落。 结论 缺血冷藏能明显延长同种异体肌腱的对缺血耐受时间 。

不同时段缺血对SD大鼠周围神经超微结构的影响

目的 探讨缺血对 SD大鼠周围神经组织超微结构的影响。 方法 采用两步冷冻法 ,以 1 5 % DMSO为低温保护剂 ,对 30只 SD大鼠股前神经进行缺血冷藏和常温缺血实验 ,时间为 1 ,2 ,3,4 ,5 ,6和 8h,- 5 0℃冷冻温度预处理 ,液氮保存 1周 ,透射电镜观察。 结果 缺血 1～ 2 h,冷藏组个别髓鞘轻度水肿 ,常温组髓鞘增厚 ,雪旺细胞水肿 ;缺血 3～ 4 h,冷藏组个别轴索内线粒体轻度肿胀 ,常温组少数神经纤维脱髓鞘现象 ;缺血 5～ 6 h,冷藏组部分髓鞘不规则 ,排列疏松 ,常温组神经纤维脱髓鞘增多 ,雪旺细胞及轴索内线粒体水肿明显 ;缺血 8h,冷藏组少数神经纤维脱髓鞘 ,部分雪旺细胞水肿 ,常温组轴索明显萎缩 ,少数雪旺细胞破坏。 结论 缺血 8h冷藏神经组织 ,其超微结构仍较好 。

不同时段超低温保存对兔肌腱力学性能的影响

目的 :探讨不同时段超低温保存对兔肌腱组织生物力学性能的影响。方法 :以 15 %DMSO(二甲基亚砜 )为低温保护剂 ,采用两步冷冻保存步骤 ,对青紫兰兔肌腱进行维持温度 - 5 0℃的冷冻预处理 ,- 196℃液氮保存 18d、180d ,测试前用 4 0℃水浴复温 ,每组肌腱 8段 ,与新鲜肌腱对照进行拉伸实验。结果 :肌腱的破坏荷载在对照组、18d组、180d组分别为 (6 6 .0± 19.4 9)N、(6 5 .0± 7.0 7)N和 (5 4 .0± 11.4 )N ,各组肌腱的延伸率 (% )依次为 6 3.5± 17.3、38.6± 0 .98和 30 .6± 0 .4 7。结论 :经不同时段超低温冷冻保存的兔肌腱 ,拉伸实验的生物力学指标无明显差异 (P>0 .0 5 )。

胶原凝胶包埋肝细胞体外培养和腹腔移植的研究

目的 研究改进肝细胞腹腔移植的方法。方法 用胶原凝胶包埋大鼠肝细胞 ,并在体外培养 ,测定培养液中总蛋白 (TP)和尿素氮 (BUN)水平。将胶原培养液与鼠肝细胞混合后注入大鼠腹腔 ,混合物在腹腔内形成凝胶并包埋肝细胞。用含酶的培养液将受者鼠腹腔内的移植肝细胞洗出 ,再置于无葡萄糖培养液中培养 ,测定培养液中葡萄糖含量。对照组处理过程与实验组相同 ,但不用胶原。结果 胶原凝胶包埋肝细胞组的TP、BUN和葡萄糖含量均明显高于对照组 (P <0 .0 1)。胶原培养液与肝细胞混合物在注入腹腔 2 4h后变为凝胶。结论 胶原凝胶可促进体外培养或腹腔移植的肝细胞生长 ;胶原培养液腹腔注射和腹腔内胶原凝胶包埋细胞法 ,使肝细胞的腹腔移植更简便、安全、实用。