孕激素治疗子宫内膜癌研究进展

子宫内膜癌原发于子宫内膜,是常见的妇科恶性肿瘤之一,其发病率及死亡率仍在逐年上升。虽然子宫内膜癌多见于围绝经期和绝经后女性,但近年来该病有着明显的年轻化趋势。对于未生育但有生育意愿的年轻患者,应用孕激素治疗子宫内膜癌近年来在临床上取得了很大的进展。鉴于孕激素临床应用个体差异大、作用机制不明确等问题,本文就孕激素的临床应用现状、疗效、孕激素抵抗及其机制进行综述。

孕激素受体基因G1978T多态性与子宫内膜癌的相关性研究

目的:探讨子宫内膜癌与孕激素受体(progesterone receptor, PGR)基因G1978T多态性的关联。方法:先在Pubmed、EMBASE、中国知网和万方数据库中检索子宫内膜癌患者孕激素受体G1978T基因分型的文献,提取数据用STATA15软件进行Meta分析,计算I2和OR(95%CI)。然后收集子宫内膜癌(EC组)和正常女性(对照组)的全血标本,参照Genebank数据库序列,设计PGR基因G1978T位点野生型G和突变型T序列的特异性检测引物,并硫化修饰其3’末端,对采集样本进行高保真DNA聚合酶介导的PCR反应,检测其基因型,并辅以测序验证。结果:多种遗传模型分析显示PGR基因G1978T多态性与子宫内膜癌风险之间没有明显关联(等位基因模型OR=1.10,95%CI=0.98~1.24,P=0.072)。66例正常人全血DNA中检测出1例PGR基因G1978T突变,而在62例子宫内膜癌患者全血DNA中未检测出PGR基因G1978T突变。病例组和对照组两组之间基因型与等位基因频率的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PGR基因G1978T位点的多态性与子宫内膜癌的发生无关。

微小RNA在动脉粥样硬化中的研究进展

动脉粥样硬化是一种伴有内皮功能障碍、泡沫细胞形成以及血管平滑肌细胞增殖等复杂病理改变的慢性炎症反应性疾病。微小RNA是由大约19~25个核苷酸组成的单链非编码RNA,被认为是基因表达转录后的调控因子。大量微小RNA参与了动脉粥样硬化的病理过程。本文总结了微小RNA调控血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的凋亡、衰老、增殖和迁移等,参与动脉粥样硬化发生发展的新进展。

基于OBE教学理念的药物化学教学改革探索

OBE教学理念,是一种以成果为目标导向,以学生为本,采用逆向思维的方式进行的课程体系建设理念。药物化学是药学专业的一门重要专业课程。笔者在长期从事药物化学一线教学的基础上,根据目前教学中存在的问题,运用OBE教学理念,分别选取天然产物合成,手性药物不对称合成和抗癌药物研发三个知识点为导向进行教学改革,取得较明显的效果。

二烯丙基二硫增强DJ-1过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU的敏感性

目的 探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)是否增强DJ-1(protein/nucleic acid deglycase,蛋白/核酸去糖化酶)过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU(5-fluorouracil, 5-氟尿嘧啶)的敏感性。方法 实验分为Control组、DADS组、VCR(Vincristine,长春新碱)组、VCR+DADS组、DJ-1组、DJ-1+DADS组;MTT检测DADS对5-FU抑制细胞增殖的影响;流式细胞术检测DADS对细胞凋亡的影响;qRT-PCR、Western blot、免疫荧光检测DADS对耐药相关基因表达的影响。结果 DADS增强5-FU对VCR耐药细胞和DJ-1过表达细胞增殖的抑制作用;DADS诱导VCR耐药细胞凋亡;DADS下调DJ-1表达、诱导DJ-1过表达细胞凋亡;过表达DJ-1上调P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、Bcl-2、XIAP(X连锁凋亡抑制蛋白),下调caspase-3表达;DADS降低DJ-1过表达细胞和VCR耐药细胞P-gp、Bcl-2、XIAP,升高caspase-3表达。结论 DADS能增强DJ-1过表达细胞对5-FU的敏感性,与其拮抗DJ-1介导的P-gp、Bcl-2、XIAP上调、caspase-3下调有关。

DADS抑制XIAP介导的人胃癌HGC27细胞增殖、迁移和侵袭

目的 研究二烯丙基二硫(DADS)对X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)过表达胃癌HGC27细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 建立XIAP过表达HGC27细胞株;实验设置为Vector组、Vector+DADS组、XIAP组和XIAP+DADS组;DADS处理细胞后,Western blotting检测各组XIAP;MTT和平板克隆实验分析各组细胞的增殖能力;Transwell实验检测各组细胞的迁移、侵袭能力。结果 XIAP过表达细胞增殖率和克隆形成率增高,迁移和侵袭的细胞数增加;DADS处理XIAP过表达细胞后,XIAP表达降低的同时,细胞增殖率和克隆形成率下降,迁移和侵袭的细胞数减少。结论 过表达XIAP促进HGC27细胞增殖和迁移侵袭;DADS下调XIAP,抑制HGC27细胞增殖、迁移和侵袭。

HMGA23'-UTR双荧光素酶报告载体构建及与miR-33b-5p的靶向验证

目的:构建野生型及突变型HMGA2基因3’-非编码区(3’-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,验证miR-33b-5p与HMGA2之间的靶向关系。方法:生物信息学相关软件预测miR-33b-5p与HMGA2之间的靶向关系;PCR扩增HMGA2的基因片段,构建HMGA2野生型和突变型双荧光素酶报告载体;将miR-33b-5p和阴性对照物分别与野生型GV272-HMGA2-wt-3’-UTR或突变型GV272-HMGA2-mut-3’-UTR双荧光素酶报告载体共转染293T细胞,然后检测荧光素酶的活性。结果:成功构建野生型及突变型HMGA2基因3’-非编码区(3’-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,双荧光素酶报告系统的结果显示,加入miR-33b-5p可使野生型GV272-HMGA2-wt-3’-UTR的荧光素酶活性降低,但突变型GV272-HMGA2-mut-3’-UTR的荧光素酶活性与对照组相比则未发生显著变化。结论:野生型及突变型HMGA23’-UTR双荧光素酶报告载体构建成功;miR-33b-5p与HMGA2之间存在靶向关系。

肠道菌落——治疗骨质疏松症新靶点

肠道菌落是生活在消化道内与人体共生的生物,参与调节人体生理平衡状态。肠道菌落可通过营养吸收、免疫调节、激素作用和肠-脑-骨轴途径干预成骨细胞和破骨细胞的分化和活力,对骨骼的重塑调节起着重要作用。

子宫内膜癌PTEN基因968delA突变检测技术平台的构建及初步应用

目的 构建子宫内膜癌PTEN基因968delA突变检测技术平台,为临床分析PTEN基因968delA突变与子宫内膜癌的相关性提供技术支持。方法 设计PTEN基因968delA位点的特异性硫化修饰引物,以本实验室前期构建的包含PTEN基因968delA位点的突变型质粒和野生型质粒为模板,进行高保真聚合酶介导的双向引物延伸反应,采用正交设计进行PCR条件优化,再将其优化后采用突变敏感性分子开关技术检测从南华大学附属第一医院收集的62例临床患者子宫内膜组织样本PTEN基因968delA位点突变。结果 突变敏感性分子开关技术检测PTEN基因968delA位点最佳PCR反应条件为:30个循环、模板DNA(10 ng/μL)0.3μL、引物(10μmol/L)0.5μL、退火温度61℃,灵敏度达10^(-3)ng/μL。62例子宫内膜癌组织与21例正常子宫内膜组织标本均未发现PTEN基因968delA突变。结论 成功构建了子宫内膜癌PTEN基因968delA突变检测技术平台,为该技术在PTEN基因968delA的突变筛查中的应用提供了依据。

Adiporedoxin对TNF-α诱导血管内皮细胞Integrinα4和Integrinβ1表达的影响

目的研究脂过氧化物酶(adiporedoxin,Adrx)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导血管内皮细胞整合素α4(Integrinα4)和整合素β1(Integrinβ1)表达的影响。方法过表达实验分为空载体组、空载体+TNF-α组、Adrx+TNF-α组;si-RNA干扰实验分为si-Control组、TNF-α组、si-Adrx+TNF-α组。将Adrx质粒和si-Adrx分别转染HUVEC细胞后,用TNF-α处理细胞,Real-time PCR和Western blotting分别检测Integrinα4和Integrinβ1 mRNA和蛋白水平。结果TNF-α上调Integrinα4、Integrinβ1表达;与单用TNF-α处理组比较,Adrx+TNF-α组细胞Integrinα4和Integrinβ1 mRNA和蛋白水平均显著降低;而用si-RNA下调Adrx表达后,TNF-α诱导的Integrinα4和Integrinβ1 mRNA和蛋白水平均明显升高。结论Adrx负调控TNF-α诱导的HUVEC细胞Integrinα4和Integrinβ1表达。

一款新型茶代餐粉的配方优化

以具有多种药理成分的衡阳特色南岳云雾茶粉作为主要有效成分,与燕麦粉、木糖醇、抗性糊精进行复配,同时添加适量的大豆分离蛋白等营养物质成分,以感官评价为标准进行配方优化。大豆分离蛋白、复合维生素与复合矿物质的添加量分别固定为4.0, 0.2与0.7 g,再选取南岳云雾茶粉、燕麦粉、木糖醇与抗性糊精的添加量为变量,进行单因素试验,筛选其最佳添加量范围,以单因素试验的结果为基准进行正交试验,探讨代餐粉最佳配方,得到南岳云雾茶粉、燕麦粉、木糖醇与抗性糊精的最佳添加量,结果分别为4.5, 22.0, 6.0与1.0 g。该配方的茶代餐粉营养全面,集药理性与绿茶特有的口感风味为一体,食用价值高。