MMP-9在女性相关恶性肿瘤中作用的研究进展

基质金属蛋白酶-9(MMP-9)是在多种生物过程中发挥重要作用的一种基质金属蛋白酶,可切割细胞外基质(ECM)蛋白,调控ECM重构,而ECM重塑是肿瘤细胞增殖、侵袭与转移等过程中的重要一环。同时MMP-9还能介导肿瘤微环境,因此,MMP-9对癌症的发生与发展起着一定的促进作用。本文对MMP-9在女性相关恶性肿瘤中的研究进展做一概述,为女性相关肿瘤的治疗、管理及预后等提供依据。

全反式维甲酸通过调控sFlt-1表达对滋养层细胞侵袭及促血管形成能力的影响

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)的调控作用及其对人胎盘滋养层细胞侵袭及促血管形成能力的影响。方法采用0.15μmol/L ATRA处理HTR-8/SVneo细胞12、24、48、72 h,RT-PCR和ELISA分别检测细胞中sFlt-1 mRNA以及上清液中sFlt-1蛋白水平。采用携带sFlt-1过表达载体慢病毒感染HTR-8/SVneo细胞,并采用0.15μmol/L ATRA处理24 h,采用ELISA检测细胞上清液中sFlt-1、胎盘生长因子(PIGF)和血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白含量;Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力;小管形成实验检测细胞体外促血管形成能力;Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9蛋白表达水平。结果 ATRA可呈时间依赖性的抑制HTR-8/SVneo细胞中sFlt-1 mRNA表达及其蛋白的分泌;ATRA干预后,HTR-8/SVneo细胞上清液中sFlt-1蛋白水平降低(P <0.05),PIGF和VEGF蛋白水平升高(P <0.05),而细胞侵袭和迁移能力、血管成管数目以及MMP-9和MMP-2蛋白表达水平均增加(P <0.05)。然而,sFlt-1过表达可抑制ATRA对HTR-8/SVneo细胞的干预效果。结论ATRA可通过抑制sFlt-1表达增强滋养层细胞侵袭及促血管形成能力。

miR-200b与miR-200c靶向DNA甲基转移酶对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响

目的探讨miR-200b与miR-200c靶向DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3A和DNMT3B对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响。方法以人卵巢癌细胞株(A2780)、人卵巢癌顺铂耐药细胞株(A2780/DDP)作为研究对象,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测A2780、A2780/DDP细胞株中miR-200b与miR-200c表达量。耐药细胞株A2780/DDP转染后分为si-miR-200b组、si-miR-200c组、si-NC组,MTT法检测转染后3组细胞IC50值;蛋白印迹免疫法(Western blotting)检测转染后3组细胞DNMT1、DNMT3A和DNMT3B蛋白表达水平;流式细胞术检测转染后细胞凋亡率。结果qRT-PCR结果显示A2780细胞系中miR-200b与miR-200c表达高于A2780/DDP细胞系(P<0.05)。si-miR-200b组和si-miR-200c组IC50值、DNMT1、DNMT3A和DNMT3B蛋白表达水平低于si-NC组(P<0.05)。结论miR-200b与miR-200c高表达能抑制DNMT1、DNMT3A和DNMT3B基因表达,从而逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性。

miR-27a低表达对子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖的影响

目的 研究miR-27a低表达对子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖的影响。方法 构建miR-27a低表达HEC-1-A细胞株。细胞实验分为空白对照组(HEC-1-A不做任何处理)、NC-miR组(转染miR-27a空载体)及miR-27a inhibitor组(转染miR-27a抑制剂)。qRT-PCR法检测各组细胞miR-27a表达情况;MTT比色法和平板克隆技术检测各组细胞增殖能力。结果 成功构建miR-27a低表达HEC-1-A细胞株。miR-27a inhibitor组miR-27a水平及细胞增殖能力均低于NC-miR组及空白对照组(P<0.05)。结论 miR-27a低表达抑制子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖能力。

骨髓间充质干细胞外泌体源性miR-214-3p调控IKBKB基因促进宫颈癌细胞焦亡

目的探究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSC)外泌体源性miR-214-3p调控B细胞κ轻肽基因增强子抑制因子激酶β(inhibitor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cell kinase beta,IKBKB)对宫颈癌细胞的影响。方法采用生物信息学方法分析宫颈癌组织中异常表达的微RNA,最终选择miR-214-3p作为目的基因,并确定其下游靶基因IKBKB;检测宫颈癌患者的癌组织及癌旁组织中miR-214-3p、IKBKB的表达情况;提取并鉴定BMMSC外泌体,干预外泌体中miR-214-3p的表达水平,构建IKBKB过表达质粒,将改造后的外泌体及质粒分别转染至宫颈癌HeLa细胞,测定转染后不同组别宫颈癌细胞焦亡相关指标。结果生物信息学和实验检测均发现miR-214-3p在宫颈癌组织和细胞中低表达,而在BMMSC外泌体中高表达,且BMMSC源性外泌体可显著提高宫颈癌细胞中miR-214-3p的表达水平;IKBKB基因是miR-214-3p的下游靶点,在宫颈癌组织和细胞中高表达;高表达miR-214-3p可促进宫颈癌细胞焦亡,过表达IKBKB基因后宫颈癌细胞的焦亡水平显著降低。结论BMMSC分泌的外泌体通过携带miR-214-3p调控IKBKB促进宫颈癌细胞焦亡。

妊娠期亚临床甲状腺功能减退孕妇叶酸利用能力与血清同型半胱氨酸、维生素B_(12)的相关性分析

目的探究妊娠期亚临床甲状腺功能减退(妊娠期亚甲减)孕妇叶酸(FA)利用能力与血清同型半胱氨酸(Hcy)、维生素B_(12)的相关性。方法选取100例妊娠期亚甲减孕妇为研究组;另选同期100例甲状腺功能正常孕妇为对照组。检测两组孕妇FA、Hcy、维生素B_(12)以及甲状腺功能,并分析其相关性。结果两组FA利用能力比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。研究组血清Hcy水平高于对照组,维生素B_(12)水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、游离四碘甲状腺原氨酸(FT_(4))水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),研究组促甲状腺激素(TSH)水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。FA利用能力与Hcy呈负相关(r=-0.454),与维生素B_(12)呈正相关(r=0.219);Hcy与维生素B_(12)、FT_(3)、FT_(4)呈负相关(r=-0.126、-0.296、-0.286),TSH呈正相关(r=0.352);维生素B_(12)与TSH呈负相关(r=-0.095),与FT_(3)、FT_(4)呈正相关(r=0.062、0.075)。结论妊娠期亚甲减与FA、Hcy、维生素B_(12)具有一定相关性,孕妇应及时补充FA、维生素B_(12),并关注FA、Hcy、维生素B_(12)水平变化。

PARP抑制剂用于靶向治疗卵巢癌的机理及进展分析

卵巢癌是最具挑战性的妇科恶性肿瘤,发现即晚期,预后差、易耐药,5年总生存率不足50%。近年来,研究发现聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂可以借助“合成致死原理”对卵巢癌,尤其是对铂类敏感的复发性卵巢癌有显著疗效。目前,PARP抑制剂用于靶向治疗卵巢癌已经成为研究热点,先后有多种药物成功上市。但临床使用表明,其普遍具有骨髓抑制的毒副作用,仍需进一步开发新型高选择性PARP抑制剂。

LncRNA-UCA1通过靶向调控miR-182-5p对滋养细胞侵袭与转移的影响

目的探讨长链非编码RNA尿道上皮癌相关基因1(LncRNA-UCA1)对滋养细胞侵袭与转移的影响及其可能机制。方法收集30例行剖宫产分娩的子痫前期(PE)患者胎盘组织和30例正常妊娠孕妇胎盘组织,qRT-PCR检测各胎盘组织中UCA1和miR-182-5p表达水平。以滋养细胞HTR-8/Svneo为研究对象,将UCA1过表达质粒(pcDNA3.1-UCA1)及其空载质粒(Vector)转染至细胞中,qRT-PCR检测细胞中UCA1和miR-182-5p表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证UCA1与miR-182-5p之间的靶向调控关系。将pcDNA3.1-UCA1质粒与miR-182-5p mimic分别或同时转染至HTR-8/Svneo细胞中,CCK-8检测细胞增殖活性;Transwell实验检测细胞侵袭与转移;Western blotting检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9蛋白表达变化。结果(1)临床标本测定结果:与正常妊娠孕妇胎盘组织比较,PE患者胎盘组织中UCA1表达降低(1.10±0.51 vs 5.74±1.63),差异有统计学意义(t=14.947,P<0.001),而miR-182-5p表达显著增加(7.23±1.44 vs 1.07±0.72),差异有统计学意义(t=20.961,P<0.001)。(2)细胞实验结果:UCA1能特异性靶向调控miR-182-5p表达。与Vector组比较,UCA1过表达可降低HTR-8/SVneo细胞中miR-182-5p表达(0.12±0.05 vs 0.97±0.06,t=19.028,P<0.001),促进细胞增殖、侵袭和迁移(t=10.160、17.228、13.768,P均<0.001),并上调MMP-2和MMP-9蛋白表达(t=20.833、24.793,P均<0.001);而miR-182-5p过表达能显著减弱UCA1过表达对HTR-8/SVneo细胞增殖、侵袭和迁移的促进作用。结论UCA1通过靶向下调miR-182-5p表达促进滋养细胞侵袭与转移。