血管成形术后再狭窄与平滑肌细胞转化和迁移及转化生长因子α表达上调有关

目的为探讨血管成形术后再狭窄形成与平滑肌细胞(Smooth muscle cells,即SMCs)的迁移和表型转化,以及转化生长因子α(Transforming growth factor-α,即TGFα)在内膜增生过程中的表达变化的关系。方法取40只Sprague-Dawle大鼠行右颈总动脉球囊内膜剥脱术建立再狭窄动物模型,于第1,3,9,28天和2月取实验动脉段和对侧正常动脉段行光镜观察及计算机图像分析,同时在透射电镜下观察SMCs亚微结构变化。并以放免测定内膜增生时损伤血管组织中TGFα表达的变化。结果图像分析显示在球囊损伤第3天即见损伤血管中膜出现明显增厚,而后恢复正常厚度。与此同时球囊损伤第3天内膜明显增厚,而在第9～28天逐渐达到高峰;在透射电镜下观察可见:术后第3天损伤血管增生内膜中近腔面的SMCs就已主要表现为合成表型,在28d和2个月时大部分SMCs又恢复收缩表型的形态特征。而通过放免测定发现球囊损伤后第3天对血管组织TGFα表达明显增加,与对侧正常颈总动脉标本中的TGFα含量有统计学意义的差异。结论故认为大鼠再狭窄模型的内膜增生过程具有明显的时相特征,SMCs从中膜向内膜的迁移,而SMCs的表型转化在这过程中显示出明显的双向转化特点,而TGFα在损伤血管的表达明显增加,可能参与了内膜过度增生过程的SMCs的表型转化和迁移的机制。

氨氯地平联合坎地沙坦治疗原发性高血压患者血压晨峰的疗效研究

目的探讨氨氯地平联合坎地沙坦对原发性高血压患者血压晨峰的影响。方法以收治的50例原发性高血压患者为研究对象,随机分为对照组和治疗组。治疗组口服氨氯地平,晚间服用坎地沙坦;而对照组仅口服依那普利,共8周。观察治疗前后血压晨峰的变化情况。结果治疗组和对照组均能降低血压晨峰,氨氯地平、联合坎地沙坦治疗组与依那普利治疗组晨峰血压下降的幅度分别为SBP(22.51±1.52)mmHg,DBP(22.13±1.84)mmHg;SBP(10.27±2.17)mmHg,DBP(12.23±2.24)mmHg,两组比较差异有统计学意义,治疗组控制血压晨峰的疗效优于依那普利。结论在服用氨氯地平的同时,晚间加服坎地沙坦,能够有效控制高血压患者的晨峰现象。

水飞蓟宾抑制人外周血单个核细胞产生TNF-α、IL-6以及H_2O_2

目的探讨水飞蓟宾能否抑制人外周血单个核细胞(PBMCs)产生TNF-α和IL-6,以及对H2O2的产生有无影响。方法获取的PBMCs与不同浓度的水飞蓟宾孵育后,台盼蓝染色检测其活性;酚红氧化实验和酶联免疫吸附试验分别检测H2O2和TNF-α和IL-6的产生。结果 1～100μg/ml水飞蓟宾对细胞活性无明显影响,1～50μg/ml水飞蓟宾能呈剂量依赖性方式抑制H2O2,TNF-α和IL-6的产生。结论水飞蓟宾具有抗氧化和抗炎的作用,它可能是通过抑制PBMC细胞产生H2O2,TNF-α和IL-6而实现的。

腹主动脉缩窄大鼠心力衰竭时心室肌细胞电生理失稳态及Ito的变化

目的探讨腹主动脉缩窄大鼠心力衰竭时电生理失稳态和心室肌细胞Ito的变化。方法采用腹主动脉缩窄法建立心力衰竭大鼠模型，术后16周检测心脏彩超和左室舒张末压，左室舒张末压≥15mmHg大鼠归入心力衰竭组，另设假结扎对照组。在术后16周测定两纽大鼠电生理指标。采用酶解法获得单个大鼠。室肌细胞并以标准全细胞膜片钳技术记录Ito结果心力衰竭大鼠与假结扎对照组大鼠比较左室舒张末压．心率和动脉血压均明显增加，校正QT间期和心室有效不应期则明显延长，而心室有效不应期的延长与大鼠左室舒张末压呈正相关。心力衰竭组细胞心室肌细胞膜电容与假结扎对照组相比明显增大。而该组心室肌细胞的Ito峰值及密度较假结扎对照组明显降低。两组大鼠。室肌细胞Ito激活、失活和复活动力学特征均无显著差异。结论腹主动脉缩窄大鼠心力衰竭时存在明显电生理失稳态变化，可能与心室肌细胞膜Ito的降低有关。

TGFα与bFGF联结皂草毒素蛋白对增殖平滑肌细胞和内皮细胞的特异性细胞毒作用

目的:为比较生物导向药物转化生长因子-皂草毒素蛋白(TGFα-SAP)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)-SAP对增殖平滑肌细胞特异性细胞毒性作用。方法:用SPDP化学联结的方法合成了导向药物TGFα-SAP和bFGF-SAP,以3H-亮氨酸渗入法观察了TGFα-SAP及bFGF-SAP对平滑肌细胞(SMCs)和内皮细胞(ECs)蛋白质合成的影响,并以MTS法和3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)渗入法比较TGFα-SAP及bFGF-SAP对SMCs和ECs的增殖和DNA合成的抑制作用。结果:10-9mol/L的TGFα-SAP可明显抑制SMCs增殖,SMCs细胞增殖抑制率达到77.5%,而相同浓度bFGF-SAP的抑制率仅46.1%;并且TGFα-SAP也比bFGF-SAP更明显抑制了培养SMCs的蛋白质合成。与空白对照组比较,3H-亮氨酸掺入量降低了47.3%;该浓度的TGFα-SAP和bF-GF-SAP对ECs却未显示出明显的细胞毒性作用。10-9mol/L的TGFα-SAP明显抑制了SMCs的DNA合成,使3H-TdR掺入量较对照组降低了29.5%,但同样浓度的bFGF-SAP仅使3H-TdR掺入量较空白对照组降低了9.86%。在10-7mol/L浓度下的TGFα-SAP未显示出明显对ECs的细胞毒性作用,而bFGF-SAP具有明显降低ECs的3H-TdR掺入量。结论:TGFα-SAP通过表皮生长因子受体介导具有明显增强的细胞毒性作用,其对增殖SMCs的细胞毒性作用较bFGF-SAP更为敏感,而在10-7mol/L浓度下,bFGF-SAP比TGFα-SAP对ECs显示出更明显的细胞毒性作用。本实验为TGFα-SAP在经皮冠脉成形术后再狭窄临床防治中的应用前景提供进一步实验依据。

生物导向药物TGFα-SAP的联结与生物学鉴定

目的观察半毒素Saporin联结导向因子TGFα后细胞毒性作用的改变及其生物学鉴定。方法用SPDP化学联结的方法合成了TGFα-SAP,通过细胞计数观察TGFα-SAP对培养中的增殖平滑肌细胞的细胞毒性作用,并用3H-leucine掺入法进一步探讨了TGFα-SAP对平滑肌细胞的蛋白质合成的影响。结果发现Saporin对于真核细胞的细胞毒性作用很弱,联结TGFα后构建的TGFα-SAP可明显抑制平滑肌细胞的增殖,而过量的TGFα可通过竞争抑制逆转TGFα-SAP对平滑肌细胞3H-TdR掺入量的明显抑制作用。结论细胞毒性药物Saporin联结导向因子TGFα构建的TGFα-SAP通过TGFα的介导已具有较Saporin明显增强的细胞毒性作用。

缬沙坦抑制缺氧时肥大心肌细胞凋亡及Cx43表达下调

目的探讨缬沙坦对缺氧环境下肥大心肌细胞缝隙连接蛋白Cx43表达的影响。方法培养心肌细胞或在诱导肥大后分别缺氧24h,采用免疫荧光方法和Western-blot法分别检测缝隙连接蛋白Cx43总蛋白表达变化,同时观察缬沙坦对缺氧状态下肥大心肌细胞Cx43表达的影响。结果缺氧24h后可致正常心肌细胞Cx43表达下调13%(P<0.01),心肌细胞经血管紧张素Ⅱ诱导48h后可出现肥大,而肥大心肌细胞比正常心肌细胞在缺氧24h后Cx43总蛋白表达显示出更明显的下调(P<0.01),缬沙坦可抑制缺氧状态下肥大心肌细胞的凋亡和Cx43总蛋白表达的下调。结论缺氧可导致心肌细胞Cx43表达下调,而肥大心肌细胞在缺氧时总蛋白下调更为明显,而缬沙坦可部分抑制肥大心肌细胞缺氧时的凋亡和Cx43总蛋白下调,这可能与缬沙坦改善缺氧时肥大心肌的电生理重构和恶性心律失常的机制有关。

莫西沙星对脂多糖诱导A549细胞分泌IL-8和TNF-α的影响

目的观察莫西沙星(Moxifloxacin,MXF)对脂多糖(LPS)诱导A549细胞产生IL-8和TNF-α以及蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法 LPS诱导体外培养A549细胞,加入不同浓度的MXF与其孵育后,观察PKC的活性情况,同时IL-8和TNF-α分泌的含量。结果 MXF能明显抑制LPS诱导的IL-8和TNF-α产生,同时能抑制PKC的活性。结论 MXF可抑制LPS诱导A549细胞产生细胞因子,其效应可能与PKC的抑制有关。