SDC1基因单核苷酸多态性与汉族孕产妇伴有严重特征的子痫前期易感性相关性研究

目的:探讨SDC1基因家族单核苷酸多态性(SNPs)与汉族孕妇伴有严重特征的子痫前期(PE-sf)易感性的相关性。方法:选取2020年5月至2022年4月中山市博爱医院收治的PE-sf孕产妇201例和健康孕产妇171例,利用飞行时间质谱检测系统对SDC1基因的4个SNPs位点(rs1131351、rs11899121、rs2230924和rs11544860)进行基因分型,探讨SDC1的SNPs对其编码产物血清syndecan-1浓度的影响。结果:与对照组相比,PE-sf组的血清syndecan-1水平明显降低,差异有统计学意义(P=0.006)。基因分型成功率为100%,其中rs11544860全部为GG基因型,未见AA、GA基因型,不符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。与对照组相比,PE-sf组rs1131351的等位基因分布差异有统计学意义(χ^(2)=5.342,P=0.021),rs2230924和rs11899121均无差异(χ^(2)=0.025,P=0.873;χ^(2)=0.053,P=0.818)。与对照组相比,PE-sf组rs1131351和rs2230924的基因型分布差异均有统计学意义(χ^(2)=14.581,P=0.001;χ^(2)=6.788,P=0.034),rs11899121则无差异(χ^(2)=0.155,P=0.926)。进行Bonferroni校正后rs1131351的基因型分布差异有统计学意义(P<0.05),rs2230924则无差异(P>0.05)。与CC基因型相比,rs1131351的CG和GG基因型均显著增加PE-sf发生的危险性,OR分别为2.731(1.616~4.617)和2.118(1.171~3.833)。经Spearman相关性检验,发现SDC1基因的rs1131351位点SNPs与血清syndecan-1水平具有相关性(r=-0.352,P=0.022)。与CC、GG基因型组相比,PE-sf患者CG基因型组的血清syndecan-1水平明显降低(均P<0.05)。结论:SDC1基因的SNPs可能与PE-sf易感性有关,CG基因型对血清syndecan-1浓度有一定影响。

SLC基因家族单核苷酸多态性与汉族孕产妇重度子痫前期易感性的关系

目的探讨SLC基因家族单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）与汉族孕产妇重度子痫前期易感性的相关性。方法选取2011年3月至2013年3月确诊的合并重度子痫前期孕产妇125例和健康孕产妇140例为研究对象,利用Mass ARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台（MALDI-TOF-MS）对SLC9A3、SLC4A1和SLCO4C1基因的4个SNPs位点进行基因分型。结果基因分型成功率为98.11%。与对照组相比,重度子痫前期组rs2074107的等位基因分布（χ^2=0.992,P=0.319）和基因型分布（χ^2=0.886,P=0.648）均无显著性差异。与对照组相比,重度子痫前期组rs2857078、rs4957061和rs10066650的等位基因分布（χ~2=7.720,P=0.005;χ^2=19.755,P=0.000;χ^2=15.078,P=0.000）和基因型分布（χ^2=6.608,P=0.037;χ^2=20.116,P=0.000;χ^2=12.026,P=0.002）均具有显著性差异,但进行Bonferroni校正后rs2857078位点的2组间基因型分布无显著性差异（Pc=0.074）,而rs4957061和rs10066650的2组间基因型分布均具有显著性差异（Pc=0.000,Pc=0.008）。与CC基因型相比,rs4957061的TT基因型显著增加重度子痫前期发生的危险性（P=0.001）,OR值（95%可信区间）为3.080（1.615~5.875）。如表3与TT基因型相比,rs10066650的GT和GG基因型均增加重度子痫前期发生的危险性（P=0.033,P=0.003）,OR值分别为1.938（1.050~3.577）和5.814（1.628~20.758）。结论 SLC9A3和SLCO4C1基因的单核苷酸多态性可能与重度子痫前期易感性有关。

pCDNA3.1-MT2A真核表达载体的构建及亚细胞定位

目的:构建pCDNA3.1-MT2A真核表达载体并观察其在293T和SMMC7721细胞株中的定位和表达情况。方法:使用基因合成法合成MT2A基因,在其N端添加Kozak序列及His标签序列,将扩增后的目的基因双酶切连接至pcDNA3.1(+)载体的BamHⅠ和NotⅠ之间。转化DH5α大肠杆菌后,挑取阳性克隆子进行质粒抽提电泳及测序鉴定。将鉴定正确的pCDNA3.1-MT2A质粒采用脂质体法转染293T和SMMC7721细胞株,激光共聚焦显微镜观察其在真核细胞中的表达和定位情况。结果:pCDNA3.1-MT2A重组质粒经酶切电泳及DNA测序证实,目的基因MT2A的序列完全正确,真核表达载体构建成功,激光共聚焦观察发现该重组质粒表达于293T和SMMC7721细胞的胞质中。结论:成功构建pCDNA3.1-MT2A融合基因并进行真核表达,发现MT2A主要定位于293T和SMMC7721细胞的细胞质中。本研究为探讨MT2A在肝癌细胞内的功能奠定了基础。

ORMDL3基因多态性与儿童哮喘发病的关系

目的探讨ORMDL3基因的单核苷酸多态性（SNPs）与汉族儿童哮喘发病的相关性。方法选取儿童哮喘患者168例和同期健康查体者188例为研究对象,利用MassARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台（MALDI-TOF-MS）对ORMDL3基因的7个SNPs位点进行基因分型。结果与对照组相比,哮喘组嗜酸性粒细胞计数（Z=26.581,P=0.000）和IgE明显升高（Z=73.208,P=0.000）,CRP水平差异无统计学意义（Z=2.938,P=0.066）,吸入性过敏原（χ2=44.638,P=0.000）和食物过敏原（χ2=14.347,P=0.000）检出率明显增高。总的基因型分型成功率为99.34%。与对照相比,哮喘组rs4795400的等位基因分布（χ2=4.166,P=0.041）有差异,但基因型分布（χ2=3.732,P=0.155）无明显差异。与对照相比,哮喘组rs2305480和rs3859192的等位基因分布（χ2=5.294,P=0.021;χ2=6.804,P=0.009）有差异,基因型分布（χ2=5.538,P=0.019;χ2=7.618,P=0.022）也均具有显著性差异,但进行Bonferroni校正后两组间基因型分布均无显著性差异（Pc=0.114;Pc=0.132）。与对照相比,哮喘组rs7216389、rs8069176和rs12603332的等位基因分布（χ2=13.800,P=0.000;χ2=13.066,P=0.000;χ2=10.872,P=0.001）均具有显著差异,基因型分布（χ2=12.162,P=0.002;χ2=11.574,P=0.003;χ2=10.500,P=0.005）同样均具有显著性差异,进行Bonferroni校正后两组间仍均具有显著性差异（Pc=0.012;Pc=0.018;Pc=0.030）。与CC基因型相比,rs7216389的TT基因型显著增加哮喘发生的危险性（P=0.003）,OR值（95%可信区间）为3.846（1.488~9.939）。与AA基因型相比,rs8069176的GG基因型显著增加哮喘发生的危险性（P=0.008）,OR值（95%可信区间）为3.453（1.322~9.017）。与TT＋TC基因型相比,rs12603332的CC基因型显著增加哮喘发生的危险性（P=0.001）,OR值（95%可信区间）为2.057（1.316~3.214）。结论 ORMDL3基因的rs7216389、rs8069176和rs12603332位点与汉族儿童哮喘的发病有关。

可溶性髓系细胞触发受体-1在呼吸机相关性肺炎早期诊断中的价值

目的通过Meta分析探讨可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)在呼吸机相关性肺炎(VAP)早期诊断中的价值。方法通过检索PubMed、MEDLINE、Embase、Cochrane、中国知网、万方、维普数据库,收集有关sTREM-1和VAP的文献,用QUADAS-2量表进行文献质量评价,Stata 13.0软件进行Meta分析。结果检索日期截至2019年6月30日,共有12篇文献入选。研究发现VAP组sTREM-1水平明显高于无呼吸机相关性肺炎(no-VAP)组,差异有统计学意义(Z=3.05,P=0.002)。异质性分析提示入选文献存在高度异质性(I2=95.0%,P<0.001),与作者国籍和文献结论有关,而与课题设计、检测方法和诊断金标准无关。共7篇文献入选诊断试验的Meta分析,合并灵敏度为0.82(0.76,0.86),特异度为0.70(0.59,0.79),阳性似然比为2.70(1.90,3.90),阴性似然比为0.26(0.18,0.38),诊断比值比为10(5,21)。受试者工作特征曲线下面积为0.84(0.81~0.87)。结论sTREM-1水平检测可用于VAP的早期诊断,有一定的灵敏度和特异度,但结论可靠性较低。

β2肾上腺素受体基因Arg16Gly位点多态性与华南人群哮喘相关性研究

目的探讨β2肾上腺素受体基因（ADRB2）SNP位点rs1042713即突变位点Arg16Gly的多态性与华南汉族人群支气管哮喘发病的相关性。方法采用病例对照研究,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI-TOF-MS）对rs1042713进行基因分型，对实验结果运用X^2检验和二分类Logistic回归进行统计学相关性分析。结果rs1042713多态位点AA、AG、GG3种基因型在哮喘患者的频率为18．7％、76．0％和5．3％，与对照组（33．8％，44．6％和21．6%）相比具有显著差异（X^2=36．28，P〈O．001）；对年龄和性别进行校正后，发现相对于AA＋GG基因型，携带AG基因型的哮喘发病风险增加（OR=4.37，95％CI：2．64～7．23）。结论华南汉族人群哮喘的发病机制可能与SNP rs1042713位点的单核苷酸多态性有关,杂合子基因型AG为其发病的危险因素。

HSPC238相互作用蛋白RPL5的初步筛选

目的:构建HSPC238诱饵载体,筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。方法:基因合成法合成HSPC238基因,sfi IA和sfi IB双酶切后与pGBKT7诱饵载体连接,获得诱饵质粒pGBKT7-HSPC238,经测序鉴定后与酵母双杂交空质粒pGBKT7共同转化到酵母菌株AH109,在营养缺陷培养基中观察pGBKT7-HSPC238的自激活作用,进一步从人胎肝c DNA文库中筛选与HSPC238相互作用的目标蛋白。结果:诱饵载体pGBKT7-HSPC238构建成功,经表型筛选检测无自激活作用,经酵母双杂交技术结合文献分析,从人胎肝c DNA文库中初步筛选发现核糖体蛋白L5(Ribosomal protein L5,RPL5)可能是HSPC238相互作用的目标蛋白之一。结论:成功构建pGBKT7-HSPC238诱饵质粒载体,且经酵母双杂交技术结合文献分析发现RPL5可能是与HSPC238相互作用的目标蛋白之一。

胰石蛋白与呼吸机相关性肺炎的关系研究

目的探讨血清胰石蛋白(PSP/reg)在呼吸机相关性肺炎(VAP)诊断和疾病评估中的意义。方法收集该院中心ICU从2012年9月至2015年10月行呼吸机治疗患者的临床资料,在上呼吸机时、确诊VAP第1、4、7、14天及停呼吸机时分别留取血标本,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测PSP/reg的浓度,同时记录呼吸机治疗时间,VAP的转归。另选取同期上呼吸机未发生VAP的患者作为对照组。结果与对照组相比,未发生VAP时,VAP组血清PSP/reg浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)。从连续监测来看,VAP组发生VAP后,与上呼吸机时相比,血清PSP/reg浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),且第4天达到最高峰。第7天血清PSP/reg浓度已明显下降,但仍高于第1天,差异有统计学意义(P<0.05)。第14天血清PSP/reg浓度进一步下降,但比上呼吸相时相比仍较高,差异有统计学意义(P<0.05)。共成功脱机38例,与PSP/reg最高峰时(第4天)相比,停用呼吸机时浓度已明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),接近上呼吸机时的浓度,但两者比较差异有统计学意义(P<0.05),且高于对照组脱呼吸机时PSP/reg浓度,差异有统计学意义(P<0.05)。经Spearman分析发现确诊为VAP的第1天,PSP/reg浓度与C反应蛋白(CRP)具有明显相关性(r=0.570,P<0.05),而与白细胞总数(WBC)和降钙素原(PCT)无相关性(P>0.05)。结论 PSP/reg可作为诊断VAP的指标之一,并可能与VAP的严重程度有关。

支气管肺泡灌洗联合大剂量盐酸氨溴索在难治性肺部感染中的应用

目的:探讨支气管肺泡灌洗(BAL)联合大剂量盐酸氨溴索在难治性肺部感染中的应用价值。方法:将73例难治性肺部感染患者随机分为支气管肺泡灌洗联合大剂量盐酸氨溴索为治疗组、单纯行支气管肺泡灌洗为对照组,均在全身应用抗菌药物、营养支持等综合治疗的基础上。结果:治疗组有效率92%明显高于74%,P<0.05;治疗组机械通气时间明显缩短,脱机成功率提高,P<0.05。结论:难治性肺部感染在支气管肺泡灌洗基础上联合大剂量盐酸氨溴索能达到良好的治疗效果,是一种行之有效的治疗方法。

肺泡液可溶性髓系细胞触发受体-1水平对呼吸机相关性肺炎早期诊断价值的Meta分析

目的血清可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)是一种用于区分细菌感染与非细菌感染的生物标志物,但肺泡液中sTREM-1水平在肺部感染中的诊断价值仍不明确.通过对相关文献进行系统评价,探讨肺泡液中sTREM-1水平在呼吸机相关性肺炎(VAP)早期诊断中的价值.方法检索中国知网(CNKI)、万方数据库、维普数据库(VIP)、美国国立医学图书馆数据库(PubMed/Medline)和荷兰医学文摘(Embase)等数据库,截至2019年6月30日发布的有关sTREM-1诊断VAP的文献.采用Cochrane协作网提供的QUADAS-2量表进行文献质量评价.应用RevMan 5.3和Stata 13.0软件完成Meta分析,比较VAP与非VAP患者的sTREM-1水平,再通过诊断试验Meta分析评价sTREM-1对VAP的早期诊断价值,并进行异质性、敏感性及发表偏倚分析.结果最终共有24篇文献入选,QUADAS-2量表评价提示入选文献均具有较低的偏倚和较高的临床适应性.①在对肺泡液中sTREM-1水平进行Meta分析时共入选20篇文献,存在高度异质性(I^2=94.4%,P=0.000),故采用随机效应模型分析,结果显示,与非VAP组相比,VAP组患者肺泡液中sTREM-1水平明显升高,差异有统计学意义〔标准化均数差(SMD)为1.47,95%可信区间(95%CI)为1.00~1.95,Z=6.14,P=0.000〕.通过亚组分析和回归分析未发现异质性来源;敏感性分析提示Meta分析的结果尚稳健可信;Begg漏斗图分析显示纳入文献不存在明显发表偏倚(Z=1.46,P=0.143).②在进行诊断试验的Meta分析时共入选18篇文献,Deek漏斗图显示纳入文献存在发表偏倚(P=0.012).合并的敏感度为0.87(95%CI为0.81~0.91),特异度为0.80(95%CI为0.73~0.86),诊断优势比(DOR)为26(95%CI为13~50);对肺泡液3种不同的标本来源(支气管肺泡灌洗液、气管内抽吸液和呼出气冷凝液)进行亚组分析显示,不同肺泡液中sTREM-1水平对VAP均有一定早期诊断价值.合并DOR的I 2=35.4%,敏感度的I 2=79.46%,特异度的I 2=77.61%,提示入选文献存在异质性;亚组分析显示,异质性与国籍、课题设计、样本来源、样本量和诊断"金标准"有关,但与年龄无关.肺泡液中sTREM-1水平诊断VAP的综合受试者工作特征曲线下面积(AUC)为0.90(95%CI为0.87~0.92).结论肺泡液中sTREM-1水平可用于VAP的早期诊断,有一定敏感度和特异度,但影响因素较多,联合其他生物标志物可能更有诊断价值.

泌尿系感染摩氏摩根菌摩根亚种致感染性休克和多器官损伤1例

摩氏摩根菌是一种条件致病菌,为院内感染的重要致病菌.现报告1例该菌引起感染性休克患者的救治情况如下. 1 病例介绍患者男性,46岁.14年前膀胱镜下取石损伤尿道,后多次行尿道扩张术,每次术后出现畏寒和发热,自行服药可缓解.2d前再次行尿道扩张术,术后出现寒战、高热、尿痛、血尿,尿少有臭味,伴大汗淋漓、全身酸痛,呕吐1次,服头孢类抗菌药物未缓解,急诊入院,测血压84/50 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）,扩容后入院.体温39.5℃,呼吸频率24次/min,血压88/57 mm Hg,全身皮肤无皮疹,浅表淋巴结不大;双肺呼吸音粗,未闻及干湿啰音;心界不大,心率124次/min,律齐,未闻及杂音;腹部无压痛及反跳痛,肝脾未触及,双输尿管无压痛,双肾区无叩击痛.

C3基因单核苷酸多态性与成人哮喘易感性的相关性研究

目的 探讨C23基因的单核苷酸多态性与华南汉族成人支气管哮喘发病的相关性.方法 应用病例对照研究,收集2006年2月至2010年2年南方医院和广东医学院附属医院确诊的汉族成人哮喘患者484例为研究对象,同期健康查体者553名为对照,应用MassARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台（matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS）对C3基因的rs10402876和rs366510位点进行基因分型.结果 在华南汉族人群中rs10402876检测到GG、GC和CC 3种基因型,rs366510检测到GG、GT和TT 3种基因型,分型成功率为98.94%.与对照组相比,哮喘组rs10402876的基因型分布（χ2=0.346,P=0.841）和等位基因分布（χ2=0.101,P=0.751）差异均无统计学意义;而rs366510的基因型分布（χ2=9.759,P=0.008;Bonferroni校正法,P=0.016）和等位基因分布（χ2=5.294,P=0.021;Bonferroni校正法,P=0.042）差异均有统计学意义.与GG＋GT基因型相比,rs366510的TT基因型显著增加哮喘发生的危险性（OR=1.471,95%CI：1.125～1.923）.结论 C3基因rs366510位点单苷酸多态性可能与华南汉族成人哮喘易感性有关.

MD-1基因单核苷酸多态性与华南汉族成人支气管哮喘发病的相关性研究

目的 探讨MD-1基因的单核苷酸多态性与华南汉族成人支气管哮喘（简称哮喘）发病及肺功能的相关性.方法 选取2006年2月至2010年2月南方医院确诊的华南汉族成人哮喘患者332例[男169例,女 163例,平均年龄（44±16）岁]作为病例组,选取同期健康查体者276例[143例,女 133例,平均年龄（45±15）岁]作为对照组,利用MassARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台（MALDI-TOF-MS）对MD-1基因的rs2233128和rs7740529位点进行基因分型,并对其中105例初次确诊哮喘患者的肺功能进行检查.结果 在华南汉族人群中MD-1的rs2233128位点检出 AG和GG两种基因型,rs7740529位点检出CC、CT和TT 3种基因型,分型成功率为94.74%.与对照组比较,病例组rs2233128的基因型分布（x2=0.030,P=0.863）和等位基因分布（x2=0.029,P=0.865）差异均无统计学意义,而rs7740529的基因型分布（x2=8.681,P=0.013）和等位基因分布（x2=8.005,P=0.005）差异均有统计学意义.与TT基因型比较,rs7740529的CC和CC＋CT基因型均能显著增加哮喘发生的危险性,OR值（95%可信区间）分别为2.451（1.299～4.963）和2.172（1.173～4.020）.在初次确诊的105例哮喘患者中,rs7740529的3种不同基因型（CC、CT和TT）患者的FVC占预计值%（F=18.405,P=0.000）和FEV1占预计值%（F=25.700,P=0.000）差异均有统计学意义,与TT基因型[（86±9）%,（88±8）%]相比,CC基因型患者的FVC占预计值%[（65±12）%]和FEV1占预计值%[（64±11）%]下降最明显（均P＜0.05）,但在初诊为哮喘且病情严重程度不同分级患者的rs7740529基因型分布比较,差异无统计学意义（x2=5.017,P=0.081）.结论 MD-1可能是华南汉族成人哮喘的易感基因,rs7740529位点的基因型分布可能与初诊哮喘患者的肺功能改变有关.

中性粒细胞弹性蛋白酶对呼吸机相关性肺炎诊断及转归的评估价值

目的探讨中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）对呼吸机相关性肺炎（VAP）患者诊断与转归的评估价值。方法回顾性分析2012年9月至2015年10月南方医科大学附属中山市博爱医院中心重症加强治疗病房（ICU）机械通气患者的临床资料，根据患者是否发生VAP分为两组，记录患者上机时、诊断VAP时（非VAP患者取上机〉48h至停机前最差值）和停机前血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中NE水平、炎症指标、临床肺部感染评分（CPIS）、机械通气时间及转归情况。采用受试者工作特征曲线（ROC）分析NE对VAP的诊断和预后评估价值。结果最终VAP组入选38例，非VAP组入选40例，两组患者基线资料均衡。VAP组和非VAP组上机时血清及BALF中NE水平均较低且无明显差异[血清NE（μg／L）：67．04（63．00，75．75）比69．OO（63．75，75．00），BALF中NE（μg／L）：96．26（85．26，176．01）比95．26（86．76，107．11），均P〉0．05]。连续监测结果显示，非VAP组机械通气过程中血清及BALF中NE水平无明显变化，而VAP组诊断VAP时血清及BALF中NE水平较上机时明显升高[μg／L：157．00（153．04，165．75）比67．04（63．00，75．75），178．04（153．00，188．25）比96．26（85．26，176．01），均P〈0．05]，VAP临床治愈后准备停机前血清及BALF中NE水平明显下降[μg/L：75．67（64．51，110．55）比157．00（153．04，165．79），95．50（66．56，183．02）比178．04（153．00，188．25），均P〈0．05]。对VAP组诊断VAP时的NE进行四分位数分组，发现血清及BALF中NE水平越高，CPIS评分越高，机械通气时间越长，预后越差（均P〈0．01）。与非VAP组比较，VAP组白细胞计数（WBC）、中性粒细胞比例、C-反应蛋白（CRP）和降钙素原（PCT）均明显升高（均P〈0．01）。VAP患者BALF中NE水平与WBC、中性粒细胞比例、CRP和PCT均呈显著正相关（r值分别为0．507、0．432、0．779、0．519，均P=0．000），其中以与CRP的相关性最高。BALF中NE诊断VAP具有较好的准确性，敏感度为87．4％，特异性为90．6％；血清NE诊断VAP的敏感度为78．6％，特异度为79．2％。结论NE可作为诊断VAP的指标之一，且与VAP的转归有关。