生理学教学中培养学生创新能力的探讨

如何培养具有创新能力的高素质医学人才已成为当前医学本科教学改革的热点问题。针对生理学教学的现状,从教学理念、教学方法、教学内容、教学手段和实验教学等方面,阐述了如何在生理学教学改革中培养学生的创新能力。

生理学双语教学初探

作为一门医学基础课程，生理学教学直接关系到医学生对基础理论知识的掌握以及对后续课程的学习。鉴于英语已成为科学领域的世界通用语言，在医学本科生理学教学中尝试中英文双语教学，探讨了双语教学模式的选择，教材的选用以及结合教学的实践谈谈对双语教学的体会和思考。

虚拟现实技术在生理学教学中的应用

虚拟现实技术是一项新兴的计算机技术,介绍了虚拟现实技术的概念及特征,分析了生理学教学的现状,着重对虚拟现实技术在生理学实践教学中的应用及其优缺点进行讨论和阐述。

人体生理学教学方法初探

人体生理学是一门重要的基础医学课程,其内容枯燥、复杂。作为人体生理学教师需不断探索并综合运用多种教学方法,以激发学生的学习兴趣,提高学生综合分析能力,为学生学好生理学指明便捷有效的途径,从而提高教学效果,为以后其它医学基础和临床课程学习奠定坚实的理论基础。

人工组织神经修复狗坐骨神经缺损后的电生理学检测

目的 :利用电生理学指标评价人工组织神经修复狗坐骨神经缺损后的效果。方法 :以狗作为实验对象用人工组织神经辅加神经再生素、或自体神经桥接坐骨神经 3 0 mm缺损 ;在术后 6个月时 ,采用在体引导坐骨神经干复合动作电位方法及肌电图的检测。结果 :人工组织神经移植和自体神经移植相比再生的坐骨神经干复合动作电位传导速度或肌电图均无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :人工组织神经具有良好的神经再生桥梁作用。

NGD及NRF对大鼠坐骨神经缺损修复的电生理学检测

目的 :观察神经生长液 ( NGD)及神经再生素 ( NRF)修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法 :用生理盐水( NS)、NRF桥接以及 NRF桥接 +口服 NGD修复大鼠坐骨神经缺损 ,术后 12周检测大鼠坐骨神经干动作电位传导速度及肌电图。结果 :行为方面 NGD+ NRF组比 NS组恢复早 ,NS组、NRF组、NRF+ NGD组神经干动作电位传导速度的平均值分别为 5 .72 0 m/ s、16 .5 14 m/ s、2 1.310 m/ s。NS组与 NGD+ NRF组的神经干动作电位传导速度经统计学分析有显著性差异 ( P<0 .0 1)。NGD+ NRF组与 NS组的肌电图比较 ,前者的潜伏期短、峰谷值大、运动神经传导速度快。结论 :NGD+

人体生理学双语教学的体会

在医学飞速发展的时代，医学界的国际间交流与合作日益频繁，如何培养与世界接轨的新型跨世纪人才，是各医学高校普遍重视的问题。培养医学专业学生更好地掌握专业英语已成为医学教育的一项紧迫任务。为此，教育部于2001年出台教高[2001]4号文，明确要求高校要积极开展双语教学。人体生理学是医学专业基础教学中一门很重要的学科，该课程学习效果如何直接关系到培养医学人才的质量。

人工组织神经移植物辅加神经再生素修复大鼠周围神经缺损的实验研究

目的 用人工组织神经移植物辅加神经再生素 (NRF)桥接修复大鼠周围神经缺损。 方法 用壳聚糖套管和聚乙醇酸纤维制成人工组织神经移植物 ,辅加促神经生长的中药有效组分NRF ,桥接大鼠坐骨神经缺损10mm。术后作足迹试验 ;2 4周时对再生神经进行电生理学测试、形态学观察和计量学统计。 结果 术后 2 4周内 ,动物未见炎症及排斥反应。实验组的再生神经在足迹试验、电生理学、形态学及计量学上优于硅胶管桥接组。结论 人工组织神经移植物辅加NRF与周围神经组织具有良好的生物相容性 ;

神经生长液促大鼠坐骨神经再生的实验研究

目的评价一种新型中药-神经生长液对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响。方法SD大鼠50只雌雄各半,采用随机数字表法将其随机分成5组:神经生长液低、中、高剂量组,弥可保组和空白对照组。采用坐骨神经夹伤模型,于术后每5d测定坐骨神经功能指数(sciaticnerveindex,SFI),术后第20天行电生理,组织学检测及超微结构观察。结果术后5d时实验组(-72±9)与对照组(-79±8)间SFI差异无显著性意义(F=1.58,P>0.05),10d时高剂量组(-60±9)和弥可保组(-61±7)优于对照组(-75±7)(F=5.1,P<0.05),15d和20d时低、中、高剂量组及弥可保组均优于对照组(F=6.83和9.92,P<0.05)。坐骨神经干动作电位传导速度,小腿三头肌最大收缩力检测,及脊髓前角运动神经元记数、再生有髓纤维数、肌细胞截面积等指标神经生长液低、中、高剂量组及弥可保组均优于空白对照组(F=26.29,51.35,7.86,37.38,11.11,P<0.05)。超微结构观察实验组有髓神经纤维的髓鞘形态、厚度、成熟度均优于对照组,变性纤维的数目少于对照组。结论神经生长液能促进周围神经再生及功能的恢复。

去甲肾上腺素对T淋巴细胞增殖的影响

本实验研究了不同浓度和不同作用时间的去甲肾上腺素（ＮＡ）对大鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖的影响，并探讨α和β受体在此影响中的作用。结果表明，１０￣（－８）－－１０￣（－５）ｍｏｌ／ＬＮＡ可显著抑制由刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）诱导的Ｔ细胞增殖反应，其中１０￣（－７）ｍｏｌ／ＬＮＡ的抑制作用最强。ＮＡ与已被ＣｏｎＡ刺激ｌｈ的Ｔ细胞作用后，或者ＮＡ与脾细胞作用１ｈ后被洗去，Ｔ细胞的增殖仍受到抑制，但是ＮＡ不能抑制已被Ｃｏｎ Ａ刺激６ｈ的Ｔ细胞的增殖。α受体拮抗剂酚妥拉明（Ｐｈｅｎ，１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ）和β受体拮抗剂心得安（Ｐｒｏｐ，１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ）均可完全阻断１０￣（－８）和１０￣（－７）ｍｏｌ／ＬＮＡ的免疫抑制作用。结果提示，ＮＡ具有非浓度依赖性的细胞免疫抑制作用，此作用可能发生于Ｔ细胞激活前或激活早期，并可能通过α和β受体介导。

去甲肾上腺素对大鼠体外抗体生成的影响

目的观察不同浓度去甲肾上腺素 ( NA,10 - 1 0～ 10 - 6 m ol/ L)对大鼠体外抗体生成的影响 ,并初步探讨其作用机制。方法在体外用绵羊红细胞 ( SRBC)刺激大鼠肠系膜淋巴结 B细胞转化成抗体形成细胞 ( AFC) ,然后检测其抗体生成量。结果 110 - 1 0、10 - 9、10 - 8和 10 - 7mol/ L NA都能显著抑制体外抗体生成 ,其中 10 - 8mol/ L NA的作用最强。2 β受体激动剂异丙基肾上腺素亦能明显减弱体外抗体生成。3 α受体拮抗剂酚妥拉明和 β受体拮抗剂心得安不能单独阻断 NA抑制体外抗体生成的作用 ,而两者共同作用时 ,能完全阻断 NA的作用。4NA仍能抑制先用 SRBC刺激 2 4h或 48h后的淋巴细胞的抗体生成 ,但不能抑制用 SRBC刺激 72 h或 96 h后的淋巴细胞的抗体生成。结论 NA可非浓度依赖性地抑制大鼠的体外抗体生成 ,此作用可能由淋巴细胞上的 α和 β受体共同介导 ,且

白介素-6保护小脑颗粒神经元抵抗NMDA的神经毒性作用

近来研究发现,细胞因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)不仪是重要的免疫调节因子,而且也是重要的神经调节因子。中枢神经系统中IL-6的作用是复杂的,尤其是对脑损伤时IL-6所发挥的作用及其作用机制尚不十分清楚。为此,我们利用N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)处理小脑颗粒神经元引起急性损伤的细胞模型,探讨IL-6对神经元损伤的保护及其作用机制。取出生后8 d幼鼠的小脑,进行小脑颗粒神经元培养。将IL-6(5或10 ng/mL)加入到小脑颗粒神经元的培养液中孵育8 d,然后用NMDA(100μmol／L)刺激小脑颗粒神经元30 min以造成神经元损伤。用噻唑兰(methyl-thiazole tetrazolium,MTT)比色法检测神经元的活性;用末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法检测神经元的凋亡;用激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)观察神经元内游离Ca2+浓度的动态变化。用抗gp130单克隆抗体(75 ng／mL)抑制IL-6的活性,然后观察IL-6抗NMDA神经毒性作用的变化;并利用Western blot法检测IL-6对小脑颗粒神经元表达IL-6的细胞内信号转导蛋白——信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)和细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase 1／2,ERK1／2)磷酸化水平的影响。NMDA刺激未经IL-6处理的小脑颗粒神经元,导致神经元活性降低、神经元凋亡增加和神经元内Ca2+超载。NMDA刺激经IL-6慢性预处理的小脑颗粒神经元,其损伤程度与未经IL-6处理的神经元相比明显减轻,包括神经元活性明显增强、神经元凋亡显著减少和神经元内Ca2+超载减轻。抗gp130抗体可阻断IL-6减轻NMDA激发的神经元内Ca2+超载的作用;经IL-6慢性处理的小脑颗粒神经元,其细胞内STAT3和ERK1／2的磷酸化水平显著增加。结果表明,IL-6能保护神经元抵抗由NMDA诱导的兴奋性神经毒性,此神经保护机制与IL-6减轻神经元内Ca2+超载密切相关,而且可能通过激活神经元内IL-6的信号转导路径调节细胞内的基因表达而实现。

应激抑制淋巴细胞转化的时间效应

本研究使用束缚方法使大鼠接受应激刺激， 然后分别取大鼠应激３ 、６ 、１２、１８ ｈ 和解除束缚后１２ 、２４ 、４８ 、７２ 、９６ ｈ 的淋巴结、脾脏提取物和血清， 与刀豆素Ａ 同时加入正常大鼠肠系膜淋巴结细胞悬液中孵育７２ ｈ 后用噻唑蓝（ＭＴＴ） 比色分析法检测肠系膜淋巴结细胞的转化（ 以光密度ＯＤ 值表示） ， 来观察应激抑制淋巴细胞转化作用的出现和消失过程。结果如下：（１） 应激３ 和６ ｈ 大鼠的淋巴结、脾脏提取物和血清对淋巴细胞的转化都没有明显的影响；（２）应激１２ ｈ， 大鼠的淋巴结、脾脏提取物和血清都出现对淋巴细胞转化的明显抑制作用， 应激１８ｈ 的作用更强；（３） 淋巴结和脾脏提取物对淋巴细胞转化的抑制作用一直持续至束缚解除后９６ ｈ 仍然较强， 但血清对淋巴细胞转化的抑制作用在束缚解除后逐渐减弱， 至９６ ｈ ， 作用基本消失。上述结果说明， 大鼠束缚应激１２ ｈ 以上， 其淋巴结、脾脏和血清同步出现对淋巴细胞转化的抑制作用； 这种抑制作用即使在束缚解除后仍能存在较长时间； 血清的抑制作用时间短于淋巴结和脾脏的抑制作用时间。结果提示， 束缚应激可引起淋巴组织产生一种能抑制免疫功能的应激免疫抑制蛋白（ＩＳＰＳ） ，

白介素-6对NMDA诱导的小脑神经元放电活动的抑制作用及其机制

目的:观察白介素-6(IL-6)对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)激发的神经元放电活动的影响及其可能的作用机制。方法:用含IL-6、NMDA和JAK抑制剂AG490的人工脑脊液(ACSF)灌流小脑脑片,利用离体脑片神经元单位放电细胞外记录技术,记录药物对小脑间位核神经元放电的影响。用Western blot法测定间位核神经元NMDA受体亚单位1(NR1)的磷酸化水平。结果:单独用12.5μmol/L和25μmol/L NMDA灌流,神经元放电频率均较基础放电频率增加;用不同浓度IL-6(50,100,200ng/ml)联合NMDA作用后,神经元的放电频率出现浓度依赖性地降低;AG490可部分阻断IL-6对NMDA兴奋神经元放电的抑制作用。与单独NMDA处理组比较,用IL-6联合NMDA处理神经元后,神经元的NR1磷酸化水平出现浓度依赖性地降低。AG490可阻断IL-6所致的神经元NR1磷酸化水平的降低。结论:IL-6可抑制NMDA激发的小脑间位核神经元的放电兴奋活动;并同时下调神经元的NR1磷酸化水平。

乙酰胆碱对大鼠体外抗体生成的影响

目的：观察不同浓度乙酰胆碱（ＡＣｈ，１０－１０～１０－５ｍｏｌ／Ｌ）对大鼠体外抗体生成的影响，并初步探讨其作用机制，从细胞水平了解乙酰胆碱与免疫功能之间的关系。方法：用体外抗体生成的检测方法，用绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）刺激大鼠肠系膜淋巴结Ｂ细胞转化成抗体形成细胞（ＡＦＣ），然后检测其抗体生成量。结果：①１０－１０～１０－７ｍｏｌ／ＬＡＣｈ能显著抑制体外抗体生成，其中１０－８和１０－７ｍｏｌ／ＬＡＣｈ的作用较强，而１０－６和１０－５ｍｏｌ／ＬＡＣｈ无明显的抑制作用；②Ｍ型胆碱能受体激动剂毛果芸香碱（１０－８和１０－７ｍｏｌ／Ｌ）能明显减弱体外抗体生成，而Ｎ型受体激动剂烟碱（１０－８和１０－７ｍｏｌ／Ｌ）没有显著的减弱作用，Ｍ型受体拮抗剂阿托品（１０－７和１０－６ｍｏｌ／Ｌ）可完全阻断ＡＣｈ抑制体外抗体生成的作用；③ＡＣｈ分别在Ｂ细胞用ＳＲＢＣ刺激后３～４８ｈ中的６个不同时间与淋巴细胞作用，其抗体生成仍然是减少的。结论：ＡＣｈ可非浓度依赖性地抑制大鼠的体外抗体生成；此作用可能由Ｂ细胞上的Ｍ型胆碱能受体介导；且ＡＣｈ可能主要影响Ｂ细胞转化的后期过程。

白细胞介素-6受体在大鼠小脑间位核中的表达

我们以往的研究表明小脑皮层颗粒细胞表达白细胞介素-6受体(interleukin-6 receptor,IL-6R),该受体介导了白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的神经保护作用。然而,大鼠小脑核团是否也表达IL-6R目前尚不清楚。为此,本研究应用RT-PCR、Western blot和免疫组织化学方法分别在基因、蛋白和细胞水平检测IL-6R在大鼠小脑间位核的表达。结果显示:(1)在小脑间位核PCR扩增产物的凝胶电泳图上,在365 bp位置可见一清晰的条带,与IL-6R mRNA预计扩增片断的长度一致;(2)在West-ern blot实验体系中,IL-6R免疫反应阳性条带出现在分子量为80 kD处;(3)免疫组织化学结果显示,小脑间位核中出现大量IL-6R免疫反应阳性细胞。以上结果表明:小脑间位核细胞在mRNA和蛋白水平均表达IL-6R,提示IL-6在小脑间位核内可能具有重要作用。

生长激素诱导心肌细胞外信号调节酶激活及其上游调控

目的和方法：用生长激素（ＧＨ）刺激培养的新生大鼠心肌细胞，用含ＭＢＰ凝胶分离法测定细胞外信号调节酶（ＥＲＫｓ）活性，用ＷｈａｔｍａｎＰａｐｅｒＦｉｌｔｅｒ法测定Ｒａｆ－１活性，观察ＧＨ是否激活心肌细胞Ｒａｆ－１－ＥＲＫ级联反应。观察负显突变Ｒａｓ质粒（Ｄ．Ｎ．Ｒａｓ）与ＨＡ－ＥＲＫ２质粒复合转染或有关抑制剂对ＧＨ诱导ＥＲＫ激活的影响。结果：ＧＨ以时间和浓度依赖性方式激活心肌细胞ＥＲＫ１和ＥＲＫ２。ＥＲＫ上游调节酶Ｒａｆ－１活性也升高。过度表达Ｄ．Ｎ．Ｒａｓ明显抑制ＧＨ诱导的心肌细胞ＨＡ－ＥＲＫ２激活。Ｒａｓ特导性抑制剂ｍａｎｕｍｙｃｉｎ也显著阻断ＧＨ诱导的心肌细胞ＥＲＫ激活。而分别用ＴＰＡ和ＣａｌｐｈｏｓｔｉｎＣ耗竭和抑制心肌细胞ＰＫＣ，均未阻断ＧＨ对ＥＲＫ的激活作用。结论：ＧＨ激活心肌细胞的Ｒａｆ－１－ＥＲＫ级联反应，这种激活依赖上游Ｒａｓ。

免疫应答期间大鼠脑内乙酰胆碱酯酶活性的变化

用绵羊红细胞（ＳＲＢｃ）免疫大鼠，在免疫后第３天至第６天，使用光电比色法检测大鼠海马、下丘脑、丘脑、中脑和脑桥内乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活性的变化。结果表明，海马和下丘脑中ＡＣｈＥ活性在免疫后第３天至第６天均显著低于对照组；而丘脑、中脑和脑侨内ＡＣｈＥ活性与对照组比较均无明显差异。由此提示：在体液免疫应答期间，海马和下丘脑中ＡｃｈＥ活性降低，亦即以上两脑区中乙酰胆碱（ＡＣｈ）含量可能增加。我们以往的实验说明，中枢ＡＣｈ可调节体液免疫应答。综合两者结果，可以推测在中枢ＡＣｈ与免疫之间存在着相互作用。

小脑间位核对淋巴细胞功能的调节作用

目的:研究小脑深部核团之一间位核对淋巴细胞功能的调节作用,以拓宽对小脑功能的认识进而增加神经免疫学的知识。方法:在大鼠双侧小脑间位核内注射海人酸(KA)以损毁间位核内神经元的胞体,并设对照组,于小脑间位核内注入等量生理盐水。在手术后的第8、16、32d分别用血细胞计数法检测动物外周血中淋巴细胞的数量;用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测动物肠系膜淋巴结细胞对刀豆蛋白A(ConA)刺激的增殖反应;用ELISA法检测动物血清中抗绵羊红细胞(SRBC)特异性IgM抗体的生成能力;用流式细胞术测定脾脏自然杀伤(NK)细胞的活性。结果:小脑间位核损毁后的第8、16、32d,动物外周血中淋巴细胞数都明显低于损毁手术前的淋巴细胞数,也显著低于生理盐水对照组相应时间段的淋巴细胞数。在小脑间位核注射KA后的第8、16、32d,动物的肠系膜淋巴结细胞由ConA诱导的增殖反应、血清中特异性抗SRBCIgM抗体的生成能力和脾脏NK细胞杀伤靶细胞YAC-1的活性均明显低于生理盐水对照组,但比较损毁后不同时间段的T、B和NK细胞功能的变化,没有发现显著的差异。结论:小脑双侧间位核损毁可导致总淋巴细胞数以及T、B和NK细胞功能均发生不可逆的降低,充分说明小脑间位核可调节淋巴细胞的功能,并提示在正常体内,小脑间位核对淋巴细胞功能具有增强效应。