美托洛尔对腹主动脉缩窄大鼠心肌CalpainⅠ、CaN信号通路的影响

目的以钙调神经磷酸酶(Ca N)和钙蛋白酶Ⅰ(CalpainⅠ)为研究对象,探讨美托洛尔预防腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚的机制。方法 30只SD大鼠建立腹主动脉缩窄模型,造模成功者随机分为假手术组(n=10)、腹主动脉缩窄手术组(n=9)和美托洛尔组(n=9,在腹主动脉缩窄基础上每日予美托洛尔干预)。术后4周检测大鼠血压[收缩压(SBP)/舒张压(DBP)]及心肌肥厚程度变化[左心室质量/体质量的比值(LVW/BW表示)],逆转录PCR(RT-PCR)法检测Ca N m RNA表达,Western blot法检测Ca N和CalpainⅠ蛋白表达。检测各组的Ca N酶活性。结果手术组大鼠SBP、DBP、LVW/BW,心肌Ca N m RNA、Ca N蛋白、Ca N活性及CalpainⅠ蛋白表达均较假手术组增高(P<0.05)。美托洛尔组大鼠SBP、DBP虽较手术组略下降,但差异无统计学意义(P>0.05),且仍高于假手术组(P<0.05)。与手术组相比,美托洛尔组大鼠LVW/BW、心肌中Ca N m RNA、蛋白表达和酶活性,CalpainⅠ蛋白显著下降(P<0.05),与假手术组差异均无统计学意义。结论美托洛尔可通过抑制CalpainⅠ,调控Ca N信号通路,从而预防压力超负荷大鼠心肌肥厚的发生。

钙调神经磷酸酶在cTnI基因Asp128Tyr突变致心肌肥大中的作用

目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)在心肌钙蛋白I(cTnI)基因第128位天冬氨酸→酪氨酸(Asp128Tyr)突变致心肌肥大中的作用。方法:乳鼠心肌细胞,以心钠素(ANF)、脑钠肽(BNP)mRNA表达作为心肌肥大指标,观察含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒转染对心肌细胞的作用,并观察CaN抑制剂环孢菌素A(CsA)或FK506对突变基因转染的影响。Real-time PCR检测ANF、BNP和CaN mRNA表达变化,同时行CaN活性测定。结果:转染含cTnI Asp128Tyr突变基因腺病毒的心肌细胞增大,胞内ANF和BNP的mRNA表达较空白对照组、不含任何目的基因的阴性对照腺病毒转染组和转染含野生型cTnI基因的腺病毒组增高(P<0.05)。与含野生型cTnI基因的腺病毒组相比,转染含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒组在ANF和BNP mRNA表达升高的同时存在CaN活性升高和CaN mRNA表达上调(P<0.05)。转染含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒并用CsA或FK506干预后,心肌细胞缩小,胞内ANF和BNP mRNA表达量较单纯转染含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒组降低(P<0.05),同时心肌细胞内CaN活性显著下降(P<0.05),CaN mRNA表达下调(P<0.05)。结论:cTnI Asp128Tyr突变可引起心肌细胞肥大;CaN信号通路参与了cTnI Asp128Tyr突变致心肌肥大过程的调控。

Dyrk1A经ASF调控CaMKⅡδ可变剪接在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用

目的:探讨双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(Dyrk1A)经可变剪接因子(ASF)对钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱδ(CaMKⅡδ)可变剪接的调控在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用。方法:制备两肾一夹肾血管性高血压大鼠模型,给予Dyrk1A抑制剂表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和哈尔碱(harmine)干预,观察大鼠血压及心肌肥厚程度变化,逆转录-多聚酶链反应法检测CaMKⅡδ可变剪接的改变,免疫印迹法检测大鼠心肌Dyrk1A和ASF蛋白质表达的变化。结果:两肾一夹术后8周,与假手术组相比,手术组大鼠血压显著升高(P<0.05),大鼠左室重、左室重/体重比值及心肌细胞面积均增高(P<0.05),同时该组大鼠心肌中Dyrk1A蛋白表达增加,ASF蛋白表达下降(P<0.05),CaMKⅡδ亚型可变剪接表现为CaMKⅡδA、δB mRNA表达升高,δC mRNA表达降低(P<0.05);与手术组相比,EGCG和哈尔碱组大鼠左室重、左室重/体重比值和心肌细胞面积下降,同时大鼠心肌中Dyrk1A蛋白表达降低,ASF蛋白表达上调,CaMKⅡδ亚型可变剪接逆转(均P<0.05)。结论:Dyrk1A可通过ASF调控CaMKⅡδ的可变剪接,从而参与肾血管性高血压大鼠心肌肥厚的发生。

Dyrk1A-ASF-CaMKⅡδ信号通路在EGCG预防腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚中的作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚的影响及可能机制。方法 30只SD大鼠随机均分为腹主动脉缩窄组(A组)、腹主动脉缩窄+EGCG组(B组)和假手术组(C组)。4周后,计算左室重量/体重(LVW/BW)比值以判断大鼠心肌肥厚程度,Western blot法检测双特异性酪氨酸磷酸化调控激酶1A(Dyrk1A)和可变剪接因子(ASF)蛋白表达,RT-PCR法检测钙调素依赖蛋白激酶Ⅱδ(CaMKⅡδ)mRNA表达。结果与C组相比,A组大鼠LVW/BW升高,心肌中Dyrk1A蛋白及CaMKⅡδA、B亚型mRNA表达增加,ASF蛋白及CaMKⅡδC亚型mRNA表达下降(P<0.05);而B组能明显逆转A组上述指标的变化(P<0.05)。结论 EGCG可通过调控Dyrk1A-ASF-CaMKⅡδ可变剪接的信号通路预防腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚的发生。

β1肾上腺素能受体基因多态性对高血压病患者左心室肥厚的影响

目的探讨β1肾上腺素能受体（β1-AR）常见基因多态性对高血压病患者左心室肥厚的影响。方法高血压病患者114例分为合并左心室肥厚（EH-LVH组,50例）和不合并左心室肥厚者（EH组,64例）两组,对照组为同期正常体检者54例。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测β1-AR Gly389Arg和Ser49Gly位点的单核苷酸基因多态性。结果EH-LVH组患者β1-AR Arg389Arg基因型比例高于EH组和对照组（86.0%vs.65.6%和51.9%）（P〈0.05）;EH-LVH组β1-AR Arg389等位基因频率高于EH组和对照组（90.0%vs.78.1%和71.2%）（P〈0.05）。三组β1-AR Ser49Gly基因型和等位基因频率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论携带β1-AR Arg389等位基因的高血压病患者更易出现左心室肥厚。