经济新常态下基于O2O理论研究吉林省林蛙产品营销

中国林蛙是世界上唯一集药用、滋补保健、美容和食用于一体的名贵蛙种,产业和市场潜力巨大。林蛙这个产业属于吉林省内得特色资源产业,很大程度上推动了省内"天然林保护"和"生态省建设"的绿色产业。林蛙具有营养、保健和美容的价值,但是销售状况不理想。目前吉林省市场上林蛙产品种类稀少,深加工出来的产品更是少之又少,本文提出在经济新常态下基于O2O运作机制的林蛙产品深加工及网络营销的新方案,从而为地方经济的发展提供驱动力。

隐性知识共享视角下提升大学生创业能力的研究

知识经济下中国的高等教育已经由过去的小众型教育转向大众型教育,更多的学生步入公办及民办的高等院校享受着大学教育,然而随之而来的高校毕业生就业难问题已经成为了现代社会的关注热点,同时也成为了高等教育改革的瓶颈。本文提出提升大学生的创业能力是解决此问题的一个途径,并讨论如何通过隐性知识共享的途径提升高校课程设置的实用性及科学性。

知识转移模型下大学生创业教育的研究

在国家倡导全民创业的大环境下,如何提升大学生的创业素质教育成为了教育界的讨论热点。本文运用了知识转移模型本质特征,对中、美的创业教育进行了比较,对于课程设置等方面进行了分析,从而提出科学的设置实践课程体系,能够激发学生的创业意识。

BADH/pepB双价基因无选择标记表达载体转化苜蓿的初步研究

选用公农1号紫花苜蓿，以5～7d苗龄的无菌子叶为外植体，通过农杆菌介导法将含有甜菜碱醛脱氢酶（BADH）和酸性蛋白酶（pepB）双价基因的无选择标记表达载体导入苜蓿子叶中，并用含有Na2CO3和NaHCO3碱性盐溶液的培养基进行筛选，得到抗盐碱转化植株。碱性盐浓度48mmol／L宜于子叶愈伤诱导，有利于转化植株的获得。对转化植株进行PCR检测，初步证明目的基因序列已经整合到苜蓿基因组中。移栽成活的13棵碱性盐抗性植株经PCR检测有3棵植株呈阳性。

大豆根际溶无机磷细菌Klebsiella sp.wj6的分离鉴定与溶磷特性分析

[目的]为了明确黑土种植的大豆根际溶磷菌的种类及不同溶磷菌溶无机磷的特性,并有效利用溶磷菌,增加黑土的可持续利用能力。[方法]以NBRIP为分离培养基从大豆根际土壤中分离到1株溶磷菌(命名为wj6),采用Vitek 2自动分析系统和16S rDNA方法对其进行鉴定;以NBRIP分离培养基为基础,利用L25(53)正交设计试验,从碳源、氮源及pH值3个方面对菌株wj6溶磷培养基进行优化;利用优化后的NBRIP培养基测定wj6溶解Ca3(PO4)2、FePO4和AlPO4的特点以及溶磷过程中磷酸酶活性和葡萄糖脱氢酶活性。[结果]经Vitek 2自动分析系统和16S rDNA方法鉴定菌株wj6为Klebsiella sp.。菌株wj6以葡萄糖和蛋白胨为碳源和氮源,pH值为8时溶磷量最高;对Ca3(PO4)2、FePO4、AlPO4均有较强的溶解能力,最高溶磷量分别为409.28、60.59和32.90μg·m L-1。菌株wj6在溶解FePO4和AlPO4时受环境pH值的影响较大,当接种到pH值为8的溶磷培养基中,能溶解FePO4和AlPO4,而在培养基原液(pH3)中不具有溶磷能力;以Ca3(PO4)2为唯一磷源,在溶磷过程中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和葡萄糖脱氢酶活性先增加后减小,36 h内葡萄糖脱氢酶活性较大,与其他时间内酶活差异显著。[结论]从大豆根际分离到的溶磷菌Klebsiella sp.wj6在不同难溶性磷酸盐中溶磷能力差异较大,且溶磷受环境pH值的影响。磷酸酶和葡萄糖脱氢酶在溶磷过程中起重要作用。

鹅细小病毒研究进展

小鹅瘟是由鹅细小病毒引起的一种急性、亚急性烈性传染病,是目前危害养鹅业的重要传染病之一。近年来关于鹅细小病毒的研究又有了新的发展和新的观点,作者从鹅细小病毒分子生物学、检测方法、致病机理和抗原位点的定位等方面进行了阐述。

外源溶磷菌对不同土壤条件下大豆生长特性的影响

为了明确溶磷菌在多种土壤中的应用效果,探讨了两株溶磷菌对黑土及盐碱土种植大豆的促生效应。采用盆栽试验分析了不同处理对大豆光合作用、渗透调节物质含量、生物量、氮磷吸收及产量的影响。结果表明:加菌处理可增加植株Pn,显著降低R6、R8两时期叶片可溶性蛋白、可溶性糖及游离氨基酸含量,增加R2~R8时期大豆株高和根干重,混合土壤中加菌处理也可提高植株地上部分氮、磷及植株全磷、全氮含量。添加wj1和混合菌处理的植株干重优于添加wj3的处理。黑土加混合菌可显著提高大豆R2期叶片WUE,增加V3、R2和R8这3个时期大豆地上、地下部分氮、磷及植株全氮、全磷的含量。黑土加wj1与混合土壤加菌处理的大豆株荚数、总粒数、单株粒重及百粒重均高于未加菌处理。添加外源溶磷菌,对黑土及盐碱土栽培大豆均有不同程度的促生效果,能明显增强大豆在混合盐碱土壤中的适应性,增加植株生物量、氮磷吸收量和产量,且混合菌处理对大豆的促生效应优于wj1及wj3单一菌株处理。

重组人胶原蛋白肽在大肠杆菌中的高效表达

目的:构建含有胶原蛋白基因的原核表达载体pET32a-CP6,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行高效表达,为获得大量可溶的胶原蛋白肽提供可靠依据。方法:将重组表达载体pET32a-CP6转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG为诱导剂,对温度、接种量、诱导时机、IPTG诱导浓度等各种发酵参数进行优化,筛选高效表达的发酵条件,并通过Ni-NTA亲和层析进行纯化分析。结果:菌株在37℃、接种量为2%、摇瓶培养约2.5h后,加入终浓度为0.5mmol.L-1的IPTG,37℃诱导5h,收获的蛋白产量最高为31.52mg.L-1,Westernblotting分析该表达产物与人COL6A2单克隆抗体有特异结合能力。结论:优化工程菌高效表达重组人胶原蛋白,纯化重组蛋白。

不同施氮水平下3种类型粳稻光合特性及干物质积累分析

【目的】阐明吉林省主推粳稻品种在不同氮水平下光合特性及干物质积累的差异,为提高稻田氮肥利用率提供依据。【方法】采用大田试验,在不施氮(CK)、1N(纯氮70kg/hm2)、2N(纯氮140kg/hm2)和3N(纯氮210kg/hm2)4种施氮水平下,研究3个吉林省主推水稻品种(吉农大505,吉农大603,吉农大809)灌浆期农艺性状、光合特性和干物质积累特性及产量的变化。【结果】随施氮水平的增加,灌浆期株高、分蘖数和叶面积指数均显著增大。吉农大505在2N条件下剑叶和倒三叶净光合速率最大,吉农大603在3N条件下倒三叶净光合速率较高,吉农大809功能叶净光合速率受施氮水平影响不明显,3个品种净光合速率的差异可能是由于不同氮水平对不同品种冠层结构的影响导致叶片表观叶肉导度不同而引起的。吉农大603和吉农大809茎鞘、叶和穗部的干物质积累量均呈现随施氮水平的增加而增加的趋势,吉农大505茎鞘的干物质积累量在2N水平达到最高值。吉农大603在3N水平产量最高,其他2个品种在2N水平下产量最高,这与对应氮水平条件下各品种灌浆期功能叶片净光合速率、高效叶面积有关。产量与茎鞘、穗及地上部干物质积累量显著或极显著正相关。【结论】不同类型粳稻品种适宜施氮量存在差异,吉农大505和吉农大809相对耐低氮,而吉农大603适宜在高氮下栽培。

氮肥施用量对嵌合体‘金旗’玉簪叶色的影响

以嵌合体花叶玉簪代表品种‘金旗’为试验材料,研究了4个水平的氮肥处理(盆栽土尿素用量0,1,2,3g/kg)对其不同叶色部位叶色值、叶绿素含量、全氮含量、氮代谢关键酶活性以及叶绿体超微结构的影响。研究结果表明,氮肥主要影响‘金旗’玉簪叶片黄色部位的叶色变化,0和1 g/kg氮肥处理能够维持其花叶性状,叶绿素、全氮含量以及氮代谢关键酶活性等指标无显著变化,叶绿体结构发育不完全,缺乏基粒堆积;2和3 g/kg氮肥处理导致叶片黄色部位转绿,与0和1 g/kg氮肥处理下各指标相比,叶绿素、全氮含量显著提高,谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸合成酶(GOGAT)活性显著上升,叶绿体超微结构发育完全,并且出现大量类囊体片层结构。

梅花鹿鹿角脱盘总肽的分离纯化及其抗肿瘤活性研究

目的分离纯化梅花鹿鹿角脱盘总肽,以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘总肽的抗肿瘤活性。方法采用酸提醇沉、真空旋转蒸发及冷冻干燥提取鹿角脱盘总肽,再经Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定总肽的蛋白质浓度,SDS-PAGE电泳分析总肽中的蛋白质,MTT法和流式细胞仪检测鹿角脱盘总肽对小鼠乳腺癌细胞系MA782增殖的影响和细胞周期的变化。结果分离纯化出鹿角脱盘总肽粗提物,其蛋白质含量为91.800%;SDS-PAGE分析显示,鹿角脱盘总肽中主要含有11 kDa,18 kDa,40 kDa,64 kDa和80 kDa 5种多肽,总肽对小鼠乳腺癌细胞的增殖具有明显抑制作用,细胞周期各期细胞比例变化明显,当总肽浓度为30 mg/L时,作用72 h后细胞抑制率最高为69.200%,G0/G1期细胞百分比为81.621%,S期细胞百分比为8.983%。结论鹿角脱盘总肽对乳腺癌细胞具有抑制作用,为深入研究鹿角脱盘的抗肿瘤活性提供了实验依据。

超级稻吉粳88再生体系的建立

以超级稻吉粳88成熟胚作为外植体,通过对基本培养基、激素组合和干燥处理时间的筛选优化试验,以建立超级稻吉粳88的再生体系。结果表明,以NMB作为基本培养基,2,4-D2.0mg/L、NAA0.1mg/L、KT0.2mg/L和蔗糖40g/L组合条件下,能够诱导出质量较好的愈伤组织,诱导率在80%以上;采用滤纸干燥法对愈伤组织进行干燥处理48h,可使愈伤组织分化率和成苗率明显提高,分化率可达95.0%,成苗率可达20.4%。

大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达

为使大豆锰超氧化物歧化酶(Mn superoxide dismutase,Mn SOD)在乳酸乳球菌中高效表达,将克隆的Mn SOD基因开放阅读框序列分别重组到质粒p NZ8149和经改造的质粒p NZS上,表达载体p NZ-SOD和分泌表达载体p NZS-SOD,将两者分别以电穿孔法转化乳酸乳球菌L.lactis NZ3900,经Elliker琼脂板筛选、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、酶切鉴定正确后,获得的两重组菌株加入Nisin进行诱导表达,对L.lactis NZ3900/p NZ-SOD和L.lactis NZ3900/p NZS-SOD的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和酶活性对比分析。结果显示:L.lactis NZ3900/p NZS-SOD菌株表达SOD总活性约是L.lactis NZ3900/p NZ-SOD菌株的1.6倍,是L.lactis NZ3900/p NZ8149的13.5倍,且可将表达的约2/3的SOD分泌到胞外,表明经改造的乳酸菌分泌表达系统L.lactis NZ3900/p NZS能够分泌表达SOD,并增强SOD的表达。

罗布麻叶总黄酮提取物对小鼠的抗抑郁作用的研究

目的对传统中药罗布麻进行抗抑郁活性评价,并对其作用机制进行研究。方法采用经典抗抑郁评价模型小鼠强迫游泳实验对罗布麻叶总黄酮进行抗抑郁活性评价,在此基础上,应用皮质酮损伤PC12细胞模型,采用MTT法、LDH检测法观察罗布麻提取物对皮质酮损伤的PC12细胞是否具有神经保护作用。结果在小鼠强迫游泳实验中,罗布麻提取物100,50,26 mg/kg(i.g.)连续给药10 d后,能显著缩短小鼠的强迫游泳不动时间(分别为P<0.001,P<0.05,P<0.01);同时罗布麻叶总黄酮提取物对皮质酮损伤的PC12细胞具有神经保护作用。结论罗布麻叶总黄酮具有抗抑郁作用,其机理可能与神经细胞的保护作用有关。

桔皮黄色素提取方法的研究

以桔子皮为原料,对桔皮黄色素浸提剂进行了筛选,并从浸提温度、pH和浸提液浓度等方面,对桔皮黄色素提取条件进行了研究。结果表明:用50%乙醇作为浸提剂,浸提温度为60℃,pH为3,超声波提取60 min,提取效果最好。该色素在可见区最大吸收波长为360 nm,为开发利用这种天然色素资源提供科学依据。

梅花鹿角脱盘多肽的分离纯化及对乳腺癌细胞端粒酶活性的影响

目的分离纯化梅花鹿鹿角脱盘多肽;以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘多肽对肿瘤细胞端粒酶活性的影响。方法采用酸提醇沉法提取鹿角脱盘多肽,再经Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定的多肽蛋白质含量,TRAP-银染法分析MA782细胞端粒酶活性的变化,再利用相对荧光定量PCR技术检测MA782细胞端粒酶催化亚基TERT基因的表达水平。结果分离纯化出鹿角脱盘多肽粗提物,其蛋白质含量为91.800%;TRAP-银染法检测MA782细胞端粒酶的活性发现,与对照组细胞比较,多肽使细胞端粒酶活性有所下降,典型的重复序列条带数依次减少,多肽处理24 h、48 h、72 h、96 h、120 h后,MA782细胞中相对端粒酶活力分别为91.4、78.3、66.5、47.8、29.2、20.5,呈时间依赖性;相对荧光定量PCR法分析结果表明,与对照组比较,TERT基因的表达水平降低。结论鹿角脱盘多肽对乳腺癌细胞端粒酶活性有一定的抑制作用,可为深入研究鹿角脱盘多肽抗肿瘤活性提供依据。

“5S”管理理念在高校生物化学实验室管理中的应用

介绍了"5S"管理的内涵,分析了高校生物化学实验室的特点及存在的问题,分别从整理(SEIRI)、整顿(SEITON)、清扫(SEISO)、清洁(SEISO)、素养(SHITSUKE)5个方面阐述了"5S"管理理念在高校生物化学实验室管理中的运用。

黑米色素的提取方法及稳定性研究

简要介绍了黑米色素的结构,以及黑米在国内的分布及利用情况。对黑色素提取条件进行了摸索研究,获得提取黑色素的最佳条件,并对色素的性质进行了研究。

膦丝菌素乙酰转移酶的表达及单克隆抗体制备

目的表达有生物活性的膦丝菌素乙酰转移酶(PAT),制备PAT蛋白单克隆抗体(mAb)。方法通过PCR克隆bar基因编码区全长,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建重组质粒pET28-bar并转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),经IPTG诱导目的蛋白表达,利用镍离子亲和层析纯化PAT蛋白,分析PAT蛋白活性。免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾脏与Sp2/0细胞融合,经间接ELISA筛选分泌抗PAT蛋白抗体杂交瘤细胞。结果在大肠杆菌中以可溶形式表达出重组PAT蛋白,纯化的重组PAT蛋白具有乙酰转移酶活性,制备了9株抗PAT蛋白mAb。结论表达的PAT蛋白可以用于除草剂解除剂研究,制备的mAb可能用于转基因产品的检测研究。

金针菇菇脚对肉鸡生长性能、肠道发育及挥发性脂肪酸的影响

为探讨金针菇菇脚(flammulina velutipes stem base,FVS)对肉鸡生长性能、肠道发育及挥发性脂肪酸(volatile fatty acid,VFA)的影响,进行试验。试验选用4 550只1 d爱拔益加(AA)肉鸡,随机分为5组,每组7个重复。在21 d和42 d,每个重复选择3只肉鸡屠宰并取样,分别测量肉鸡平均日增重、平均日采食量和料重比等生长性能,十二指肠、空肠、回肠和盲肠的长度、重量,并利用气相色谱法测量盲肠VFA浓度。结果显示:与空白组相比,6%FVS阶段组肉鸡平均日增重显著增加;2%FVS、4%FVS组和6%FVS组的平均日采食量显著降低;4%FVS组和6%FVS阶段组料重比显著降低。与空白组相比,21 d 4%FVS组和6%FVS阶段组十二指肠长度显著增加;6%FVS阶段组十二指肠重量显著增加;6%FVS阶段组空肠长度和重量均显著增加;2%FVS组和6%FVS阶段组回肠重量显著增加;2%FVS组和4%FVS组盲肠重量显著增加。与空白组相比,42 d 2%FVS、4%FVS组和6%FVS组十二指肠长度显著增加;4%FVS组和6%FVS阶段组十二指肠重量显著增加,6%FVS阶段组空肠重量显著增加;4%FVS组和6%FVS阶段组回肠长度显著增加;6%FVS阶段组回肠重量显著增加;4%FVS组盲肠长度显著增加;2%FVS、4%FVS组和6%FVS组盲肠重量显著增加。与空白组相比,21 d2%FVS、4%FVS组和6%FVS阶段组盲肠食糜乙酸和丙酸含量显著增加,各FVS组盲肠食糜丁酸含量均显著增加;42 d 2%FVS、4%FVS组和6%FVS阶段组盲肠食糜乙酸、丙酸和丁酸含量均显著增加。与空白组相比,21 d 4%FVS组和6%FVS阶段组盲肠食糜pH值显著降低;42 d 4%FVS组和6%FVS组盲肠食糜pH值显著降低。以上结果表明,日粮中添加FVS可提高肉鸡生长性能,促进肠道发育,提高盲肠食糜VFA含量,降低盲肠食糜pH值,有利于肠道健康。