案例教学在牙体牙髓科住院医师规范化培训中的应用

目前牙体牙髓病学住院医师规范化培训存在理论内容复杂、抽象和欠缺规范、统一且完整的临床案例等问题,这些问题制约了规范化培训教学工作的进展。为此,我院牙体牙髓科在住院医师规范化培训教学中应用案例教学和前期建立的牙体牙髓病学教学案例库,为教师备课和学员学习提供便捷的教学资源,为牙体牙髓病学住院医师规范化培训质量的提升创造有利条件。

组织块法培养成体人牙髓细胞的增殖及分化状态(英文)

背景:人牙髓组织较少,对酶解消化的耐受性较差,经胰蛋白酶和胶原酶分步消化处理后,细胞贴壁数量少,生长缓慢,难以成功传代,组织块酶解法获得的牙髓细胞种类少,活性差。目的:探索组织块培养法在人牙髓细胞体外培养中的应用。设计、时间及地点:细胞观察实验,于2005/2007年在吉林大学和平校区及口腔医学院进行。材料:健康人正畸或阻生拔除的牙齿。方法:选取第三磨牙,取出牙髓,在少量DMEM培养液浸润下,将牙髓组织剪碎至1.0mm×1.0mm×0.5mm组织块,将牙髓组织块移入含培养液的6孔板中,调整组织块密度至3～6块每孔,间距0.5cm均匀摆置。将6孔板倒置放入37℃、体积分数为5%CO2、饱和湿度条件的培养箱中,3h后翻转培养板,保持组织块贴壁生长,加培养液至2mL后继续培养。4～6d换液1次,细胞6～15d从组织块边缘游出,在组织块周围形成生长晕。细胞渐进汇合时,以用0.25%的胰蛋白酶、0.02%EDTA的混合液消化2.0～3.0min,按1∶(2～3)的比例传代培养至25mL培养瓶。原代培养细胞通过反复消化传代的方式逐渐获得纯化的成纤维样细胞。主要观察指标:采用免疫组织化学方法鉴定细胞形态,碱性磷酸酶值测定牙髓细胞分泌。MTT法绘制牙髓组织细胞生长曲线。结果:相差显微镜下,获得的牙髓细胞主要是典型成纤维细胞,形态多呈星形、长梭形,胞体丰满,胞浆均匀,核圆形或卵圆,核仁清晰。免疫组织化学检测显示,细胞表面波丝蛋白阳性、角蛋白阴性,碱性磷酸酶阳性。在接种于96孔平底培养板1d后,细胞数量有所下降,但在接种2d后数量又有所增加,此时细胞增加不很明显。4d开始进入对数生长期,细胞增加显著,8d进入平台期,9d开始减少,整个细胞曲线呈"S"形。结论:采用组织块培养法从成体人牙髓组织中可以分离培养出细胞,在体外能有效增殖并保持低分化状态。

案例教学法在牙体牙髓病学临床实习教学中的应用

案例教学法应用于牙体牙髓病学的临床实习教学,调动了口腔医学专业学生的学习兴趣和积极性,培养了理论联系实践习惯,学生容易适应牙体牙髓病学临床实践,提高了教师的教学技能,是一种高效的牙体牙髓病学临床实习教学方法。

离体牙钙化根管的扫描电镜观察

目的观察钙化根管系统的形态特点,探索将其疏通的措施。方法筛选钙化不通畅的离体牙根管,制片,SEM观察。结果收集钙化根管61个。SEM下,钙化根管系统呈多分枝样,局部狭窄甚至闭锁;根管壁牙本质小管的开口分布不规则、大小不一,局部可见牙本质吸收、再矿化及矿化生物膜样结构,近根尖区根管壁有牙本质小管或根尖分歧开口。结论钙化根管内有与牙根面相通的潜在间隙,内有细菌及其代谢产物,应尽可能将钙化根管疏通、扩大、消毒并严密充填。

牙髓成纤维细胞传代培养与冻存复苏后生长情况比较

目的:比较牙髓成纤维细胞在体外传代培养及冻存复苏后细胞生长情况的差异,探讨其应用价值。方法:采用组织块培养法对牙髓组织标本进行体外成纤维细胞的原代及传代培养,观察成纤维细胞形态及生物学特性,选取第4代处于对数生长期的细胞梯度降温后置入液氮中(196℃)保存3个月,比较经传代培养细胞与复苏后成纤维细胞的生长情况,用MTT法分别绘制细胞生长曲线,比较细胞生长情况。结果:经冻存保存3个月后牙髓细胞复苏率超过80%,而细胞形态未见明显的改变。复苏后细胞生长较对照组慢,进入对数生长期的时间较对照组略长。但两者生长曲线基本一致。结论:牙髓成纤维细胞传代培养与冷冻复苏后形态及生长特性基本相同,冻存的成纤维细胞可以成功的复苏。

双向电泳分析重组人白细胞介素-1β对人牙髓细胞的影响

目的:观察rhIL-1β对培养的HDPCs产生蛋白质的影响,揭示rhIL-1β与牙髓炎的关系。方法:在HD-PCs的培养液中加入rhIL-1β,用2-DE分离HDPCs全蛋白,获得对照组和诱导组HDPCs蛋白质图谱,ImageMaster2DElit 5.0软件分析确认差异表达蛋白。结果:比较对照组和诱导组蛋白质图谱,发现了39个蛋白质点差异明显。其中15个蛋白质点在诱导组高表达,新增13个蛋白质点,7个蛋白质点低表达,4个蛋白质点仅在对照组中表达。结论:HDPCs对rhIL-1β的应答反应是一个非常复杂的过程,多种蛋白质分子涉及其中。

CD40在人炎症牙髓组织中的表达

目的:探讨在牙髓炎中CD40的表达,揭示CD40在牙髓炎发生发展中的可能作用。方法:采用免疫组织化学的方法检测人的正常及急、慢性牙髓炎牙髓中CD40的表达。结果:免疫组化染色观察正常牙髓组织中,CD40未见阳性表达,而在急慢性牙髓炎组织中CD40在浆细胞、巨噬细胞上有不同程度的表达。慢性牙髓炎组表达明显强于急性牙髓炎组。结论:CD40在牙髓炎牙髓组织中呈阳性表达,CD40参与了牙髓的炎症反应。

促进再生牙髓血管化的支架研究进展

牙髓再生是牙体牙髓领域的研究热点,再生牙髓血运重建是牙髓再生的瓶颈,而所应用的支架材料又是血运重建的关键,本文对促进再生牙髓血运重建的支架材料作一综述。文献复习结果表明,牙髓血运重建所用支架材料的来源不同,主要有天然、人工合成和复合材料等。应用于血管再生的天然支架材料包括壳聚糖、透明质酸、细菌纤维素、原花青素等;人工合成支架材料包括水凝胶、冷冻凝胶、电纺丝等。具有双层管状结构的仿生复合支架系统具有低免疫原性和良好的生物相容性。适合根管形态的仿生细胞外基质的支架材料如可注射水凝胶/微球的研究推动了牙髓再生研究的发展,即根管内分布均匀的支架材料促进了牙髓样组织的生成;但新生的牙髓组织是否能够通过根尖孔建立有效的血液循环仍是一个巨大挑战。

可注射水凝胶支架在牙髓再生中的研究进展

组织工程为牙髓再生提供了新的可能,支架作为组织工程三要素之一,受到了越来越多的关注。由于根管系统受长而狭窄的管腔独特解剖结构的限制,预成型支架虽应用方便但无法完全布满整个根管空间,因此,可注射性支架可能是牙髓组织工程的较理想选择。水凝胶是一种亲水聚合物网络,具有类似软组织的物理特性,并可提供多孔的亲水性微环境,后者方便扩散氧气和营养物质。近年来,研究者们用不同力学性能和(或)载生物活性成分的可注射性水凝胶作为支架来促进血运重建和牙髓再生,研究结果表明天然高分子水凝胶、合成高分子水凝胶、结合天然和合成高分子的复合型水凝胶均具有优异的生物相容性;水凝胶的类型和力学性能、生物活性成分的添加可影响干细胞行为;明胶基水凝胶及纤维蛋白基水凝胶等还可实现快速血管化,这为牙髓样组织形成创造了条件。其中,光交联甲基丙烯酰化明胶/透明质酸水凝胶、与具有抗菌及温敏性能的壳聚糖相结合的双/多组分水凝胶及新型自组装肽由于优异的性能成为近年来的研究热点。为了开发适宜水凝胶支架并促进其在牙髓再生方面的应用,本文对用于牙髓再生的可注射水凝胶的种类、制备和应用等方面的研究进展进行综述。

多发多病程前磨牙畸形中央尖1例

该文报道1例因畸形中央尖折断导致严重根尖周感染的患者,其双侧上颌第二前磨牙、下颌前磨牙共6颗牙均患畸形中央尖,而且患牙处于不同病变发展阶段,经对症处理,治疗效果良好。结合该罕见病例并回顾相关文献,总结畸形中央尖患牙的临床表现、分类和相应的治疗措施,为畸形中央尖患牙的早期诊疗和其继发病变的预防提供切实可行的方案。

不同开髓方向对探查下颌切牙双根管的影响

目的:观察不同开髓方向对探查下切牙双根管的影响。方法:选取150颗临床拔除的下颌切牙,随机分为两组,一组进行传统舌侧开髓不损伤切缘;另一组按照近远中垂直向x光片根管影所划直线进行开髓,不考虑对切缘的影响。结果:传统方法发现1.33%双根管;另一组发现12.0%双根管。结论:传统方法进行开髓遗漏了大部分舌侧根管,临床应改进这一传统方法。

口腔鳞状细胞癌中CADM1蛋白的表达及意义

目的:研究细胞粘附分子1(cell adhesion molecule 1,CADM1)在口腔鳞状细胞癌(Oral squamous cell car-cinoma,OSCC)中的表达,探讨其在OSCC病变中的作用及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法S-P法检测52例OSCC及30例正常的口腔黏膜组织中CADM1蛋白的表达,数据采用SPSS13.0统计软件进行χ2检验。结果:CADM1蛋白在高分化组阳性表达率为87.50%、中分化组阳性表达率为42.86%、低分化组阳性表达率为20.00%,三者之间对比有显著性差异(P<0.05),与正常对照组有显著性差异(P<0.01);在临床分期为早期(Ⅰ级+Ⅱ级)组中阳性表达率为72.22%,晚期(Ⅲ级+Ⅳ级)组中阳性表达率为35.29%,二者之间存在显著性差异(P<0.05)。结论:CADM1蛋白的表达与OSCC的病理分级、临床分期关系密切,提示CADM1蛋白缺失可能是OSCC的发生机制之一。

牙本质湿粘结中胶原纤维状态的研究进展

自1992年 Kanca［1］提出牙本质湿粘结技术以来，许多学者对湿粘结技术的临床应用进行了研究，其中牙本质内胶原纤维的蓬松状态和结构状态对牙本质粘结耐久性有重要影响。而使用 MMPs 抑制剂预处理牙本质粘结面也有提高粘结界面强度的作用。

实验性牙移动大鼠外周血内皮祖细胞的培养

背景:观察血管内皮祖细胞在牙周血管改建中的作用规律对于研究正畸牙周改建机制具有重要意义。目的:对牙移动大鼠外周血内皮祖细胞进行体外分离、培养及鉴定,探讨牙齿移动是否可动员骨髓内皮祖细胞进入外周血。设计、时间及地点:细胞体外分离培养及生物学指标检测,随机对照动物实验。于2007-09/2008-04在吉林省口腔生物医学工程重点实验室完成。材料:24只Wistar大鼠,随机分为实验组和对照组,每组12只。方法:实验组建立大鼠牙移动模型,对照组置牵拉装置但不加力。加力第2天取两组动物外周血制作细胞涂片,检测其中CD133阳性细胞数。同时以Percoll密度梯度分离提取其外周血单个核细胞,培养至第12天,取两组细胞爬片进行相关指标检测。主要观察指标:以免疫细胞化学染色和免疫荧光化学染色检测细胞表面标志物,荧光化学检测细胞吸收乙酰化低密度脂蛋白及荆豆凝集素1情况,MTT法检测细胞增殖情况。结果:实验组细胞涂片中CD133阳性细胞率明显高于对照组(P<0.05)。所培养细胞可同时吸收Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白、FITC标记的荆豆凝集素1,呈CD133、Ⅷ因子、CD34阳性。实验组细胞增殖活性高于对照组(P<0.05)。结论:实验初步证实了实验性牙移动可动员大鼠骨髓内皮祖细胞进入外周血。

散发性先天缺牙的临床特征分析

目的:探讨散发性先天缺牙的临床特征,分析其危害。方法:临床检查散发性先天缺牙病例,影像学观察,统计分析。结果:收集到11例散发性先天缺牙患者,男5例,女6例,患者缺牙1～25颗,伴有食物嵌塞(90.9%)、邻面龋及继发病变(81.8%)、创伤(72.7%)、牙周病(45.5%)、咬合异常(72.7%)。结论:散发性先天缺牙多为少数牙先天缺失,与性别无明显关系,伴有恒牙埋伏和乳牙滞留,缺牙部位具有随机性,先天缺牙影响口腔健康及咬合关系。

熊果酸对成牙骨质细胞增殖及矿化功能的影响

目的:观察熊果酸对鼠成牙骨质细胞系OCCM-30增殖、周期、凋亡及矿化功能的影响。方法:一定浓度熊果酸处理成牙骨质细胞后,cck-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,微量酶标法检测碱性磷酸酶活性,茜素红染色法定量及定性检测矿化结节量。结果:熊果酸组(2.5μmol/L)相比于对照组,细胞增殖率和细胞周期增殖指数升高,早期凋亡率降低,碱性磷酸酶活性和矿化结节量上调。结论:一定浓度熊果酸可促进成牙骨质细胞增殖,G1期百分比降低,抑制早期凋亡,增强碱性磷酸酶活性,促进矿化结节的形成。

小鼠牙齿发育中Pax-9的表达及意义

目的 通过观察PAX-9在牙发育中的分布及变化规律，探索牙齿发生的机制。方法 标本为妊娠10．5～18．5天昆明小鼠分别取胎鼠，分别作HE染色和免疫组化染色，图像分析仪分析。结果 Pax-9表达于胞浆中。蕾状期，牙蕾上皮及间充质细胞不表达Pax-9；帽状期牙乳头细胞表达较强；钟状期早期成牙本质细胞或前成牙本质细胞表达强阳性，内釉上皮细胞、星网状层细胞及牙乳头细胞有微弱表达；钟状期晚期成牙本质细胞、成釉细胞、及釉牙本质界处集中表达，新形成的釉质和前期牙本质染色较强。结论 PAX-9促进牙胚从蕾状期向帽状期转变，调节钟状期成牙本质细胞及成釉细胞的分化及基质分泌，并参与生物矿化过程。

口腔显微镜联合超声技术在塑化根管再治疗中的临床应用及护理

目的:探讨口腔显微镜联合超声技术在塑化根管再治疗中的应用及护理。方法:选取曾进行过塑化治疗的患牙84颗,在口腔显微镜下采用超声根管锉疏通塑化根管。结果:72颗患牙的根管疏通成功,根管再通成功率为85.7%。结论:口腔显微镜和超声器械去除根管内塑化物快速高效,可作为临床上处理塑化再治疗患牙有效方法;治疗的效果与护士的默契配合是分不开的,是治疗成功的重要保证。

牙釉质表面处理对离子交换树脂转移钙离子能力的影响

目的 :探讨牙釉质表面经喷粉抛光技术处理对离子交换树脂转移钙离子能力的影响。方法 :将新鲜离体牙釉质小块 ,经喷粉抛光技术处理表面后 (对照组不处理 ) ,分别浸泡在 45Ca离子交换树脂生理盐水溶液中 ,经 0 .5、2、12h后 ,测量放射活度计数。结果 :实验组 0 .5h前、后牙釉质中已有 45Ca离子大量转入 ,分别可达 9.3 5 0、10 .92 5个放射活度计数 /mm2 ;2h转入量达高峰 ,可达 17.199、2 3 .72 5个放射活度计数 /mm2 ;12h有所下降 ,可达 15 .675、17.83 7个放射活度计数 /mm2 。实验组和对照组经配对t检验 (P <0 .0 0 5 ) ,统计学具有显著性差异。结论 :牙釉质表面覆盖的获得性膜是阻挡离子交换树脂转移钙离子进入牙釉质的重要因素之一 。