分子光谱技术在氯丙嗪检测中的应用研究进展

氯丙嗪是临床中应用较为广泛的精神活性物质,因其对病毒的抑制作用及滥用而成为临床的关注热点。分子光谱技术不仅是检测体系构建和反应机制解析的重要手段,也是新兴检测技术发展的基础。本文主要基于分子运动产生的吸收、发射和散射等现象,从测定的原理、条件等方面综述了紫外-可见分光光度计、分子荧光、化学发光、表面增强拉曼散射、共振瑞利散射等光谱技术在氯丙嗪分析中的应用进展,探讨和展望了分子光谱法在氯丙嗪相关研究中的应用前景,以期为氯丙嗪的检测、药理学、毒理学、风险评估方面研究提供参考。

大豆叶酸的三酶法提取及微生物检测技术研究

采用大豆品种Wmiams82为试验材料，用“一淀粉酶、蛋白酶和大鼠血清酶三种酶来提取大豆中的叶酸，并用微生物法对叶酸含量进行测定。利用优化的三酶法，对121份北方地区栽培大豆的种子进行总叶酸含量测定。结果表明：α-淀粉酶、蛋白酶和大鼠血清的组合在8、100、10μl的条件下能够最大程度地提取大豆种子中的叶酸；北方地区121份栽培大豆的种子中叶酸含量为143．57-309．57μg／100g。优化得到的三酶法提取大豆种子中叶酸的方法可行，为今后谷类作物叶酸含量测定提供了参考。

基于联合验证数据评定转化体定量检测结果测量不确定度

随着转基因生物及产品定量标识制度的不断完善,大批转化体定量检测方法的建立迫在眉睫,为了在实验数据积累不足的情况下,在检测方法建立初期及时评定测量不确定度,本研究以耐除草剂大豆DBN9004定量检测方法为例,在检测实验室积累到足够检测数据之前,在8家实验室对5种转基因含量样品进行联合验证,分析试验数据的再现性标准偏差,形成“自上而下”的不确定度预评定方法。结果显示:经格拉布斯法和科克伦法检验8家实验室数据,实验室5的数据存在离群值和岐离值,故剔除,7家实验室5个含量样品的再现性相对标准差RSD_(jR)为6.025%~11.532%,均小于规定的35%,说明该方法具有良好的精密度。根据上述分析数据绘制回归曲线方程为s_(jR)=0.0783×c/≡_(j)-0.0104,计算的相对标准不确定度分量u_(r)=0.0783,u_(0)=0.012,进而将试样检测结果的平均值(c=)带入公式,计算定量结果的标准不确定度u=√u_(0)^(2)+(u_(r)×c/=)^(2)=√0.012^(2)+(0.0783×c=)^(2)。结果表明基于联合验证数据评定转化体定量检测结果测量不确定度,为转化体定量检测方法建立初期提供了科学有效的实验室自行评定方法,为转基因生物及产品的安全监管提供了技术保障。

吉林省不同类型土壤玉米氮肥效应研究

采用田间试验研究不同氮肥用量对吉林省东部(冲积土)、中部(黑土)、西部(淡黑钙土)不同类型土壤玉米产量的影响。结果表明:在不同类型土壤上,玉米产量均随氮肥用量的增加呈先增后降的趋势,根据玉米产量(y)和施氮量(x)拟合,结合当年玉米价格和肥料投入,得出吉林省东部(冲积土)、中部(黑土)、西部(淡黑钙土)最高产量氮肥用量和最佳经济产量的氮肥用量分别为203.3 kg/hm^2、169.6kg/hm^2、173.2 kg/hm^2和185.5 kg/hm^2、149.0 kg/hm2、156.7 kg/hm^2。综合考虑提高玉米产量和效益等因素,在吉林省东部(冲积土)适宜氮肥用量为185.5 kg/hm^2,中部(黑土)适宜氮肥用量为149.0 kg/hm^2、西部(淡黑钙土)适宜氮肥用量为156.7 kg/hm^2。另外,土壤碱解氮含量与需氮量之间为负相关。

基于FMV35S的数字聚合酶链式反应方法定量检测转基因作物

以含有FMV35S标记基因的大豆转化体MON87705为材料,利用实时聚合酶链式反应(real-timepolymerase chain reaction,real-time PCR)和数字PCR(digital PCR,dPCR)技术,建立一种转基因作物的定量检测方法。通过real-time PCR法对扩增体系测试,建立的检测方法对FMV 35S标记基因具有高度特异性;利用双重微滴式dPCR进行定量检测参数的测定,结果表明:在基因组DNA 0.005~20 ng/μL质量浓度范围,靶标基因的测量拷贝数与理论拷贝数具有良好的线性关系;dPCR方法对FMV 35S标记基因的检出限可达到5 copies,定量限为0.1%。利用两个dPCR平台,对不同含量的转基因作物的盲样进行测定,内标准基因和外源特异性片段的双重、三重测定,均获得准确的定量结果,数据可靠,再现性良好。因此本研究建立的基于筛选标记基因FMV 35S的转基因dPCR定量检测方法在满足转基因成分定量检测标准的参数要求的同时,能够进一步提高检测效率,可为转基因作物成分定量提供一种准确、简便的检测技术。

利用多重PCR技术快速检测五个转基因大豆品系

转基因大豆305423、MON89788、CV127、GTS40-3-2、356043作为商品化应用最为广泛的大豆品系,种植面积占世界转基因大豆总种植面积的80%以上。根据大豆内标准基因Lectin和5种转基因大豆品系的边界序列设计特异性引物。通过验证引物的适用性、特异性和灵敏度,优化多重PCR检测体系中不同引物的用量及反应退火温度,建立了能同时扩增大豆内源基因Lectin和5个转基因大豆品系的六重PCR检测体系。结果表明:确定的大豆内源基因和5个转基因大豆品系的引物具有很好的特异性,引物之间无交叉扩增和非特异性扩增,多重PCR方法的检测灵敏度达到0.1%。该方法可作为转基因大豆及其产品成分检测的辅助手段,快速检测转基因大豆及其产品中的相应品系。

吉林省种植基地蔬菜中农药污染特征及风险评价

目的了解吉林省种植基地蔬菜中农药残留情况,并探明其污染风险状况。方法在吉林省7个市县采集211份蔬菜样品,测定其中80种农药残留水平,并分别用危害物风险系数法和食品安全指数法评价其风险状况。结果共检出农药25种,检出率最高的为啶虫脒,超标率最高的是氧乐果;农药残留超标的蔬菜为韭菜、芹菜、马铃薯、茄子和菜豆;从风险系数法结果看,氧乐果为高风险农药,毒死蜱和腐霉利为中风险农药;从食品安全指数评价结果看,吉林省蔬菜质量安全整体状况是可接受的,但克百威、氧乐果在蔬菜中残留的风险超过了可接受的限度,应该进入风险管理程序。结论吉林省基地蔬菜中存在农药残留及超标情况,且存在农药多残留累积风险,建议相关部门加强对蔬菜生产者进行合理用药的培训,抓好产中的技术指导和产后的监管,保证蔬菜整体质量安全。

波兰农产品中农药残留检测技术现状

介绍波兰农产品中农药残留检测技术。波兰的农药残留检测技术标准以欧盟标准为框架,在实际检测过程中各实验室可根据自身仪器设备条件、样品基质及目标农药的性质,自主开发检测方法,但需根据SANCO 12571:2013对方法进行验证,并向波兰认可中心提供验证报告。样品制备技术以基于乙腈提取/分配、Qu ECh ERS净化为主(EN 15662:2008),各实验室对标准中大部分步骤进行了调整和创新,以满足实际工作的需要;一些经改进的经典方法,如基质固相分散法(MSPD)和基于丙酮提取、二氯甲烷萃取的LUKE法在波兰农产品检测实验室也有较为广泛的应用;最终定性定量分析以GC–MS/MS和HPLC–MS/MS法为主,以GC,HPLC和紫外分光光度法等分析方法为辅。

吉林省玉米机械收获现状及发展方向

玉米收获是玉米生产过程中的重要环节,玉米机械收获是现代农业发展的必然趋势,吉林省玉米机械收获还处于起步阶段。本文对吉林省玉米机械化生产的形势、机械收获现状、存在的问题进行了细致分析,提出了促进吉林省玉米机械收获的建议。

大豆转化体E8A7027外源T-DNA分析及特异性检测体系建立

为进一步分析转AgGlpF基因耐盐转基因大豆E8A7027转化体的分子特征信息并对其进行特异性检测,本研究分离该转化体的旁侧序列并建立其特异性PCR检测体系。基于基因组重测序技术并结合Sanger测序技术,将基因组重测序分析获得的序列信息与参考大豆基因组进行对比,确定E8A7027转化体的T-DNA区在大豆基因组上的插入位点及其5′端和3′端的旁侧序列。根据旁侧序列设计PCR检测引物,并对检测体系的特异性、灵敏度进行实验室内验证。结果显示:转基因大豆E8A7027的整合位点为Chr09染色体的33886331位点,整合方式为单拷贝插入,受体基因组DNA在插入位点缺失了1段58 bp序列,分别获得E8A7027大豆的5′端旁侧序列910 bp和3′端旁侧序列802 bp。根据这两个旁侧序列设计引物建立的PCR检测方法,能够特异性地将E8A7027大豆转化体与其他转基因作物和非转基因大豆区分开,方法的检测灵敏度为0.05%。研究结果可为E8A7027转化体的安全评价和监管检测提供技术支撑。

高职食品营养与检测专业实践教学体系研究与探索

随着科技的发展与时代的进步,社会对高素质技能型人才的需求越来越高,高职院校实践教学体系的构建就愈发重要。本文阐述了当前高职院校食品营养与检测专业实践教学体系建设中存在的问题,针对校内外实践教学过程中如何有效发掘学生专业特长、发挥人才培养作用给出了几点建议。

UPLC测定食用油中的3种香兰素类物质含量

为解决现有检测方法存在前处理净化不完全、不彻底的情况,建立了超高效液相色谱(UPLC)测定食用油中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素含量的分析方法。用乙腈提取食用油中目标物,以乙腈饱和的正己烷萃取净化,冷冻分层后,再经OasisPRiMEHLB固相萃取柱净化,采用C18色谱柱分离,以0.5%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行UPLC测定,外标法定量。结果表明:3种香兰素类物质在0.1~100.0mg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.999,检出限均为0.03 mg/kg,定量限均为0.1mg/kg;在0.1、0.2、1.0mg/kg3个添加水平的平均回收率为86.6%~108.1%,相对标准偏差(RSD)为2.0%~8.8%。同时,采用本方法与BJS201705中方法对食用油中的3种香兰素类物质进行测定,两种方法结果间无显著性差异。综上,建立的方法采用两步净化,减少了杂质对香兰素类物质的干扰,适用于食用油中香兰素类物质含量的测定。

固相微萃取-气相色谱-质谱法分析油莎豆中挥发性成分

以油莎豆为研究对象,采用固相微萃取-气相色谱-质谱联用法(SPME-GC-MS)测定其挥发物成分。通过优化前处理过程中萃取头类型、萃取温度、萃取时间,确定最佳萃取条件。利用质谱数据库对挥发物成分进行鉴定,并采用归一化法进行含量分析。结果表明:最佳萃取条件为采用DVB/CAR/PDMS萃取头、萃取温度110℃、萃取时间30 min,在此条件下,油莎豆中共检测出27种挥发物,其主要特征挥发物为醇类和醛类物质,其相对含量分别为32.30%和43.56%。

基于多元质量特性过程能力分析的高效液相色谱-串联质谱法检测猪可食组织中常见精神活性物质及其代谢物

建立了液相色谱-串联质谱法同时测定猪可食组织中氯丙嗪、异丙嗪、甲苯噻嗪等精神活性物质及其代谢物的方法。通过构建回收率及相对标准偏差的多元质量特性双响应曲面模型进行过程能力分析,对QuEChERS方法进行优化,并结合同位素内标法进行检测。结果表明,在质量浓度0.40~200 ng/mL范围内7种目标化合物呈良好的线性关系,相关系数(r^(2))均大于0.999,方法检出限范围为0.05~0.10μg/kg,定量限范围为0.20~0.40μg/kg。5种不同基质中7种目标化合物的加标回收率在78.5%~109%之间,相对标准偏差(RSD)在0.89%~10.8%之间,10日内方法重现性RSD在2.3%~12%之间。所建立的方法适用于猪可食组织中几种常见精神活性物质及其代谢物的定量分析检测。

异色瓢虫对甜菜夜蛾和草地贪夜蛾的捕食潜能

为明确异色瓢虫Harmonia axyridis对甜菜夜蛾Spodoptera exigua和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的捕食潜能,本文在室内条件下研究了异色瓢虫对上述2种鳞翅目害虫2龄幼虫的捕食功能反应和搜寻效应;在网室条件下测定了异色瓢虫对2种害虫低龄幼虫的防控效果。室内研究结果表明,异色瓢虫雌雄成虫对这2种害虫2龄幼虫的捕食功能反应均属于HollingⅡ型圆盘方程,其中雌成虫对甜菜夜蛾和草地贪夜蛾2龄幼虫的瞬时攻击率(a)分别为1.120和0.987,控害效能(a/T_(h))分别为134.514头和154.408头,日最大捕食量(1/T_(h))分别为120.124头和156.437头;雄成虫对甜菜夜蛾和草地贪夜蛾2龄幼虫的瞬时攻击率(a)分别为1.071和0.830,控害效能(a/T_(h))分别为116.262头和124.568头,日最大捕食量(1/T_(h))分别为108.540头和150.039头。网室试验结果表明,2∶300、4∶300和8∶300的益害比下异色瓢虫均能有效控制甜菜夜蛾和草地贪夜蛾低龄幼虫的数量,释放后8 d防效分别在65%、80%和95%以上。综上所述,异色瓢虫具备对甜菜夜蛾和草地贪夜蛾低龄幼虫有效控害的潜力,试验结果可为利用异色瓢虫防控甜菜夜蛾和草地贪夜蛾提供理论依据。

糖源对“东方黏虫-异色瓢虫”饲养体系的影响

为了优化“东方黏虫-异色瓢虫”饲养体系中卵粒对异色瓢虫的饲喂效果,同时解决异色瓢虫取食低龄幼虫和高龄幼虫仅交配不产卵的问题。本文在该体系的基础上通过补充蜂蜜、蔗糖和葡萄糖3种水溶液,研究糖源物质对异色瓢虫生长发育及繁殖的影响。研究结果表明:以卵粒为饲料,添加糖源物质后异色瓢虫世代发育历期显著缩短、繁殖力显著提升,其中以葡萄糖饲喂效果最优(世代发育历期为20.71 d,30 d单雌平均产卵量937.00粒);以低龄幼虫和高龄幼虫为饲料,添加糖源后异色瓢虫出现产卵行为,且均以蜂蜜饲喂繁殖力最强(30 d单雌平均产卵量分别为434.80和645.11粒)。综合试验结果和饲养效果来看,糖源物质对“东方黏虫-异色瓢虫”饲养体系具有促进作用,不仅提升卵粒的饲喂效果,而且解决了取食低龄幼虫和高龄幼虫异色瓢虫仅交配不产卵的问题,优化后能代替“植物-蚜虫-异色瓢虫”的饲养模式。这一体系打破了寄主植物和环境的限制,在异色瓢虫人工饲料的研究中取得突破,为日后室内规模化生产异色瓢虫提供借鉴。

三种转基因大豆品系的多重荧光PCR检测体系建立

转基因大豆MON87701、MON87708、MON87769是我国大豆进口贸易中重点监测的转基因品系,为探讨这3个品系的高效监管技术手段,应用多重实时荧光聚合酶链式反应建立在同一反应体系中同时检测MON87701、MON87708、MON87769的方法。通过分析转基因大豆MON87701、MON87708、MON87769品系的特性序列及大豆内标准基因lectin序列,在此基础上优化设计1组多重PCR引物/探针,并以转基因大豆MON87701、MON87708和MON87769为测试样品,以其它转基因大豆、玉米、水稻、油菜、棉花及非转基因大豆为对照测试样品,经引物/探针浓度优化、特异性、灵敏度等测试,建立多重实时荧光PCR检测体系。结果显示:该多重PCR方法可从各种复杂样品中准确检出相应的靶标转基因大豆成分,对转基因大豆MON87701、MON87708和MON87769的检测灵敏度达到43个DNA拷贝,相当于比0.05%(w/w)。该方法特异性强、灵敏度高,在转基因大豆成分快速检测和品系鉴定中具有很好的应用前景。

抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C定性PCR检测方法

转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C是由北京奥瑞金公司研发的转mG2-aroA基因和mcry1Ah基因抗虫耐除草剂玉米新品系,对玉米螟、粘虫等鳞翅目害虫具有抗性、耐草甘膦除草剂的转基因玉米,在我国具有重要产业化应用前景。本文研发了GH5112E-117C转基因玉米的定性PCR检测方法,该方法能特异性地检测转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C,在每个反应引物浓度为0.2 μmol/L、Taq DNA 聚合酶0.625 U、DNA模板50 ng,退火温度为58℃的条件下,检测灵敏度可稳定达到0.1%。该方法为转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C的精准检测提供了一种新的技术手段,为农业转基因监管提供技术支撑。

应用简并PCR方法检测转cry1A基因作物

根据不同转基因作物中cry1A基因的保守区序列,建立简并聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对转cry1A基因作物检测方法。cry1A基因(包括cry1Ab、cry1Ac、cry1Ab/Ac、cry1A.105、mcry1Ac)是抗虫转基因作物中使用频次最高的目的基因,常用作转基因成分筛选检测的靶标。应用Vector NTI Advance 11.5软件将已报道的20余种cry1A基因PCR检测方法中的引物与11个cry1A基因序列进行比对,结果显示,这些方法的引物序列不能同时与所有cry1A基因序列完全配对,每对引物的错配碱基数均大于3个,且许多错配发生在引物的3’端,表明这些cry1A基因检测方法理论上仅适用于部分特定的靶标基因。在对MON810、Bt11、Bt176等11种转基因作物中cry1A基因核苷酸序列进行比对分析基础上,以其5’端的保守核苷酸序列为模板,筛选到1对简并引物,建立了cry1A基因的简并PCR方法。应用该方法能特异性地检测11种转基因作物中的cry1A基因,检测灵敏度可稳定达到0.1%。该方法为转基因作物中cry1A基因的高效筛选检测提供了一种新的技术手段。

基于UPLC-MS-MS技术快速测定花生中4种黄曲霉毒素

建立了花生中4种黄曲霉毒素的超高液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-MS-MS)检测的方法。样品经80%乙腈-水溶液振荡超声提取后,采用多功能净化柱净化。待测物经Kinetex SB-C18色谱柱分离,甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,三重四级杆串联质谱多反应离子监测(MRM)方式检测,外标法定量。结果表明:4种黄曲霉毒素在各自的线性响应范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,方法的检出限为0.014~0.025μg/kg,空白样品中加标回收率为72.25%~89.46%,RSD在4.01%~9.56%之间。该方法前处理简单快速、净化效果好、检出限低,适合花生中多种黄曲霉毒素的同时快速测定。