骨髓间充质干细胞源外泌体保护顺铂相关急性肾损伤作用及机制研究

目的:探索骨髓间充质干细胞源外泌体(BMSC-exos)保护顺铂(CDDP)诱导急性肾损伤(AKI)作用及机制。方法:48只C57BL/6小鼠随机分4组:对照(CN)组、顺铂诱导AKI模型(CDDP)组、CDDP+BMSC-exos(CDDP+EXO)组、CDDP+BMSC-exos+PI3K抑制剂(LY294002)(CDDP+EXO+LY294002)组。分别腹腔、尾静脉注射生理盐水、顺铂、顺铂+BMSC-exos及顺铂+BMSC-exos+LY294002。留取血液测肌酐(SCr)和尿素氮(BUN);取肾组织进行病理分析;TUNEL观察肾小管上皮细胞(RTEC)凋亡;免疫组化染色检测活化的半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、葡萄糖调节蛋白78(GRP-78)、半胱氨酸蛋白酶12(caspase-12)和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达定位;Western Blot法测定Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12、CHOP、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)表达。结果:在CDDP诱导AKI模型中,肾组织TUNEL阳性细胞数目明显增多(P<0.05),免疫组化免疫Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12和CHOP阳性面积显著增加(P<0.05),Western Blot法证实,Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12及CHOP表达水平显著上调(P<0.05),p-AKT表达水平显著下调(P<0.05)。经BMSC-exos治疗,肾组织TUNEL阳性细胞数目明显减少(P<0.05),免疫组化染色Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12和CHOP阳性面积显著减少(P<0.05),Western Blot法证实,Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12及CHOP表达水平显著下调(P<0.05),p-AKT表达水平显著上调(P<0.05)。BMSC-exos治疗前应用LY294002治疗,肾组织TUNEL阳性细胞数目明显增多(P<0.05),免疫组化免疫Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12和CHOP阳性面积显著增加(P<0.05),Western Blot法证实,Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12及CHOP表达水平显著上调(P<0.05),p-AKT表达水平显著下调(P<0.05)。结论:BMSC-exos保护CDDP-AKI作用机制可能是通过抑制内质网应激及激活PI3K/AKT信号通路。

C-反应蛋白和肿瘤坏死因子与慢性肾功能衰竭

目的:C-反应蛋白(CRP)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在慢性肾功能衰竭各期中的水平,探讨两者与肾功的关系。方法:定量检测52例慢性肾功能衰竭患者外周血CRP和TNF-α的水平,并与20例正常健康人作比较,同时检测患者的肾功。并分析TNF-α与血肌酐(SCr)的相关性。结果:CRP在慢性肾功能衰竭各期中均有不同比例的升高,并随着肾功能衰竭的加重比例有升高的趋势。TNF-α在慢性肾功能衰竭各期中均较正常组明显升高,且随着肾功能衰竭的加重有逐渐升高的趋势,同时与SCr成正相关。结论:CRP和TNF-α可能参与慢性肾功能衰竭的发生、发展,并可作为病情监测、预后的重要指标。

黄葵胶囊联合氯沙坦对慢性肾炎患者小管功能保护作用的临床观察

原发性慢性肾小球肾炎是肾脏疾病中导致慢性肾衰竭的最常见疾病,临床上在疾病早期主要以减少蛋白尿、控制血压、延缓肾衰竭的进程为主要治疗方法。近年来,肾小管功能的损害在肾脏病进展中的作用越来越受到人们的关注,黄葵胶囊的主要成分为黄蜀葵花,其化学成分为黄酮类,

糖尿病肾病的维持性血液透析患者CKD-MBD调查研究

目的探讨糖尿病肾病与非糖尿病肾病的血液透析患者在CKD-MBD患病和治疗情况上的差别。方法采用单中心、回顾性横断面研究设计。选取哈尔滨医科大学附属第一医院血液净化中心维持血液透析患者336例作为研究对象,依照其原发病将入选患者分为糖尿病肾病组(DN组)123例和非糖尿病肾病组(Non-DN组)213例。收集患者的一般资料,并检测甲状旁腺素、血钙、血磷和碱性磷酸酶等钙磷代谢指标,比较分析两组患者CKD-MBD的患病及治疗情况,并对继发性甲状旁腺功能亢进的相关因素进行多元回归分析。结果两组的全段甲状旁腺激素水平分别为:DN组为(283.08±187.01)pg/m L、Non-DN组为(415.96±482.49)pg/m L,差异有统计学意义(t=-3.58,P<0.01);DN组与NonDN组血钙水平分别为:(8.74±0.87)mg/d L vs(9.13±1.01)mg/d L(t=-3.63,P<0.01);血磷水平分别为:(6.08±1.88)mg/d L vs(6.41±1.96)mg/d L(t=-1.50,P=0.13)。DN组SHPT的发生率为33.33%,显著低于Non-DN组的53.05%;DN组与Non-DN组低钙血症的发生率分别为34.96%和24.41%,高磷血症的发生率分别为53.66%和68.08%。对影响i PTH升高的因素进行逐步Logistic回归分析结果显示:透析龄增加(OR=1.90,P=0.02)和钙磷乘积水平(OR=2.36,P<0.01)为血i PTH进一步升高的独立危险因素,而非糖尿病患者并发高IPTH危险是糖尿病患者的0.56倍(OR=0.56,P=0.01)。结论糖尿病可能为继发性甲状旁腺功能亢进的抑制因素。

糖尿病肾病发病机制的研究进展

糖尿病肾病是糖尿病的主要并发症之一,是导致终末期肾功能衰竭的主要原因。糖尿病肾病的发病机制十分复杂,确切的机制仍未明确。目前认为血流动力学改变、代谢紊乱、炎症、自噬、氧化应激、微RNAs及一些病理因素参与疾病的发生与发展。虽然严格控制血糖和血压会延缓糖尿病肾病的进展,但是仍未有理想的干预措施能够逆转或者阻止糖尿病肾病的进展。因此,了解糖尿病肾病的发病机制对改善糖尿病患者的预后具有重要的意义。

慢性肾脏病患者心血管事件相关预测因子

慢性肾脏病(CKD)患者逐年增加,心血管疾病作为其最主要的并发症,决定着CKD患者的预后。尽管目前临床医师已经对CKD患者进行了相对全面的检查,并已经使用药物对心脏功能进行早期的干预性治疗,但CKD患者心血管疾病并发症仍有很高的发生率及病死率。CK不仅仅是一个临床问题,肾脏替代治疗消耗大量的医疗资源,患者生活质量大大下降。近年来,心血管学科和肾脏学科医师强烈推荐,评估肾脏功能应该是心血管疾病患者诊断的一部分,同时肾脏病患者也应早期完善心血管疾病的相关检查。传统的心血管事件的危险因素对于预测CKD患者早期心血管事件风险似乎并不十分准确及全面,一些非传统性的因素,例如炎性介质及电解质近年来备受关注。

不同性别原发性IgA肾病患者临床与病理分析

目的:探讨原发性IgA肾病患者临床表现、病理特点及其相关性,为临床积极有效的治疗提供依据。方法:回顾性分析我院经肾活检确诊的130例原发性IgA肾病患者的临床病理资料,分别比较不同性别组的临床病理特点。结果:IgA肾病占同期肾活检的19.1%;肾脏病理分级以Ⅱ级为主,为73例(占56.2%),其中有75.4%的患者伴足突融合,53.1%伴肾小管萎缩,43.1%有不同程度肾小球硬化,26.9%有肾间质纤维化,21.5%有血管病变,6.2%伴新月体形成;IgA肾病患者临床表现、肾功能及肾脏病理改变在不同性别之间并无明显差异(P>0.05),不同性别在年龄、收缩压、血尿酸、三酰甘油、白蛋白、补体C3之间差异有显著性(P<0.05)。结论:IgA肾病的临床表现和病理类型表现多样化,不同性别在临床指标中存在着一定的相关性但不完全一致,要综合考虑并尽早行肾活检以明确病理诊断,为制定有效个体化治疗提供重要依据。

维持性控制护理模式对血液透析终末期肾病患者临床成效研究

目的探究终末期肾病血液透析患者引入维持性控制护理措施对其负性情绪及透析相关指标的影响。方法选取2012年9月至2015年3月收治的86例行血液透析治疗的终末期肾病患者,利用随机数字表法进行分组,分别设为研究组和对照组,每组43例。其中对照组开展常规护理干预,研究组则在对照组基础上引入维持性控制护理策略。2组患者均于干预前及干预后第4周末接受抑郁自评量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS)及生活质量量表(QLQ-C30)测评,并比较2组患者间的血液透析相关指标。结果 2组患者在干预前的SAS和SDS评分差异无统计学意义(P>0.05);干预后,研究组SAS和SDS评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者在干预前的各维度生活质量评分差异无统计学意义(P>0.05);干预后,研究组在躯体、角色、情绪、社会及认知方面的生活质量评分均要高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者干预前的尿素降低率、平均尿素清除指数及平均血细胞压积差异无统计学意义(P>0.05);研究组患者干预后的尿素降低率及平均尿素清除指数均低于对照组(P<0.05);平均血细胞压积高于对照组(P<0.05)。结论维持性控制护理干预应用于行血液透析治疗的终末期肾病患者,有助于改善其消极情绪,且能提高透析效果,值得在临床上进一步推广。

前列地尔注射液联合缬沙坦氨氯地平片对慢性肾小球肾炎患者蛋白尿、肾功能及免疫功能的影响

目的探讨前列地尔注射液联合缬沙坦氨氯地平片对慢性肾小球肾炎患者蛋白尿、肾功能及免疫功能的影响。方法选取2014年12月至2016年12月本院肾内科收治的120例慢性肾小球肾炎患者为研究对象。采用随机数表法将其分为对照组与观察组,每组各60例。对照组患者予缬沙坦氨氯地平片降压,纠正电解质、酸碱平衡紊乱,低盐、优质蛋白饮食等常规基础治疗;观察组患者在对照组治疗基础上联合使用前列地尔注射液。比较两组患者治疗前后24小时尿蛋白定量、肾功能及免疫功能的差异。结果治疗前两组患者24小时尿蛋白定量比较无显著差异(P>0.05),治疗后观察组患者24小时尿蛋白定量显著低于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者血肌酐、血尿素氮水平及肾小球滤过率比较均无显著差异(P>0.05);治疗后两组患者血肌酐和血尿素氮水平较本组治疗前均显著降低(P<0.05),肾小球滤过率较本组治疗前均显著升高(P<0.05),但两组患者血肌酐水平和肾小球滤过率比较均无显著差异(P>0.05),观察组患者血尿素氮水平显著低于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者血清免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)A和IgG水平比较均无显著差异(P>0.05);治疗后两组患者血清IgA和IgG水平较治疗前均显著升高(P<0.05),且观察组患者血清IgA和IgG水平均显著高于对照组(P<0.05)。结论前列地尔注射液联合缬沙坦氨氯地平片可减少慢性肾小球肾炎患者24小时蛋白尿,改善肾功能,提高机体免疫功能。

促红细胞生成素通过调节未折叠蛋白反应减轻顺铂所致的肾小管上皮细胞凋亡

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)能否通过调节未折叠蛋白反应减轻顺铂(CP)诱导的肾小管上皮细胞凋亡。方法:健康雄性SD大鼠随机分为3组(每组12只),包括正常对照组(control组)、CP组和CP+重组人EPO组(CP+rHuEPO组)。顺铂或生理盐水注射96 h后处死SD大鼠,留取血液和肾脏组织,检测血尿素氮(BUN)和血清肌酐(SCr)水平,PAS染色光镜观察肾脏形态结构变化;TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡;采用Western blotting法、免疫组化及激光共聚焦技术检测EPO受体(EPOR)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达。结果:与control组比较,CP组与CP+rHuEPO组大鼠BUN及SCr水平均显著升高(P<0.05),TUNEL染色显示凋亡细胞阳性率显著上升(P<0.05),EPOR及GRP78蛋白表达显著上调(P<0.05);PAS染色光镜示CP组肾脏组织结构出现明显损伤性变化;与CP组比较,CP+rHuEPO组SCr水平显著降低(P<0.05),凋亡细胞阳性率显著下降(P<0.05),EPOR及GRP78蛋白表达下调(P<0.05),肾脏病理损伤减轻。结论:EPO可以减轻顺铂引起的肾损害,其机制可能与调节未折叠蛋白反应减轻肾小管上皮细胞凋亡相关。

缺血再灌注急性肾损伤机制研究进展

急性肾损伤(AKI)是临床常见的急危重症,伴随AKI的发生,患者病死率和AKI致肾脏预后不良的比例均逐年增加。AKI常发展为慢性肾脏病,且是终末期肾脏疾病的主要危险因素。尽管AKI的定义对其诊断和分期进行了标准化,强调早期诊断和早期干预对预后的影响,但目前仍无有效的预防或治疗方法。因此,了解AKI发病的病理生理机制是关键。缺血再灌注损伤是临床导致AKI的最主要原因,更好地了解缺血再灌注肾损伤的分子和细胞病理生理机制,将为AKI的预防和治疗提供更多可能。

肾组织中CD80和CD86的表达及其与肾间质损伤的关系

目的探讨T淋巴细胞活化分子CD80与CD86在原发性肾小球肾炎肾小管间质损伤中的作用。方法采用免疫组织化学法检测原发性肾小球肾炎患者肾组织中的CD80与CD86的表达情况,免疫比浊法检测24h尿蛋白定量,全自动生化分析仪检测血尿素氮、血清肌酐及血浆白蛋白等临床指标。结果 CD80和CD86在原发性肾小球肾炎肾组织中的表达情况不同。CD80在肾小管上皮细胞、肾间质有阳性表达,在肾小球无表达,而CD86在肾小管上皮细胞、肾间质及肾小球均有表达。CD80和CD86在肾小管间质中的表达水平随着原发性肾小球肾炎患者肾小管间质病变程度的加重而增强(相关系数分别为0.741和0.736,P<0.001),并且CD80的表达与CD86的表达成正相关。CD80和CD86的表达与患者24h尿蛋白定量、血尿素氮和血清肌酐水平成正相关;与肌酐清除率成负相关。结论 T细胞的活化可能参与了原发性肾小球肾炎肾间质损伤。

蛋白尿在慢性肾脏病进展中的新认识

慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)是肾脏结构或功能的不可逆性改变。蛋白尿不仅是大多数CKD患者共同的临床表现,而且在CKD的进行性发展中起重要作用。蛋白尿可通过诱导足细胞损伤和凋亡等导致肾小球硬化;通过直接毒性作用、激活补体和炎性小体、诱导氧化应激、促进凋亡等途径导致肾小管萎缩和间质纤维化。了解蛋白尿及其在CKD进展中的作用对于研究CKD治疗新靶点和延缓CKD的进展具有重要意义。

慢性肾脏病血管钙化发病机制的研究进展

血管钙化(vascular calcification,VC)是慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者心血管病死率高的主要原因。VC发病机制非常复杂,与肾的排泄功能、内分泌功能减退等相关,如明显的钙磷代谢紊乱、klotho蛋白水平降低、炎症氧化应激和细胞凋亡、钙化抑制因子的减少和尿毒症毒素的累积等。近年来发现的micro RNA的调控也与VC密切相关,其中多种过程介导的VC涉及血管平滑肌细胞的转分化。

123例原发性IgA肾病患者临床特点与病理分析

目的:探讨原发性IgA肾病患者临床表现、病理特点及其相关性。方法:回顾性总结分析123例经肾活检病理确诊为原发性IgA肾病的临床和病理资料。结果:123例IgA肾病患者在21岁～40岁年龄段发病率最高(占65.8%);临床表现以发作性肉眼血尿最多见(占36.6%);病理类型分级以Ⅱ级(56.1%),Ⅲ级(20.3%)为主;病理类型与临床表现呈正相关(P<0.01);随着Lee氏病理分级程度的增高,血肌酐、血尿酸、血脂有不同程度的升高(P<0.05)。结论:IgA肾病临床类型多样,其组织形态学改变轻重不一,宜尽早做肾活检以明确诊断,指导治疗。

甘露糖结合凝集素补体途径与糖尿病肾病的相关性的研究进展

糖尿病肾病是糖尿病最严重的微血管并发症,是终末期肾病的重要病因之一。甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin,MBL)是糖尿病肾病发生发展重要的生物标志物,H型纤维胶原凝集素(H-ficolin)也与糖尿病肾病的发展有关,而MBL相关丝氨酸蛋白酶与糖尿病肾病的关系有待进一步研究。

盐酸法舒地尔通过活化Akt与抑制PTEN减轻顺铂导致的肾小管上皮细胞凋亡

目的:探讨盐酸法舒地尔(fasudil)能否通过活化Akt并抑制PTEN减轻顺铂(CP)导致的肾小管上皮细胞凋亡。方法:健康雄性SD大鼠随机分为3组(每组12只),包括正常对照(control)组、CP组及CP+fasudil组。生理盐水或顺铂腹腔注射96 h后处死SD大鼠,留取血液和肾脏组织,检测血尿素氮(BUN)、血清肌酐(s Cr)水平。PAS染色光镜观察肾脏形态结构的变化;TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡;分别采用Western blotting法和/或免疫组化技术检测Rho蛋白激酶1(ROCK1)、PTEN、Akt蛋白表达变化及磷酸化Akt(p-Akt)水平。结果:与control组比较,CP组与CP+fasudil组大鼠的BUN及s Cr水平、凋亡细胞阳性率、ROCK1及PTEN蛋白表达均显著升高(P<0.05),而p-Akt表达则显著减少(P<0.05);PAS染色光镜示CP组肾脏组织结构出现明显损伤性变化;与CP组比较,CP+fasudil组的s Cr水平、凋亡细胞阳性率、ROCK1及PTEN蛋白表达均显著下调(P<0.05),而p-Akt水平则显著增高(P<0.05);此外,肾脏病理损伤减轻。结论:盐酸法舒地尔可以减轻顺铂引起肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与活化Akt及抑制PTEN蛋白表达相关。

单克隆抗体OX7的制备及大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎模型的建立

目的:制备单克隆抗体OX7(monoclonal antibody OX7,mAb OX7)及建立大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎模型。方法:弗氏不完全佐剂预免疫Balb/c小鼠,腹腔注射OX7细胞,Protein A亲和层析法纯化腹水,用SDS-PAGE鉴定纯化后抗体的纯度。将所得抗体尾静脉注射Wistar大鼠,PAS染色观察正常对照组注射前及注射后第3天、第7天大鼠肾脏病理组织学改变。结果:SDS-PAGE电泳显示,纯化的抗体有IgG的轻链和重链两条带,无其他杂带,抗体浓度为2.06 mg/ml。PAS染色显示正常对照组肾小球结构正常,毛细血管袢开放良好;模型组第3天开始出现大量系膜细胞破坏,系膜基质溶解,肾小球毛细血管扩张;第7天系膜细胞重度增生。结论:通过将OX7细胞注入小鼠腹腔并用Protein A亲和层析法纯化腹水,可成功制备高效价、高纯度及特异性强的mAb OX7,该抗体可成功建立抗Thy1系膜增生性肾炎动物模型。

骨髓间充质干细胞对系膜增生性肾炎的修复作用及机制探讨

目的观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植后在大鼠肾脏的分化并研究其对于抗Thy1.1系膜增生性肾小球肾炎的损伤修复作用。方法测定60Coγ照射比较组24 h尿蛋白定量、血清尿素氮及血肌酐水平,观察肾脏病理;注射Thy1.1单克隆抗体建立Thy1.1肾炎模型;分离培养鉴定MSCs,以PKH67标记;观察MSCs移植后Thy1.1肾炎模型组及对照组第24 h尿蛋白量及血Cr水平,肾脏改变及MSCs在肾脏的分布情况;红色荧光标记RECA-1、OX-7、ED-1;测定MSCs培养上清液和对照组VEGF和TGF-β1的浓度;结果60Coγ照射比较组实验指标及肾脏病理无明显差异。Thy1.1肾炎模型组与正常对照组相比,24 h尿蛋白明显升高,80%的大鼠出现镜下血尿,肾病理小球系膜细胞弥漫性增多伴基质增加,肾功能与对照组无差异。MSCs模型移植组24 h尿蛋白量明显减少,病理改变减轻,死亡率降低。肾小球中极少见双重染色细胞。MSCs培养上清液VEGF和TGF-β1的浓度明显升高。结论剂量为8Gy的60Co照射可增加MSCs在肾脏沉积。MSCs移植可参与肾小球的损伤修复,改善系膜增生性肾小球肾炎,其机制可能与旁分泌VEGF和TGF-β1促进修复有关。