高血浆同型半胱氨酸对急性脑卒中的影响

目的探讨高同型半胱氨酸血症(hyperhomocystinemia,HHC)在脑卒中急性期的作用机制,为急性脑卒中的治疗提供临床资料,并为估计预后提供帮助。方法高压液相色谱法测定137例脑卒中患者[其中脑出血39例,脑梗死98例(包括腔隙梗死32例,血栓形成组37例,心源性脑栓塞29例)]的空腹血浆同型半胱氨酸(totalHomocysteine,tHcy)水平,并与40例健康对照者进行对比研究。结果脑梗死、脑出血组血浆tHcy水平[分别为(21.49±8.52)mmol/Lvs(23.34±10.68)mmol/L)]及HHC检出率(分别为70.8%和61.5%)均高于对照组[(13.19±2.31)mmol/L和5%],脑梗死亚组间以及脑卒中的不同型别之间与脑出血组比较tHcy差异无统计学意义,早期神经功能加重的恶化组患者比相对稳定的患者组tHcy水平高[分别为(26.85±9.51)mmol/Lvs(20.65±8.66)mmol/L]。结论HHC与所有脑梗死亚型及脑出血有关,早期神经功能恶化的患者具有相对较高的tHcy水平。

雌激素对慢性低灌注大鼠血脑屏障通透性的影响

目的检测大鼠永久性双侧颈总动脉结扎（pBCCAO）早期脑组织伊文思蓝（EB）的含量、大鼠海马和脉络丛ZO-1的表达变化，以及17β-雌二醇（E2）对其影响，旨在揭示血管性痴呆（VD）早期血脑屏障通透性的变化，并探索可能的防治措施。方法成年雌性大鼠去双侧卵巢，7d后制备pBCCAO模型，随机分为控制组，pBCCAO后6h、1d．3d、7d实验组，E2处理组和溶剂对照组，采用比色分析法及激光共聚焦显微镜技术检测脑组织EB含量，Western blot技术及共聚焦显微镜技术观察ZO-1蛋白水平。结果大鼠行pBCCAO后1d脑组织EB渗出量较sham组明显升高，于第3天达到高峰，术后7d明显下降，但仍高于sham组；共聚焦结果显示，pBCCAO后3d大鼠海马槽EB红色荧光较sham组和E2组明显增强；Western blot结果显示，pBCCAO后3d大鼠海马中ZO-1较sham组明显降低，但E2处理组与sham组相似，ZO-1水平明显高于溶剂对照组；共聚焦结果显示，pBCCAO后3d脉络丛ZO-1免疫反应较sham组和E2处理组明显降低。结论pBCCAO早期即可造成大鼠血脑屏障损伤，下调ZO-1的表达；E2可有效改善此病理变化。

同型半胱氨酸的代谢与缺血性卒中的相互关系

高同型半胱氨酸血症被认为是卒中的独立危险因素。本文以同型半胱氨酸代谢途径为背景,以同型半胱氨酸及相关血脂致动脉粥样硬化为基础,阐述同型半胱氨酸与缺血性卒中的关系。其中,同型半胱氨酸水平与卒中的严重程度成正比,维生素降低同型半胱氨酸对卒中预后的影响各研究结果不一。高同型半胱氨酸血症与各型缺血性卒中的关系研究结果仍存在争议。

脑缺血预处理对大鼠皮质区Bad磷酸化水平的影响

目的观察大鼠脑缺血预处理后皮质区Bcl—xl／Bcl-2相关死亡促进因子（Bcl—xl／Bcl-2 associated death promoter，Bad）磷酸化的表达及意义。方法采用Sprague Dawley（SD）大鼠四动脉结扎全脑缺血模型，随机分为假手术组、缺血-再灌注组及缺血预处理组，免疫组织化学方法检测各组大鼠脑内皮质区Bcl—xl／Bcl-2相关死亡促进因子磷酸化（P—Bad）的表达变化。结果大鼠脑缺血-再灌注3d后，缺血-再灌注组皮质区P—Bad表达逐渐增加，与假手术组比较差异有统计学意义（P〈0．05），而缺血预处理组再灌注3dP—Bad表达较缺血-再灌注组再灌注3d显著增加（P〈0．05）。结论缺血预处理对再次脑缺血有保护作用。

外周血单个核细胞hMLH1启动子甲基化与类风湿关节炎发生发展的关系

目的探讨错配修复基因-h MLH1启动子甲基化及基因失活在类风湿关节炎(RA)发生发展中的作用。方法选取2006年4月—2007年4月河北医科大学附属第二医院及第三医院新诊断的RA患者33例为病例组,另选择同期河北省血液中心提供的健康人群38例为对照组。取受试者外周血,以密度梯度离心法分离外周血单个核细胞。分别以RT-PCR法、蛋白印迹法检测外周血单个核细胞h MLH1 m RNA、蛋白相对表达量。经亚硫酸氢钠修饰后,分别设计h MLH1启动子甲基化和非甲基化的DNA引物,检测病例组和对照组患者h MLH1启动子甲基化结果。结果病例组h MLH1 m RNA相对表达量为0.56(0.24,0.69),低于对照组的0.80(0.68,0.93),差异有统计学意义(Z=-3.98,P<0.05)。病例组h MLH1蛋白相对表达量为0.70(0.62,0.76),低于对照组的0.80(0.68,0.94),差异有统计学意义(Z=-2.23,P<0.05)。病例组h MLH1启动子甲基化阳性率为90.9%(30/33),高于对照组的13.2%(5/38),差异有统计学意义(χ2=42.72,P<0.05)。h MLH1启动子甲基化程度与m RNA、蛋白相对表达量呈负相关(rs=-0.866、-0.541,P<0.01)。类风湿因子阳性患者h MLH1 m RNA、蛋白相对表达量低于阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05);两者h MLH1启动子甲基化阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 h MLH1启动子甲基化可能是h MLH1基因失活的重要机制,h MLH1异常高甲基化可能参与了RA的发生发展。

类风湿关节炎外周血CD4^+CD161^+T细胞亚群频数情况

目的检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中CD161+T细胞的频数变化,探讨其在类风湿关节炎(RA)发生、发展中的作用。方法收集唐山市工人医院风湿病科2009年6月至2010年6月21例类风湿关节炎患者,其中男性7例,女性14例,平均年龄55岁。采用PBMCs体外活化技术,应用流式细胞术检测RA患者外周血PBMCs中CD4+CD161+T细胞的频数情况。结果与年龄、性别匹配的健康人群相,RA患者PBMCs中CD161+CD4+T和CD161+Th1细胞的百分比显著降低[(27.53±7.34)%vs(22.75±5.11)%,(P<0.05);(11.35±4.36)%vs(8.21±3.93)%,(P<0.05)],导致RA患者CD161+与CD161-Th1细胞的比率下降,二者差异有显著性[(0.76±0.29)%vs(0.60±0.30)%,(P<0.05)]。结论 RA患者滑膜炎性反应导致外周血CD161+CD4+T细胞及其Th1亚群与相应阴性T细胞群体的平衡紊乱,CD161+CD4+T细胞及其Th1亚群在RA的病理过程密切相关。

环氧化酶23'非翻译区+8473T>C基因多态性及其与吸烟、幽门螺杆菌感染的交互作用对食管癌发病的影响研究

目的探讨环氧化酶2(COX-2)3'非翻译区(3'UTR)+8473T>C基因多态性及其与吸烟、幽门螺杆菌感染的交互作用对食管癌发病的影响。方法选择2006年1月—2011年1月在唐山市工人医院进行治疗的食管癌患者119例为病例组,按照2∶1比例选择同期体检正常者238例为对照组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术进行基因分型;采用非条件Logistic回归模型进行分析,计算OR值及其95%CI。结果病例组携带1个C等位基因、2个C等位基因、TC+CC基因型者的食管癌发病风险分别为对照组的1.60倍〔95%CI(0.91,2.83),P=0.08〕、3.29倍〔95%CI(1.10,11.62),P=0.03〕、1.76倍〔95%CI(1.12,2.93),P=0.02〕。在吸烟人群中,病例组携带COX-2 3'UTR+8473C等位基因者食管癌发病风险是对照组的2.11倍〔95%CI(1.08,3.96),P=0.02〕;在血清幽门螺杆菌抗体阳性人群中,病例组携带COX-2 3'UTR+8473C等位基因者食管癌发病风险是对照组的3.98倍〔95%CI(1.85,8.46),P<0.001〕。结论 COX-2 3'UTR+8473T>C基因多态性是影响食管癌发病的重要的遗传易患因素,可增加食管癌发病风险,且与吸烟、幽门螺杆菌存在交互作用。

γ射线吸收剂量对深低温保存的大鼠同种带瓣肺主动脉免疫原性的影响

目的应用60Coγ射线照射、液氮深低温保存大鼠同种带瓣肺主动脉(VPHC),并建立VPHC移植模型,观察不同吸收剂量对同种带瓣管道免疫原性的作用,寻找合适吸收剂量,为进一步基础研究及临床应用提供依据。方法应用流式细胞仪(FCM)检测CD4、CD8细胞亚群细胞,凋亡检测用TUNEL法,ICAM-1用免疫组化检测。结果γ射线照射有效地抑制了VPHC移植术后CD4+、CD8+和ICAM-1的表达量,减轻了排斥反应的发生,但同时也导致细胞凋亡甚至发生细胞坏死改变,降低了VPHC的活性,影响其耐久性。结论600Gy60Coγ射线照射在不严重损伤大鼠VPHC活性的同时可明显地降低VPHC移植术后免疫排斥反应的发生,可作为参考剂量用于降低VPHC免疫原性的研究。

类风湿关节炎患者外周血CD5^＋B细胞及其亚群变化和意义

目的通过检测外周血CD5^＋B淋巴细胞及其亚群变化，探讨其与类风湿关节炎（RA）发病及活动的关系。方法采用流式细胞仪技术对RA患者（RA组39例）和健康对照者（对照组18例）外周血CD5^＋B细胞（包括CD5^＋CD19^＋和CD5^＋CD20^＋亚群）进行定量分析，同时判断RA患者的疾病活动状态。结果外周血CD5^＋B细胞在RA组和对照组间差异无统计学意义（P〉0．05）。RA组外周血CD5^＋CD19^＋和CD5^＋CD20^＋B细胞亚群百分率显著高于对照组（P〈0．01）。RA活动组患者CD5^＋CD19^＋和CD5^＋CD20^＋B细胞亚群百分率与RA非活动组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CD5^＋CD19^＋和CD5^＋CD20^＋B细胞亚群可能参与RA发病，但与RA的活动无显著关联。

合并腹主动脉旁淋巴结清扫的胃癌扩大根治术与D2手术前后细胞免疫功能的变化

目的探讨进展期胃癌(AGC)患者行合并腹主动脉旁淋巴结(PAL)清扫的胃癌扩大根治术(D3+PAL)前后细胞免疫功能的变化,并与D2手术后的细胞免疫功能进行对比分析。方法应用改良MTT法和T淋巴细胞亚群SAP法检测104例AGC患者和33例正常对照(对照组)外周血的NK细胞杀伤活性及T淋巴细胞亚群的变化。结果与对照组相比,2组AGC患者手术前NK细胞活性,CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+明显降低(CD8^+升高),术后D3+PAL组NK细胞活性,CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+比术前明显升高(P<0.05或0.01);与D2术后相比,D3+PAL术后NK细胞活性,CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+明显升高。结论手术前AGC患者细胞免疫功能明显降低,D3+PAL手术可明显改善AGC患者的细胞免疫功能,且比D2手术效果明显。

桥本甲状腺炎不同甲状腺功能状态的血流面积比鉴别

目的研究桥本甲状腺炎不同甲状腺功能状态的血流面积比鉴别效能。方法选取2015年11月—2016年11月在该院经穿刺针吸活检或手术切取病理活检确诊为桥本氏甲状腺炎患者95例作为研究对象,根据患者的甲状腺功能将所有患者分为三组,同时选取健康志愿者30例作为对照组。所有患者均进行超声检查,对比四组的诊断结果和血流面积比。结果甲亢组、甲状腺功能正常组、甲减组和对照组两两相比在血流平均面积比、峰值比、谷值比存在明显差异,呈递减趋势;从检查者甲、乙、丙、丁的重复测量结果来看,血流平均面积比、峰值比和谷值的ICC值范围为0.77~0.90,ICC值较高;到达峰值和谷值时间的ICC值范围为0.09~0.24,且可信性区较上述三个参数值宽。结论鉴别桥本甲状腺炎不同甲状腺功能状态的血流面积比,可以对甲状腺内血流情况进行定量评价,能够辅助鉴别不同功能状态的桥本甲状腺炎,并提示其变化情况。

流式细胞术检测子宫内膜疾病中p15蛋白表达及其与病理特征的关系

目的 利用流式细胞术研究子宫内膜疾病中p15抑癌基因表达与病理诊断的相关性，探讨抑癌基因p15在子宫内膜疾病发生、发展中的作用及其在诊断中的临床意义。方法 应用细胞免疫荧光技术及流式细胞术，对50例子宫内膜疾病石蜡组织块的p15蛋白表达定量分析。结果 单纯性子宫内膜增生10例，p15表达均为阴性；非典型性子宫内膜增生11例，7例为阳性表达，只有1例过度表达；子宫内膜样腺癌19例均为阳性，其中11例（58％）过度表达；非子宫内膜样癌10例均为阳性，其中8例（80％）过度表达。组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。从单纯性子宫内膜增生至非子宫内膜样癌，p15的过度表达百分比有明显进行性增高（P〈0．01）。p15表达量随肿瘤细胞分裂相、异型性、密度的增高也有明显增高。p15低表达者5年生存率为100％，而过度表达者〈50％。结论 子宫内膜疾病一旦出现p15过度表达应考虑为恶性；p15表达可作为判断疾病预后的一项客观指标。